符佩華 張靜 林束珠 張巧珍 張妍涵 張皓

急性呼吸道感染(acute respiratory infection,ARI)在世界范圍內(nèi)具有很高的發(fā)病率和死亡率,特別是在5歲以下兒童[1]。病毒感染是ARI的主要病原體,其感染譜受不同人群、季節(jié)、區(qū)域和年齡而變化[2]。報道顯示[3-9],2019新型冠狀病毒肺炎(COVID-19)大流行期間,呼吸道病毒感染發(fā)生率創(chuàng)歷史新低,可能的因素包括勤洗手、戴口罩、學(xué)校關(guān)閉、旅行限制、禁止大規(guī)模集會以及其它公共衛(wèi)生和保持社交距離等措施的實施,以控制COVID-19。為了解上?；鶎釉贑OVID-19流行期間ARI呼吸道常見7項病原譜分布情況,本研究回顧性分析2019年(COVID-19流行前)和2020年(COVID-19流行期間)上海健康醫(yī)學(xué)院附屬周浦醫(yī)院兒科和上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬第九人民醫(yī)院奉城醫(yī)院兒科門診和住院的ARI患兒共6 676例,采用雙擴(kuò)增法檢測呼吸道7項病原體RNA:呼吸道合胞病毒(respiratory syncytial virus,RSV)、甲型流感病毒(influenza A virus,FluA)、乙型流感病毒(influenza B virus,FluB)、副流感病毒(parainfluenza virus,PIV)、腺病毒(adenovirus,ADV)、肺炎支原體(mycoplasma pneumoniae,MP)、肺炎衣原體(chlamydia pneumonia,CP),進(jìn)行統(tǒng)計分析,為本地區(qū)兒童ARI臨床診治及防控策略提供臨床依據(jù)。

資料與方法

一、臨床資料

選取2019年1月1日-2020年12月31日上海健康醫(yī)學(xué)院附屬周浦醫(yī)院和上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬第九人民醫(yī)院奉城醫(yī)院兒科門診和住院的確診為ARI患兒共6 676例,其中男性3 866例,女性 2 810 例,年齡28天～14歲,平均年齡(2.85±6.91)歲。2019年和2020年門診和住院ARI患兒性別、年齡和一般情況具有可比性,差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。本研究對象監(jiān)護(hù)人均知情同意,并簽署知情同意書,通過上海市健康醫(yī)學(xué)院附屬周浦醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會批準(zhǔn)(zpyyll-2018-02)。

二、實驗室檢測

采用武漢中幟生物科技股份有限公司7項呼吸道病原體核酸檢測試劑盒(雙擴(kuò)增法)。使用專用的咽拭子取樣,將咽拭子插入采集管中,旋緊管蓋,將采集管在旋渦混合器上振蕩,采集管中的溶液轉(zhuǎn)入1.5 mL離心管中,111×g離心3 min,上清液轉(zhuǎn)移至干凈離心管;11 100×g離心2 min,棄上清液,在離心管底部沉淀中加入0.2 mL生理鹽水或PBS緩沖液,輕輕振蕩;11 100×g離心2 min,棄去大部分上清液后收集管底的細(xì)胞沉淀,收集的細(xì)胞沉淀直接用于檢驗。

三、統(tǒng)計學(xué)方法

采用SPSS 21.0進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)分析,不同年份、季節(jié)呼吸道病原體檢出率的差異分析采用χ2檢驗和Fisher精確檢驗,不同年齡間呼吸道病原體檢出率差異分析采用Cochran-Armitage趨勢檢驗,P<0.05表示差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

結(jié) 果

一、2019年和2020年ARI患兒呼吸道病原體檢出情況

表1 2019年和2020年ARI患兒不同呼吸道病原體檢出情況[n(%)]

2019年、2020年ARI患兒共6 676例,其中2019年3 705例,2020年2 971例,2019年ARI患兒呼吸道病原體檢出率顯著高于2020年(30.55%vs21.91%,χ2=62.901,P<0.001);2019年檢出前三位的病原體依次為:MP(12.98%)、RSV(7.58%)、PIV(4.56%),2020年檢出前三位的病原體依次為:RSV(9.79%)、MP(4.61%)、PIV(3.97%),2019年和2020年間MP、RSV陽性檢出率差異有統(tǒng)計學(xué)意義(均P<0.01),PIV檢出率無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05);2019年合并2種病原體感染檢出率2.83%,2020年檢出率0.67%,兩組比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.001);2019年合并3種及3種以上病原體感染共檢測出5例,2020年合并3種及3種以上病原體感染未檢出(見表1,2)。

