肖漢祥 袁龍宇 高艷 張振飛 李振宇 李燕芳

摘要

采用飼料浸藥法測定了草地貪夜蛾對氯蟲苯甲酰胺、多殺霉素、甲氨基阿維菌素苯甲酸鹽、蟲螨腈的相對敏感基線，并測定了廣東省廣州、東莞、開平、平遠(yuǎn)和陽江等5地田間草地貪夜蛾種群對氯蟲苯甲酰胺、多殺霉素、甲氨基阿維菌素苯甲酸鹽和蟲螨腈的抗藥性。結(jié)果表明：上述4種藥劑對敏感草地貪夜蛾種群2齡幼蟲的LC50在0.037～0.300?6?mg/L之間。除平遠(yuǎn)種群對氯蟲苯甲酰胺保持敏感外，其余4個種群對氯蟲苯甲酰胺抗性在3.51～9.99倍之間，屬低水平抗性;陽江和東莞種群對多殺霉素的抗性分別為17.62倍和17.71倍，屬中等水平抗性;其他3個種群對多殺霉素抗性在4.69～7.60倍之間，屬低水平抗性;除平遠(yuǎn)草地貪夜蛾種群對甲氨基阿維菌素苯甲酸鹽抗性倍數(shù)為5.34倍，屬低水平抗性外，其他4個草地貪夜蛾種群對甲氨基阿維菌素苯甲酸鹽抗性倍數(shù)在0.39～1.08倍之間，屬于敏感水平;開平草地貪夜蛾種群對蟲螨腈的抗性倍數(shù)為10.77倍，屬中等水平抗性;廣州、東莞和陽江草地貪夜蛾種群對蟲螨腈的抗性倍數(shù)在4.21～8.84倍之間，屬低水平抗性;平遠(yuǎn)草地貪夜蛾種群對蟲螨腈的抗性倍數(shù)為2.37倍，屬敏感水平。

關(guān)鍵詞

廣東;?草地貪夜蛾;?殺蟲劑;?抗藥性

中圖分類號：

S?482.3

文獻(xiàn)標(biāo)識碼：?B

DOI：?10.16688/j.zwbh.2022069

Monitoring?of?Spodoptera?frugiperda?（J.?E.?Smith）?resistance?to?four?types?of?insecticides?in?Guangdong

XIAO?Hanxiang1，?YUAN?Longyu1，?GAO?Yan1，2，?ZHANG?Zhenfei1，?LI?Zhenyu1，?LI?Yanfang1*

（1.?Plant?Protection?Research?Institute，?Guangdong?Academy?of?Agricultural?Science，?Guangdong?Provincial?Key

Laboratory?of?High?Technology?for?Plant?Protection，?Guangzhou?510640，?China;?2.?South?China?Agricultural

University，?Guangzhou?510640，?China）

Abstract

The?relative?sensitivity?baseline?of?Spodoptera?frugiperda?（J.?E.?Smith）?to?chlorantraniliprole，?spinosad，?emamectin?benzoate?and?chlorfenapyr?was?determined?by?artificial?diet?dipping?bioassay?method，?and?the?resistance?of?S.frugiperda?populations?to?four?kinds?of?pesticides?in?Guangzhou，?Dongguan，?Kaiping，?Pingyuan?and?Yangjiang?in?Guangdong?province?was?determined.?The?results?showed?that?the?LC50?values?of?the?above?four?insecticides?on?the?2nd?instar?larvae?of?the?sensitive?S.frugiperda?population?were?between?0.037?mg/L?and?0.300?6?mg/L.?The?results?of?resistance?monitoring?showed?that?the?resistance?multiple?of?S.frugiperda?population?to?chlorantraniliprole?in?Pingyuan?was?1.54?times，?which?belonged?to?the?sensitive?level，?while?that?in?the?other?four?places?to?chlorantraniliprole?was?3.51-9.99?times?than?the?sensitivity?baseline，?which?belonged?to?the?low?level?of?resistance.?The?resistance?multiples?of?S.frugiperda?populations?to?spinosad?in?Yangjiang?and?Dongguan?were?17.62?and?17.71?times，?respectively，?belonging?to?medium?level?resistance，?while?that?in?the?other?three?places?are?between?4.69-7.60，?which?belonged?to?lowlevel?resistance.?Except?that?the?population?of?S.frugiperda?in?Pingyuan?was?5.34?times?resistant?to?emamectin?benzoate，?which?was?a?lowlevel?resistance，?that?in?other?four?places?was?0.39-1.08?times，?which?was?a?sensitive?level.?The?resistance?multiple?of?S.frugiperda?population?in?Kaiping?to?chlorfenapyr?is?10.77?times，?which?belonged?to?medium?level?resistance，?while?that?in?Guangzhou，?Dongguan?and?Yangjiang?was?between?4.21-8.84?times，?which?belonged?to?lowlevel?resistance，?and?that?in?Pingyuan?was?2.37?times，?which?belonged?to?the?sensitive?level.

