袁琳琳 潘雪蓮 陸容材 陳龍威 席羽 吳少英

摘要

普通大薊馬?Megalurothrips?usitatus?在海南省對豇豆造成嚴重危害且抗藥性逐漸增強。本研究測定了2019年至2021年海南省普通大薊馬對氯菊酯和甲氰菊酯的抗性。結(jié)果表明，海口、樂東和三亞3個地理種群對甲氰菊酯處于極高水平抗性，對氯菊酯處于高水平抗性，且抗性逐年增強。對普通大薊馬鈉離子通道序列分析發(fā)現(xiàn)存在M283R突變，該突變位于鈉離子通道同源結(jié)構(gòu)域Ⅰ。突變頻率檢測顯示，2019年至2021年連續(xù)3年?？诜N群該突變位點的突變頻率分別為1/30、1/30、3/30，有升高趨勢。本研究發(fā)現(xiàn)海南省普通大薊馬從2019年到2021年對擬除蟲菊酯類藥劑的抗藥性呈逐年上升趨勢。

關(guān)鍵詞

普通大薊馬;?鈉離子通道;?突變;?擬除蟲菊酯;?抗藥性

中圖分類號：

S?433

文獻標識碼：?A

DOI：?10.16688/j.zwbh.2022062

Detection?of?the?resistance?of?Megalurothrips?usitatus?to?pyrethroids?and?sodium?channel?mutation?in?Hainan

YUAN?Linlin，?PAN?Xuelian，?LU?Rongcai，?CHEN?Longwei，?XI?Yu，?WU?Shaoying*

（Sanya?Nanfan?Research?Institute?of?Hainan?University，?Sanya?572025，?China）

Abstract

Megalurothrips?usitatus?has?caused?serious?damage?to?cowpeas?in?Hainan?province?and?its?resistance?to?insecticide?is?building?up.?This?study?investigated?the?resistance?of?M.usitatus?to?permethrin?and?fenpropathrin?in?Hainan?province?from?2019?to?2021.?Haikou，?Ledong?and?Sanya?populations?showed?extremely?high?level?of?resistance?to?fenpropathrin?and?high?level?of?resistance?to?permethrin，?and?the?resistance?enhanced?year?by?year.?The?M283R?mutation?was?found?in?the?domain?Ⅰ?of?the?sodium?channel?in?M.usitatus.?The?frequencies?of?this?mutation?was?1/30，?1/30?and?3/30?in?three?Haikou?populations?collected?from?2019?to?2021，?respectively，?with?an?increasing?trend.?In?a?word，?this?study?found?that?the?resistance?of?M.usitatus?to?pyrethroids?in?Hainan?province?enhanced?year?by?year?from?2019?to?2021.

Key?words

Megalurothrips?usitatus;?sodium?channel;?mutation;?pyrethroids;?insecticide?resistance

豇豆是海南省主要的冬季蔬菜作物。據(jù)報道，海南省每年豇豆的種植面積可達?2?萬?hm2?左右［1］。普通大薊馬?Megalurothrips?usitatus，也稱豆大薊馬（薊馬科?Thripidae，大薊馬屬?Megalurothrips），是海南省冬季瓜菜上的主要害蟲。普通大薊馬主要通過取食、產(chǎn)卵造成直接危害，此外還可以通過傳播植物病毒造成間接危害。直接危害主要是其利用銼吸式口器取食植物汁液，影響寄主植物的花、果實和生長點的生長，致使植物葉片卷曲皺縮，無法正常進行光合作用，最終導致作物生長緩慢甚至停止生長。植物開花期受害最重，薊馬會在植物開花后迅速鉆入花心為害，造成花蕊腐爛壞死甚至脫落［2］。研究表明，普通大薊馬可以傳播煙草線條病毒（tobacco?streak?virus，?TSV）［34］、花生芽壞死病毒（peanut?bud?necrosis?virus，?PBNV）［5］等造成間接危害。普通大薊馬在海南省主要為害豇豆［6］，尤其在冬季蔬菜種植期間為害更為嚴重，對豇豆的品質(zhì)和產(chǎn)量造成嚴重影響［68］。

