董素素，梅 牧，王天立，譚亞芬，肖 強(qiáng)，張 旋，李秋平

常德市第一人民醫(yī)院呼吸與危重癥醫(yī)學(xué)科（湖南常德 415000）

慢性阻塞性肺疾?。╟hronic obstructive pulmonary disease,COPD）是一種以持續(xù)性氣流受限為特征的常見呼吸系統(tǒng)疾病，主要發(fā)生在老年人群中。慢性阻塞性肺疾病急性加重期（acute exacerbations of chronic obstructive pulmonary disease,AECOPD）患者的呼吸道癥狀惡化[1]。AECOPD 已成為導(dǎo)致老年患者住院的重要疾病之一，造成巨大的社會(huì)和經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)。COPD 的發(fā)生發(fā)展與氣道炎癥和全身免疫紊亂有關(guān)[2]。免疫功能異常是導(dǎo)致COPD 患者病情加重及預(yù)后不良的主要因素之一，而T 淋巴細(xì)胞亞群是機(jī)體免疫功能發(fā)揮作用的主要載體。T 淋巴細(xì)胞亞群與COPD 之間的關(guān)系越來越受關(guān)注。研究表明，COPD 患者急性加重期外周血T淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)水平明顯低于健康人群，T 淋巴細(xì)胞亞群失衡導(dǎo)致的機(jī)體免疫功能失調(diào)與COPD 進(jìn)展密切相關(guān)[3-4]。目前有關(guān)T 淋巴細(xì)胞亞群與肺功能、炎癥指標(biāo)的關(guān)系研究較少。本研究旨在探討AECOPD 患者T淋巴細(xì)胞亞群與肺功能、炎癥指標(biāo)的關(guān)系。

1 資料與方法

1.1 研究對(duì)象

回顧性分析湖南省常德市第一人民醫(yī)院呼吸內(nèi)科2021 年1 月至12 月AECOPD 患者的臨床資料，電話隨訪一年內(nèi)急性加重的次數(shù)。根據(jù)慢性阻塞性肺疾病全球倡議（Global Initiative for Chronic Obstructive Lung Disease,GOLD）標(biāo)準(zhǔn)診斷為COPD，表現(xiàn)為癥狀急性加重，如呼吸困難、痰膿性增加、痰量增加；可耐受肺功能檢查；可獲取相關(guān)實(shí)驗(yàn)室檢查結(jié)果。排除心、肝、腎、腦等重要器官疾病、自身免疫性疾病、惡性腫瘤及過去3 個(gè)月內(nèi)有就醫(yī)史的患者。根據(jù)肺功能分類，將AECOPD 患者分為GOLD I—Ⅱ、Ⅲ—Ⅳ組。健康對(duì)照組為同期在我院體檢中心接受體檢者。本研究由常德市第一人民醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)通過（2021-114-01）。

1.2 研究方法

1.2.1 肺功能檢查

采用德國(guó)耶格公司生產(chǎn)的Master Screen Diffusion 肺功能測(cè)定儀測(cè)定第 1 秒用力呼氣容積占預(yù)計(jì)值百分比（FEV1%pred）、吸入支氣管擴(kuò)張劑后的第1 秒用力呼氣容積與用力肺活量比值（FEV1/FVC）。肺功能檢測(cè)前24 h 內(nèi)不使用支氣管擴(kuò)張劑，吸入400 μg 沙丁胺醇20 min 后行支氣管舒張?jiān)囼?yàn)。要求質(zhì)量控制達(dá)到美國(guó)胸科協(xié)會(huì)標(biāo)準(zhǔn)[5]。①呼氣起始標(biāo)準(zhǔn)：呼氣起始無猶豫有爆發(fā)力，F(xiàn)-V 曲線顯示PEF 尖峰出現(xiàn)；外推容積應(yīng)小于FVC 的5%或0.15 L（取較大值）。②呼氣結(jié)束標(biāo)準(zhǔn)：受試者不能或不應(yīng)繼續(xù)呼氣，呼氣時(shí)間大于6 s 或呼氣平臺(tái)出現(xiàn)持續(xù)1 s 以上。③可接受的呼氣標(biāo)準(zhǔn)：到達(dá)滿意的試驗(yàn)開始標(biāo)準(zhǔn)；呼氣第1 s 無咳嗽、曲線平滑；達(dá)到滿意的試驗(yàn)結(jié)束標(biāo)準(zhǔn)；沒有漏氣、聲門關(guān)閉；呼氣期間沒有再吸氣。

