王雪婷，顧霞，徐先寶，趙磊，薛罡，李響

（1 東華大學(xué)環(huán)境科學(xué)與工程學(xué)院，上海 201620；2 維爾利環(huán)保科技集團(tuán)股份有限公司，江蘇 常州 213125）

戊酸是含有五個(gè)碳原子的飽和脂肪酸[1]，已廣泛應(yīng)用于化工、制藥、食品、飲料和紡織等行業(yè)[2]，可用于生產(chǎn)防腐劑、稀釋劑、藥物、增塑劑、香料、纖維、添加劑以及可生物降解塑料聚羥基烷酸酯[3-4]。目前，戊酸生產(chǎn)主要依賴于石油化工以及化學(xué)合成[5]，然而化工合成能耗大、成本高且會(huì)產(chǎn)生環(huán)境污染，因此，拓展綠色的戊酸生產(chǎn)方式具有廣闊的前景和意義。

近年來(lái)，利用碳鏈延長(zhǎng)方法將有機(jī)廢棄物轉(zhuǎn)化為有機(jī)酸[6]的方式越來(lái)越受到研究者的關(guān)注。碳鏈延長(zhǎng)技術(shù)是特定的碳鏈延長(zhǎng)微生物利用乙醇、乳酸等能源物質(zhì)作為電子供體，以乙酸、丙酸等短鏈羧酸作為電子受體[7]，在生物酶的催化作用下，通過(guò)反向β 氧化循環(huán)反應(yīng)將短鏈羧酸進(jìn)行碳鏈延長(zhǎng)[8]。早期利用碳鏈延長(zhǎng)方法產(chǎn)戊酸的研究多集中于純底物和純菌，Grootscholten 等[9]和Ganigué 等[10]在純底物體系投加外源乙醇并接種克氏梭菌（Clostridium kluyveri）生產(chǎn)戊酸，最終戊酸的產(chǎn)量分別可達(dá)10.61g COD/L 和10.81g COD/L。但是純菌體系操作煩瑣，耐沖擊負(fù)荷能力弱，且運(yùn)行成本高，不利于工業(yè)化的大規(guī)模生產(chǎn)[11]。因此研究者嘗試?yán)没炀w系生產(chǎn)戊酸，餐廚垃圾因其有機(jī)質(zhì)豐富成為研究中常用的底物。在前期的研究中選取了兩種常用的菌源（剩余污泥和酒曲），結(jié)果表明在接種剩余污泥的發(fā)酵體系中戊酸產(chǎn)量為5.01g COD/L，而接種酒曲的發(fā)酵體系中戊酸產(chǎn)量?jī)H為2.83g COD/L[12]，混菌體系戊酸的產(chǎn)量遠(yuǎn)低于純菌體系。此外，分析得知，酒曲體系中產(chǎn)生了高濃度的乙醇，而研究證實(shí)醇酸比高時(shí)易產(chǎn)生高濃度的己酸和庚酸，醇酸比低時(shí)易產(chǎn)生大量戊酸[13]，因此調(diào)控乙醇的產(chǎn)量有利于提高發(fā)酵體系中戊酸的產(chǎn)量。

Taherzadeh 等[14]和Taue 等[15]的研究發(fā)現(xiàn)呋喃、糠醛和羥甲基糠醛會(huì)降低發(fā)酵體系中乙醇的生成，可使乙醇的產(chǎn)量降低80%，而餐廚垃圾水熱預(yù)處理過(guò)程中會(huì)發(fā)生美拉德反應(yīng)，產(chǎn)生類黑精類物質(zhì)、呋喃、糠醛和胺類物質(zhì)等[16]。因此利用水熱法預(yù)處理餐廚垃圾抑制乙醇的產(chǎn)量，從而提高戊酸的產(chǎn)量是一種可行的方法，然而尚缺乏水熱預(yù)處理對(duì)餐廚垃圾厭氧發(fā)酵產(chǎn)戊酸的效果驗(yàn)證。

本文基于前期的研究基礎(chǔ)[12]，選取了戊酸產(chǎn)量高的剩余污泥體系和戊酸產(chǎn)量低的酒曲體系作為菌源，以批次發(fā)酵的方式，研究了在不同水熱預(yù)處理溫度下，餐廚垃圾厭氧發(fā)酵產(chǎn)戊酸的效能，探究了產(chǎn)酸代謝機(jī)制，同時(shí)研究了微生物群落組成變化，為餐廚垃圾高值資源化提供技術(shù)支撐。

