趙 楠 代慧琳 周 羽

開封市兒童醫(yī)院 (河南 開封 475100)

兒童復發(fā)性口腔潰瘍是兒科和口腔科常見的疾病之一，該疾病發(fā)病具有長期性和反復性，且相對頑固常見于唇部、臉頰部位以及舌頭的黏膜處。雖然復發(fā)性口腔潰瘍具有一定程度的自限性，但其在反復大病前會引發(fā)前口腔病變，給患兒的言語表達和進食造成了嚴重的影響[1-2]。EB病毒作為一種皰疹病毒，具有潛伏感染的特征，研究發(fā)現(xiàn)該病毒與復發(fā)性口腔潰瘍前口腔病變的發(fā)生發(fā)展存在密切的相關(guān)性[3]，因此對EB病毒的DNA以及血液指標等進行檢測可了解兒童復發(fā)性口腔潰瘍前口腔病變的機制。本研究選擇了90例復發(fā)性口腔潰瘍前口腔病變的患兒和50例健康兒童，從而探究EB病毒與兒童復發(fā)性口腔潰瘍前口腔病變的關(guān)聯(lián)機制，以期為臨床治療兒童復發(fā)性口腔潰瘍前口腔病變提供科學的理論基礎。

1 資料與方法

1.1 研究對象選擇2019年4月至2021年4月本院兒科確診為復發(fā)性口腔潰瘍前口腔病變的患兒90例作為本研究的觀察組，其中男性患兒44例，女性患兒46例，年齡為3歲～12歲。同時選擇同期的健康兒童50例作為對照組。兩組兒童的一般臨床資料對比，差異均無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)。

患兒的納入標準：符合復發(fā)性口腔潰瘍前口腔病變的診斷標準；潰瘍處邊緣有水腫現(xiàn)象，中央發(fā)黃且凹陷；患兒臨床資料完整準確，且無其他疾?。凰谢純焊改妇押炇鹬橥鈺?。排除標準：合并其他口腔疾病的；患有其他疾病或者伴隨有器官疾病的；有復發(fā)性口腔潰瘍家族史的；由于各種原因無法配合治療的。

1.2 標本的采集清晨取兩組兒童空腹狀態(tài)下的肘靜脈血2 mL置EDTA抗凝無菌管中，充分混勻，在3000r/min的條件下離心取上清液，置于-80 ℃的冰箱中保存，待測。用無菌雙蒸水低滲溶血法提取外周血單個核細胞，提取后置于-20 ℃的環(huán)境中保存待用。

1.3 觀察指標

1.3.1 兩組EB病毒DNA檢出率比較 取出-20 ℃中保存?zhèn)溆玫耐庵苎獑蝹€核細胞，在室溫下自然融解，于8000r/min的條件下離心處理5 min，棄去上清取沉淀，在沉淀中加入50μL的DNA提取液，充分混勻。于12000r/min的條件下離心處理5min。采用熒光定量PCR法檢測檢測EB病毒DNA的拷貝量。其中，當EBV DNA＞500 copy/mL則可判斷為陽性。

1.3.2 EB病毒DNA檢出組與未檢出組血清炎癥因子水平比較 取出-20 ℃中保存?zhèn)溆玫纳锨逡?，采用酶?lián)免疫吸附測定法檢測腫瘤壞死因子(tumor necrosis factor-α，TNF-α)、C-反應蛋白(C-reaction protein，CRP)、白細胞介素-6(Interleukin-6，IL-6)和白細胞介素-8(Interleukin-23，IL-8)因子水平。

1.3.3 EB病毒DNA檢出組與未檢出組免疫功能指標水平比較 取出-20 ℃中保存?zhèn)溆玫纳锨逡?，根?jù)試劑盒相關(guān)說明測定免疫球蛋白A(Immunoglobulin A，IgA)、免疫球蛋白A(Immunoglobulin G，IgG)、免疫球蛋白M(Immunoglobulin M，IgM)的水平。

1.3.4 EB病毒與血清炎癥因子和免疫功能指標水平的相關(guān)性 結(jié)合

1.3.1～1.3.3結(jié)果，采用Person法分析EB病毒與血清炎癥因子和免疫功能指標水平的相關(guān)性。

1.4 統(tǒng)計學方法本研究中數(shù)據(jù)均通過SPSS 20.0統(tǒng)計分析軟件(美國IBM公司)處理；計量資料按照(±s)形式表示，組間比較采取單因素方差分析；計數(shù)資料以百分率(%)的形式表示，組間比較采用χ2分析，相關(guān)性分析采用Person法，其中P＜0.05表明差異具有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié) 果

2.1 兩組EB病毒DNA檢出率比較90例復發(fā)性口腔潰瘍前口腔病變的患兒中外周血單個核細胞中有66例檢測出EB病毒DNA，檢出率為73.33%，50例健康對照組中有1例檢測出EB病毒DNA，檢出率為2.00%，經(jīng)χ2檢驗，兩組EB病毒DNA檢出率比較，差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)，見表1。

表1 兩組EB病毒DNA檢出率比較[n(%)]

2.2 EB病毒DNA檢出組與未檢出組血清炎癥因子水平比較EB病毒DNA檢出組與未檢出組血清炎癥因子水平比較，檢出組患兒血清中TNF-α、CRP、IL-6和IL-8水平顯著高于對照組，差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)，見表2。

表2 EB病毒DNA檢出組與未檢出組血清炎癥因子水平比較

2.3 EB病毒DNA檢出組與未檢出組免疫功能指標水平比較EB病毒DNA檢出組與未檢出組免疫功能指標水平比較，檢出組患兒血清中IgA、IgG和IgM水平顯著高于對照組，差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)，見表3。

