鮑 寧，陳子超，趙春芹，劉名玉，張 振，李 肖*，蔡梅超*

黃芪-莪術藥對及其活性成分抗肝癌作用機制研究進展

鮑 寧1，陳子超2，趙春芹3，劉名玉3，張 振3，李 肖3*，蔡梅超1*

1. 山東中醫(yī)藥大學藥學院，山東 濟南 250355 2. 山東中醫(yī)藥大學實驗中心，山東 濟南 250355 3. 山東中醫(yī)藥大學中醫(yī)藥創(chuàng)新研究院，山東 濟南 250355

原發(fā)性肝癌為我國高發(fā)惡性腫瘤，中醫(yī)認為肝癌的主要病因是“氣虛血瘀”，其治法以“益氣活血”為主。黃芪-莪術為益氣活血法代表性藥對，已有研究表明該藥對及其活性成分具有明確的抗肝癌作用。通過對黃芪-莪術藥對及其活性成分抗肝癌作用機制相關文獻進行梳理，從抑制細胞增殖、誘導細胞凋亡、抑制細胞遷移和侵襲、抑制新血管生成、改善免疫微環(huán)境、逆轉多藥耐藥等角度對其抗肝癌作用機制進行綜述，為黃芪-莪術藥對的臨床用藥和抗肝癌中藥新藥研發(fā)提供依據(jù)。

黃芪；莪術；藥對；肝癌；免疫微環(huán)境；黃芪甲苷；毛蕊異黃酮；莪術醇；吉馬酮；姜黃素

原發(fā)性肝癌是最常見的惡性腫瘤之一，其中肝細胞癌約占90%[1]。世界衛(wèi)生組織數(shù)據(jù)顯示，2020年全球肝癌新發(fā)病例近90萬，中國約占45.3%[2]。原發(fā)性肝癌是當前我國第4位常見惡性腫瘤及第2位腫瘤致死病因，對人類的生命健康造成了嚴重威脅[3]。中藥作為我國原創(chuàng)性藥物資源在肝癌治療領域已有較多應用，其與放療、化療、手術等聯(lián)合使用不僅可提高療效，還可改善機體免疫系統(tǒng)功能，減輕患者的不良反應，提高患者生存質量[4-6]。中藥藥對作為中藥復方的特色之一，是歷代醫(yī)家根據(jù)臨床經驗凝練提取的精華所在[7]。黃芪-莪術配伍源于張錫純所著《醫(yī)學衷中參西錄》中的理沖湯，其用藥比為1∶1，該方主治氣虛血瘀證，莪術以消沖瘀血，而黨參、黃芪以保護氣血，則瘀血去而氣血不至傷損；且黃芪能補氣，得莪術以流通之，則補而不滯，而元氣愈旺；元氣既旺，愈能鼓舞莪術之力以消癥瘕，此其所以效也[8]。中醫(yī)認為肝癌的發(fā)病機制多為正氣虧虛、瘀血凝滯，黃芪扶益正氣，莪術破血消癥，二者配伍不僅互補弊端，更有利于發(fā)揮各自優(yōu)勢，起到破瘀不傷正、行氣不留瘀的作用。本文首先從不同層面對黃芪-莪術配伍理論進行研究，進一步整合國內外相關研究，對黃芪-莪術藥對中可能的抗肝癌有活性成分及其作用機制進行總結，為研究黃芪-莪術藥對抗肝癌提供理論基礎及思路指導。

1 配伍理論研究

1.1 基于用藥經驗的配伍研究

古今醫(yī)家認為正氣虧虛為肝癌的發(fā)病內因和前提，瘀血凝滯是肝癌發(fā)病的基本病理因素，正氣不足、瘀血阻滯伴隨著肝癌的發(fā)生、發(fā)展和轉移[9]。武嫣斐等[10]和李永健等[11]發(fā)現(xiàn)在脾氣虛型、肝血瘀阻型、肝郁氣滯型等原發(fā)性肝癌患者中，以氣滯血瘀、肝郁脾虛為常見主要證型，并提出將理氣、活血化瘀法貫穿于肝癌治療的始終。已有研究指出在治療肝癌過程中不僅要輔助正氣，還要同時行氣活血，二者兼顧方能共湊扶正祛邪之效[12]。早在《傷寒雜病論》中已將益氣藥與活血藥配伍使用，益氣活血法目前為臨床治療腫瘤的常用方法之一，其中黃芪-莪術為益氣活血法代表性藥對[12-18]。竇永起教授指出益氣活血法是腫瘤臨床不可或缺的抑制腫瘤生長和轉移的有效治法，其中益氣藥物常選生黃芪、黨參（15～30 g），氣虛甚者可增至50 g；活血藥物常用莪術、郁金、土鱉蟲、片姜黃等（10～15 g），其擬定的扶正散結方可改善腫瘤患者生存質量、提高患者的放化療完成率、延緩腫瘤的復發(fā)和轉移[19-20]。國醫(yī)大師朱春良進一步指出：“黃芪得莪術，補氣而不壅中，攻破并不傷正”，2藥配伍則“破中有補、補中有行、相得益彰”，并進一步指出臨證時以氣虛為主應重黃芪用量（30～60 g），若以血瘀為主則加重莪術用量（10～15 g）[21]。孫桂芝教授擅用桃紅芪術軟肝煎起益氣活血之效，認為黃芪-莪術配伍在治療肝癌時可補脾胃、破癥消積，對肝癌有很好的抑制作用，并在臨床實踐中將益氣活血法與化療相結合，可顯著提高肝癌患者的生存質量，在提高肝癌遠期療效上具有一定優(yōu)勢[22-24]。侯智通等[25]以益氣活血湯（其中黃芪-莪術2∶1）辨證配合肝動脈化療栓塞術可有效降低早期原發(fā)性肝癌患者腫瘤供血和供血速度。杜相宇[26]通過總結在臨床常用莪術配黃芪為主治療各種癌癥及肉瘤，認為莪術雖行氣活血消積之力強，而耗散正氣之弊反而不大，與黃芪合用，尤善于破積，針對血瘀氣虛型病機頗有成效。