1 實(shí)驗(yàn)部分

1.1 實(shí)驗(yàn)材料

餐廚垃圾，東華大學(xué)食堂，以蔬菜、米飯和肉為主，揮發(fā)性固體（VS）值為0.38g/g，經(jīng)手工篩選和攪拌機(jī)攪碎后放置在4℃的冰箱內(nèi)保存?zhèn)溆?；剩余污泥，上海市某污水處理廠，VS 值為11.10g/g，室溫下保存?zhèn)溆?；酒曲，上海市某酒廠，VS值為0.78g/g，經(jīng)攪拌機(jī)混勻放置在4℃的冰箱內(nèi)保存?zhèn)溆谩?/p>

1.2 實(shí)驗(yàn)裝置與方法

發(fā)酵罐運(yùn)行之前，將餐廚垃圾分別在80℃、100℃、120℃、140℃、160℃、180℃條件下進(jìn)行水熱預(yù)處理，隨后將不同水熱預(yù)處理溫度下得到的發(fā)酵底物分成兩組：其中一組接種酒曲（DY-B、DY-80、DY-100、DY-120、DY-140、DY-160、DY-180）；另一組接種剩余污泥（WAS-B、WAS-80、WAS-100、WAS-120、WAS-140、WAS-160、WAS-180）。發(fā)酵罐有效容積為200mL，底物濃度為(42.0±0.5)g VS/L（餐廚垃圾∶菌源=6∶1），投加20g/L 的CaCO3緩沖pH。將厭氧發(fā)酵罐置于磁力攪拌器上，放置于37℃恒溫箱內(nèi)。

發(fā)酵周期為20天，每隔2天進(jìn)行一次取樣，將5mL 發(fā)酵液置于離心管中經(jīng)8000r/min 離心10min。取上層清液經(jīng)0.45μm 濾膜過(guò)濾后，用于分析發(fā)酵體系中的戊酸、乙醇、乙酸、丙酸、丁酸、己酸和庚酸的變化情況；下層固體物質(zhì)標(biāo)記后置于-20℃的冰箱中保存，用于體系中微生物的分析。

1.3 組分分析方法

揮發(fā)性固體量采用馬弗爐重量法測(cè)定；戊酸、乙醇、乙酸、丙酸、丁酸、己酸和庚酸的測(cè)定采用氣相色譜儀GCSmart（GC-2018）測(cè)定，檢測(cè)器類型為FID 檢測(cè)器，檢測(cè)器溫度設(shè)為250℃，進(jìn)樣口溫度設(shè)為220℃，載氣為N2，載氣流速設(shè)為50mL/min，測(cè)定時(shí)間為15min，利用外標(biāo)法進(jìn)行定量；餐廚垃圾水熱預(yù)處理后溶解性有機(jī)物的測(cè)定采用熒光光度計(jì)（Hitachi F-7000）進(jìn)行掃描測(cè)定，利用Matlab軟件對(duì)掃描結(jié)果進(jìn)行分析。

1.4 微生物測(cè)序方法

選擇發(fā)酵12天時(shí)的DY-B、DY-100、DY-140、DY-180 和 WAS-B、 WAS-100、 WAS-140、WAS-180的8個(gè)樣品進(jìn)行微生物群落分析。微生物群落樣品選擇高通量測(cè)序技術(shù)進(jìn)行分析，測(cè)樣公司為上海派森諾生物科技有限公司，PCR 擴(kuò)增引物序列為338F（5'-ACTCCTACGGGAGGCAGCA-3'）和806R （5'-GGACTACHVGGGTWTCTAA T-3'），擴(kuò)增區(qū)域?yàn)閂3～V4區(qū)，測(cè)序平臺(tái)為Illumina Miseq。