Key?words

Guangdong;?Spodoptera?frugiperda;?insecticide;?resistance

草地貪夜蛾Spodoptera?frugiperda?（J.?E.?Smith），屬鱗翅目Lepidoptera夜蛾科Noctuidae灰翅夜蛾屬Spodoptera，原分布于美洲［1］，可為害玉米、水稻、花生、高粱和大豆等作物［2］。在玉米上，草地貪夜蛾幼蟲主要取食鮮嫩幼葉，影響玉米生長，降低玉米產(chǎn)量［3］。?2018年12月26日在云南省普洱市江城縣寶藏鎮(zhèn)進(jìn)行小春作物病蟲害調(diào)查期間發(fā)現(xiàn)草地貪夜蛾入侵中國［4］，2019年1月-3月該蟲在云南多地蔓延為害，4月相繼侵入廣西、廣東、貴州、湖南、海南，5月快速擴(kuò)散至福建、湖北、浙江、四川、江西、重慶、河南等地［56］。草地貪夜蛾可以在我國北回歸線以南的熱帶、亞熱帶地區(qū)以及中南半島大部分地區(qū)周年繁殖［7］，并且該蟲可能在我國形成季節(jié)性南北遷飛，成為一種常發(fā)性害蟲［8］。

2000年之前，美洲地區(qū)對草地貪夜蛾的防治以化學(xué)防治為主［9］，由于抗藥性問題，當(dāng)?shù)赜?000年開始種植?Bt?抗蟲玉米，但自2007年起陸續(xù)在多個國家發(fā)現(xiàn)該蟲對Cry1F、?Cry1Ab、Cry2A和Vip3A產(chǎn)生抗性并導(dǎo)致?Bt?抗蟲玉米防效下降［1015］，因此南美洲大部分地區(qū)又重新使用殺蟲劑進(jìn)行防控。目前草地貪夜蛾已對41種殺蟲劑產(chǎn)生了不同程度的抗性，包括有機(jī)磷類、擬除蟲菊酯類、雙酰胺類、多殺霉素等［16］。GutiérrezMoreno等2018年發(fā)現(xiàn)美國波多黎各田間草地貪夜蛾種群已對多種新型作用機(jī)制殺蟲劑產(chǎn)生了高水平抗性，如氟苯蟲酰胺（500倍）和氯蟲苯甲酰胺（160倍），對乙基多殺菌素（14倍）也顯示出了中等水平抗性，此外對多殺霉素（8倍）、甲氨基阿維菌素苯甲酸鹽（7倍）?和阿維菌素（7倍）?均處于低水平抗性階段［9］。

