李 敏,張麥利,趙寶娟,杜 丹

陜西省渭南市中心血站檢驗科,陜西渭南 714000

Rh血型系統(tǒng)是國際輸血協(xié)會命名的第4號血型系統(tǒng),也是最復雜的血型系統(tǒng),具有高度免疫原性和復雜多態(tài)性,在輸血醫(yī)學中的臨床重要性僅次于ABO血型系統(tǒng),Rh血型系統(tǒng)目前已發(fā)現(xiàn)54種抗原,具有臨床重要性的抗體大多數(shù)針對的是5種主要抗原(D、C、c、E、e),其抗原的強弱依次為D>E>C>e>c[1]。RhD陰性在我國漢族人群中的分布頻率為0.2%～0.5%[2]。本研究通過對渭南地區(qū)RhD陰性獻血者抗原表型分布及抗體篩查進行分析,了解RhD陰性獻血者抗原及不規(guī)則抗體的分布特點,對于實施精準輸血,保障臨床用血安全具有重要意義。本研究對2020年3月至2022年12月渭南地區(qū)RhD陰性獻血者抗原分布及不規(guī)則抗體進行調(diào)查分析,現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1標本來源 選取2020年3月至2022年12月本血站檢驗科從155 353例獻血者中初篩RhD陰性獻血者821例作為研究對象。

1.2儀器與試劑 KA-2200離心機(日本Kubota公司)、HW37免疫孵育器(中山市生科試劑儀器有限公司)、微柱凝膠卡(江蘇力博醫(yī)藥生物技術股份有限公司)、IgM+IgG抗-D[單克隆抗體Milliporw(UK)Ltd]、IgM+IgG抗-D(單克隆抗體Dominion Biologicals Limited)、IgG抗-D(單克隆抗體,上海血液生物醫(yī)藥有限責任公司)、抗-C(單克隆抗體,上海血液生物醫(yī)藥有限責任公司)、抗-c(單克隆抗體,上海血液生物醫(yī)藥有限責任公司)、抗-E(單克隆抗體,上海血液生物醫(yī)藥有限責任公司)、抗-e(單克隆抗體,上海血液生物醫(yī)藥有限責任公司);抗體篩查細胞(Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型,上海血液生物醫(yī)藥有限責任公司);室內(nèi)質(zhì)控(上海血液生物醫(yī)藥有限責任公司)。試劑批號均在有效期內(nèi)。

1.3方法 檢驗科采用NEO全自動血型分析儀對所有無償獻血者的血液標本進行RhD抗原初篩,初篩為RhD陰性的標本送血型室,分別采用3種不同廠家的試劑進行鹽水試管法和抗人球蛋白微柱凝膠卡法陰性確認試驗,如果均不凝集判為RhD陰性,若其中一種方法或試劑出現(xiàn)凝集,則加做直接抗人球蛋白試驗排除獻血者自身干擾,若陰性,則判為D抗原變異型,同時進行鹽水試管法的C、c、E、e抗原表型檢測及抗人球蛋白微柱凝膠卡法的不規(guī)則抗體篩查。

2 結 果

2.1RhD陰性獻血者抗原表型分布情況比較 821例RhD初篩陰性獻血者中ccee占比最高,為442例(53.84%),其次由高到低依次為Ccee 270例(32.89%)、ccEe 42例(5.12%)、CCee 32例(3.90%)、CcEe 27例(3.29%)、CCEe 6例(0.73%)、ccEE 2例(0.24%),未發(fā)現(xiàn)CCEE、CcEE表型獻血者。

2.2D抗原變異抗原表型分布情況比較 821例初篩RhD陰性獻血者經(jīng)抗人球蛋白確認試驗,確認為D抗原變異49例,占RhD初篩陰性人數(shù)的5.97%,以ccEe占比最高。見表1。

表1 49例D抗原變異抗原表型分布情況比較

2.3RhD確認陰性與D抗原變異型E抗原分布情況比較 檢出的49例D抗原變異型獻血者中含E抗原36例,抗人球蛋白確認試驗陰性的772例獻血者中含E抗原72例,差異有統(tǒng)計學意義(χ2=168.063,P<0.01)。

2.4RhD陰性獻血者意外抗體分布情況比較 821例RhD陰性獻血者中,檢出意外抗體14例,占RhD初篩陰性人數(shù)的1.71%,其中抗-D抗體12例,全部為女性;抗-E抗體1例,為男性;IgM抗-M抗體1例,為男性。