2 結(jié)果與討論

2.1 水熱預(yù)處理對(duì)餐廚垃圾發(fā)酵產(chǎn)戊酸的影響

由圖1(a)結(jié)果可知，接種酒曲體系下，空白組戊酸最大產(chǎn)量為3.47g COD/L，水熱預(yù)處理后，戊酸最大濃度分別提升至13.03g COD/L （80℃）、12.05g COD/L （100℃）、12.68g COD/L （120℃）、14.81g COD/L（140℃）、12.67g COD/L（160℃）和16.19g COD/L（180℃）。結(jié)果表明，水熱預(yù)處理顯著提高了酒曲體系中戊酸的產(chǎn)量，其中DY-180組戊酸產(chǎn)量與DY-B 相比提高了3.66 倍。由圖1(b)結(jié)果可知，接種剩余污泥體系下，空白組戊酸最大產(chǎn)量為10.64g COD/L，高于接種酒曲的空白組，與郭志超等[12]的研究結(jié)果一致。水熱預(yù)處理后，戊酸最大濃度提升至12.57g COD/L（80℃）、12.73g COD/L（100℃）、12.63g COD/L （120℃）、13.11g COD/L（140℃）、15.75g COD/L（160℃）和18.55g COD/L（180℃）。結(jié)果表明，水熱預(yù)處理同樣提高了剩余污泥體系中戊酸產(chǎn)量，WAS-180 組戊酸產(chǎn)量與WAS-B 組相比提高了0.74 倍。研究表明，以粗甘油為底物時(shí)戊酸的產(chǎn)量?jī)H為6.9g COD/L[17]；以剩余污泥為底物時(shí)戊酸的產(chǎn)量?jī)H為2.82g COD/L[2]。本文以成分復(fù)雜的餐廚垃圾作為發(fā)酵底物，并利用水熱預(yù)處理的方法顯著提高了體系中戊酸的產(chǎn)量，最高產(chǎn)量可達(dá)18.55g COD/L。

圖1 不同水熱預(yù)處理發(fā)酵體系下戊酸的產(chǎn)量

2.2 水熱預(yù)處理對(duì)餐廚垃圾發(fā)酵產(chǎn)有機(jī)酸及乙醇的影響

2.2.1 水熱預(yù)處理對(duì)戊酸代謝過(guò)程的影響

戊酸的產(chǎn)生和消耗主要是通過(guò)反向β 氧化途徑，微生物利用體系中乙醇作為電子供體，丙酸作為電子受體通過(guò)一次反向β循環(huán)產(chǎn)生戊酸，同時(shí)戊酸也可作為電子受體與乙醇通過(guò)反向β循環(huán)產(chǎn)生庚酸[18]，因此關(guān)注發(fā)酵體系內(nèi)丙酸和庚酸的變化對(duì)戊酸的產(chǎn)生和積累尤其重要。如圖2所示，在酒曲體系中，空白組丙酸的最大產(chǎn)量是2.16g COD/L，水熱預(yù)處理組丙酸的最大產(chǎn)量可達(dá)到10.58g COD/L（180℃）；在剩余污泥體系中，空白組丙酸的最大產(chǎn)量是12.10g COD/L，水熱預(yù)處理組丙酸的最大產(chǎn)量可達(dá)到14.63g COD/L（120℃）。結(jié)果表明，水熱預(yù)處理后接種酒曲及污泥體系中的丙酸產(chǎn)量均有顯著提高。研究發(fā)現(xiàn)，腐殖酸可以提高水解酶的活性，增強(qiáng)電子轉(zhuǎn)移效率，促進(jìn)發(fā)酵體系產(chǎn)短鏈羧酸[19]。如圖3 所示，隨著水熱預(yù)處理溫度的提高，餐廚垃圾中腐殖酸的比例逐漸增加，體系中丙酸濃度的提高可能與腐殖酸濃度的增加有關(guān)。同時(shí)研究發(fā)現(xiàn)，水熱預(yù)處理會(huì)提高體系中乳酸的產(chǎn)量，部分乳酸會(huì)通過(guò)丙烯酸途徑轉(zhuǎn)化為丙酸，實(shí)現(xiàn)了體系中丙酸的積累[20]。丙酸與乙醇氧化形成的乙酰輔酶A縮合形成戊酸，因此經(jīng)水熱預(yù)處理后的酒曲體系和剩余污泥體系中戊酸的產(chǎn)量會(huì)增加，該過(guò)程的反應(yīng)方程式見(jiàn)式(1)、式(2)、式(4)、式(5)[21]。在戊酸的消耗方面，隨著發(fā)酵時(shí)間的延長(zhǎng)，在電子供體充足的情況下，戊酸會(huì)作為電子受體通過(guò)一次反向β循環(huán)生成庚酸，該過(guò)程的反應(yīng)方程式見(jiàn)式(6)[21]。酒曲和剩余污泥體系中，空白組中庚酸的產(chǎn)量可分別達(dá)到1.84g COD/L 和2.33g COD/L，經(jīng)水熱預(yù)處理后體系中庚酸的產(chǎn)量均下降，其中最低產(chǎn)量分別為0g COD/L（DY-120）和0.71g COD/L（WAS-160），水熱預(yù)處理減少了戊酸的消耗，實(shí)現(xiàn)了戊酸的積累。