1.2.2 T淋巴細(xì)胞檢測(cè)

AECOPD 組患者于入院后第一天、對(duì)照組于體檢時(shí)清晨空腹抽取5 mL 外周靜脈血，加入K2EDTA 抗凝，采用細(xì)胞免疫芯片（上海匯中細(xì)胞生物科技有限公司）檢測(cè)AECOPD 組及健康對(duì)照組患者外周血T 淋巴細(xì)胞亞群：CD3、CD4、CD8、CD4/CD8 細(xì)胞。操作嚴(yán)格按試劑盒方法進(jìn)行，包括稀釋血樣、加樣孵育40 min、洗染計(jì)數(shù)。

1.2.3 超敏C反應(yīng)蛋白檢測(cè)

AECOPD 組患者于入院后第一天、對(duì)照組于體檢時(shí)清晨空腹抽取5 mL 外周靜脈血，使用特定蛋白分析儀Aristo（深圳市國(guó)賽生物技術(shù)有限公司）經(jīng)免疫比濁法測(cè)定超敏C 反應(yīng)蛋白（C-reactive protein,CRP）。

1.3 統(tǒng)計(jì)分析

使用SPSS 26 軟件分析數(shù)據(jù)。正態(tài)分布的計(jì)量資料用均數(shù)和標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示，組間比較采用t檢驗(yàn)。非正態(tài)分布的計(jì)量資料用中位數(shù)和四分位數(shù)表示，采用秩和檢驗(yàn)。P＜0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。CD4、CD4/CD8、CD3、CD8 與FEV1%pred、FEV1/FVC、超敏CRP 的關(guān)系采用Pearson 相關(guān)分析。采用雙側(cè)檢驗(yàn)，取檢驗(yàn)水準(zhǔn)α=0.05。

2 結(jié)果

2.1 一般情況

研究共納入66 例AECOPD 患者，其中男性50 例、女性16 例，平均年齡（68.82±8.12）歲；對(duì)照組63 例，其中男性49 例、女性14 例，平均年齡（68.41±5.12）歲。AECOPD 患者平均年齡（P=0.73）、吸煙指數(shù)（P=0.08）與對(duì)照組的差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，但平均體質(zhì)量指數(shù)（BMI）、FEV1%pred、CD4、CD8、CD3、CD4/CD8 均低于健康對(duì)照組（P＜0.001），超敏CRP 高于健康對(duì)照組（P＜0.001），見表1。

表1 AECOPD組和健康對(duì)照組相關(guān)指標(biāo)比較Table 1.Comparison of related indicators between AECOPD group and control group

2.2 不同肺功能分級(jí)間的比較

相較于肺功能I—Ⅱ級(jí)組患者，Ⅲ—Ⅳ級(jí)組患者CD4（P＜0.001）、CD4/CD8（P=0.02）、CD3（P=0.02）顯著降低，而超敏CRP 則顯著升高（P=0.03），CD8 差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P=0.22），見表2。

表2 肺功能I一II組與Ⅲ一Ⅳ組的外周血T淋巴細(xì)胞及超敏CRP比較Table 2.Comparison of peripheral blood T lymphocyte and hypersensitive CRP between lung function I-II group and III-IV group

2.3 各指標(biāo)間的相關(guān)分析

CD4、CD4/CD8、CD3 與FEV1%pred、FEV1/FVC 呈正相關(guān)，與超敏CRP、急性加重次數(shù)呈負(fù)相關(guān)（P＜0.05）。CD8 與FEV1%、FEV1/FVC、超敏CRP 無顯著相關(guān)性（P＞0.05）。見表3。

表3 各指標(biāo)間的相關(guān)性分析Table 3.Correlation analysis among various indexes

3 討論

在COPD 發(fā)病過程中T 淋巴細(xì)胞亞群存在免疫缺陷及免疫失衡，T 淋巴細(xì)胞介導(dǎo)的免疫反應(yīng)是COPD 發(fā)病的重要機(jī)制之一[6]。外周血T 淋巴細(xì)胞亞群可反映患者的細(xì)胞免疫狀態(tài)。具體而言，CD4+輔助性T 細(xì)胞在活化狀態(tài)下可分泌釋放細(xì)胞因子以增強(qiáng)和擴(kuò)大免疫反應(yīng)[7]，而CD8+輔助性T 細(xì)胞抑制B 和T 淋巴細(xì)胞以維持免疫穩(wěn)態(tài)。CD4+/CD8+T 淋巴細(xì)胞的比值可直接反映患者T 淋巴細(xì)胞亞群的異常情況，從而在一定程度上了解細(xì)胞免疫狀態(tài)[8]。CD4+/CD8+T 淋巴細(xì)胞比值降低表明機(jī)體免疫功能下降。