1.2 基于體外成分相互作用的配伍研究

中藥活性成分是中藥發(fā)揮療效的物質基礎，配伍后產生的成分變化是研究中藥配伍機制的基礎，藥對經過配伍后，由于2藥間發(fā)生化學反應使活性成分溶出率發(fā)生變化達到增效或減毒的目的，目前多采用質譜與色譜結合的方法對藥對配伍前后的成分變化進行分析，探討其配伍規(guī)律，為臨床用藥提供指導[27-28]。吳佳菲等[29]通過高效液相色譜法對黃芪單煎、莪術單煎、共煎有效成分含量進行測定，結果顯示黃芪單煎時黃芪甲苷、黃芪皂苷I、黃芪皂苷II、毛蕊異黃酮、芒柄花素含量分別為0.094 3、0.383 6、0.377 0、0.080 3、0.034 9 mg/g；莪術單煎時莪術二酮、莪術醇含量分別為0.924 2、0.523 0 mg/g；2藥共煎時這些成分含量為單煎的2～3倍，推測黃芪中皂苷類及黃酮類成分對莪術中的脂質成分有一定的助溶作用。Yin等[30]應用超高效液相色譜-三重四極桿串聯(lián)質譜法測定黃芪、莪術中17種活性成分，發(fā)現(xiàn)與單煎相比，共煎莪術烯醇、莪術二酮、異莪術烯醇、莪術呋喃二烯酮、莪術醇和吉馬酮（0.279、0.830、0.006、0.106、0.571、0.017 mg/g）等脂溶性成分含量均顯著增加，表明黃芪-莪術配伍可以促進活性成分的溶出。

1.3 基于體內生物效應的配伍研究

中藥配伍后相互作用可影響生化指標、組織形態(tài)及引起內源性代謝物發(fā)生變化，且這些相互作用受配伍比例的影響，比例關系的改變會導致作用效果的改變[27,31]。藥對配伍后的藥效學評價是判斷2藥配伍是否合理的重要考察內容[28]。許成勇等[32]通過研究黃芪-莪術不同配比（0∶1、1∶1、2∶1、3∶1）的抗腫瘤效果及其抗腫瘤血管生成機制，發(fā)現(xiàn)黃芪-莪術3∶1對腫瘤大小及血管生成的抑制作用最好，推測黃芪可增強莪術下調血管生成相關蛋白轉化生長因子-β（transforming growth factor-β，TGF-β）、缺氧誘導因子-1α（hypoxia inducible factor-1α，HIF-1α）的表達。近年來代謝組學技術已被廣泛應用于藥對配伍機制研究，Sun等[33]基于超高效液相色譜四極桿飛行時間質譜的代謝組學方法檢測黃芪-莪術不同配伍比例對結直腸癌荷瘤小鼠血清內源性代謝物和代謝途徑的影響，發(fā)現(xiàn)黃芪-莪術配伍后可通過調節(jié)纈氨酸、亮氨酸、異亮氨酸、氨酰-tRNA生物合成，咖啡因代謝和視黃醇代謝發(fā)揮抗腫瘤作用，且黃芪-莪術2∶1效果最佳。

2 抗肝癌的作用機制研究

2.1 抑制細胞增殖

惡性腫瘤的發(fā)生、發(fā)展與細胞增殖密切相關，阻滯腫瘤細胞周期進而抑制增殖是抗腫瘤的一個重要策略[34-35]。研究表明黃芪、莪術中的多種成分黃芪總黃酮、黃芪多糖、毛蕊異黃酮、莪術油、莪術醇、莪術二酮均可通過阻滯肝癌細胞周期發(fā)揮抗腫瘤作用[36-39]。細胞周期的調控與細胞周期蛋白（Cyclin）、Cyclin依賴性激酶（Cyclin-development protein kinases，CDKs）等相關[40]。Liu等[41]發(fā)現(xiàn)黃芪中的黃酮類成分毛蕊異黃酮100 μmol/L可有效促進人肝癌HepG2細胞周期停滯在G0/G1期，其機制是通過降低細胞中CDK2/4/6、Cyclin D1和Cyclin E蛋白的表達；芒柄花素0.006 μmol/mL可通過環(huán)氧合酶-2（cyclooxygenase-2，COX-2）/Cyclin D軸促進人肝癌Bel-7402細胞和HepG2細胞周期停滯在G0/G1期[29,42]。吉馬酮是莪術的主要活性成分之一，HepG2和BEL-7402細胞經吉馬酮80、160、200 μmol/L處理24 h后，其細胞周期停滯于G2/M期，其機制為激活p21的表達，促使其與CDK1、Cyclin B1和增殖細胞核抗原（proliferating cell nuclear antigen，PCNA）的競爭性結合，避免細胞分裂周期蛋白25催化的CDK1去磷酸化，從而抑制CDK1活性[43]。此外，黃芪、莪術中的非特異性成分如蘆丁、異鼠李素、異甘草素等都對肝癌細胞的周期有一定的影響[44-46]。

2.2 誘導細胞凋亡

細胞凋亡是細胞為維持穩(wěn)定的內環(huán)境而發(fā)生的自主有序的死亡，誘導細胞凋亡是抗腫瘤的常見手段，導致細胞凋亡的主要途徑有線粒體應激參與的內源性途徑和死亡受體介導的外源性途徑[34]。黃芪、莪術中的有效成分主要通過線粒體途徑誘導細胞凋亡，黃芪多糖0.1、0.5、1.0 mg/mL可下調B淋巴細胞瘤-2（B-cell lymphoma-2，Bcl-2）和上調Bcl-2相關X蛋白（Bcl-2 associated X protein，Bax）的表達，激活半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3（cystein- asparate protease-3，Caspase-3）和Caspase-9的級聯(lián)反應產生，從而誘導小鼠肝癌H22細胞凋亡[47]；毛蕊異黃酮100 μmol/L可靶向線粒體途徑，通過絲裂原活化蛋白激酶（mitogen-activated protein kinase，MAPK）、信號轉導和轉錄激活因子3（signal transducer and activator of transcription 3，STAT3）和核因子-κB（nuclear factor-κB，NF-κB）信號通路促進活性氧的產生進而誘導細胞凋亡，且對正常細胞無毒性[41]；黃芪多糖100、200 mg/L和莪術中的β-欖香烯20、50、100 μg/mL可通過抑制HepG2細胞中的Wnt/β-連環(huán)蛋白（β-catenin）信號通路促進細胞凋亡[48-49]。黃芪水煎劑、黃芪甲苷也可以通過抑制NF-κB信號通路來增強細胞免疫功能，進而誘導HepG2細胞凋亡[50-51]。