二、2019年和2020年不同季節(jié)ARI患兒呼吸道病原體檢出情況

1 2019年不同季節(jié)ARI患兒呼吸道病原體檢出情況

春、夏、秋、冬季中,FluA、FluB、PIV、RSV、ADV、MP檢出率差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05);RSV在冬季檢出率最高(15.99%),隨著氣候變暖逐漸降低,到夏季檢出率最低(2.50%),秋季又逐漸上升(6.29%);ADV、MP、CP均在夏季檢出率最高(4.20%、21.36%、0.23%),隨著天氣變冷逐漸降低,冬季達(dá)到最低(1.61%、5.90%、0.00%),到春天又逐步回升(3.02%、9.66%、0.12%);FluA、FluB在冬春季節(jié)檢出率最高(3.54%、1.93%vs1.07%、1.09%),夏季逐漸下降,到秋季達(dá)到最低(0.75%、0.19%);PIV檢出率隨著春、夏、秋、冬季節(jié)變化逐漸減少;總病原體檢出率差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)(見表3,圖1)。

2 2020年不同季節(jié)ARI患兒呼吸道病原體檢出情況

春、夏、秋、冬季中,FluA、FluB、PIV、RSV、ADV、MP、CP檢出率差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05);FluA在夏秋季、FluB在夏季、CP在春秋季無病原體檢出;FluB、RSV、ADV在冬季檢出率最高(1.64%、17.60%、2.93%),隨著氣候變暖逐漸降低,到夏季檢出率最低(0.00%、0.25%、0.74%),秋季又逐漸上升(0.73%、7.25%、0.92%);除PIV在秋季檢出率最高外(8.08%),其余病原體FluA、FluB、RSV、ADV、MP、CP均在冬季達(dá)到感染高峰;總病原體檢出率差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.001)(見表4,圖2)。

與2019年相比,2020年ARI患兒病原體檢出率在春、夏、秋季均下降,兩者比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05),而在冬季檢出率上升,兩者比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.001)(見表5)。

表3 2019年不同季節(jié)ARI患兒呼吸道病原體檢出情況[n(%)]

圖1 2019年不同季節(jié)ARI患兒呼吸道病原體檢出情況

圖2 2020年不同季節(jié)ARI患兒呼吸道病原體檢出情況

三、2019年和2020年不同年齡組ARI患兒呼吸道病原體檢出情況

1 2019年不同年齡組患兒呼吸道病原體檢出情況

2019年,在不同年齡組間FluA、PIV、RSV、MP檢出率差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05),其中FluA隨年齡增大病原體檢出率逐漸降低(P<0.05),MP隨年齡增大檢出率逐漸增加(P<0.001);不同年齡組間總病原體檢出率差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.001)(見表6)。

2 2020年不同年齡組患兒呼吸道病原體檢出情況

2020年,在不同年齡組,FluA、PIV、RSV、MP檢出率差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。RSV隨年齡增大檢出率逐漸降低(P<0.05);FluA隨年齡增大檢出率逐漸增加(P<0.05)?？偛≡w檢出率差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)(見表7)。

與2019年相比,2020年各年齡組檢出率均減少,其中2～3歲組、7～14歲組患兒病原體檢出率差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.001)(見表8)。

表4 2020年不同季節(jié)ARI患兒呼吸道病原體檢出情況[n(%)]

表5 2019年和2020年不同季節(jié)ARI患兒呼吸道病原體檢出情況[n(%)]

表6 2019年不同年齡組ARI患兒呼吸道病原體檢出情況[n(%)]

表7 2020年不同年齡組ARI患兒呼吸道病原體檢出情況[n(%)]

表8 2019年和2020年不同年齡組ARI患兒呼吸道病原體檢出情況[n(%)]

討 論

2019年12月底,我國湖北省武漢市先后發(fā)現(xiàn)多例不明原因肺炎,隨后在其呼吸道標(biāo)本中檢測到一種新型冠狀病毒,2020年1月12日世界衛(wèi)生組織正式命名為2019新型冠狀病毒(COVID-19)?；贑OVID-19高傳染性和致病性的特點,全國采取了針對COVID-19傳播的嚴(yán)格防控措施:提倡外出做好個人防護(hù),減少外出及人員聚集等。通過對上海健康醫(yī)學(xué)院附屬周浦醫(yī)院和上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬第九人民醫(yī)院奉城醫(yī)院兩家醫(yī)院門診和住院的ARI患兒呼吸道7項病原體RNA檢測,我們發(fā)現(xiàn)疫情前、疫情期間其呼吸道病原體的病原譜發(fā)生了變化。