表3 EB病毒DNA檢出組與未檢出組免疫功能指標水平比較

表4 EB病毒與血清炎癥因子和免疫功能指標水平的相關(guān)性

2.4 EB病毒與血清炎癥因子和免疫功能指標水平的相關(guān)性EB病毒與血清炎癥因子和免疫功能指標水平之間均存在正相關(guān)關(guān)系，其中EB病毒DNA檢出組與血清炎癥因子和免疫功能指標水平之間存在顯著的正相關(guān)系(P＜0.05)；而EB病毒DNA未檢出組與血清炎癥因子和免疫功能指標水平之間的相關(guān)性不顯著(P＞0.05)。

3 討 論

近年來，兒童復發(fā)性口腔潰瘍給兒童的身體造成的問題越來越嚴重，并且復發(fā)性口腔潰瘍前口腔病變導致兒童出現(xiàn)了諸多不良癥狀，對生長發(fā)育造成了較大的影響，因此臨床應盡快明確其發(fā)病機制并給與合適的干預治療[4]。

兒童復發(fā)性口腔潰瘍前口腔病變是一種多因素共同參與的疾病，其發(fā)病原因及發(fā)病機制尚不統(tǒng)一，大部分醫(yī)生認為這與兒童的易感體質(zhì)、激素分泌水平以及環(huán)境因素等有關(guān)。在環(huán)境因素中，病毒感染與兒童復發(fā)性口腔潰瘍前口腔病變有著密切的聯(lián)系[5]。EB是一種潛伏感染的病毒，目前臨床研究發(fā)現(xiàn)[6]，機體容易感染EB病毒，在普通人群中，EB病毒的感染率高達90%以上。一般情況下，機體感染EB病毒后，可以通過宿主免疫的抑制性控制達到抑制EB病毒增殖致病。但是，EB病毒能夠長期潛伏于機體的B細胞中，而受到感染者將成為終生EB病毒攜帶者。EB病毒能夠限制機體自身抗原基因的表達，以達到逃逸機體免疫監(jiān)視以及清除的目的[7]。

在兒童復發(fā)性口腔潰瘍前口腔病變病因?qū)W的研究中[8-9]，有關(guān)EB病毒的研究受到了越來越多的重視。有學者認為，EB病毒的感染是觸發(fā)兒童復發(fā)性口腔潰瘍前口腔病變的一個關(guān)鍵原因，其機制可能是：EB病毒會感染B淋巴細胞，逐漸刺激機體的免疫系統(tǒng)，導致機體的凋亡機制發(fā)生紊亂，其中B淋巴細胞會過度的增殖，產(chǎn)生多種自身抗體且數(shù)量巨大，形成免疫復合物，但是機體巨噬細胞的功能則會下降，超過病理的閾值范圍，最終引發(fā)了兒童復發(fā)性口腔潰瘍前口腔病變。另外，EB病毒的感染在打破機體免疫系統(tǒng)平衡后，炎癥因子水平上升，參與疾病的發(fā)生和發(fā)展[10]。在本研究中，觀察組患兒中EB病毒DNA檢出率為73.33%，對照組EB病毒DNA檢出率僅為2.00%，差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)；檢出組患兒血清中TNF-α、CRP、IL-6、IL-8水平以及IgA、IgG和IgM水平均顯著高于對照組，差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。Person相關(guān)性分析結(jié)果顯示，EB病毒DNA檢出組與血清炎癥因子和免疫功能指標水平之間存在顯著的正相關(guān)系(P＜0.05)；而EB病毒DNA未檢出組與血清炎癥因子和免疫功能指標水平之間的相關(guān)性不顯著(P＞0.05)。由此可知，EB病毒會對嚴重影響機體的免疫功能，由此引發(fā)兒童復發(fā)性口腔潰瘍前口腔病變。

EB病毒能夠以共生的形式存在于體內(nèi)且機體一般表現(xiàn)為無癥狀，雖然該病毒的存在的范圍廣泛，但其作用機制在一定程度上說是一種腫瘤性病毒。有研究中通過使用序列特異性的引物結(jié)合PCR技術(shù)發(fā)現(xiàn)，在復發(fā)性口腔潰瘍前口腔病變患兒的唾液中發(fā)現(xiàn)了EB病毒的擴增[11]。這說明EB病毒的感染與口腔病變的發(fā)生有一定相關(guān)性，但EB病毒DNA在細胞中的存在形式仍需進一步的研究。還有學者研究發(fā)現(xiàn)[12]，復發(fā)性口腔潰瘍大多發(fā)生在舌背，患者的臨床表現(xiàn)非特異性且反復發(fā)生時間會長達3個月，EB病毒的感染與口腔潰瘍之間可能存在協(xié)同作用，目前對于口腔潰瘍病毒感染作為原發(fā)病因還是繼發(fā)現(xiàn)象仍需要進一步探討。

綜上所述，EB病毒的存在會導致機體血清炎癥因子和免疫功能指標水平升高，進而促進復發(fā)性口腔潰瘍前口腔病變的發(fā)生。因此，在診斷兒童復發(fā)性口腔潰瘍前口腔病變期間，可以通過檢測EB病毒DNA的表達完成早期診斷，同時還能減輕患者的經(jīng)濟壓力，為更加科學的掌握該種病癥發(fā)展情況以及研究發(fā)病機制奠定理論基礎并提供相應的技術(shù)支持。