2.3 抑制細胞遷移和侵襲

肝細胞癌具有較高的侵襲、轉移性，是導致臨床腫瘤治療失敗的主要原因之一[52]。黃芪-莪術配伍水煎液0.60、0.30、0.15 g/mL通過下調、的表達發(fā)揮抗肝癌侵襲、轉移的作用[53]。黃芪多糖300 mg/L通過下調人肝癌SMMC-7721細胞中Janus激酶（Janus kinases，JAK）/STAT通路相關蛋白表達起到抑制遷移和侵襲的作用[54]。大量研究表明上皮間質轉化（epithelial-mesenchymal transition，EMT）在腫瘤遷移和侵襲過程中發(fā)揮重要作用[55-56]。研究表明黃芪甲苷10、50、100 μg/mL可上調具有低轉移潛能和高轉移潛能的人肝癌Huh-7細胞和MHCC97-H細胞中E-cadherin的蛋白表達，促進其在細胞膜上積累，使細胞間連接更加緊密從而降低轉移擴散能力。此外黃芪甲苷50、100 μg/mL還可以通過降低蛋白激酶B（protein kinase B，Akt）磷酸化，抑制其對糖原合成酶激酶-3β（glycogen synthasekinase-3β，GSK-3β）的降解作用，進而促進β-catenin磷酸化，抑制EMT過程。姜黃素10、20、30 μmol/mL通過白細胞介素-6受體α（interleukin-6 receptor α，IL6-Rα）/JAK2/Akt/GSK-3β抑制HepG2細胞的EMT過程；β-欖香烯20、50、100 μg/mL可通過降低HepG2細胞內Wnt1的表達抑制GSK-3β的表達，進而抑制EMT過程[49,57-58]。研究表明毛蕊異黃酮與姜黃素均可以通過影響TGF-β/Smad2的表達影響EMT過程[41,59]。黃芪有效成分也可通過調控長鏈非編碼RNA（long non-coding RNA，lncRNA）的表達而抑制腫瘤細胞的EMT過程，黃芪甲苷20、40、80、160 μg/mL可呈劑量相關性下調lncRNA-的表達抑制SMMC-7721細胞的EMT過程，從而抑制肝癌細胞的遷移和侵襲[60]。Huang等[47]研究發(fā)現(xiàn)在肝細胞癌細胞中存在Notch1過表達，Notch1會改善肝細胞癌細胞的生存時間和血管生成擬態(tài)，黃芪多糖0.1、0.5、1.0 mg/mL可降低H22細胞中Notch1的表達，進而下調基質金屬蛋白酶9（matrix metalloprotein 9，MMP9）和COX-2水平從而抑制遷移。

2.4 抑制腫瘤新血管生成

惡性腫瘤的生長、浸潤和轉移依賴于血管生成，血管內皮生長因子（vascular endothelial growth factor，VEGF）能夠促進內皮細胞增殖，誘導腫瘤附近的正常毛細血管轉變?yōu)樾碌拿氀?，從而促進腫瘤的生長[61-62]。黃芪-莪術水煎液3、6、12 g/kg能夠降低人肝癌裸鼠原位移植瘤中VEGF的表達使腫瘤新生血管生成受到抑制[63]。Zhang等[64]研究表明黃芪甲苷和姜黃素單獨使用及聯(lián)合使用均能抑制HepG2原位裸鼠模型中的腫瘤生長和血管生成，且黃芪甲苷20 mg/kg與姜黃素100 mg/kg聯(lián)用對VEGF、MMP2、成纖維細胞生長因子-2（fibroblast growth factor-2，F(xiàn)GF-2）和肝細胞生長因子（hepatocyte growth factor，HGF）及血栓形成相關因子組織因子（tissue factor，TF）和凝血因子VII（coagulation factor VII，F(xiàn)VII）有協(xié)同抑制作用。HIF-1在促進腫瘤血管的生成方面也起到重要作用，決定HIF-1活性的HIF-1α已被證實與腫瘤血管新生密切相關，臧文華等[63]和駱殊等[65]發(fā)現(xiàn)黃芪、莪術水煎液及黃芪甲苷與姜黃素配伍使用可降低人肝癌裸鼠原位移植瘤中HIF-1α的表達抑制腫瘤新血管的生成。CD147是位于腫瘤細胞膜表面的跨膜糖蛋白，有研究表明CD147可通過HIF-2α通路調節(jié)VEGF及VEGF-R2的表達進而刺激腫瘤血管的生成[66-67]。黃芪、莪術水煎液6、12 g/kg及同劑量聯(lián)合順鉑可下調人肝癌裸鼠移植瘤中的CD147的表達抑制腫瘤新血管的生成，且呈劑量相關性[68]。