疫情期間總的呼吸道病原體檢出率下降,合并2種病原體感染檢出率下降,合并3種及3種以上的病原體感染未檢測出,大部分病原體檢出率明顯降低,與其它研究一致[10-11],考慮與疫情期間加強(qiáng)防控措施,外出勤洗手、戴口罩、減少人員流動有關(guān)。與疫情前以MP檢出率最高不同,疫情期間,RSV感染檢出率占首要位置,這與趙林清等的研究結(jié)果正好相反[12],分析原因可能跟不同地區(qū),不同氣候環(huán)境、溫度、降水量和不同生活習(xí)性有關(guān);疫情前、疫情期間PIV檢出率持平,考慮與疫情期間,由于以PIV感染高發(fā)期的春夏季節(jié)封控,病原體傳播途徑切斷有關(guān)。具體有待大樣本量隨機(jī)對照研究試驗進(jìn)一步分析其可能原因。

相比于疫情前,疫情期間春季、夏季、秋季病原體檢出率下降,但從秋季開始又逐漸回升,到2020年疫情期間冬季呼吸道病原體感染率反超過疫情前,這與劉琳等的報告一致[13],一方面考慮秋冬季本應(yīng)是呼吸道病原體感染高發(fā)季節(jié);其次,隨著夏季過后到秋冬季疫情好轉(zhuǎn),COVID-19防控措施的放松,很多學(xué)校從以線上居家上課為主,轉(zhuǎn)為以線下學(xué)校上課為主的授課模式,人與人之間的距離減少,加劇呼吸道病原菌之間的傳播;再次,有研究發(fā)現(xiàn)[14],疫情期間呼吸道感染發(fā)病率降低后機(jī)體對各種病原體接觸減少,導(dǎo)致人體免疫功能降低,當(dāng)正常社交開放接觸呼吸道病原菌后感染反彈性激增,導(dǎo)致感染高峰期延后的現(xiàn)象。疫情期間FluA、FluB、CP分別在夏秋季、夏季和春秋季檢出率為零,說明嚴(yán)格防控措施對控制流感和肺炎衣原體效果顯著。

RSV感染主要發(fā)生在1歲以下嬰兒[15],其檢出率與年齡呈負(fù)相關(guān),年齡越小感染率越高[16-18]。本研究發(fā)現(xiàn),2019年、2020年在28天～1歲年齡組患兒中,RSV檢出率均最高,分別為(15.65%、15.65%),隨著年齡增長檢出率有逐漸降低的趨勢。說明嬰幼兒期免疫力低,隨著年齡增長,自身免疫功能完善,RSV感染率亦逐漸下降。

新冠肺炎疫情期間我們發(fā)現(xiàn),2～3歲組、7～14歲組患兒病原體檢出率下降,考慮與疫情期間減少外出,出門戴口罩、勤洗手、線上居家上課等有效阻斷病原體傳播,減少與病原體接觸有關(guān);28天～1歲組患兒疫情前后檢出率無明顯變化,考慮低年齡組患兒跟外界接觸少,疫情防控措施相對于此年齡組患兒影響較小有關(guān);而4～6歲組在疫情前、疫情期間檢出率無明顯變化,其可能原因需進(jìn)一步加大樣本量來研究。

本研究不足之處:本研究選擇2019年、2020年兩個年份進(jìn)行研究,未能縱向觀察疫情前、中、后期兒童呼吸道病原體感染的流行趨勢,長期連續(xù)的監(jiān)測是研究病原體流行特征和分布規(guī)律的基礎(chǔ);疫情期間由于疫情嚴(yán)重或者因為害怕交叉感染很多患兒未去醫(yī)院就診,導(dǎo)致疫情期間數(shù)據(jù)存在一定偏倚,數(shù)據(jù)代表性不足;檢測病原體比較單一,很多其它引起呼吸道感染的病原體未檢測;不同疾病以及疾病嚴(yán)重程度也沒有細(xì)分比較。

總之,COVID-19疫情期間,由于采取一系列防控措施,ARI患兒呼吸道病原體感染下降,并且存在明顯的年齡差異和季節(jié)性。提示在呼吸道感染高發(fā)季節(jié)重視對呼吸道的隔離和防護(hù),減少外出活動,保持安全距離,有效降低兒童呼吸道感染的發(fā)生率。