于江，吳浩，賀友蘭，尹凱

(浙江南郊化學(xué)有限公司，浙江 紹興 312369)

氟鈴脲屬苯甲酰脲類殺蟲劑，具有很好的殺蟲、殺卵活性，主要用于棉花、馬鈴薯及果樹防治金紋細(xì)蛾、潛夜蛾、卷葉蛾、刺蛾、桃蛀螟等害蟲[1-2]。針對(duì)苯甲酰脲類殺蟲劑原藥分析方法已有較多報(bào)道[3-5]，但關(guān)于氟鈴脲原藥的檢測(cè)分析方法則少有報(bào)道。江蘇省農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量檢驗(yàn)測(cè)試中心基于甲醇/水為流動(dòng)相，二甲基甲酰胺和甲醇的混合溶劑為稀釋劑HPLC外標(biāo)法分析檢測(cè)了氟鈴脲原藥[6]，該方法稀釋操作繁瑣且二甲基甲酰胺和甲醇基線噪音大，易出現(xiàn)基線不穩(wěn)定現(xiàn)象，色譜柱柱壓高使用壽命短。其他關(guān)于氟鈴脲檢測(cè)報(bào)道多是針對(duì)農(nóng)藥殘留或制劑樣品[7-9]。本文研究了基于乙腈/水為流動(dòng)相，純乙腈為稀釋溶劑，通過C18反相高效液相色譜柱定量分析測(cè)定氟鈴脲原藥的方法。該方法稀釋溶劑單一、檢測(cè)時(shí)間短、操作簡便、結(jié)果重現(xiàn)性好、檢測(cè)靈敏度高，適用于氟鈴脲原藥的定量分析。

1 實(shí)驗(yàn)部分

1.1 儀器與試劑

U3000 高效液相色譜儀(DAD)、IS5 紅外光譜儀(賽默飛世爾科技公司)；Chromeleon7.2 工作站；ME204 分析天平儀(梅特勒-托利多公司)。

乙腈(HPLC 級(jí)，美國Tedia 公司)，娃哈哈純凈水，氟鈴脲標(biāo)樣(質(zhì)量分?jǐn)?shù)≥98%，自制)。

1.2 色譜操作條件

流動(dòng)相：乙腈與水(體積比為66∶34)，經(jīng)0.45 μm濾膜過濾，并在超聲波中脫氣20 min。檢測(cè)波長：254 nm；色譜柱：伊力特Supersil ODS2 C18色譜柱(4.6 mm×250 mm，5 μm)；色譜柱柱溫：25 ℃；進(jìn)樣量：5 μL；流速：1.0 mL/min。氟鈴脲原藥的保留時(shí)間為8 min。采用外標(biāo)法計(jì)算含量。

以上操作參數(shù)是典型的，可以根據(jù)不同儀器特點(diǎn)，對(duì)給定操作參數(shù)進(jìn)行適當(dāng)調(diào)整以便獲得最佳效果。

1.3 測(cè)定步驟

1.3.1 標(biāo)樣溶液配制

準(zhǔn)確稱取氟鈴脲標(biāo)樣0.02 g，置于50 mL 容量瓶中，加入乙腈稀釋，超聲溶解，取出冷至室溫后，用乙腈稀釋至刻度線，搖勻，備用。

1.3.2 試樣溶液配制

準(zhǔn)確稱取氟鈴脲樣品0.02 g，置于50 mL 容量瓶中，加入乙腈稀釋，超聲溶解，取出冷至室溫后，用乙腈稀釋至刻度線，搖勻，備用。

1.3.3 測(cè)定

待儀器基線穩(wěn)定后，連續(xù)注入數(shù)針標(biāo)樣溶液，直至相鄰2 針氟鈴脲峰面積相對(duì)變化小于1.0%后，按照標(biāo)樣溶液、試樣溶液、試樣溶液、標(biāo)樣溶液的順序進(jìn)行測(cè)定。圖1 為HPLC 典型譜圖。

1.3.4 計(jì)算

將測(cè)得的2 針試樣溶液以及試樣前后2 針標(biāo)樣溶液中氟鈴脲峰面積分別進(jìn)行平均。試樣中氟鈴脲的質(zhì)量分?jǐn)?shù)x1(%)按以下公式(1)計(jì)算。