圖2 不同水熱預(yù)處理發(fā)酵體系下有機(jī)酸的變化

水熱預(yù)處理對(duì)乙酸、丁酸和己酸的產(chǎn)量如圖2所示，在酒曲和剩余污泥體系中，水熱預(yù)處理后乙酸產(chǎn)量與空白組相比均有提高，而水熱預(yù)處理后丁酸和己酸的產(chǎn)量與空白組相比顯著下降。研究發(fā)現(xiàn)水熱預(yù)處理會(huì)產(chǎn)生類黑精類物質(zhì)（類腐殖酸區(qū)），而類黑精類物質(zhì)會(huì)抑制發(fā)酵過(guò)程中乙酸向丁酸的轉(zhuǎn)化[22]，因此水熱預(yù)處理組乙酸產(chǎn)量會(huì)有明顯的積累，該過(guò)程的反應(yīng)方程式見(jiàn)式(3)和式(7)[21]。體系中己酸產(chǎn)量的降低可能與電子受體丁酸不足，微生物無(wú)法利用乙醇進(jìn)行碳鏈延長(zhǎng)反應(yīng)有關(guān)，該過(guò)程的反應(yīng)方程式見(jiàn)式(8)[21]。丁酸和己酸濃度的降低減少了碳鏈延長(zhǎng)過(guò)程中乙醇的消耗，為生產(chǎn)戊酸積累了充足的電子供體。

2.2.2 水熱預(yù)處理對(duì)產(chǎn)乙醇的影響

乙醇是富含能量的還原性物質(zhì)，為碳鏈延長(zhǎng)提供能量，可氧化產(chǎn)生乙酰輔酶A[23]進(jìn)而發(fā)生縮合反應(yīng)促進(jìn)碳鏈延長(zhǎng)反應(yīng)，是產(chǎn)戊酸的重要電子供體。低濃度的乙醇會(huì)導(dǎo)致碳鏈延長(zhǎng)不充分，而乙醇濃度過(guò)高會(huì)對(duì)微生物有毒害作用[24]。如圖4所示，在酒曲和剩余污泥體系中，空白組乙醇濃度最高可分別達(dá)到14.90g COD/L 和3.96g COD/L，水熱預(yù)處理組乙醇濃度與空白組相比有明顯的下降，這與空白組產(chǎn)生高濃度的中長(zhǎng)鏈羧酸（己酸和庚酸）而水熱預(yù)處理組產(chǎn)生高濃度的戊酸現(xiàn)象一致。

研究表明，醇酸比對(duì)發(fā)酵體系中有機(jī)酸的組成和產(chǎn)量有重要影響[25]，醇酸比高時(shí)易產(chǎn)生高濃度的己酸和庚酸，醇酸比低時(shí)易產(chǎn)生大量戊酸[13]。乙醇和丙酸可以通過(guò)一次反向β循環(huán)產(chǎn)生戊酸，本研究中乙醇/丙酸的值如表1 所示，空白組醇酸比分別為6.48（酒曲體系）和1.55（剩余污泥體系），水熱預(yù)處理后醇酸比與空白組相比有明顯的下降。在酒曲體系中，DY-B（6.48）和DY-80（4.66）醇酸比高，這與體系中高濃度己酸和庚酸現(xiàn)象一致，而DY-100、DY-140、DY-160 和DY-180 的醇酸比均處于較低水平（0.14～1.30），因此產(chǎn)生了高濃度的戊酸。在剩余污泥體系中，所有反應(yīng)罐中醇酸比均處于較低水平（0.40～1.55），故剩余污泥組戊酸的產(chǎn)量高。上述現(xiàn)象與苑榮雪[26]研究的醇酸比對(duì)厭氧發(fā)酵中產(chǎn)有機(jī)酸的影響一致，醇酸比為3時(shí)主要以產(chǎn)己酸和庚酸為主，而醇酸比為1 和0.5 時(shí)，戊酸的產(chǎn)量與高醇酸比組相比有顯著升高。另外，如圖5所示，在酒曲和剩余污泥體系中，戊酸產(chǎn)量較高的兩組（DY-180和WAS-180）發(fā)酵前期（2～8 天），乙醇、乙酸、丙酸和丁酸的濃度均呈現(xiàn)上升趨勢(shì)，醇酸比較高，電子受體乙酸易與電子供體乙醇反應(yīng)產(chǎn)生丁酸，消耗了電子供體乙醇，此階段戊酸的產(chǎn)量緩慢增長(zhǎng)。在發(fā)酵第8～12 天，隨著戊酸產(chǎn)量的快速提高，乙醇和丙酸分別作為電子供體和電子受體被消耗，濃度呈快速下降趨勢(shì)。當(dāng)戊酸的產(chǎn)量達(dá)到峰值時(shí)，此時(shí)乙醇濃度突然降為0。在發(fā)酵后期第16～20天時(shí)，戊酸、丁酸、己酸和庚酸的產(chǎn)量保持不變，這可能與體系中缺乏電子供體乙醇有關(guān)。水熱預(yù)處理可以降低發(fā)酵體系中乙醇的濃度，調(diào)控醇酸比，促進(jìn)餐廚垃圾厭氧發(fā)酵體系中戊酸的產(chǎn)生和積累。