2.5 改善腫瘤免疫微環(huán)境

腫瘤免疫微環(huán)境可動態(tài)調控肝癌的發(fā)生、發(fā)展及轉移[69-70]。黃芪水煎液40 mg/mL能夠刺激人外周血單個核細胞（peripheral blood mononuclear cell，PBMC）分泌γ-干擾素、腫瘤壞死因子（tumor necrosis factor，TNF），從而使PBMC活化增強對腫瘤細胞的殺傷能力[71]。巨噬細胞是具有多種功能的免疫細胞，巨噬細胞吞噬外來異己細胞后，誘導主要組織相容性復合物II（major histocompatibility complex II，MHCII）和MHCⅠ及協(xié)同刺激分子如CD40、CD86等，這些分子參與T細胞活化的第1信號通路和第2信號通路，促進抗原的遞呈從而激活T細胞[72]。黃芪甲苷聯(lián)合β-欖香烯100、150 μg/mL可增強小鼠巨噬細胞J447A.1Mφ的吞噬能力，并且可以增強巨噬細胞表面MHCII、MHCI類分子及共刺激因子CD40、CD86的表達，促進巨噬細胞遞呈外源性抗原及激活T細胞從而使機體更好的發(fā)揮免疫應答能力[73]。樹突狀細胞（dendritic cells，DCs）可以通過分泌細胞因子發(fā)揮免疫應答作用，細胞因子IL-2和IL-6的靶細胞主要是T細胞和自然殺傷細胞（natural killer cell，NK），一方面可以增強CD8 T細胞的殺傷作用，增強DCs細胞抗原呈遞功能，另一方面可以增強NK細胞的殺傷能力，從而增強固有免疫功能，因此IL-2和IL-6是連接固有免疫和獲得性免疫的一個重要紐帶[74-75]。黃芪總皂苷80 mg/mL、黃芪多糖100、200、400 mg/kg可促進H22荷瘤小鼠體內的IL-2、IL-6的產生[76-77]；黃芪甲苷和β-欖香烯10 μg/mL聯(lián)用能夠促進DCs細胞分泌IL-2、IL-6等細胞因子從而增強細胞的免疫功能[78]。

2.6 逆轉腫瘤多藥耐藥（multidrug resistance，MDR）

MDR是臨床腫瘤化療失敗的主要原因之一，據(jù)統(tǒng)計90%肝癌患者化療失敗的原因與細胞的MDR密切關聯(lián)，干擾或阻止藥物耐藥是目前癌癥治療需要攻克的難題，中藥治療或可以提供解決這一障礙的新方法[79]。多項研究表明黃芪、莪術有效成分在體內外均能增加化療藥物的治療效果、減少化療藥物對機體的損傷[80-81]。多藥耐藥相關蛋白1（multidrug resistance-associated protein 1，MRP1）是引起MDR的一種跨膜蛋白[82-83]。黃芪多糖50、100、200 mg/kg能夠通過下調MRP1的蛋白表達，并且與順鉑-多柔比星化療干預相比，黃芪多糖與其聯(lián)合使用MRP1的蛋白表達下調作用更為顯著，表明黃芪多糖在一定程度上能夠拮抗腫瘤細胞的耐藥性，增強對化療藥物的敏感性[84]。

黃芪-莪術藥對及其活性成分抗肝癌主要分子機制見圖1。其他活性成分如黃芪皂苷II、黃芪多糖、姜黃素等能夠通過介導死亡受體途徑誘導凋亡、干涉自噬溶酶體途徑、調節(jié)miRNA表達、調節(jié)免疫因子等發(fā)揮抗肝癌作用，見表1。

圖1 黃芪-莪術藥對及其有效成分抗肝細胞癌的作用機制

表1 黃芪-莪術藥對及其有效成分抗肝細胞癌作用機制

續(xù)表1

續(xù)表1

3 結語與展望

黃芪-莪術作為我國傳統(tǒng)藥對，具有悠久的用藥歷史，其配伍使用被廣泛應用于抗腫瘤治療?，F(xiàn)代研究發(fā)現(xiàn)黃芪總黃酮、黃芪多糖、黃芪甲苷、姜黃素、莪術醇等成分在抗腫瘤方面發(fā)揮重要作用。首先，通過阻滯肝癌細胞的周期進程抑制細胞增殖；其次，通過線粒體途徑等誘導腫瘤細胞凋亡；此外，通過抑制EMT過程、調節(jié)Wnt/β-catenin信號通路來抑制腫瘤細胞遷移和侵襲。黃芪、莪術中的活性成分還能在抑制新血管生成、改善腫瘤免疫微環(huán)境、逆轉MDR等方面發(fā)揮重要作用。

盡管目前對黃芪、莪術抗肝癌機制的研究取得了一定進展，但仍有多方面的問題有待進一步的探索：（1）現(xiàn)階段對黃芪-莪術藥對抗肝癌配伍的科學內涵闡釋不清，多數(shù)研究集中在單味藥及單個成分的作用機制上，對藥對配伍及多成分協(xié)同抗肝癌研究較少。（2）目前該藥對抗肝癌研究主要集中在藥理機制層面，多學科間關聯(lián)性研究較少。針對上述存在的問題，綜合現(xiàn)階段的研究成果，筆者認為，以體外成分為切入點，從配伍前后體內外化學成分變化、藥動學行為及作用機制3個層面進行系統(tǒng)研究，有助于闡明二者配伍的協(xié)同增效機制。如單煎與共煎是否影響成分在體內的含量及其藥動學行為。目前成分配伍主要集中在黃芪多糖、黃芪甲苷、姜黃素、β-欖香烯，更多成分的配伍有待進一步研究。其次是應注重多學科間的關聯(lián)發(fā)展，注重整體性研究。如網絡藥理學、生物信息學與轉錄組學、蛋白組學、代謝組學等多組學整合系統(tǒng)研究方法，有助于全面闡釋黃芪-莪術藥對及其有效成分抗肝癌的多成分、多靶點、多通路的作用機制。

另外中藥的多成分作用廣泛，難以明確其唯一作用途徑，因此在臨床使用時與現(xiàn)代醫(yī)學理論的融合尚有欠缺，筆者認為應以中醫(yī)藥辨證論治結合現(xiàn)代醫(yī)學知識和科技手段，深入研究藥物作用機制并實現(xiàn)傳統(tǒng)醫(yī)學理論與現(xiàn)代科技手段的相互交融，以促進臨床應用與基礎研究的緊密結合，為中藥抗腫瘤的進一步發(fā)展提供依據(jù)。以上問題的解決將為更準確尋找、確認和優(yōu)化黃芪、莪術發(fā)揮抗肝癌效應的有效成分與靶點的作用，推動臨床應用提供新的見解，為肝癌治療提供新的方法。

利益沖突 所有作者均聲明不存在利益沖突

[1] Vogel A, Meyer T, Sapisochin G,. Hepatocellular carcinoma [J]., 2022, 400(10360): 1345-1362.

[2] Sung H, Ferlay J, Siegel R L,. Global cancer statistics 2020: GLOBOCAN estimates of incidence and mortality worldwide for 36 cancers in 185 countries [J]., 2021, 71(3): 209-249.