海南省大面積種植豇豆供應(yīng)冬季蔬菜的同時也給普通大薊馬營造了天然家園。伴隨著殺蟲劑的不斷使用，在有效防治普通大薊馬的同時也致使其抗藥性水平不斷攀升，給田間防治帶來了困難。2014年－2015年海南地區(qū)普通大薊馬對高效氯氰菊酯、甲氨基阿維菌素苯甲酸鹽（甲維鹽）、吡蟲啉、乙基多殺菌素、阿維菌素和啶蟲脒的抗性測定結(jié)果表明，三亞種群2014年對高效氯氰菊酯、甲維鹽、吡蟲啉，產(chǎn)生了低水平抗性，?2015年對甲維鹽、吡蟲啉依然維持低水平抗性，同時又對乙基多殺菌素和啶蟲脒產(chǎn)生了低水平抗性，對高效氯氰菊酯產(chǎn)生了中等水平抗性;澄邁種群2014年對甲維鹽產(chǎn)生了低水平抗性，2015年對除甲維鹽外的其他藥劑仍然處于敏感狀態(tài)；

海口種群2014年和2015年對這6種藥劑均處于敏感階段［9］。此外，研究者2014年測定了毒死蜱、阿維菌素、高效氯氰菊酯、甲維鹽、吡蟲啉和啶蟲脒對海南省普通大薊馬的毒力，發(fā)現(xiàn)其中高效氯氰菊酯的?LC50?為?0.165?4?g/L［8］。2017年三亞和澄邁的普通大薊馬種群對阿維菌素仍處于敏感狀態(tài)，?？诜N群對高效氯氰菊酯、甲維鹽、乙基多殺菌素、吡蟲啉和啶蟲脒等藥劑產(chǎn)生了中等水平抗性［10］。而到2019年，普通大薊馬?？诜N群對擬除蟲菊酯類藥劑的抗性倍數(shù)增加，其中高效氯氟氰菊酯的LC50超過?1?000?mg/L［11］。

電壓門控鈉離子通道（voltagegated?sodium?channel，以下簡稱鈉離子通道）存在于脊椎動物和無脊椎動物的神經(jīng)系統(tǒng)內(nèi)，是神經(jīng)細胞傳遞電信號的重要通道。鈉離子通道是河豚毒素、蝎毒素和蟾蜍毒素等動物源神經(jīng)毒素的作用靶標［12］，同時也是擬除蟲菊酯類殺蟲劑和滴滴涕的主要作用靶標［13］。此外，鈉離子通道阻斷殺蟲劑（sodium?channel?blocker?insecticides，?SCBI）也可以作用于昆蟲鈉離子通道［1415］。

哺乳動物鈉離子通道的?α?亞基由多個基因編碼，而絕大多數(shù)昆蟲的神經(jīng)鈉離子通道由1個基因編碼。目前為止僅發(fā)現(xiàn)赤擬谷盜?Tribolium?castaneum?和蚜蟲的鈉離子通道由2個基因編碼［16］。昆蟲鈉離子通道含有1個大型糖基化?α?亞基和1個與哺乳動物?β?亞基功能相同的?Tip?E?蛋白，該?Tip?E?蛋白可以提高鈉離子通道的表達水平，利于后續(xù)鈉離子通道的功能驗證［1720］。α?亞基由N端、C端和中間的4個同源結(jié)構(gòu)域（Domain?Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ）組成。鈉離子通道的中央孔洞由4個結(jié)構(gòu)域圍繞形成，每個同源結(jié)構(gòu)域由6個跨膜螺旋片段組成（S1～S6），其中S5和S6間的跨膜片段形成P環(huán)（Ploop），而決定鈉離子通道離子選擇性的D（天冬氨酸）、E（谷氨酸）、K（賴氨酸）、A（丙氨酸）4個氨基酸殘基分別存在于4個同源結(jié)構(gòu)域的P環(huán)上［21］。4個同源結(jié)構(gòu)域和不同的跨膜螺旋片段之間通過多肽鏈相互連接。一般情況下，鈉離子通道有靜息態(tài)、激活態(tài)和失活態(tài)3種狀態(tài)［22］。昆蟲鈉離子通道的開放受膜電位控制，所以被稱為電壓門控離子通道。而鈉離子通道的門控是指在電刺激下通過