式中：A1為標(biāo)樣溶液中氟鈴脲峰面積的平均值；A2為試樣溶液中氟鈴脲峰面積的平均值；m1為氟鈴脲標(biāo)樣的質(zhì)量，g；m2為氟鈴脲試樣的質(zhì)量，g；p為氟鈴脲標(biāo)樣的質(zhì)量分?jǐn)?shù)，%。

2 結(jié)果與討論

2.1 最佳操作條件的選擇

對(duì)氟鈴脲標(biāo)準(zhǔn)品進(jìn)行紅外光譜掃描鑒定，掃描結(jié)果見圖2。

圖2 氟鈴脲紅外掃描圖

采用HPLC-DAD 峰純度分析法鑒別氟鈴脲標(biāo)樣中的有效成分。標(biāo)樣中的氟鈴脲HPLC-DAD 峰純度大于閾值970，根據(jù)波長掃描圖，目標(biāo)化合物在254 nm 波長下具有良好的吸收，掃描結(jié)果見圖3。

圖3 氟鈴脲HPLC-DAD 掃描圖

為確保樣品與雜質(zhì)的完全分離且提高分析效率降低分析成本，筆者經(jīng)多次試驗(yàn)表明，當(dāng)流動(dòng)相為乙腈與水(體積比為66∶34)、流速1.0 mL/min、柱溫25 ℃時(shí)基線平穩(wěn)且峰型對(duì)稱，與其他雜質(zhì)峰沒有重疊，得到了較好的分離效果。

2.2 線性關(guān)系的測(cè)定

分別準(zhǔn)確稱取氟鈴脲標(biāo)樣11.03、16.58、20.08、24.40、22.43、29.74 mg 于50 mL 容量瓶中，用乙腈超聲溶解，取出冷至室溫后，用乙腈至刻度線，搖勻，備用。待儀器穩(wěn)定后對(duì)標(biāo)準(zhǔn)溶液分別進(jìn)行進(jìn)樣測(cè)定，以氟鈴脲的質(zhì)量x(mg)為橫坐標(biāo)，以其響應(yīng)的峰面積y為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，得到線性方程y=234.07x-28.073，相關(guān)系數(shù)R2=0.999 9。

2.3 準(zhǔn)確度的測(cè)定

儲(chǔ)備液的配制：準(zhǔn)確稱取氟鈴脲標(biāo)樣101.05 mg于50 mL 容量瓶中，用乙腈超聲溶解，取出冷至室溫后，用乙腈至刻度線，搖勻，備用。

標(biāo)樣配制：分別準(zhǔn)確稱取氟鈴脲標(biāo)樣20.01、20.35 mg 于50 mL 容量瓶中，用乙腈超聲溶解，取出冷至室溫后，用乙腈至刻度線，搖勻，備用。

樣品配制：分別準(zhǔn)確稱取已知含量(97.75%)的氟鈴脲樣品14.30、12.74、11.24 mg 于50 mL 容量瓶中，分別加入5 mL 儲(chǔ)備液，用乙腈超聲溶解，取出冷至室溫后，用乙腈至刻度線，搖勻，備用。

待儀器穩(wěn)定后對(duì)標(biāo)準(zhǔn)溶液及待測(cè)樣品溶液分別進(jìn)行進(jìn)樣測(cè)定，計(jì)算回收率，平均回收率為100.84%，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差0.9%，結(jié)果見表1。

表1 分析方法的準(zhǔn)確度測(cè)定

2.4 精密度的測(cè)定

同一份樣品準(zhǔn)確稱取6 份，并準(zhǔn)確稱取2 份氟鈴脲標(biāo)準(zhǔn)品，在氟鈴脲外標(biāo)操作方法下測(cè)定氟鈴脲質(zhì)量分?jǐn)?shù)，并計(jì)算氟鈴脲質(zhì)量分?jǐn)?shù)的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為0.13，小于Horwits 公式2(1-0.5logC)×0.67(C為試樣中氟鈴脲含量，以小數(shù)計(jì))計(jì)算值1.34(表2)。

表2 分析方法的精密度測(cè)定

3 結(jié)論

本文建立了一種基于反相高效液相色譜法的氟鈴脲原藥的分析方法，該方法的標(biāo)準(zhǔn)偏差為0.13%，線性相關(guān)系數(shù)0.999 9，平均回收率為100.84%。該方法準(zhǔn)確度和精密度較高，樣品結(jié)果重現(xiàn)性好，操作簡便且檢測(cè)時(shí)間短，是一種理想的定量分析氟鈴脲原藥的方法。