[3] 原發(fā)性肝癌診療指南 (2022年版) [J]. 腫瘤綜合治療電子雜志, 2022, 8(2): 16-53.

[4] Qi F H, Zhao L, Zhou A Y,. The advantages of using traditional Chinese medicine as an adjunctive therapy in the whole course of cancer treatment instead of only terminal stage of cancer [J]., 2015, 9(1): 16-34.

[5] 何志軍, 張健, 王佩, 等. 補中益氣湯加減改善肝癌患者肝動脈化療栓塞術后疲勞狀態(tài)及生活質量臨床觀察 [J]. 湖北中醫(yī)藥大學學報, 2020, 22(1): 105-108.

[6] 郭京華. 中藥方劑緩解肝癌化療后癥狀的臨床研究 [J]. 北方藥學, 2018, 15(5): 18-19.

[7] 袁海建, 李國銀, 姜俊, 等. 半夏-厚樸藥對抗腫瘤功效物質基礎及作用機制研究新思路 [J]. 中草藥, 2018, 49(8): 1924-1931.

[8] 王惠. 理沖湯加減方聯(lián)合5-氟尿嘧啶對肝癌上皮間質轉化影響的實驗研究 [D]. 南京: 南京中醫(yī)藥大學, 2019.

[9] 臧文華, 唐德才. 益氣活血法治療原發(fā)性肝癌的理論探討 [J]. 中國中醫(yī)基礎醫(yī)學雜志, 2015, 21(12): 1498-1500.

[10] 武嫣斐, 王素萍, 孫健民, 等. 原發(fā)性肝癌中醫(yī)證型臨床分布及證型標準 [J]. 山西中醫(yī)學院學報, 2007, 8(2): 21-23.

[11] 李永健, 方肇勤, 邸若虹, 等. 2492例肝癌辨證分型臨床報道的統(tǒng)計分析 [J]. 中國中醫(yī)基礎醫(yī)學雜志, 2001, 7(6): 69-71.

[12] 盧冬雪, 祁明浩, 薛恬, 等. 劉沈林治療晚期消化道腫瘤用藥經驗 [J]. 世界中西醫(yī)結合雜志, 2017, 12(8): 1064-1068.

[13] 孫穎, 孫彬栩, 賈英杰. 賈英杰教授辨治惡性腫瘤血瘀證經驗 [J]. 天津中醫(yī)藥大學學報, 2020, 39(2): 135-137.

[14] 張新華. 段鳳舞老師運用參赭培氣逐淤湯治療原發(fā)性肝癌的經驗 [J]. 黑龍江中醫(yī)藥, 1988, 17(1): 7-8.

[15] 唐德才. 活血化瘀藥在抗腫瘤及轉移中的運用思考 [J]. 南京中醫(yī)藥大學學報, 2019, 35(1): 1-4.

[16] 陳吉全, 劉冉女. 龐景三教授運用黃芪-黨參-三棱-莪術藥串經驗 [J]. 中醫(yī)研究, 2012, 25(9): 40-42.

[17] 宋希朋. 乳腺癌術后常規(guī)化療輔以中藥治療對患者遠期轉移復發(fā)率及生活質量的影響 [J]. 現(xiàn)代中西醫(yī)結合雜志, 2016, 25(33): 3670-3672.

[18] 倪俊剛. 黃芪抗癌湯干預乳腺癌術后復發(fā)轉移的臨床觀察 [J]. 中國中醫(yī)藥科技, 2016, 23(5): 599-600.

[19] 許成勇. 竇永起教授治療腫瘤學術思想總結及黃芪-莪術配伍抗腫瘤血管生成機制研究 [D]. 北京: 中國人民解放軍醫(yī)學院, 2018.

[20] 徐冉. 竇永起教授診治惡性腫瘤學術經驗總結與研究 [D]. 北京: 中國人民解放軍醫(yī)學院, 2019.

[21] 張勤華, 齊聰, 黃宗瀚. 氣虛血瘀證卵巢癌大鼠的預后及其與腫瘤新生血管形成的相關性 [J]. 上海中醫(yī)藥雜志, 2007, 41(6): 73-75.

[22] 王靖思, 陳蘭羽, 劉玉琴, 等. 孫桂芝從補脾胃、治未病論治肝癌經驗 [J]. 中醫(yī)雜志, 2015, 56(13): 1096-1098.

[23] 王靖思. 從桃紅芪術軟肝煎抗肝纖維化探討孫桂芝教授防治肝癌經驗內涵 [D]. 北京: 中國中醫(yī)科學院, 2015.

[24] 王靖思, 孫桂芝, 趙杰. 孫桂芝“益氣活血軟堅解毒法”論治原發(fā)性肝癌經驗介紹 [J]. 中華中醫(yī)藥雜志, 2015, 30(1): 112-114.

[25] 侯智通, 馬曉霞, 儀孝臣. 益氣活血湯劑配合介入治療早期原發(fā)性肝癌影像學療效分析 [J]. 中國實驗方劑學雜志, 2011, 17(17): 303-304.

[26] 杜相宇. 以β-catenin為中心研究芪術抗癌方聯(lián)合五氟尿嘧啶對CT26.WT原位移植瘤小鼠肝轉移的影響 [D]. 南京: 南京中醫(yī)藥大學, 2020.

[27] 鄭雁雪, 王圓圓, 王琳, 等. 中藥配伍減毒增效的現(xiàn)代研究及思考 [J]. 中草藥, 2023, 54(2): 386-395.

[28] 宋佳, 高曉霞, 田俊生, 等. 中藥藥對配伍機制的現(xiàn)代研究 [J]. 中草藥, 2017, 48(21): 4367-4374.

[29] 吳佳菲, 姚映芷, 尹剛, 等. HPLC對黃芪和莪術單煎、單煎后合并及共煎的有效成分含量分析 [J]. 中華中醫(yī)藥雜志, 2018, 33(4): 1567-1570.

[30] Yin G, Cheng X L, Tao W W,. Comparative analysis of multiple representative components in the herb pair-and its single herbs by UPLC-QQQ-MS [J]., 2018, 148: 224-229.

[31] 劉佳寧, 李遇伯, 王玉麗, 等. 基于配伍相互作用的中藥合理用藥研究進展及監(jiān)管思考 [J]. 中草藥, 2023, 54(2): 375-385.

