尹 心 安，李 浩

(1.北京師范大學 環(huán)境學院，北京 100875； 2.北京師范大學 水環(huán)境模擬國家重點實驗室，北京 100875)

0 引 言

藻類是水生態(tài)系統(tǒng)的重要組成部分[1]，種間競爭會顯著影響藻類的群落結(jié)構(gòu)[2]。藻類不僅可以通過資源競爭影響自身的生長繁殖，還可以通過干擾競爭影響其他藻類的生長繁殖[3]。在多種藻類共同生存的水體中，種間競爭強度的變化，可能會引起某些藻的大量繁殖，從而導致水華的發(fā)生[4]。

藻類種間競爭受到營養(yǎng)鹽條件的影響[5-6]。當某種營養(yǎng)鹽成為限制性資源時，對其需求量最低的藻種將具有競爭優(yōu)勢[7]。環(huán)境中營養(yǎng)鹽比率低于或高于特定比例，將直接影響藻類的種群結(jié)構(gòu)[8]。當多個物種競爭相同營養(yǎng)鹽時，營養(yǎng)鹽利用水平高的競爭者會獲勝，其他物種會受到排斥[9]。以往研究為揭示營養(yǎng)鹽對藻類種間競爭的影響做出了突出的貢獻。然而，這些研究大多只關(guān)注營養(yǎng)鹽，較少考慮其他環(huán)境因子存在時的影響。

除了受到營養(yǎng)鹽的影響，藻類種間競爭也會由于多種環(huán)境因子之間的相互作用而出現(xiàn)復雜和難以預料的結(jié)果[10]。例如，溶解氧、CO2水平、pH等都有可能改變營養(yǎng)鹽在藻類種間競爭中的作用[11]。除上述環(huán)境因子之外，水體流速也可能成為影響藻類競爭的關(guān)鍵因子[12]。如澳大利亞墨累-達令(Murray-Darling)地區(qū)的河流經(jīng)常發(fā)生水華，通過減少水體滯留時間，可有效抑制有毒藻類的繁殖[13]。近年來，大量實驗也證明了流速會改變藻類競爭[14-17]。

然而，以往研究很少同時考慮營養(yǎng)鹽和流速這兩個因子對藻類種間競爭的影響。這兩種因素可以發(fā)生相互作用，流速可以改變藻類細胞周邊的營養(yǎng)鹽濃度，也可以改變藻類細胞結(jié)構(gòu)，進而影響藻類吸收營養(yǎng)鹽的速率。除此之外，藻類的生長時期可劃分為適應期、對數(shù)期、穩(wěn)定期和衰亡期。大多研究側(cè)重整個生長周期上環(huán)境因子對藻類種間競爭的影響。然而，在生長周期的不同階段，環(huán)境因子對藻類種間競爭的影響會有所不同。銅綠微囊藻和斜生柵藻是湖泊水體中常見的藻類，容易大量繁殖[18-19]。本次研究采用室內(nèi)實驗研究了流速和營養(yǎng)狀態(tài)的不同組合對銅綠微囊藻和斜生柵藻的種間競爭的影響，采用種間競爭指數(shù)作為參數(shù)，分析在生長周期的不同階段這兩個環(huán)境因子對藻類種間競爭優(yōu)勢、競爭強度和競爭重要性的影響。

1 材料和方法

1.1 藻種培養(yǎng)

本文以藍藻門的銅綠微囊藻和綠藻門的斜生柵藻為研究對象。從中國科學院水生生物研究所的淡水藻種庫(Freshwater Algae Culture Collection at the Institute of Hydrobiology，F(xiàn)ACHB)中獲得實驗所用的銅綠微囊藻(Microcystisaeruginosa，F(xiàn)ACHB-911)和斜生柵藻(Scenedesmusobliquus，F(xiàn)ACHB-12)。兩種微藻在藍綠色培養(yǎng)基BG11中培養(yǎng)。培養(yǎng)基經(jīng)過121℃高壓蒸汽滅菌30 min，所有實驗所需三角瓶等全部經(jīng)過高壓滅菌后使用。

