王文萍

【摘要】? 目的? ? 比較熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)（FQ-PCR）法與免疫學(xué)化學(xué)發(fā)光法（CLEIA）檢測乙型肝炎病毒（HBV）的價值。方法? ? 選擇2020年8月—2022年6月上饒市人民醫(yī)院檢驗(yàn)科341份應(yīng)用FQ-PCR法測定HBV-DNA陽性血清標(biāo)本作為研究對象，所有血清標(biāo)本均采用FQ-PCR法及CLEIA檢測。分析HBV-DNA陽性標(biāo)本中乙肝5項(xiàng)[乙肝表面抗體（HBsAb）、乙肝表面抗原（HBsAg）、乙肝核心抗體（HBcAb）、乙肝e抗體（HBeAb）、乙肝e抗原（HBeAg）]陽性檢出率在不同血清模式下HBV-DNA載量分布情況，對比HBV-DNA載量于HBeAg陽性與HBeAb陽性中的分布情況。結(jié)果? ? HBsAg+、HBcAb+、HBeAg+及HBsAg+、HBcAb+、HBeAb+陽性檢出率最高，分別為38.42%、43.70%；HBsAg+、HBsAb+、HBcAb+、HBeAg+陽性檢出率為4.99%，HBsAg+、HBsAb+、HBcAb+、HBeAb+陽性檢出率為4.69%。另外，HBcAb陽性標(biāo)本共331份，約占所有HBV-DNA陽性標(biāo)本數(shù)的97.07%。大三陽組（131例）患者HBV-DNA平均載量為 5.65×108 U/mL，其中低載量占全組比例為17.56%（23/131）、中載量占全組比例為17.56%（23/131）、高載量占全組比例為64.89%（85/131）；小三陽組（149例）患者HBV-DNA平均載量為 1.82×106 U/mL，其中低載量占全組比例為81.88%（122/149）、中載量占全組比例為15.44%（23/149）、高載量占全組比例為2.68%（4/149）。HBeAg陽性患者于高載量HBV-DNA中占比為60.67%，HBeAb陽性患者于低載量HBV-DNA中占比為77.71%，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。結(jié)論? ? 2種方法聯(lián)合檢測在判斷HBV感染中具有較高的應(yīng)用價值，可為診斷及治療方案制定等提供可靠的參考依據(jù)。

【關(guān)鍵詞】? 乙型肝炎病毒； 熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)； 免疫學(xué)化學(xué)發(fā)光法； 乙肝5項(xiàng)

中圖分類號：R512.6+2? ? ? ? 文獻(xiàn)標(biāo)識碼：A

文章編號：1672-1721（2023）22-0118-03

DOI：10.19435/j.1672-1721.2023.22.039

乙型肝炎（乙肝）現(xiàn)已成為危害公共衛(wèi)生安全的嚴(yán)重疾病之一，與艾滋病及肺結(jié)核共同為臨床常見的傳染性疾病。乙肝為乙型肝炎病毒（hepatitis B virus，HBV）感染所致，盡早明確HBV感染對改善患者預(yù)后具有重要作用[1-2]?，F(xiàn)階段，臨床在HBV檢測中主要采用免疫學(xué)化學(xué)發(fā)光法（CLEIA）及熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)（FQ-PCR）法，其中CLEIA具有較高的特異度及靈敏度，且線性范圍較寬，檢測時自動化程度較高，現(xiàn)已廣泛被應(yīng)用于HBV感染的檢測，其檢測內(nèi)容包括HBV及HBV-DNA載量、乙肝病毒所致的抗原及抗體，如乙肝5項(xiàng)分別為乙肝表面抗體（HBsAb）、乙肝表面抗原（HBsAg）、乙肝核心抗體（HBcAb）、乙肝e抗體（HBeAb）、乙肝e抗原（HBeAg）[3-4]。FQ-PCR法因具有較高的準(zhǔn)確度、靈敏度及特異度等，在HBV鑒別診斷中受到廣大檢驗(yàn)人員及患者的青睞，多被用于HBV-DNA檢測[5]。2種方法檢測均具有操作便捷、經(jīng)濟(jì)、靈敏度及特異度均較高等特點(diǎn)。本研究對比了FQ-PCR法與CLEIA檢測HBV的結(jié)果，旨在探究其臨床應(yīng)用價值，報(bào)告如下。