[32] 許成勇, 徐冉, 王毓國, 等. 不同劑量配比黃芪-莪術抑制Lewis肺癌生長轉移及其對TGF-β1、HIF-1α表達的影響 [J]. 北京中醫(yī)藥, 2018, 37(11): 1069-1072.

[33] Sun R L, Gu J F, Chang X W,. Metabonomics study on orthotopic transplantion mice model of colon cancer treated with-in different proportions via UPLC-Q-TOF/MS [J]., 2021, 193: 113708.

[34] 徐世一, 劉秀波, 陸佳欣, 等. 黃芪活性成分抗腫瘤作用機制的研究進展 [J]. 中草藥, 2022, 53(23): 7613-7623.

[35] 劉曉燕, 龍鳳, 趙玉, 等. 蒲公英中有效成分抗腫瘤作用機制的研究進展 [J]. 中草藥, 2023, 54(10): 3391-3400.

[36] 張慧蓉, 錢敏, 李萌. 黃芪多糖通過線粒體自噬抑制肝癌腫瘤細胞 [J]. 西北藥學雜志, 2021, 36(3): 426-429.

[37] 張冬青. 黃芪總黃酮及其活性成分對腫瘤細胞的抑制作用與機理研究 [J]. 北京: 中國人民解放軍醫(yī)學院2010.

[38] 黃嵐珍, 王娟, 盧菲婷, 等. 莪術醇抑制人肝癌細胞HepG2增殖的機制 [J]. 中國中藥雜志, 2013, 38(11): 1812-1815.

[39] 王佳麗, 王秀, 夏泉, 等. 莪術油中3種倍半萜類化合物對肝癌HepG2細胞增殖抑制作用的研究 [J]. 中成藥, 2014, 36(7): 1535-1539.

[40] 劉洋. 毛蕊異黃酮誘導肝癌細胞凋亡機制的研究 [D]. 大慶: 黑龍江八一農墾大學, 2021.

[41] Liu Y, Piao X J, Xu W T,. Calycosin induces mitochondrial-dependent apoptosis and cell cycle arrest, and inhibits cell migration through a ROS-mediated signaling pathway in HepG2 hepatocellular carcinoma cells [J]., 2021, 70: 105052.

[42] 焦文鵬, 焦文靜, 張金艷. 刺芒柄花素通過COX-2/ cyclin D1軸調控肝癌的發(fā)生和發(fā)展 [J]. 中國腫瘤生物治療雜志, 2021, 28(9): 877-884.

[43] Liu Y Y, Wang W, Fang B,. Anti-tumor effect of germacrone on human hepatoma cell lines through inducing G2/M cell cycle arrest and promoting apoptosis [J]., 2013, 698(1/2/3): 95-102.

[44] 沈欽海, 馬臻, 陳國民. 蘆丁對HepG2細胞生長的影響 [J]. 第三軍醫(yī)大學學報, 2006, 28(18): 1885-1887.

[45] 蔣晨春, 向義, 鐘勇. 異鼠李素對人肝癌HepG-2細胞增殖與凋亡影響的實驗研究 [J]. 西南軍醫(yī), 2012, 14(3): 432-435.

[46] 趙參軍, 黃曉峰. 異甘草素抑制人肝癌細胞株HepG-2增殖的機制探討 [J]. 武警后勤學院學報: 醫(yī)學版, 2019, 28(5): 1-6.

[47] Huang W H, Liao W R, Sun R X.polysaccharide induces the apoptosis of human hepatocellular carcinoma cells by decreasing the expression of Notch1 [J]., 2016, 38(2): 551-557.

[48] 呂君, 朱鵬飛, 劉艷民, 等. 黃芪多糖通過Wnt/β- catenin信號通路促進肝癌細胞凋亡研究 [J]. 中草藥, 2018, 49(21): 5155-5160.

[49] 葉興濤, 史國軍, 陸寧, 等. 莪術提取物介導Wnt/β- catenin信號通路對人肝癌Hep-G2細胞的影響 [J]. 解剖學雜志, 2020, 43(6): 472-476.

[50] 安方玉, 史旭鋒, 顏春魯, 等. 黃芪水煎劑對荷H22肝癌小鼠瘤組織凋亡及肝損傷調控的作用機制 [J]. 華西藥學雜志, 2020, 35(4): 392-396.

[51] 安小翠, 朱瑞雪, 藺淑梅, 等. 黃芪甲苷抑制ROS NF-κB信號通路促進肝癌細胞增殖、凋亡的作用機制 [J]. 現(xiàn)代消化及介入診療, 2019, 24(12): 1399-1403.

[52] Stuelten C H, Parent C A, Montell D J. Cell motility in cancer invasion and metastasis: Insights from simple model organisms [J]., 2018, 18(5): 296-312.

[53] 臧文華, 黃顯章, 唐德才, 等. 黃芪-莪術聯(lián)合順鉑誘導肝癌細胞凋亡及其對,,表達的影響 [J]. 中國實驗方劑學雜志, 2016, 22(17): 87-91.

[54] 徐放, 安鐵洙, 樸善花, 等. 黃芪多糖通過Janus激酶/信號轉導與轉錄激活子信號通路對肝癌細胞SMMC-7721侵襲和轉移的影響 [J]. 中國臨床藥理學雜志, 2020, 36(11): 1499-1502.

[55] Brabletz T, Kalluri R, Nieto M A,. EMT in cancer [J]., 2018, 18(2): 128-134.

[56] Dongre A, Weinberg R A. New insights into the mechanisms of epithelial-mesenchymal transition and implications for cancer [J]., 2019, 20(2): 69-84.

[57] Qin C D, Ma D N, Ren Z G,. Astragaloside IV inhibits metastasis in hepatoma cells through the suppression of epithelial-mesenchymal transition via the Akt/GSK-3β/β-catenin pathway [J]., 2017, 37(3): 1725-1735.

[58] Cao W Y, Zhang Y C, Li A M,. Curcumin reverses hepatic epithelial mesenchymal transition induced by trichloroethylene by inhibiting IL-6R/STAT3 [J]., 2021, 31(8): 589-599.