兩種微藻分別保存在250 mL錐形瓶中。錐形瓶放置在培養(yǎng)箱中。藻種培養(yǎng)箱的溫度設為(26±1) ℃。藻類在光暗周期為12 h∶12 h的條件下進行培養(yǎng)，光暗周期由冷白色熒光燈以2 100 lux的強度照明。每天手動攪拌燒瓶兩次，以減少藻細胞的絮凝和結(jié)塊。達到指數(shù)生長階段后，將微藻轉(zhuǎn)移到新鮮培養(yǎng)基中進行實驗。所有培養(yǎng)和實驗均在無菌條件下進行。使用的所有玻璃器在10%硝酸中完全浸泡至少1 d，并在使用前用蒸餾水徹底沖洗。

1.2 實驗材料

銅綠微囊藻和斜生柵藻在BG-11藍綠色培養(yǎng)液中培養(yǎng)。培養(yǎng)液的pH用鹽酸或氫氧化鈉調(diào)至7.1±0.2。流速模擬裝置由旋轉(zhuǎn)擋板、雙反應器、電機和可變控制器組成(見圖1)。擋板由丙烯酸材料制成，與電機相連并沿水平方向旋轉(zhuǎn)。水被推到生物反應器內(nèi)的旋轉(zhuǎn)流中?？刂茡醢遛D(zhuǎn)速可以調(diào)節(jié)實驗所需的流速。該生物反應器的外徑為37 cm，內(nèi)徑為7 cm，中間寬度為15 cm，深度為40 cm，最大容量為41 L。生物反應器的外壁上有6個樣品出口，間距為5 cm。生物反應器以選定的速度旋轉(zhuǎn)一段時間，以達到穩(wěn)定狀態(tài)。

圖1 流速模擬裝置Fig.1 Velocity simulator

1.3 實驗設計

實驗條件包括不同水平的水流速度和不同水平的營養(yǎng)鹽濃度。湖泊是發(fā)生水華的主要水體。湖泊流速通常較低，很少湖泊的流速會超過0.2 m/s。水流速度的設置參考了已有的類似研究。基于室內(nèi)實驗結(jié)果，已有的研究發(fā)現(xiàn)銅綠微囊藻生長的最適流速為0.15 m/s，相對有利流速為低流速(0.05～0.12 m/s)，相對不利流速為高流速(0.20～0.30 m/s)[18-19]。本次研究的水流流速設置了5個水平：0，0.05，0.1，0.15，0.2 m/s。

通過調(diào)整旋轉(zhuǎn)速率，水槽旋轉(zhuǎn)30 min，以達到每種速度下的穩(wěn)定狀態(tài)。同時，本次研究的營養(yǎng)鹽濃度設置了2個水平：富營養(yǎng)和正常營養(yǎng)。通過在流速模擬裝置中添加含不同濃度氮磷的BG-11，可以得到所需的營養(yǎng)鹽濃度。富營養(yǎng)條件下的氮和磷濃度是BG11培養(yǎng)基的標準水平(CN=247.4 mg/L，CP=7.1 mg/L)，正常營養(yǎng)條件下的氮和磷濃度是BG11培養(yǎng)基標準水平的1%(CN=2.474 mg/L，CP=0.071 mg/L)[15]。此外，添加實驗藻種時兩種藻的初始細胞密度相同，為3.0×105cell/mL。用0.1 mol/L HCl或0.1 mol/L NaOH調(diào)整試驗溶液的pH，使其保持在7.5±0.1的范圍內(nèi)。所有處理設置3個平行實驗。實驗開始之后，每天取樣測量，直到藻類死亡為止，這樣可以確保兩種藻有完整的生長周期。將藻種生長周期分為4個階段：第一階段是初始適應時期，第二階段為對數(shù)時期，第三階段為穩(wěn)定時期，第四階段為衰亡時期。

本次研究分別進行了單藻培養(yǎng)實驗和混合藻培養(yǎng)實驗。在沒有種間競爭的情況下，為了評估水流速度和營養(yǎng)鹽濃度對各藻種的影響，進行了單一藻種培養(yǎng)實驗。在有種間競爭的情況下，為了評估水流速度和營養(yǎng)鹽濃度對兩個藻種的影響，進行了混合藻種培養(yǎng)實驗。從每個處理組中提取100 μL藻類懸浮液(每個處理組4次重復測量)，使用流式細胞儀對不同種類的藻類細胞進行計數(shù)。

2 計算方法

本次研究采用競爭優(yōu)勢[20]、競爭強度和競爭重要性[21]3個指標，闡述藻類種間競爭的特征。

2.1 競爭優(yōu)勢

競爭優(yōu)勢度是指在共培養(yǎng)過程中，銅綠微囊藻的最大細胞密度與斜生柵藻的最大細胞密度的log10轉(zhuǎn)化率。當計算值為正數(shù)或負數(shù)時，分別意味著銅綠微囊藻或斜生柵藻的競爭優(yōu)勢。