廣東位于我國華南地區(qū)，屬于亞熱帶季風(fēng)氣候，十分適合草地貪夜蛾周年繁殖，在我國草地貪夜蛾的發(fā)生和防治上具有極其重要的地理位置。因此，很有必要定期、系統(tǒng)地監(jiān)測廣東不同地區(qū)草地貪夜蛾對常用藥劑的抗性水平，為指導(dǎo)田間科學(xué)用藥和開展草地貪夜蛾抗藥性治理提供依據(jù)。本研究采用浸漬法，測定了廣東省5個不同地區(qū)草地貪夜蛾對氯蟲苯甲酰胺、多殺霉素、甲氨基阿維菌素苯甲酸鹽（甲維鹽）和蟲螨腈等4種常用殺蟲劑的抗藥性，為草地貪夜蛾合理用藥提供依據(jù)。

1?材料與方法

1.1?供試?yán)ハx

草地貪夜蛾敏感種群：由廣東省農(nóng)業(yè)科學(xué)院植物保護(hù)研究所章玉蘋研究團(tuán)隊2019年7月從廣西北海市合浦縣未施用過任何藥劑的牧草上采集，后在室內(nèi)用人工飼料飼養(yǎng)，期間不接觸任何殺蟲劑。飼養(yǎng)條件：溫度（27±1）℃，光照周期L∥D=16?h∥8?h，相對濕度（70±5）%。

供試草地貪夜蛾種群：2021年6月至2021年10月間，分別從廣東省廣州、東莞、開平、平遠(yuǎn)、陽江5個地區(qū)玉米田采回高齡幼蟲或成蟲，在室內(nèi)人工飼料飼養(yǎng)1代，飼養(yǎng)條件：溫度（27±1）℃，光照周期L∥D=16?h∥8?h，相對濕度（70±5）%。

1.2?供試藥劑

99%氯蟲苯甲酰胺原藥、92.5%多殺霉素原藥、71.2%甲氨基阿維菌素苯甲酸鹽（甲維鹽）原藥、98%蟲螨腈原藥均由湖南農(nóng)大海特農(nóng)化有限公司提供;二甲基亞砜（江蘇強(qiáng)盛功能化學(xué)股份有限公司，市售）、丙酮（國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司，市售）均為分析純，吐溫?80（天津市科密歐化學(xué)試劑有限公司，市售），化學(xué)純。

1.3?試驗方法

1.3.1?草地貪夜蛾對4種藥劑敏感基線的測定

供試蟲源為草地貪夜蛾敏感種群室內(nèi)飼養(yǎng)20代的2齡幼蟲，測定方法為浸漬法。參照農(nóng)業(yè)行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)《NY/T?1154.142008?農(nóng)藥室內(nèi)生物測定試驗準(zhǔn)則殺蟲劑第14部分：浸葉法》［17］進(jìn)行生物測定，略有改動。具體步驟為：根據(jù)預(yù)備試驗，將原藥配制成母液，除氯蟲苯甲酰胺用二甲基亞砜溶解外，其余原藥均用丙酮溶解，然后用0.1%吐溫?80?水溶液將母液等比稀釋成5～6個系列濃度，將配制好的人工飼料切成長1.1?cm、寬0.8?cm、高0.4?cm的小片。分別將飼料小片在不同濃度的藥液中浸泡20?s?后，放在濾紙上陰干后置于1.8?cm?×?2.3?cm?×?2.3?cm的有蓋透明塑料小盒中。每盒放入一片經(jīng)藥液處理的人工飼料，并接入1頭2齡幼蟲，每10盒為一組（處理），每處理重復(fù)3次。以0.1%吐溫?80?和0.1%相對應(yīng)有機(jī)溶劑的水溶液處理為對照。根據(jù)不同藥劑的作用特點，氯蟲苯甲酰胺在處理后96?h檢查結(jié)果，其余3種藥劑均在處理后48?h檢查結(jié)果。用毛筆輕觸幼蟲無反應(yīng)則視為死亡。

1.3.2?廣東不同地區(qū)草地貪夜蛾田間種群蟲源對4種藥劑的抗藥性

供試蟲源為廣東5個不同地區(qū)田間種群室內(nèi)飼養(yǎng)1代的2齡幼蟲，測定方法同1.3.1方法。

1.4?數(shù)據(jù)處理

采用DPS數(shù)據(jù)處理軟件進(jìn)行統(tǒng)計分析，計算藥劑毒力回歸方程、LC50及95?%置信限和相關(guān)系數(shù)。以?LC50?的95%?置信區(qū)間是否重疊判斷不同來源地草地貪夜蛾種群對同一種殺蟲劑的抗性是否差異顯著［1819］。