鈉離子通道蛋白構(gòu)象的改變開啟或關(guān)閉通道［16］。

擬除蟲菊酯類殺蟲劑（pyrethroids）是天然除蟲菊素的衍生物，共分為兩類，一類是不含α氰基的Ⅰ型擬除蟲菊酯類殺蟲劑，如氯菊酯、聯(lián)苯菊酯等;一類是含有α氰基的Ⅱ型擬除蟲菊酯類殺蟲劑，如溴氰菊酯、甲氰菊酯等。相關(guān)研究表明，Ⅰ型擬除蟲菊酯類殺蟲劑作用于神經(jīng)鈉離子通道導致軸突重復放電，致使突觸前神經(jīng)纖維處于重復興奮狀態(tài)，從而擾亂突觸功能。而Ⅱ型擬除蟲菊酯類殺蟲劑的作用機理與Ⅰ型不同，不產(chǎn)生重復放電，而是抑制動作電位的產(chǎn)生，引起膜電位的去極化，從而擾亂突觸功能［23］。因此盡管Ⅰ型和Ⅱ型擬除蟲菊酯類殺蟲劑均作用于昆蟲神經(jīng)鈉離子通道，但兩者對鈉離子通道的作用方式和產(chǎn)生毒力的機制完全不同［2325］。

擊倒抗性（knockdown?resistance，kdr）是昆蟲對擬除蟲菊酯類殺蟲劑產(chǎn)生抗性的重要機制［26］。相關(guān)藥理學試驗已經(jīng)證實擊倒抗性的機理是鈉離子通道的結(jié)構(gòu)變化引起殺蟲劑結(jié)合位點發(fā)生改變，使鈉離子通道對擬除蟲菊酯類藥劑的敏感性降低［27］。研究證實，擬除蟲菊酯類殺蟲劑在昆蟲鈉離子通道上的結(jié)合位點有兩個，分別為結(jié)合位置對稱而結(jié)合方向相反的?DomainⅡL45DomainⅡS5DomainⅡS6Domain?ⅢS6?和?DomainⅠL45DomainⅠS5DomainⅠS6DomainⅡS6［17，?28］。在過去近20年的研究中，與擊倒抗性有關(guān)的鈉離子通道突變是研究者關(guān)注的重點，研究也表明擊倒抗性與鈉離子通道氨基酸的突變有著密不可分的關(guān)系［16］，因此，我們可以通過測定昆蟲鈉離子通道中與擊倒抗性密切相關(guān)的某一個單突變或一對雙突變的突變頻率來評價昆蟲對菊酯類殺蟲劑的抗性現(xiàn)狀。

本文旨在通過連續(xù)3年的抗藥性水平測定來揭示海南省普通大薊馬對擬除蟲菊酯類藥劑的抗性發(fā)展趨勢，并通過普通大薊馬神經(jīng)鈉離子通道的克隆及突變位點分析來進行分子水平的鑒定，監(jiān)測普通大薊馬對擬除蟲菊酯藥劑的抗性變化，為田間合理使用殺蟲劑提供一定的理論基礎(chǔ)。

1?材料與方法

1.1?供試昆蟲

2019年至2021年在海南省海口市美蘭區(qū)（東經(jīng)?110.3°E，北緯?20.1°N）、樂東黎族自治縣利國鎮(zhèn)（東經(jīng)?109.1°E，北緯?18.5°N）和三亞市崖城鎮(zhèn)（東經(jīng)?109.2°E，北緯?18.4°N）采集普通大薊馬田間種群，包括：?海口種群（HK2019、HK2020、HK2021）、樂東種群（LD2019、LD2020、LD2021）和三亞種群（SY2019、?SY2020、SY2021）。相對敏感品系（S）由海南大學植物保護學院范詠梅教授2018年饋贈，在實驗室內(nèi)使用未施用任何農(nóng)藥的豇豆‘夏寶?2?號（廣東省興寧市興研種子店），在光照培養(yǎng)箱（RXZ380?BM，寧波揚輝儀器有限公司）中飼養(yǎng)，飼養(yǎng)條件為：溫度（25±1）℃，相對濕度（70±5）%，光周期?L∥D=16?h∥8?h。將清洗干凈并晾干的豇豆切成?8～10?cm?長的兩端切口為實心、無孔洞的豇豆段，將豇豆段放入底部有吸水紙且瓶蓋上有氣孔的?500?mL?玻璃瓶中飼養(yǎng)。