2.2 競爭強度

競爭強度的計算方法為

(1)

2.3 競爭重要性

競爭重要性的計算方法為

(2)

3 結(jié)果與討論

3.1 藻類種間競爭優(yōu)勢的變化

銅綠微囊藻對斜生柵藻的競爭優(yōu)勢受到營養(yǎng)鹽與流速之間相互作用的影響而變化(見圖2)。

圖2 不同營養(yǎng)條件下不同生長階段銅綠微囊藻對斜生柵藻的競爭優(yōu)勢(平均值±標準差)Fig.2 The competition dominance of Microcystis aeruginosa against Scenedesmus obliquus is expressed as the mean±standard deviation in different growth cycle under different nutrition conditions

銅綠微囊藻對斜生柵藻的競爭優(yōu)勢在生長周期各階段也存在差異。在富營養(yǎng)狀態(tài)下，在適應期和對數(shù)期內(nèi)，銅綠微囊藻對斜生柵藻的競爭優(yōu)勢不容易受到相對高流速的影響。在穩(wěn)定期和衰亡期內(nèi)，銅綠微囊藻對斜生柵藻的競爭優(yōu)勢容易受到相對高流速的影響(見圖2(a))。其中，在適應期內(nèi)，銅綠微囊藻對斜生柵藻的競爭優(yōu)勢低于1。在對數(shù)期內(nèi)，銅綠微囊藻對斜生柵藻的競爭優(yōu)勢隨著流速的增加從1.30逐漸減少至0.55。在穩(wěn)定期內(nèi)，銅綠微囊藻對斜生柵藻的競爭優(yōu)勢隨著流速的增加從1.68逐漸減少至0.12。在衰亡期內(nèi)，銅綠微囊藻對斜生柵藻的競爭優(yōu)勢隨著流速的增加而減小。

在正常營養(yǎng)狀態(tài)下銅綠微囊藻對斜生柵藻的競爭優(yōu)勢在生長周期各階段都容易受到相對高流速的影響(見圖2(b))。其中，在適應期內(nèi)，銅綠微囊藻對斜生柵藻的競爭優(yōu)勢低于1。銅綠微囊藻對斜生柵藻的競爭優(yōu)勢隨著流速的增加而緩慢減小。在對數(shù)期內(nèi)，銅綠微囊藻對斜生柵藻的競爭優(yōu)勢隨著流速的增加而逐漸減小。在穩(wěn)定期內(nèi)，銅綠微囊藻對斜生柵藻的競爭優(yōu)勢隨著流速的增加從1.00逐漸減小至0.20。在衰亡期內(nèi)，銅綠微囊藻對斜生柵藻的競爭優(yōu)勢隨著流速的增加從1.15逐漸減少至0.60。

生態(tài)學的一個研究熱點是厘清多種環(huán)境因素相互作用在藻類種間競爭中的作用。本文實驗結(jié)果表明，銅綠微囊藻對斜生柵藻的競爭優(yōu)勢受到兩方面的影響，分別是營養(yǎng)鹽和流速相互作用的影響以及生長周期各階段的影響。實驗結(jié)果表明相對高流速會營造不利于銅綠微囊藻生長的環(huán)境。這可能是因為銅綠微囊藻受到流速影響后，細胞會產(chǎn)生明顯的變形和破裂現(xiàn)象。此外，銅綠微囊藻具有囊泡結(jié)構(gòu)，能夠調(diào)節(jié)自身浮力。銅綠微囊藻很容易在靜止的湖泊中獲得競爭優(yōu)勢。然而，流速可以使水體中藻類混合均勻，會破壞銅綠微囊藻的競爭優(yōu)勢。實驗結(jié)果還表明富營養(yǎng)可以在某種程度上改善流速營造的不利環(huán)境。這可能是因為富營養(yǎng)增強了銅綠微囊藻對斜生柵藻的種間競爭優(yōu)勢。這和已有的研究結(jié)論一致，即富營養(yǎng)水體可以增強銅綠微囊藻對斜生柵藻的種間競爭優(yōu)勢。另外，有的研究還發(fā)現(xiàn)水體中氮、磷含量高時，銅綠微囊藻容易大量繁殖占據(jù)優(yōu)勢地位。相反，有的研究認為，銅綠微囊藻在中等和較低營養(yǎng)狀態(tài)下易占據(jù)競爭優(yōu)勢。這種情況可能是由于水體中除營養(yǎng)鹽濃度會對藻類的種間競爭產(chǎn)生影響外，還存在著其它環(huán)境因子對其產(chǎn)生影響。特別地，在特定環(huán)境因素下，一些藻類容易大量繁殖形成水華。