[59] Cao M T, Liu H F, Liu Z G,. Curcumin downregulates the expression of Snail via suppressing Smad2 pathway to inhibit TGF-β1-induced epithelial- mesenchymal transitions in hepatoma cells [J]., 2017, 8(65): 108498-108508.

[60] Li Y L, Ye Y, Chen H Y. Astragaloside IV inhibits cell migration and viability of hepatocellular carcinoma cells via suppressing long noncoding RNA ATB [J]., 2018, 99: 134-141.

[61] Goel H L, Mercurio A M. VEGF targets the tumour cell [J]., 2013, 13(12): 871-882.

[62] Lippman S M, Hawk E T. Cancer prevention: From 1727 to milestones of the past 100 years [J]., 2009, 69(13): 5269-5284.

[63] 臧文華, 唐德才, 尹剛, 等. 黃芪莪術配伍對人肝癌裸鼠原位移植瘤新生血管生成的影響 [J]. 時珍國醫(yī)國藥, 2014, 25(3): 516-518.

[64] Zhang S, Tang D C, Zang W H,. Synergistic inhibitory effect of traditional Chinese medicine astragaloside IV and curcumin on tumor growth and angiogenesis in an orthotopic nude-mouse model of human hepatocellular carcinoma [J]., 2017, 37(2): 465-474.

[65] 駱殊, 尹剛, 唐德才. 黃芪甲苷與姜黃素配伍對人肝癌裸鼠原位移植瘤新生血管生成的影響 [J]. 中華腫瘤防治雜志, 2016, 23(S1): 12-13.

[66] Xiong L J, Edwards C K 3rd, Zhou L J. The biological function and clinical utilization of CD147 in human diseases: A review of the current scientific literature [J]., 2014, 15(10): 17411-17441.

[67] Bougatef F, Quemener C, Kellouche S,. EMMPRIN promotes angiogenesis through hypoxia-inducible factor- 2α-mediated regulation of soluble VEGF isoforms and their receptor VEGFR-2 [J]., 2009, 114(27): 5547-5556.

[68] 臧文華, 胡久略, 唐德才, 等. 黃芪、莪術聯(lián)合順鉑對人肝癌裸鼠CD147、iNOS表達的影響 [J]. 時珍國醫(yī)國藥, 2020, 31(4): 785-788.

[69] Gajewski T F, Schreiber H, Fu Y X. Innate and adaptive immune cells in the tumor microenvironment [J]., 2013, 14(10): 1014-1022.

[70] Binnewies M, Roberts E W, Kersten K,. Understanding the tumor immune microenvironment (TIME) for effective therapy [J]., 2018, 24(5): 541-550.

[71] 王金全, 陳啟助, 黃樹林, 等. 黃芪總提取物促進PBMC對肝癌細胞的體外殺傷作用 [J]. 廣東藥學院學報, 2016, 32(1): 66-70.

[72] 王丹, 張玉民, 劉金劍, 等. 巨噬細胞與腫瘤治療的研究進展 [J]. 河北醫(yī)科大學學報, 2023, 44(5): 606-611.

[73] 林琳, 沈洪, 王立新. 黃芪甲苷、β-欖香烯增強小鼠巨噬細胞免疫功能的體外實驗研究 [J]. 臨床檢驗雜志, 2011, 29(2): 129-131.

[74] Connolly M K, Ayo D, Malhotra A,. Dendritic cell depletion exacerbates acetaminophen hepatotoxicity [J]., 2011, 54(3): 959-968.

[75] Seruga B, Zhang H B, Bernstein L J,. Cytokines and their relationship to the symptoms and outcome of cancer [J]., 2008, 8(11): 887-899.

[76] Lai X Y, Xia W B, Wei J,. Therapeutic effect ofpolysaccharides on hepatocellular carcinoma H22-bearing mice [J]., 2017, 15(1): 1559325816685182.

[77] 安方玉, 劉雪松, 顏春魯, 等. 黃芪總皂苷對H22荷瘤小鼠腫瘤抑制作用及機制 [J]. 中國公共衛(wèi)生, 2017, 33(4): 596-598.

[78] 林琳, 沈洪, 王立新, 等. 黃芪甲苷、β-欖香烯對小鼠樹突狀細胞免疫功能的影響 [J]. 東南大學學報: 醫(yī)學版, 2011, 30(2): 294-297.

[79] 喻貢金. 艾迪注射液對人肝癌多藥耐藥細胞的逆轉作用研究 [D]. 貴陽: 貴州醫(yī)科大學, 2017.

[80] 楊潔真, 王晶, 宋永紅, 等. 脂質體莪術醇逆轉卵巢癌順鉑耐藥作用的機制 [J]. 安徽醫(yī)科大學學報, 2022, 57(7): 1106-1111.

[81] 謝海媚, 李華超, 陳前軍. 探討黃芪甲苷對乳腺癌干細胞化療增敏作用的體外研究 [J]. 中醫(yī)腫瘤學雜志, 2022, 4(5): 43-49.

[82] 吳泓. pSUPER載體介導的siRNA抑制肝癌多藥耐藥基因的表達 [D]. 成都: 四川大學, 2007.

[83] 王新平. 單基因轉入人肝癌耐藥細胞株的建立及RNA干擾靶向MRP1逆轉多藥耐藥的實驗研究 [D]. 成都: 四川大學. 2006.

[84] 潘東山. 黃芪多糖對肝癌化療的增效減毒作用及其機制的研究 [D]. 牡丹江: 牡丹江醫(yī)學院, 2020.

[85] 張秀云, 陳建業(yè), 楊映雪, 等. 黃芪總黃酮對肝癌HepG-2細胞凋亡的誘導作用 [J]. 中華中醫(yī)藥學刊, 2013, 31(6): 1320-1322.

[86] 劉禮, 袁昌勁, 郭敬杰, 等. 黃芪多糖抑制HepG2細胞增殖及可能機制研究 [J]. 實用預防醫(yī)學, 2018, 25(4): 385-387.

[87] 林霄月, 宋高臣. 注射液黃芪多糖對HepG2荷小鼠化療過程中Ki-67、HIF-1α、VEGF表達的影響研究 [J]. 北方藥學, 2020, 17(8): 71-72.