與健康志愿者相比，慢性阻塞性肺病患者的CD4+T 淋巴細(xì)胞數(shù)量和CD4+/CD8+比率已被證實(shí)較少[9]。而隨著慢性阻塞性肺疾病的進(jìn)展，CD8+T 細(xì)胞和B 細(xì)胞的數(shù)量增加[10]。與之前報(bào)道的結(jié)果相似，本研究結(jié)果表明，與健康人群相比，COPD 患者的CD3+T 細(xì)胞、CD4+T 細(xì)胞數(shù)量及CD4+/CD8+比率顯著減少。但是，與其他研究不同，本實(shí)驗(yàn)并未發(fā)現(xiàn)CD8+T 細(xì)胞數(shù)量增多。

T 淋巴細(xì)胞亞群改變與COPD 患者FEV1%預(yù)計(jì)值、FEV1/FVC 有關(guān)。早期有研究認(rèn)為CD4/CD8 T 淋巴細(xì)胞比值與COPD 患者肺功能呈負(fù)相關(guān)[11]。而之后研究發(fā)現(xiàn)，COPD 各級(jí)患者的CD3+、CD4+細(xì)胞數(shù)量與FEV1/Pre、FEV1/FVC 有正相關(guān)性；COPD I、II、III 患者CD8+細(xì)胞數(shù)量與FEV1/Pre、FEV1/FVC 具有負(fù)相關(guān)性，與CD4+/CD8+比值具有正相關(guān)性[12]。本研究發(fā)現(xiàn)AECOPD 患者CD4、CD4/CD8、CD3 與FEV1%、FEV1/FVC 呈正相關(guān)。CD8 與FEV1%、FEV1/FVC 無顯著相關(guān)性。

T 淋巴細(xì)胞異?？蓪?dǎo)致慢性感染和炎癥。有研究顯示，細(xì)胞毒性CD8 T 淋巴細(xì)胞與輔助CD4 T 淋巴細(xì)胞之間的不平衡可導(dǎo)致COPD 患者氣道中的異常炎癥過程，使該疾病成為淋巴細(xì)胞驅(qū)動(dòng)的炎癥性疾病[13]。低CD4/CD8 比值是COPD 肺部炎癥反應(yīng)的特征性指征。超敏CRP 是評(píng)估軀體感染的敏感指標(biāo)，在炎癥反應(yīng)、組織損傷和免疫系統(tǒng)疾病中顯著增加[14]。研究還發(fā)現(xiàn)，CD4/CD8與超敏CRP 呈負(fù)相關(guān)，CD4、CD3 與超敏CRP 也呈負(fù)相關(guān)。

COPD 的特征是高發(fā)病率和高死亡率，不僅給患者及其家人帶來巨大痛苦，同時(shí)造成巨大的經(jīng)濟(jì)和社會(huì)負(fù)擔(dān)。免疫失衡與COPD 密切相關(guān)，T 淋巴細(xì)胞亞群失衡在氣道炎癥及 COPD 發(fā)病機(jī)制中起著重要作用。通過監(jiān)測(cè)評(píng)估COPD 患者的免疫功能，有助于臨床醫(yī)生及時(shí)采取有效的治療措施。吳曉玲等提出，在常規(guī)治療 COPD 急性加重期患者的同時(shí)加用胸腺肽等調(diào)節(jié)機(jī)體免疫，能達(dá)到減少患者急性發(fā)作次數(shù)、縮短住院時(shí)間及改善患者病情[15]。對(duì)于常規(guī)治療效果不佳的患者，或可通過中藥或免疫制劑調(diào)節(jié)T 淋巴細(xì)胞亞群平衡，增強(qiáng)機(jī)體免疫功能，改善患者預(yù)后。本研究為回顧性研究，且樣本量較為單一，存在一定局限性，未來有待于開展設(shè)計(jì)嚴(yán)謹(jǐn)?shù)母哔|(zhì)量研究進(jìn)一步探討。