1.2?生物測定

95%甲氰菊酯原藥（TC）和97%氯菊酯原藥（TC）購自北京穎泰嘉和有限公司。本研究使用的生物測定方法是在TIBS（thrips?insecticide?bioassay?system）法［29］的基礎(chǔ)上改進的葉管藥膜法［30］改良而來。首先根據(jù)預(yù)試驗結(jié)果，用0.1?mg/L的Triton?X100（美國?Sigma）將原藥稀釋成不同濃度。取不同稀釋濃度的藥液浸滿2?mL離心管，3?h后倒出藥液，晾干備用。每個濃度3個重復。將無農(nóng)藥的豇豆切成1.5?cm長的兩端切口為實心、無孔洞的豇豆段，在不同濃度的藥液中浸泡15?s后放在濾紙上晾干備用。以0.1?mg/L的Triton?X100處理的離心管和豇豆段作為空白對照。每個晾干的離心管中接入30頭普通大薊馬成蟲，并放入對應(yīng)濃度處理的豇豆段，飼養(yǎng)條件同上。于處理后48?h統(tǒng)計普通大薊馬的死亡率。使用Polo?Plus?2.00軟件計算不同種群不同藥劑的半致死濃度（LC50，95%置信區(qū)間），計算抗性倍數(shù)，并根據(jù)2020年全國農(nóng)業(yè)有害生物抗藥性監(jiān)測結(jié)果及科學用藥建議的相關(guān)標準［31］進行抗性水平等級劃分，按抗性倍數(shù)（RR）由高到低劃分為：高水平抗性（RR>100.0）、中等水平抗性（10.0＜RR≤100.0）、低水平抗性（5.0＜RR≤10.0）、相對敏感（RR≤5.0）。

1.3?構(gòu)建重組質(zhì)粒

利用TRIzol?Reagent（美國Ambion）提取普通大薊馬成蟲總?RNA，并用?PrimeScriptTM?Ⅱ?1st?Strand?cDNA?Synthesis?Kit（日本?TaKaRa）將?RNA?反轉(zhuǎn)錄為?cDNA。設(shè)計擴增普通大薊馬鈉離子通道全長的引物?Mu5?（F）/Mu3?（R）（表1），引物由生工生物工程（上海）股份有限公司合成。利用?Mu5?（F）/Mu3?（R）及?Phanta??Max?SuperFidelity?DNA?Polymerase（南京諾唯贊）擴增鈉離子通道全長片段，獲得的?PCR?產(chǎn)物經(jīng)?1.0%瓊脂糖凝膠電泳檢測，使用?Cycle?Pure?Kit（美國?OMEGA）對擴增產(chǎn)物進行回收純化。使用Clone?Express??Ⅱ?One?Step?Cloning?Kit（南京諾唯贊）將回收產(chǎn)物連接到表達載體?PGH19?上獲得重組質(zhì)粒。重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)入XL10gold?感受態(tài)細胞（北京博邁德），在含?10?mg/mL?氨芐卡鈉霉素的?LA?固體培養(yǎng)基上培養(yǎng)，待長出單克隆后通過飽和酚（北京索萊寶）進行陽性克隆的快速檢測篩選。具體篩選方法為：50?μL單克隆菌液與?50?μL?飽和酚以及?10?μL?的?6×loading?buffer?振蕩混合均勻，在?4℃條件下?12?000?r/min?離心?10?min，取?25?μL?上清液進行?1.0%的凝膠電泳檢測，條帶長度正確的菌落即為陽性克隆。將篩選出的陽性克隆進行菌液培養(yǎng)，利用?Plasmid?DNA?Mini?Kit（美國?OMEGA）提取重組質(zhì)粒，并使用限制性內(nèi)切酶?Hind?ⅢHF（北京?NEB）?進行酶切，驗證質(zhì)粒的正確性。最終獲得的含全長鈉離子通道的陽性質(zhì)粒送至生工生物工程（上海）股份有限公司測序。

1.4?基因突變頻率檢測

檢測?？贖K2019、HK2020和HK2021種群突變位點的突變頻率。利用溶液型中/大量細胞/組織基因組DNA提取試劑盒（北京百泰克）提取單頭普通大薊馬成蟲的基因組DNA。根據(jù)突變位點所在同源結(jié)構(gòu)域Domain?Ⅰ設(shè)計引物Domain?Ⅰ5?（F）/Domain?Ⅰ3?（R）［引物由生工生物工程（上海）股份有限公司合成，表1］。利用Rapid?Taq?Master?Mix（南京諾唯贊）擴增目的片段，反應(yīng)體系及反應(yīng)程序參照試劑盒說明書。PCR擴增產(chǎn)物經(jīng)過Cycle?Pure?Kit（美國OMEGA）回收純化后使用5?min?TA/BluntZero?Cloning?Kit（南京諾唯贊）連接到T載體獲得重組質(zhì)粒，重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)入Stbl2感受態(tài)細胞（上海唯地）中，使用含10?mg/mL氨芐卡鈉霉素的LA液體培養(yǎng)基進行培養(yǎng)。菌液PCR篩選出陽性克隆后提取重組質(zhì)粒，送至生工生物工程（上海）股份有限公司測序。每組樣本各檢測30頭，計算突變頻率。突變頻率=每組含突變位點總樣本數(shù)/每組檢測總樣本數(shù)×100%。