3.2 藻類種間競爭強度的變化

兩種藻的種間競爭強度受到營養(yǎng)鹽與流速之間相互作用的影響(見圖3)。

兩種藻的種間競爭強度在生長周期各階段存在差異。在富營養(yǎng)狀態(tài)下，在適應期內(nèi)，銅綠微囊藻容易受到相對高流速的影響。在對數(shù)期間內(nèi)，銅綠微囊藻容易受到相對低流速的影響，而斜生柵藻不容易受到相對低流速的影響。在穩(wěn)定期和衰亡期內(nèi)，兩種藻的種間競爭強度也容易受到流速的影響(見圖3(a)和圖3(b))。其中，在適應期內(nèi)，銅綠微囊藻的競爭強度小于0.2，斜生柵藻的競爭強度小于0。在對數(shù)期內(nèi)，銅綠微囊藻的競爭強度隨著流速的增大而先增大后減小，斜生柵藻的競爭強度大致隨著流速的增大逐漸增大。其中，銅綠微囊藻的競爭強度在流速為0.1 m/s的時候最大。在穩(wěn)定期內(nèi)，銅綠微囊藻的競爭強度隨著流速增大先增大后減小，斜生柵藻的競爭強度隨著流速的增大而增大。在衰亡期內(nèi)，銅綠微囊藻的競爭強度隨著流速的增大先增大后減小，斜生柵藻的競爭強度隨著流速的增大逐漸增大。

圖3 不同營養(yǎng)條件下不同生長階段兩種藻的競爭強度(平均值±標準差)Fig.3 The competition intensity of the two algae is expressed as the mean±standard deviation in different growth cycle under different conditions

在正常營養(yǎng)狀態(tài)下，對數(shù)期內(nèi)兩種藻的種間競爭強度容易受到相對高流速的影響。在穩(wěn)定期和衰亡期內(nèi)，銅綠微囊藻的競爭強度容易受到相對高流速的影響，斜生柵藻的競爭強度不容易受到相對高流速的影響(見圖3(c)和圖3(d))。其中，在適應期內(nèi)，銅綠微囊藻的競爭強度小于0.4，斜生柵藻的競爭強度小于0。在對數(shù)期內(nèi)，銅綠微囊藻的競爭強度隨著流速的增大而逐漸減小，斜生柵藻的競爭強度隨著流速的增大逐漸增大。其中，銅綠微囊藻的競爭強度在水體靜止的時候最大。在穩(wěn)定期內(nèi)，銅綠微囊藻的競爭強度隨著流速的增大逐漸減小，而斜生柵藻的競爭強度較不容易受到相對低流速的影響。

在衰亡期內(nèi)，銅綠微囊藻的競爭強度隨著流速的增大大致呈減小的趨勢，而斜生柵藻的競爭強度受到相對高流速的影響較小。

實驗結(jié)果表明，在水體流速相對較低時，銅綠微囊藻的競爭強度要大于斜生柵藻的競爭強度；在水體流速相對較高時，斜生柵藻的競爭強度要大于銅綠微囊藻的競爭強度。

3.3 藻類種間競爭重要性的變化

兩種藻的種間競爭重要性受到營養(yǎng)鹽與流速之間相互作用的影響(見圖4)。

圖4 不同營養(yǎng)條件下不同生長階段兩種藻的競爭重要性(平均值±標準差)Fig.4 The competition importance of the two algae is expressed as the mean±standard deviation in different growth cycle under different conditions

兩種藻的種間競爭重要性在生長周期各階段存在差異。在富營養(yǎng)狀態(tài)下，在適應期和對數(shù)期內(nèi)，兩種藻的種間競爭重要性不容易受到相對高流速的影響；在穩(wěn)定期和衰亡期內(nèi)，兩種藻的種間競爭強度容易受到相對高流速的影響(見圖4(a)和圖4(b))。其中，在適應期內(nèi)，兩種藻的競爭重要性很小。在對數(shù)期內(nèi)，銅綠微囊藻的競爭重要性隨著流速的增大先減小后增大，斜生柵藻的競爭重要性隨著流速的增大逐漸減小。在穩(wěn)定期內(nèi)，銅綠微囊藻的競爭重要性隨著流速的增大先減小后增大，斜生柵藻的競爭重要性隨著流速的增大逐漸減小。在衰亡期內(nèi)，兩種藻的種間競爭重要性隨著流速的增大先逐漸減少再逐漸增大。

