林 琳，齊曉冬，李永素，楊玉波，楊鳴華*，陳 毅，孔令義，王 莉

（1貴州茅臺酒股份有限公司，遵義 564501；2中國藥科大學(xué)天然活性組分與藥效重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，南京 211198；3中國貴州茅臺酒廠（集團(tuán)）有限責(zé)任公司，遵義 564501）

我國是世界最大的白酒產(chǎn)銷國，但是對酒糟的開發(fā)利用仍主要以飼料行業(yè)的原料或基料為主，產(chǎn)品附加值低。對酒糟缺乏研究是限制酒糟開發(fā)利用的一個重要因素。我國對酒糟成分的研究多集中在影響白酒風(fēng)味的揮發(fā)性成分[1]，而對于酒糟中難揮發(fā)性成分的研究有限。值得注意的是，酒糟自古就作為一味中藥被中醫(yī)應(yīng)用，具有悠久的藥用歷史?！侗静菥V目》記載：糯、秫、黍、麥，皆可蒸釀酒醋，熬煎餳飴，化成糟粕[2]。其中提到的糟粕就是酒糟。酒糟味咸、溫，無毒，主溫中冷氣，消食殺腥、去草菜毒、潤皮膚、調(diào)臟腑，能活血行經(jīng)止痛，用于罯撲損瘀血，浸洗凍瘡，敷蛇、蜂叮毒，可治傷折、惡血不散疼痛[3-4]。另一方面，因?yàn)獒劸七^程中微生物群發(fā)酵可能會產(chǎn)生各種各樣復(fù)雜的生物化學(xué)變化，使得酒糟具有潛在的化學(xué)成分多樣性和豐富性，值得深入研究。

為探索酒糟中潛在的活性成分，便于對其進(jìn)行后續(xù)研究和開發(fā)利用，對茅臺酒糟的難揮發(fā)性化學(xué)成分進(jìn)行了研究。實(shí)驗(yàn)共分離鑒定了21個化合物，分別為十五烷酸（1）、十六烷酸（2）、反式-2-癸烯酸（3）、十八酸正壬酯（4）、十八酸乙酯（5）、亞油酸乙酯（6）、十二烷酸（7）、1，3-二辛酰基-2-亞油甘油（8）、環(huán)（L-苯丙氨酸-L-脯氨酸）（9）、環(huán)（脯氨酸-亮氨酸）（10）、3，6-雙（2-甲基丙基）-2，5-哌嗪二酮（11）、4-羥基苯乙醇（12）、2，4-二羥基苯甲酸（13）、豆甾醇（14）、2-呋喃甲酸（15）、纈氨酸（16）、L-丙氨酰-L-脯氨酸（17）、二氫槲皮素（18）、5，7，3'，4'-四羥基二氫黃酮（19）、槲皮素（20）、柚皮素（21）。1 ～ 21為首次從酒糟中分離得到。

1 材 料

分析型高效液相色譜儀、Zorbax SB-C18（4.6 mm × 250 mm, 5 μm）色譜柱、Agilent 1100 Series LC/MSD Trap 質(zhì)譜儀（美國Agilent 公司）；制備型高效液相色譜儀、Shim-Pack RP-C18型色譜柱（4.6 mm × 250 mm）（日本Shimadzu 公司）；核磁共振波譜為600 MHz核磁共振波譜儀（德國Bruker公司）；旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀（日本Eyela 公司）；ODS、Sephadex LH-20 填料（美國Pharmacia 公司）；薄層色譜硅膠板GF254（青島海洋化工廠）；實(shí)驗(yàn)其他試劑均為市售分析純（江蘇漢邦科技有限公司）和色譜純（美國天地化學(xué)試劑有限公司）。

酒糟樣品來源于貴州茅臺鎮(zhèn)醬香型酒七輪次酒丟糟5 kg。

2 提取與分離

茅臺酒糟5 kg，用75%乙醇超聲提取3 次，合并提取液后，減壓濃縮得到總浸膏。將其分散于水中，再依次分別用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取3 次后減壓濃縮，分別得石油醚部位、乙酸乙酯部位和正丁醇部位浸膏。