2?結(jié)果與分析

2.1?普通大薊馬抗藥性檢測結(jié)果

本研究測定了甲氰菊酯和氯菊酯兩種擬除蟲菊酯類藥劑對相對敏感品系以及9個田間種群的毒力（表2）。結(jié)果表明，對室內(nèi)相對敏感品系，氯菊酯的LC50為1.4?mg/L，甲氰菊酯的LC50為1.9?mg/L。對田間種群，從2019年至2021年，?？凇窎|和三亞種群對甲氰菊酯和氯菊酯的抗性均表現(xiàn)出不斷增強的趨勢，其中海口種群對氯菊酯的抗性3年間從194.3倍增加到241.2倍，一直處于高水平抗性;對甲氰菊酯的抗性處于超高水平，最高達1?426.5倍（HK2021）;樂東種群，對氯菊酯的抗性3年來一直處于高水平，3年抗性倍數(shù)從204.8倍增加到314.3倍，對甲氰菊酯的抗性2021年已達到2?189.9倍（LD2021），為超高水平抗性;三亞種群，對氯菊酯的抗性一直處于高水平，且3年內(nèi)抗性倍數(shù)從?232.1倍增加到?386.9倍，對甲氰菊酯的抗性也處于超高水平，且至2021年抗性倍數(shù)達到了?3?107.5倍（SY2021）。研究結(jié)果表明，海口（HK）、樂東（LD）和三亞（SY）普通大薊馬種群中，三亞種群對擬除蟲菊酯類藥劑的抗性水平最高，樂東次之，海口種群的抗性水平最低但也呈高水平抗性，并且3地的抗性均呈現(xiàn)逐年上升的趨勢。

2.2?普通大薊馬鈉離子通道克隆及突變位點分析

2.2.1?鈉離子通道全長基因的克隆

普通大薊馬鈉離子通道基因全長6?282?bp（圖1），編碼2?094個氨基酸，其全長氨基酸序列已上傳?NCBI?GenBank?數(shù)據(jù)庫并獲得序列號?MZ043856。獲得普通大薊馬鈉離子通道的基因全長后，根據(jù)其基本結(jié)構(gòu)和氨基酸序列信息，使用?SWISSMODEL?網(wǎng)站（https：∥swissmodel.expasy.org/）構(gòu)建了普通大薊馬鈉離子通道的?3D?模擬圖（圖2）。

2.2.2?普通大薊馬鈉離子通道蛋白突變位點分析

將?？贖K2019種群與敏感品系鈉離子通道氨基酸序列進行比對，結(jié)果顯示HK2019的鈉離子通道在Domain?Ⅰ區(qū)域S5位置上的第283個氨基酸的第二位核苷酸發(fā)生了突變，ATG?變?yōu)?AGG，使蛋氨酸（M）突變?yōu)榫彼幔≧）（圖3a），且?M283R?突變位點出現(xiàn)在擬除蟲菊酯類藥劑的結(jié)合區(qū)域?Domain?ⅠS5（圖3b）。

2.2.3?普通大薊馬鈉離子通道蛋白M283R突變位點的突變頻率

本研究主要檢測了普通大薊馬海口種群鈉離子通道蛋白突變位點M283R的突變頻率。對HK2019、?HK2020、HK2021共3個種群中各?30?頭單頭蟲體樣本的Domain?Ⅰ?陽性克隆進行測序和序列分析顯示，?普通大薊馬鈉離子通道Domain?Ⅰ基因長?840?bp（圖4），編碼280個氨基酸。HK2019、HK2020、?HK2021種群各?30頭樣本中產(chǎn)生突變的分別有1、1頭和3頭，M283R的突變頻率分別為1/30、1/30和3/30，即3.3%、3.3%和10.0%（表3）。

3?結(jié)論與討論

薊馬類害蟲的為害方式主要是通過銼吸式口器吸食植物細胞汁液，導致植物光合能力降低［32］，而高溫高濕的環(huán)境會加重這種損害［33］。海南濕熱的環(huán)境導致普通大薊馬的發(fā)生越發(fā)嚴重［10］。當?shù)剞r(nóng)戶使用化學殺蟲劑來控制普通大薊馬的種群數(shù)量，導致其抗藥性不斷攀升。