3 討 論

本研究共檢測821例RhD初篩陰性的獻血者,其中ccee表型占比最高,為53.84%,Ccee其次,占32.89%,與張薇薇等[3]報道的西安地區(qū)1 944例初篩陰性獻血者中的ccee表型(56.38%)和Ccee表型(28.50%),閆芳等[4]報道的北京地區(qū)3 795例初篩陰性獻血者中的ccee表型(56.36%)和Ccee表型(27.54%),楊松等[5]報道的南充市425例初篩陰性獻血者中的ccee表型(50.00%)和Ccee表型(37.70%),王連友等[6]報道的徐州地區(qū)847例初篩陰性獻血者中的ccee表型(58.80%)和Ccee表型(28.90%)比例相近,表明在我國RhD陰性獻血者中ccee和Ccee表型分布高度一致。分析認為,在臨床救治中,對于需長期輸血治療的RhD陰性患者,選擇相同表型的血液尤為重要,特別是已產(chǎn)生同種抗體的患者,輸血時不應僅僅滿足交叉配血符合,還應盡量輸入相同表型的血液,以減少輸血反應發(fā)生。

本研究共檢出D抗原變異型49例,占RhD初篩陰性人數(shù)的5.97%,與王照軍等[7]報道的徐州地區(qū)D抗原變異型占5.65%和周娜等[8]報道的山東省濟南市D抗原變異型占6.27%相近,與劉麗麗等[9]報道的廊坊地區(qū)D抗原變異型占4.12%和熊莉等[10]報道的南昌地區(qū)D抗原變異型占2.78%有較大差異。分析認為,不同來源的抗-D試劑與其細胞的反應強度可能存在差異。在臨床輸血中,RhD變異型對于獻血者和受血者的處理方式是不同的,若陰性確認試驗證實獻血者為D抗原變異型時,則表明其紅細胞表面存在較弱的D抗原表達,有可能刺激D陰性的受血者產(chǎn)生抗體,應被看作是D抗原陽性。對于受血者來說,無論確認試驗是否能證實其有弱D抗原表達,為了避免受血者產(chǎn)生針對缺失D抗原部分的抗-D抗體,該類受血者都應被作為D抗原陰性受血者。本研究認為,可實施對D抗原變異型獻血者主動臨床咨詢,對檢測結果進行解釋,告知其作為獻血者和受血者的用血策略,旨在消除獻血者對臨床檢測結果與血站檢測結果不符的疑慮。

本研究發(fā)現(xiàn),49例D抗原變異型獻血者中含E抗原36例,與抗人球蛋白確認試驗陰性的772例獻血者中含E抗原72例有明顯差異,表明含有E抗原的獻血者是D抗原變異型的概率更高。分析認為,Rh血型系統(tǒng)其他抗原,如C、E抗原對于D抗原的表達均有一定影響,導致D抗原變異型產(chǎn)生[4],提示實驗室在進行RhD陰性確認時,對含有E抗原的標本應加以關注。

多數(shù)D陽性紅細胞表達正常RhD蛋白,基因突變導致氨基酸改變,從而改變D抗原的表達,產(chǎn)生弱D、部分D、Del表型,Del紅細胞上D抗原非常弱,用常規(guī)血清學方法檢測不到,但紅細胞可吸收并放散抗-D抗體,仍然可能免疫RhD陰性受血者。目前本實驗室未將吸收放散試驗納入RhD陰性確認試驗,勢必造成Del漏檢,輸血時會存在一定程度的風險,這是本實驗室正在努力的方向。

本研究通過抗人球蛋白微柱凝膠卡法對RhD陰性獻血者進行抗體篩查,共檢出14例意外抗體,其中抗-D抗體12例,全部為女性,因Rh系統(tǒng)的D抗原具有極強的免疫原性,RhD陰性個體因輸血或妊娠接觸D抗原,極易產(chǎn)生抗-D抗體[11],是引起胎兒或新生兒溶血病的主要抗原,因此,RhD陰性女性在孕前及孕期需定期進行不規(guī)則抗體監(jiān)測[12]。對存在意外抗體的血液,其供應時必須選擇適宜的成分血品種,以規(guī)避這些意外抗體輸入患者體內(nèi),血漿可報廢處理,紅細胞可制成洗滌紅細胞或冰凍解凍去甘油紅細胞供應于臨床。

綜上所述,RhD陰性血液是稀有資源,本血站實施對RhD陰性獻血者的表型檢測和不規(guī)則抗體篩查,建立RhD陰性獻血者血型信息數(shù)據(jù)庫,旨在搭建輸血安全信息共享平臺,對于實施精準輸血,增強輸血安全性與有效性,幫助臨床在緊急情況下能快速找到合適的血液具有重要意義。