茅臺酒糟石油醚部位（46.6 g）使用硅膠柱色譜分離，用石油醚/乙酸乙酯（100∶1 ～ 70∶1）梯度洗脫后，TLC 跟蹤檢測，得到Fr.1 ～ Fr.3共3個組分。組分Fr.1 進(jìn)行ODS 分離，合并得到3 個組分，針對組分Fr. 1-1 進(jìn)行Pre-HPLC，采用85%甲醇等度洗脫，檢測波長230 nm，得到化合物1（2.3 mg，tR=31.91 min）和2（3.0 mg，tR= 10.21 min），對組分Fr.1-2 進(jìn)行Pre-HPLC，采用81%甲醇等度洗脫，檢測波長230 nm，得到化合物3（2.0 mg，tR= 15.09min），組分Fr. 2 進(jìn)行ODS 分離，合并得到2 個組分，針對Fr.2-1組分進(jìn)行Pre-HPLC，采用80%甲醇等度洗脫，檢測波長230 nm，得到化合物4（4.4 mg，tR= 32.53 min）和5（3.5 mg，tR= 28.89 min）；組分Fr.3進(jìn)行ODS分離，合并得到3個組分，對Fr.3-1 組分進(jìn)行Pre-HPLC，采用76%甲醇等度洗脫，檢測波長254 nm，得到化合物6（2.6 mg，tR= 29.19 min）和7（3.1 mg，tR= 18.31 min），對Fr.3-2組分進(jìn)行ODS 分離，采用72%甲醇等度洗脫，檢測波長230 nm，得到化合物8（5.2 mg，tR= 25.46 min）。

茅臺酒糟乙酸乙酯部位，硅膠柱色譜分離，用石油醚/乙酸乙酯梯度洗脫后，TLC 跟蹤檢測，得到Fr. 4 ～ Fr. 9 共6 個組分。Fr. 4 組分進(jìn)行Sephadex LH-20 凝膠柱色譜，以甲醇-二氯甲烷（1∶1）為洗脫劑分離得到Fr. 4-1、Fr. 4-2、Fr. 4-3 組分，對Fr. 4-2組分進(jìn)行Pre-HPLC，采用50%甲醇等度洗脫，檢測波長230 nm，得到化合物9（8.2 mg，tR= 20.21 min）、化合物10（4.5 mg，tR= 22.35 min）和化合物11（2.0 mg，tR= 25.27 min），對Fr. 4-3 組分Pre-HPLC，采用52%甲醇等度洗脫，檢測波長230 nm，得到化合物12（4.5 mg，tR= 26.52 min）；組分Fr.5進(jìn)行ODS 分離，合并得到2個組分，針對組分Fr.5-2 進(jìn)行Pre-HPLC，采用60%甲醇等度洗脫，檢測波長230 nm，得到化合物13（6.2 mg，tR= 11.51 min）和化合物14（3.9 mg，tR= 25.63 min）；組分Fr.6 進(jìn)行ODS 分離，合并得到2 個組分，針對Fr.6-2 組分進(jìn)行Pre-HPLC，采用65%甲醇等度洗脫，檢測波長230 nm，得到化合物15（4.7 mg，tR= 23.56 min）和化合物16（3.3 mg，tR= 28.66 min）；組分Fr.7 進(jìn)行ODS 分離，合并得到兩個組分，對組分Fr.7-1 進(jìn)行Pre-HPLC，采用62%甲醇等度洗脫，檢測波長230 nm，得到化合物17（3.6 mg，tR= 23.88 min），對組分Fr7-2 進(jìn)行Pre-HPLC，采用50%甲醇等度洗脫，檢測波長230 nm，得到化合物18（2.8 mg，tR=18.63 min）；組分Fr.8 進(jìn)行ODS 分離，合并得到兩個組分，對組分Fr.8-2進(jìn)行Pre-HPLC，采用50%甲醇等度洗脫，檢測波長230 nm，得到化合物19（4.7 mg，tR= 14.71 min）化合物20（3.7 mg，tR=23.71 min），組分Fr.9 進(jìn)行ODS 分離，合并得到兩個組分，對組分Fr.9-2進(jìn)行Pre-HPLC，采用45%甲醇等度洗脫，檢測波長230 nm，得到化合物21（8.6 mg，tR= 28.12 min）。