表1 不同發(fā)酵時(shí)間下各樣品的乙醇/丙酸值

圖5 180℃時(shí)不同菌源發(fā)酵體系下物質(zhì)的產(chǎn)量

2.3 微生物群落結(jié)構(gòu)分析

戊酸的產(chǎn)生與電子供體乙醇密切相關(guān)，在發(fā)酵的第12 天，接種酒曲和剩余污泥的體系中乙醇的濃度大部分均下降至0，因此選取了發(fā)酵第12天時(shí)的樣品進(jìn)行Alpha 多樣性分析和微生物群落結(jié)構(gòu)分析。

2.3.1 Alpha多樣性分析

各發(fā)酵罐的Chao1、Shannon 和Simpson 指數(shù)如表2所示，在酒曲體系中，原始酒曲的微生物群落單一[12]，水熱預(yù)處理后細(xì)菌群落Chao1、Shannon和Simpson 指數(shù)與空白組相比有明顯的提高，說(shuō)明水熱預(yù)處理后微生物群落豐富度和多樣性更高，群落結(jié)構(gòu)趨于復(fù)雜，豐富了參與溶出、水解和產(chǎn)戊酸的功能菌群，水熱預(yù)處理組戊酸產(chǎn)量的增加可能與產(chǎn)戊酸功能菌群的豐度提高有關(guān)。在剩余污泥體系中，原始剩余污泥微生物種群豐富度高[27]，群落結(jié)構(gòu)復(fù)雜，水熱預(yù)處理降低了細(xì)菌群落Chao1、Shannon 和Simpson 指數(shù)，這說(shuō)明水熱預(yù)處理降低了微生物群落豐富度和多樣性，降低了競(jìng)爭(zhēng)代謝微生物菌群。

表2 不同樣品的Chaol、Shannon和Simpson指數(shù)

2.3.2 微生物群落結(jié)構(gòu)分析

微生物門水平群落結(jié)構(gòu)組成如圖6所示，各發(fā)酵罐主要由厚壁菌門（Firmicutes）、放線菌門（Actinobacteria）、變形菌門（Proteobacteria）和擬桿菌門（Bacteroidetes）組成，其與厭氧發(fā)酵過(guò)程密切相關(guān)，能產(chǎn)生大量的酶，促進(jìn)底物的水解酸化產(chǎn)乳酸和揮發(fā)性脂肪酸[28-29]。其中優(yōu)勢(shì)菌門Firmicutes在所有發(fā)酵罐中的相對(duì)豐度均超過(guò)40%，隨著水熱溫度的升高，F(xiàn)irmicutes的相對(duì)豐度逐漸提高。在酒曲體系中，F(xiàn)irmicutes的相對(duì)豐度從44.81%（DY-B）提高到66.03%（DY-180），剩余污泥體系中Firmicutes的相對(duì)豐度從40.40%（WAS-B）提高到88.41%（WAS-180），研究表明Firmicutes對(duì)極端環(huán)境的耐受性較強(qiáng)，能適應(yīng)不斷酸化的環(huán)境，并且目前已經(jīng)被證實(shí)有碳鏈延長(zhǎng)功能的細(xì)菌大部分都屬于Firmicutes[30]，因此水熱預(yù)處理組戊酸產(chǎn)量的提高可能與這類微生物有關(guān)。