1? ? 資料與方法

1.1? ? 一般資料? ? 選擇2020年8月—2022年6月上饒市人民醫(yī)院檢驗(yàn)科341份應(yīng)用FQ-PCR法測定HBV-DNA陽性血清標(biāo)本作為研究對象，血清標(biāo)本對應(yīng)患者中，男性189例，女性152例；年齡15～83歲，平均年齡（49.83±3.90）歲；住院患者254例，門診患者87例。納入標(biāo)準(zhǔn)：所有血清樣本均經(jīng)FQ-PCR法檢測明確HBV-DNA載量≥5.00×102U/mL，并判定為HBV-DNA陽性；血清樣本均得到有效保存，質(zhì)量均合格；血清樣本來源明確；均應(yīng)用CLEIA檢測乙肝5項(xiàng)指標(biāo)。

1.2? ? 方法? ? 采集患者5? mL清晨空腹肘靜脈血，將血液標(biāo)本放置于離心機(jī)內(nèi)，以3 500? r/min速度離心10? ?min，離心半徑10? ?cm獲得上層血清，隨后將血清置于-20? ?℃環(huán)境中保存待檢，所有血清標(biāo)本均采用FQ-PCR法及CLEIA檢測。

FQ-PCR法檢測：血清樣本中HBV-DNA水平的測定應(yīng)用安普利公司生產(chǎn)的型號為Anadas? 9850的全自動核酸提純熒光定量PCR分析儀，相關(guān)試劑盒由廈門安普利生物工程有限公司提供。

CLEIA檢測：檢測血清中HBsAb、HBsAg、HBcAb、HBeAb、HBeAg水平應(yīng)用強(qiáng)生公司生產(chǎn)的型號為Maccura i3000全自動免疫分析儀及配套試劑測定，所有操作均嚴(yán)格遵循試劑盒要求；同時要求質(zhì)量控制需每日執(zhí)行，且每個監(jiān)測批次中均包括HBV陽性定量參考品與陰性質(zhì)控品，HBsAb、HBsAg、HBcAb、HBeAb、HBeAg載量為5.00×103 U/mL、5.00×104 U/mL、5.00×105 U/mL、5.00×106 U/mL、5.00×107U/mL，對其行重復(fù)檢測，以獲得最佳結(jié)果。

1.3? ? 觀察指標(biāo)? ? （1）分析HBV-DNA陽性標(biāo)本中乙肝5項(xiàng)陽性檢出率，依據(jù)乙肝5項(xiàng)檢測后HBsAb陽性、HBsAg陽性、HBcAb陽性、HBeAb陽性、HBeAg陽性對患者進(jìn)行分組，計(jì)算陽性檢出率。（2）分析不同血清學(xué)模式下標(biāo)本的HBV-DNA載量分布情況，依據(jù)HBV-DNA載量不同對所有患者進(jìn)行分級，包括低載量、中載量及高載量3個等級。（3）對比HBeAg陽性與HBeAb陽性標(biāo)本HBV-DNA載量分布。

1.4? ? 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法? ? 使用SPSS 22.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理，計(jì)數(shù)資料以百分比表示，采用χ2檢驗(yàn)，P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2? ? 結(jié)果

2.1? ? 乙肝5項(xiàng)陽性檢出情況分析? ? HBsAg+、HBcAb+、HBeAg+及HBsAg+、HBcAb+、HBeAb+陽性檢出率最高，分別為38.42%、43.70%；HBsAg+、HBsAb+、HBcAb+、HBeAg+與HBsAg+、HBsAb+、HBcAb+、HBeAb+陽性檢出率分別為4.99%、4.69%。另外，HBcAb陽性標(biāo)本共331份，約占所有HBV-DNA陽性標(biāo)本數(shù)的97.07%（331/341），見表1。