抗性倍數(shù)（RR）=測試種群LC50/敏感種群LC50。

參考GutiérrezMoreno等的研究設(shè)定抗性水平劃分標(biāo)準(zhǔn)：抗性倍數(shù)<3.0為敏感水平;3.1～10.0為低水平抗性;10.1～40.0為中等水平抗性;40.1～200.0為高水平抗性［9］。

2?結(jié)果與分析

2.1?草地貪夜蛾2齡幼蟲對4種殺蟲劑的相對敏感基線

相對敏感基線測定結(jié)果（表1）表明，草地貪夜蛾2齡幼蟲對氯蟲苯甲酰胺最敏感，LC50為0.037?mg/L;對甲維鹽、多殺霉素和蟲螨腈3種殺蟲劑LC50均小于1?mg/L。草地貪夜蛾2齡幼蟲對不同藥劑的敏感性由高到低依次為氯蟲苯甲酰胺、多殺霉素、甲維鹽和蟲螨腈。

2.2?廣東不同地區(qū)草地貪夜蛾種群對氯蟲苯甲酰胺的抗藥性

由表2可知，除平遠(yuǎn)草地貪夜蛾種群對氯蟲苯甲酰胺抗性倍數(shù)為1.54倍，屬敏感水平外，其余4個地區(qū)草地貪夜蛾種群對氯蟲苯甲酰胺抗性倍數(shù)在3.51～9.99倍之間，屬低水平抗性。從LC50置信限來看，廣東省不同地區(qū)草地貪夜蛾種群對氯蟲苯甲酰胺的抗性差異不顯著。

2.3?廣東不同地區(qū)草地貪夜蛾種群對多殺霉素的抗藥性

表3結(jié)果表明，陽江草地貪夜蛾種群對多殺霉素抗性倍數(shù)最高，為17.62倍，東莞草地貪夜蛾種群對多殺霉素抗性倍數(shù)17.71倍，上述2個地區(qū)草地貪夜蛾種群對多殺霉素屬中等水平抗性;其他3個地區(qū)草地貪夜蛾種群對多殺霉素抗性倍數(shù)在4.69～7.60倍之間，屬低水平抗性。從LC50置信限來看，廣州、平遠(yuǎn)、開平的草地貪夜蛾種群對多殺霉素的抗性差異不顯著;陽江草地貪夜蛾種群和東莞草地貪夜蛾種群對多殺霉素的抗性差異不顯著，與其余3個地方的抗性差異顯著。

2.4?廣東不同地區(qū)草地貪夜蛾種群對甲維鹽的抗藥性

表4結(jié)果表明，除平遠(yuǎn)草地貪夜蛾種群對甲維鹽抗性倍數(shù)為5.34倍，屬低水平抗性外，其他4個地區(qū)草地貪夜蛾種群對甲維鹽抗性倍數(shù)在0.39～1.08倍之間，屬于敏感水平。從LC50置信限來看，廣州、陽江、開平、東莞的草地貪夜蛾種群對甲維鹽的抗性差異不顯著，與平遠(yuǎn)的抗性差異顯著。

2.5?廣東不同地區(qū)草地貪夜蛾種群對蟲螨腈的抗藥性

表5結(jié)果表明，開平草地貪夜蛾種群對蟲螨腈的抗性倍數(shù)最高，為10.77倍，屬中等水平抗性;廣州、東莞和陽江草地貪夜蛾種群對蟲螨腈的抗性倍數(shù)在4.21～8.84倍之間，屬低水平抗性;平遠(yuǎn)草地貪夜蛾種群對蟲螨腈的抗性倍數(shù)為2.37倍，屬敏感水平。從LC50置信限來看，廣州和開平草地貪夜蛾種群對蟲螨腈抗性差異不顯著，陽江和東莞草地貪夜蛾種群對蟲螨腈抗性差異不顯著，平遠(yuǎn)和陽江草地貪夜蛾種群對蟲螨腈抗性差異不顯著。