近幾年，海南省普通大薊馬對擬除蟲菊酯類藥劑的抗性水平測定結(jié)果顯示，三亞種群對高效氯氰菊酯已經(jīng)產(chǎn)生了中等水平抗性（17.06倍）［10］。在我們最新的研究結(jié)果中，海南省?？?、樂東、三亞3個野外地理種群對高效氯氟氰菊酯（414～1?128倍）和溴氰菊酯（161～352倍）表現(xiàn)出較高水平的抗性（尚未發(fā)表）。本研究的生物測定結(jié)果表明，2019年至2021年3年內(nèi)，?？?、樂東、三亞的普通大薊馬種群對氯菊酯和甲氰菊酯均產(chǎn)生了高水平或極高水平的抗性，且抗性水平呈逐年上升趨勢。并且三亞種群的抗藥性在3個地理種群中最高，樂東種群較海口種群稍高。突變位點檢測結(jié)果顯示，本研究3個田間抗性種群中均發(fā)現(xiàn)有M283R突變位點存在，因該突變位點最先在?？诜N群HK2019中被發(fā)現(xiàn)，所以本文僅以HK2019為例進行鈉離子通道的全長克隆及序列分析，并連續(xù)3年對?？诜N群（HK2019、HK2020及HK2021）發(fā)生該突變的頻率進行檢測。海口種群M283R突變位點3年的突變頻率分別為3.3%、3.3%和10.0%，由不同種群抗性水平高低及發(fā)展趨勢推測，樂東和三亞種群中M283R的突變頻率極有可能會高于?？诜N群，甚至可能遠遠高于10%，實際突變頻率是否真如推測所言，仍需大量分子試驗的驗證。

害蟲產(chǎn)生抗藥性的機制主要有3個方面，分別為解毒酶代謝增強［34］、靶位點敏感性降低［35］以及表皮穿透性降低［36］。擬除蟲菊酯類藥劑是一種高效低毒的神經(jīng)毒劑，幾十年來一直被用于害蟲防治。相關(guān)遺傳學研究表明，普通大薊馬對氯氰菊酯等菊酯類殺蟲劑產(chǎn)生抗藥性可能與鈉通道的突變有關(guān)［37］。近幾年，鈉離子通道Domain?Ⅱ和Domain?Ⅲ的突變位點在許多昆蟲中也相繼被報道［38］。在擬除蟲菊酯長期的選擇壓力下，已經(jīng)在黑腹果蠅Drosophila?melanogaster中發(fā)現(xiàn)了I260T突變位點和I265N突變位點［39］，昆蟲Domain?Ⅰ突變也與其對擬除蟲菊酯抗性相關(guān)。

在薊馬類昆蟲中已經(jīng)報道了與擬除蟲菊酯類藥劑抗性相關(guān)的突變位點，例如在煙薊馬Thrips?tabaci中已經(jīng)確定了4個與擬除蟲菊酯抗性相關(guān)的突變，包括兩對氨基酸雙突變M918T/L1014F和M918L/V1010A［40］，并在日本煙薊馬鈉離子通道中發(fā)現(xiàn)了與擬除蟲菊酯抗性密切相關(guān)的T929I和K1774N雙突變，并首次發(fā)現(xiàn)了兩個單氨基酸突變位點T929I和M918L［4143］。而西花薊馬Frankliniella?occidentalis通過鈉離子通道的L1014F和T929C單突變位點獲得了抗藥性［44］，棕櫚薊馬Thrips?palmi也通過M843I、A1231D和T945I單突變獲得了對擬除蟲菊酯殺蟲劑的抗藥性［45］。

本研究從田間普通大薊馬種群鈉離子通道的Domain?Ⅰ中檢測到一個新的突變位點M283R，且在檢測的樣本中該突變?yōu)榧兒贤蛔?。本研究發(fā)現(xiàn)的突變位點與黑腹果蠅中的兩個突變位點在位置上相近，也位于擬除蟲菊酯類藥劑結(jié)合位點上，因此推測該突變位點與普通大薊馬對擬除蟲菊酯類藥劑產(chǎn)生抗性相關(guān)，但有待通過爪蟾卵母細胞表達系統(tǒng)和雙電極電壓鉗技術(shù)進行驗證。

參考文獻

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（責任編輯：楊明麗）