圖6 不同水熱預(yù)處理發(fā)酵體系下門水平群落結(jié)構(gòu)組成

微生物屬水平群落結(jié)構(gòu)組成如圖7所示，在酒曲體系中，DY-B組主要由雙歧桿菌屬（Bifidobacterium）（27.56%）和放線菌屬（Actinomyces）（25.80%）組成，這兩類微生物均與復(fù)雜有機(jī)物質(zhì)的水解及乙酸和丁酸的生成有關(guān)[31]，因此DY-B 組丁酸產(chǎn)量高而戊酸產(chǎn)量低可能與這兩類菌屬有關(guān)。水熱預(yù)處理后， 瘤 胃 球 菌 屬（UBA1819）、 腸 球 菌 屬（Enterococcus）、巨球菌屬（Megasphaera）和小類桿菌屬（Dialister）被選擇性富集。其中，UBA1819和Enterococcus均與產(chǎn)乙酸和丙酸有關(guān)[32]，這可能是造成水熱預(yù)處理組乙酸和丙酸積累的原因。研究發(fā)現(xiàn)Megasphaera和Dialister均是產(chǎn)戊酸功能菌群[33]，在DY-B 中，無(wú)Megasphaera和Dialister富集，而DY-100、DY-140、DY-160 和DY-180 中Megasphaera的相對(duì)豐度分別提高到2.13%、16.02%、4.52%和13.77%；Dialister的相對(duì)豐度為0%、2.86%、6.65%和2.26%。結(jié)果表明，水熱預(yù)處理實(shí)現(xiàn)了產(chǎn)戊酸相關(guān)功能菌群的富集，這可能是水熱預(yù)處理組戊酸產(chǎn)量高的原因。

圖7 不同水熱預(yù)處理發(fā)酵體系下屬水平群落結(jié)構(gòu)組成

在剩余污泥體系中，發(fā)酵罐中均含有可以將底物水解、 酸化以及產(chǎn)乳酸的鏈球菌屬（Streptococcus）[34]。在WAS-B、WAS-100、WAS-140、WAS-160 和WAS-180 中的相對(duì)豐度分別是14.09%、13.60%、53.52%、69.92%和72.92%，隨著水熱溫度的提高，Streptococcus的相對(duì)豐度逐漸提高。除此之外，所有的反應(yīng)器中均選擇性富集了巨球菌屬（Megasphaera） 和普雷沃氏菌屬_7（Prevotella_7），Megasphaera在WAS-B、 WAS-100、WAS-140、WAS-160 和WAS-180 中的相對(duì)豐度分別是6.21%、12.38%、9.22%、9.77% 和9.35%，水熱預(yù)處理提高了Megasphaera的相對(duì)豐度；Prevotella_7 在WAS-B、 WAS-100、 WAS-140、WAS-160 和WAS-180 中的相對(duì)豐度分別是1.68%、1.04%、2.99%、1.04%和1.19%。已有研究證明Megasphaera和Prevotella_7 可以產(chǎn)生高濃度丙酸和戊酸[35]，水熱預(yù)處理組產(chǎn)戊酸功能菌群的總相對(duì)豐度高于空白組，這可能是水熱預(yù)處理組戊酸產(chǎn)量升高的原因之一。另外，WAS-B 中產(chǎn)戊酸功能菌群的相對(duì)豐度是7.89%，而DY-B 無(wú)產(chǎn)戊酸功能菌群的富集，因此WAS-B 中戊酸的產(chǎn)量高于DY-B。

3 結(jié)論

（1）水熱預(yù)處理可以顯著提高戊酸的產(chǎn)量，在水熱預(yù)處理溫度為180℃時(shí)，戊酸的產(chǎn)量達(dá)到最大值。在接種酒曲體系中，戊酸的產(chǎn)量從3.47g COD/L 提高至16.19g COD/L，與空白組相比提高了3.66倍；在接種剩余污泥體系中，戊酸的產(chǎn)量從10.64g COD/L 提高至18.55g COD/L，與空白組相比提高了0.74倍。

（2）水熱預(yù)處理提高了發(fā)酵體系中丙酸的產(chǎn)量，降低了庚酸和己酸的產(chǎn)量，調(diào)控了發(fā)酵體系的醇酸比，促進(jìn)乙醇和丙酸轉(zhuǎn)化為戊酸。

（3）水熱預(yù)處理促進(jìn)了產(chǎn)戊酸功能菌群的高效富集。在接種酒曲體系中，空白組無(wú)與產(chǎn)戊酸相關(guān)功菌群的富集，水熱預(yù)處理溫度為180℃時(shí)與產(chǎn)戊酸相關(guān)功菌群Megasphaera和Dialister的相對(duì)豐度分別增加至13.77%和2.26%；在接種剩余污泥體系中，空白組Megasphaera的相對(duì)豐度為6.21%，水熱預(yù)處理溫度為180℃時(shí)Megasphaera的相對(duì)豐度最高加至9.35%。