2.2? ? HBV-DNA載量分布情況? ? 大三陽組患者（131例）HBV-DNA平均載量為5.65×108 U/mL，其中低載量占全組比例為17.56%（23/131），中載量占全組比例為17.56%（23/131），高載量占全組比例為64.89%（85/131）；小三陽組患者（149例）HBV-DNA平均載量為1.82×106 U/mL，其中低載量占全組比例為81.88%（122/149），中載量占全組比例為15.44%（23/149），高載量占全組比例為2.68%（4/149），見表2。

2.3? ? HBeAg陽性與HBeAb陽性患者HBV-DNA載量分布情況? ? 高載量HBV-DNA占所有HBeAg陽性患者的60.67%（91/150），而低載量HBV-DNA占所有HBeAb陽性患者的77.71%（136/175），差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），見表3。

3? ? 討論

乙型肝炎現(xiàn)已成為我國常見慢性傳染性疾病之一，隨著病情發(fā)展，可引發(fā)肝硬化、肝癌等，對患者生活質(zhì)量及生命健康均可造成嚴(yán)重影響。因此，盡早明確診斷對改善患者病情尤為重要。實(shí)驗(yàn)室檢測現(xiàn)已成為輔助診斷乙肝的有效方法，目前臨床多采用定量檢測的方式診斷乙型肝炎，該方法是通過免疫技術(shù)及分子技術(shù)進(jìn)行檢測，包括HBV-DNA載量及HBV相關(guān)抗原及抗體水平[6-7]。對檢測結(jié)果進(jìn)行判讀有助于及時了解HBV感染情況及免疫情況，為臨床進(jìn)一步診療提供可靠的參考依據(jù)[8]。

FQ-PCR法與CLEIA均為臨床常用的定量檢測方法，因?yàn)?種檢測方法原理存在差異，所獲得的檢測結(jié)果無法直接進(jìn)行比較。其中FQ-PCR檢測方法是利用分子水平直接對HBV-DNA的復(fù)制情況進(jìn)行測定，能夠充分反映患者的治療及恢復(fù)情況[9]。而CLEIA檢測可有效避免HBV檢測窗口期效應(yīng)的影響。將2種檢測方法聯(lián)合使用，可更好地動態(tài)監(jiān)測HBV感染患者病情轉(zhuǎn)歸情況，并對患者預(yù)后恢復(fù)有更加全面的了解[10]。本研究結(jié)果顯示，乙肝5項(xiàng)陽性檢出情況以HBsAg+、HBcAb+、HBeAg+及HBsAg+、HBcAb+、HBeAb+陽性檢出率最高，其次為HBsAg+、HBsAb+、HBcAb+、HBeAg+與HBsAg+、HBsAb+、HBcAb+、HBeAb+，大三陽組患者（131例）HBV-DNA平均載量為5.65×108 U/m，其中低載量占全組比例為17.56%、中載量為17.56%、高載量為64.89%；小三陽組患者（149例）HBV-DNA平均載量為1.82×106 U/mL，其中低載量占全組比例為81.88%、中載量為15.44%、高載量為2.68%，表明血清中HBeAg、HBeAb與HBV-DNA水平存在明顯相關(guān)性。分析原因?yàn)榛颊逪BV感染情況與其病情轉(zhuǎn)歸屬于動態(tài)過程，F(xiàn)Q-PCR檢測HBV-DNA載量與CLEIA檢測的乙肝5項(xiàng)指標(biāo)水平在判斷HBV感染嚴(yán)重程度中均具有重要作用，因患者間機(jī)體免疫功能存在較大差異，造成HBV反應(yīng)度存在不同[11]。FQ-PCR技術(shù)已在乙肝早期診斷及療效判斷中得到應(yīng)用，但需注意藥物對HBV-DNA檢測結(jié)果造成的干擾；而CLEIA檢測乙肝5項(xiàng)具有較高的靈敏度，可有效減少HBV檢測窗口期效應(yīng)的影響[12]。

綜上所述，F(xiàn)Q-PCR法與CLEIA聯(lián)合在HBV檢測中具有較高的應(yīng)用價值，可更加全面地反映患者病情轉(zhuǎn)歸情況及預(yù)后狀況，為臨床診療提供可靠參考。

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（收稿日期：2023-05-16）