3 結(jié)構(gòu)鑒定

化合物1 白色粉末；ESI-MSm/z242.2 [M+H]+，分子式為C15H30O2。1H NMR(CDCl3，500 MHz)δ:11.87(1H，s，COOH)，1.28(26H，m，H-2～H-14)，0.88(3H，t，J= 8.1 Hz，H-15)；13C NMR(CDCl3，125 MHz)δ：179.1(C＝O)，34.3(C-2)，32.8(C-13)，30.35 ～ 28.39(C-4 ～ C-12)，24.89(C-3)，22.91(C-14)，14.33(C-1)?；衔锖舜艛?shù)據(jù)與參考文獻(xiàn)[4]比對一致，確定化合物1為十五烷酸。

化合物2 白色固體；ESI-MS：m/z256.7 [M+H]+，分子式為C16H32O2。1H NMR(CDCl3，500 MHz)δ: 2.35(2H，t，J= 7.2 Hz，H-2)，1.64(2H,m，H-3)，1.30(24H，m，H-4～H-15)，0.88(3H,t，J=7.2 Hz，H-16)；13C NMR(CDCl3，125 MHz)δ: 179.6(C-1)，34.9(C-2)，31.9(C-14)，31.6(C-4)，29.3(C-5)，29.1(C-6)，29.0(C-7)，28.9(C-8)，28.8(C-9)，28.6(C-10)，28.5(C-11)，28.4(C-12)，28.3(C-13)，24.7(C-3)，22.1(C-14)，14.3(C-16)?；衔锖舜艛?shù)據(jù)與參考文獻(xiàn)[5]比對一致，確定化合物2為十六烷酸。

化合物3 無色油狀物；ESI-MS：m/z171.1[M+H]+，分子式為C10H18O2。1H NMR(CDCl3，500 MHz)δ: 7.09(1H，m，H-3)，5.82(1H，d，J= 10.0 Hz，H-2)，2.23(2H，m，H-4)，1.47(2H，m，H-5)，1.19-1.40(8H，m，H-6～ H-9)，0.88(3H，t，J= 8.0 Hz，H-10)；13C NMR(CDCl3，125 MHz) δ: 170.5(C-1)，150.9(C-3),122.8(C-2)，33.4(C-4)，31.3(C-5)，29.7(C-6)，29.6(C-7)，29.1(C-8)，22.7(C-9)，14.4(C-10)。化合物核磁數(shù)據(jù)與參考文獻(xiàn)[6]比對一致，確定化合物3為反式-2-癸烯酸。

化合物4 無色油狀物；ESI-MS：m/z410.7[M+H]+，分子式為C27H54O2。1H NMR(CDCl3，500 MHz)δ: 4.13(2H，t，J= 8.4 Hz，H-1')，2.38(2H，t，J= 8.3 Hz，H-2)，1.28(44H，m，H3～ H17，H2'～H8')，1.02(3H，s，H-9')，0.91(3H，s，H-18')；13C NMR(CDCl3，125 MHz)δ: 173.6(C-1)，66.1(C-1')，29.8(C-2 ～ C-17)，29.6(C2' ～ C-8')，14.3(C-18)，14.1(C-9')?；衔锖舜艛?shù)據(jù)與參考文獻(xiàn)[7]比對一致，確定化合物4為十八酸正壬酯。

化合物5 無色油狀物；ESI-MS：m/z313.4[M+H]+，分子式為C20H40O2。1H NMR(CDCl3，500 MHz)δ: 4.11(2H，m，OCH2CH3)，2.28(2H，m，H-2)，1.62(2H，t，H-15)，1.31( 3H，t，J= 7.0 Hz，-OCH2CH3)，1.24 ～ 1.33(28H，m，H-3 ～ H-14)，0.88(3H，t，H-16)；13C NMR(CDCl3，125 MHz)δ: 173.9(C-1)，62.3(C-1')，25.1 ～ 33.9(C-2 ～ C-17)，14.3(C-18)，14.1(C-2')?；衔锖舜艛?shù)據(jù)與參考文獻(xiàn)[8]比對一致，確定化合物5為十八酸乙酯。