[88] 武超. 黃芪皂苷II通過調控HMGB1-PI3K/Akt/mTOR-溶酶體功能增加順鉑誘導的人肝癌細胞凋亡 [D]. 合肥: 安徽醫(yī)科大學, 2016.

[89] 陳彥清. 黃芪皂苷II聯(lián)合5-氟尿嘧啶處理抑制肝癌細胞增殖的實驗研究 [J]. 海南醫(yī)學院學報, 2016, 22(17): 2035-2038.

[90] 武超, 許杜娟, 楊翠, 等. 黃芪皂苷II增加5-氟尿嘧啶對人肝癌細胞株HepG2增殖抑制作用 [J]. 安徽醫(yī)科大學學報, 2016, 51(1): 78-82.

[91] 張維彬, 譚敏, 肖剛, 等. 莪術油誘導小鼠HepA肝癌細胞凋亡及其對Bcl-2蛋白表達的影響 [J]. 現(xiàn)代中西醫(yī)結合雜志, 2009, 18(4): 370-371.

[92] Hu P, Ke C Z, Guo X R,. Both glypican-3/Wnt/ β-catenin signaling pathway and autophagy contributed to the inhibitory effect of curcumin on hepatocellular carcinoma [J]., 2019, 51(1): 120-126.

[93] Abouzied M M M, Eltahir H M, Abdel Aziz M A,. Curcumin ameliorate DENA-induced HCC via modulating TGF-β, Akt, and Caspase-3 expression in experimental rat model [J]., 2015, 36(3): 1763-1771.

[94] Wang W Z, Li L, Liu M Y,. Curcumin induces FasL-related apoptosis through p38 activation in human hepatocellular carcinoma Huh7 cells [J]., 2013, 92(6/7): 352-358.

[95] Bai C H, Zhao J Q, Su J L,. Curcumin induces mitochondrial apoptosis in human hepatoma cells through BCLAF1-mediated modulation of PI3K/Akt/GSK-3β signaling [J]., 2022, 306: 120804.

[96] Li J T, Wei H L, Liu Y G,. Curcumin inhibits hepatocellular carcinoma via regulating miR-21/TIMP3 axis [J]., 2020, 2020: 1-13.

[97] Pan Z R, Zhuang J M, Ji C H,. Curcumin inhibits hepatocellular carcinoma growth by targeting VEGF expression [J]., 2018: 4821-4826.

[98] Ren B Q, Luo S D, Tian X F,. Curcumin inhibits liver cancer by inhibiting DAMP molecule HSP70 and TLR4 signaling [J]., 2018: 895-901.

[99] Zhang K, Rui X J, Yan X. Curcumin inhibits the proliferation and invasiveness of MHCC97-H cells via p38 signaling pathway [J]., 2014: 463-468.

[100]Shao S, Duan W X, Xu Q H,. Curcumin suppresses hepatic stellate cell-induced hepatocarcinoma angiogenesis and invasion through downregulating CTGF [J]., 2019, 2019: 1-12.

[101]Chen Y, Li Q A, Ren S S,. Investigation and experimental validation of curcumin-related mechanisms against hepatocellular carcinoma based on network pharmacology [J]., 2022, 23(8): 682-698.

[102]Shao J, Shi C J, Li Y,. LincROR mediates the suppressive effects of curcumin on hepatocellular carcinoma through inactivating Wnt/β-catenin signaling [J]., 2020, 11: 847.

[103]Tang D C, Zhang S, Shi X X,. Combination of astragali polysaccharide and curcumin improves the morphological structure of tumor vessels and induces tumor vascular normalization to inhibit the growth of hepatocellular carcinoma [J]., 2019, 18: 153473541882440.

Research progress on anti-hepatocellular carcinoma mechanisms ofRhizoma herb pair and its active ingredients

BAO Ning1, CHEN Zi-chao2, ZHAO Chun-qin3, LIU Ming-yu3, ZHANG Zhen3, LI Xiao3, CAI Mei-chao1

1. College of Pharmacy, Shandong University of Traditional Chinese Medicine, Jinan 250355, China 2. Experimental Center, Shandong University of Traditional Chinese Medicine, Jinan 250355, China 3. Innovation Institute of Chinese Medicine and Pharmacy, Shandong University of Traditional Chinese Medicine, Jinan 250355, China

Primary hepatocellular carcinoma is a highly prevalent malignant tumor in China. According to traditional Chinese medicine, the main cause of hepatocellular carcinoma is “deficiency and blood stasis”, and its treatment is based on “benefittingand invigorating blood”. Huangqi-Ezhu (-) is a representative herb pair of herbal medicines that benefitand invigorate blood, and studies have shown that this pair and its active ingredients have clear anti-hepatocellular carcinoma effects. In this paper, we have reviewed the literature on the anti-hepatocellular carcinoma mechanism of the-pair and its active ingredients, and reviewed its anti-hepatocellular carcinoma mechanism of action from the aspects of inhibiting proliferation, inducing apoptosis, inhibiting cell metastasis and invasion, inhibiting neoangiogenesis, improving the immune microenvironment, and reversing multidrug resistance, etc., to provide the basis for the clinical use of-pair and the research and development of new Chinese medicine against liver cancer.

;; herb pair; hepatocellular carcinoma; immune microenvironment; astragaloside Ⅳ; calycosin; curcumol; germacrone; curcumin

R285

A

0253 - 2670(2023)15 - 5101 - 11

10.7501/j.issn.0253-2670.2023.15.033

2023-03-04

國家自然科學基金資助項目（82204656）；山東省高等學校青創(chuàng)人才引育計劃（2021505031）；山東中醫(yī)藥大學青年創(chuàng)新團隊支持計劃（22202105）

鮑 寧，碩士研究生，研究方向為中藥效物質基礎與新藥創(chuàng)新。E-mail: bn990918@163.com

通信作者：李 肖，講師，從事中藥藥效物質基礎與作用機制研究。E-mail:lixiaoedu@126.com

蔡梅超，副教授，從事中藥藥效物質基礎與新藥創(chuàng)新研究。E-mail: 304521130@qq.com

[責任編輯 趙慧亮]