3?結(jié)論與討論

目前我國防控草地貪夜蛾以施用化學(xué)殺蟲劑為主，但由于我國地域廣闊，草地貪夜蛾遷入蟲源不同且不同地區(qū)草地貪夜蛾的發(fā)生情況、用藥品種和用藥頻次存在差異，導(dǎo)致不同地區(qū)草地貪夜蛾種群對殺蟲劑的抗藥性水平也存在差異。因此加強(qiáng)不同地區(qū)草地貪夜蛾對常用殺蟲劑抗藥性水平監(jiān)測，對于指導(dǎo)不同地區(qū)因地制宜地合理用藥具有重要意義。建立靶標(biāo)害蟲對不同藥劑的敏感基線是進(jìn)行抗藥性監(jiān)測的前提，目前關(guān)于國內(nèi)草地貪夜蛾對常用殺蟲劑敏感基線的報道較少，只王歡歡等報道了草地貪夜蛾3齡幼蟲對7種殺蟲劑的相對敏感基線［19］。本研究結(jié)果與上述報道的差異較大，一方面可能是最初蟲源的來源地不同，本文敏感蟲源采自廣西，其遷入蟲源主要來源于泰國、老撾和越南［20］，而王歡歡報道的蟲源采自云南，其遷入蟲源主要來源于緬甸［19］。另一方面，王歡歡等測試的草地貪夜蛾幼3齡幼蟲在室內(nèi)飼養(yǎng)了5～7代，而本研究測試的草地貪夜蛾2齡幼蟲在室內(nèi)飼養(yǎng)了20代，對各種常用藥劑更為敏感。

草地貪夜蛾的化學(xué)防治歷史悠久，從過去使用有機(jī)磷類、氨基甲酸酯類、擬除蟲菊酯類，?到近些年的阿維菌素類、酰胺類、多殺霉素類等多種藥劑均被用于草地貪夜蛾的防治［21］。目前許多國家的草地貪夜蛾田間種群對多數(shù)藥劑產(chǎn)生了不同程度抗性。從本次監(jiān)測結(jié)果看，廣東不同地區(qū)草地貪夜蛾種群對氯蟲苯甲酰胺、多殺菌素、甲維鹽和蟲螨腈均已產(chǎn)生不同程度的抗藥性。廣州、陽江、開平和東莞草地貪夜蛾種群對氯蟲苯甲酰胺已產(chǎn)生低水平抗性;陽江和東莞草地貪夜蛾種群對多殺霉素已產(chǎn)生中等水平抗性，廣州、開平和平遠(yuǎn)草地貪夜蛾對多殺霉素已產(chǎn)生低水平抗性;平遠(yuǎn)草地貪夜蛾種群對甲維鹽已產(chǎn)生低水平抗性;開平草地貪夜蛾種群對蟲螨腈已產(chǎn)生中等水平抗性，廣州、東莞和陽江草地貪夜蛾對蟲螨腈已產(chǎn)生低水平抗藥性。本結(jié)果與國內(nèi)一些相關(guān)報道［2125］相似。

2019年草地貪夜蛾入侵我國并完成定殖，2020年進(jìn)入暴發(fā)為害階段［26］，草地貪夜蛾的防控工作形勢嚴(yán)峻。草地貪夜蛾常用的防控方法包括農(nóng)業(yè)防治、生物防治、化學(xué)防治等，目前化學(xué)防治仍是草地貪夜蛾的主要手段，但長期或大量使用化學(xué)農(nóng)藥易促使草地貪夜蛾抗藥性逐漸形成。因此系統(tǒng)監(jiān)測我國不同地區(qū)草地貪夜蛾對常用殺蟲劑的抗藥性，為其科學(xué)有效防治提供理論支持具有重要的意義。

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（責(zé)任編輯：田?喆）