在正常營養(yǎng)狀態(tài)下，在適應期內(nèi)，兩種藻的種間競爭重要性不易受到相對高流速的影響：在對數(shù)期內(nèi)，兩種藻的種間競爭重要性容易受相對高速的影響；在穩(wěn)定期內(nèi)，銅綠微囊藻的競爭重要性容易受到相對高流速的影響，而斜生柵藻的競爭重要性不容易受到相對高流速的影響。在衰亡期內(nèi)，兩種藻的競爭重要性不容易受到相對高流速的影響。其中，在適應期間，兩種藻的競爭重要性較小。在對數(shù)期間，銅綠微囊藻的競爭重要性隨著流速增大逐漸增大，斜生柵藻的競爭重要性隨著流速的增大而逐漸減小。在穩(wěn)定期間，銅綠微囊藻的競爭重要性隨著流速增大變化不明顯。在衰亡期間，兩種藻的種間競爭重要性隨著流速增大無明顯變化。

本次研究的實驗結(jié)果支持這樣的假設，即競爭在高度干擾的環(huán)境中仍然可以發(fā)揮重要的作用。這與有些研究結(jié)果相同，也就是環(huán)境脅迫雖然可以增加死亡率和減少生物量，但是其不一定降低種間競爭在構(gòu)建群落中的作用。但也有研究提出種間競爭對群落構(gòu)建的影響因環(huán)境梯度不同而異，從而隨干擾減少競爭所起作用呈增加趨勢，隨干擾增加競爭所起作用則呈減少趨勢。

本次研究利用室內(nèi)實驗，模擬了流速和營養(yǎng)狀態(tài)的不同組合對銅綠微囊藻和斜生柵藻種間競爭的影響。然而，天然河流環(huán)境復雜多變，很難通過實驗室全面模擬出來。這就導致實驗室中的研究成果應用到天然狀況下會出現(xiàn)一定程度的不足。未來還需要更多的相關(guān)研究，才能將實驗室中所得研究成果用于指導工程實踐。本研究的成果可以推進水動力條件對藻類種間競爭的有關(guān)研究，并為湖庫的藻華控制提供新思路。

4 結(jié) 論

水生態(tài)系統(tǒng)中不同藻類種群之間存在著廣泛的競爭。藻類種間競爭受到環(huán)境因素的影響。本文研究了在生長周期各階段內(nèi)，流速和營養(yǎng)狀態(tài)的不同組合對銅綠微囊藻和斜生柵藻的種間競爭影響。

(1) 藻類種間競爭不僅受到營養(yǎng)鹽和流速相互作用的影響，而且還受到生長周期各階段的影響。如果忽視藻類生長的階段，藻類種間競爭的研究結(jié)果可能出現(xiàn)偏差。

(2) 富營養(yǎng)狀態(tài)下，在對數(shù)期內(nèi)，銅綠微囊藻對斜生柵藻的競爭優(yōu)勢不容易受到高流速的影響；在穩(wěn)定期和衰亡期內(nèi)，其容易受到高流速的影響。正常營養(yǎng)狀態(tài)下，在生長周期各階段內(nèi)，銅綠微囊藻對斜生柵藻的競爭優(yōu)勢都容易受到高流速的影響。

(3) 富營養(yǎng)狀態(tài)下，在對數(shù)期內(nèi)，兩種藻的種間競爭強度容易受到高流速的影響；在穩(wěn)定期和衰亡期內(nèi)，其也容易受到高流速的影響。正常營養(yǎng)狀態(tài)下，在對數(shù)期內(nèi)，兩種藻的種間競爭強度容易受到高流速的影響；在穩(wěn)定期和衰亡期內(nèi)，銅綠微囊藻的競爭強度容易受到高流速的影響；斜生柵藻的競爭強度不容易受到高流速的影響。

(4) 營養(yǎng)鹽和流速相互作用可以改變藻類種間競爭中的優(yōu)勢物種。在流域管理或者水污染防治中，可以通過調(diào)控水體流速來預防和控制水華。