化合物6 無色油狀物；ESI-MS：m/z308.4[M+H]+，分子式為C20H36O2。1H NMR(CDCl3，500 MHz)δ: 5.48(2H，m，H-9)，5.29(2H，m，H-10，H-12，H-13)，3.57(2H，m，J= 7.4 Hz，H-11)，2.33(2H，t，H-2)，2.07(4H，q，J= 7.1 Hz，H-8，H-14)，1.25-1.29(14H，q，J= 7.1 Hz，H-3 ～ H7，H-15 ～ H-17)，0.87( 3H，m，H-18)，4. 13( 2H，q，J= 7. 0 Hz，-OCH2CH3) ,1. 29( 3H，t，J= 7. 0 Hz，-OCH2CH3)；13C NMR(CDCl3，125 MHz)δ: 174.2(C-1)，130.3(C-9)，130.1(C-13)，127.8(C-10)，127.7(C-12)，62.3(C-1')，25.1 ～ 33.2(C-2 ～ C-8)，25.5(C-11)，27.1(C-14)，29.1(C-15)，32.2(C-16)，22.5(C-17)，14.1(C-18)，14.0(C-2')?；衔锖舜艛?shù)據(jù)與參考文獻(xiàn)[9]比對一致，確定化合物6為亞油酸乙酯。

化學(xué)物7 白色固體；ESI-MS：m/z200.1 [M+H]+，分子式為C12H24O2。1H NMR(CDCl3，500 MHz)δ: 2.52(2H，t，H-2)，1.80(2H，m，H-3)，1.26(16H，s，H-4 ～ H-11)，0.87(3H，t，H-12)；13C NMR(CDCl3，125 MHz)δ: 178.4(C-1)，33.4(C-2)，32.8(C-3)，31.3(C-4)，28.1(C-5)，27.4(C-6)，26.6(C-7)，25.9(C-8)，24.8(C-9)，23.6(C-10)，22.5(C-11)，14.5(C-12)?；衔锖舜艛?shù)據(jù)與參考文獻(xiàn)[10]比對一致，確定化合物7為十二烷酸。

化合物8 無色油狀物；ESI-MS：m/z607.3[M+H]+，分子式為C29H35O14。1H NMR(CDCl3，500 MHz)δ: 6.88(1H，m，H-14)，4.75(2H，m，H-29)，2.32(6H，m，H-15，H-27，H-31,)，1.66(2H，m，H-32)，1.51(4H，m，H-12，H-28)，1.33(6H，m，H-16，H-26，H-33)，1.26(20H，m，H-10，H-11，H-16，H-17，H-22，H-25，H-33 ～ H-36)，0.88(6H，t，J= 8.0 Hz，H-24，H-37)；13C NMR(CDCl3，125 MHz)δ: 173.9(C-1')，173.7(C-1'')，173.1(C-1)，130.5(C-9)，130.4(C-13)，127.8(C-10)，127.7(C-12)，25.5 ～ 33.1(C-2' ～ C-7')，25.3 ～ 22.8(C-2'' ～ C-7'')，25.2～30.1(C-2 ～ C-8)，22.8 ～ 31.9(C-14 ～ C-17)?；衔锖舜艛?shù)據(jù)與參考文獻(xiàn)[11]比對一致，確定化合物8 為1，3-二辛酰基-2-亞油甘油。

化合物9 白色固體；ESI-MS：m/z489.1 [M+H]+，分子式為C28H32N4O4。1H NMR(DMSO-d6，500 MHz)δ: 7.97(1H，m，-NH)，7.24(4H，m，H-5，H-6)，7.23(1H，m，H-7)，4.32(1H，t，J= 5.3 Hz，H-2)，4.32(1H，dd，J= 8.8，7.1 Hz，H-2')，3.41(1H，m，H-5')，3.28(1H，m，H-5'')，3.12(1H，dd，J= 14.1，5.0Hz，H-3a)，3.04(1H，dd，J= 14.1，5.0 Hz，H-3b)，2.01(1H，m，H-3')，1.73(2H，m，H-4')，1.43(1H，m，H-3'')；13C NMR(DMSO-d6，125 MHz)δ: 169.5(C-1')，165.5(C-1)，137.7(C-4)，130.2(C-5)，128.4(C-6)，126.8(C-7)，58.9(C-2')，56.2(C-2)，45.0(C-5')，35.8(C-3)，28.2(C-3')，22.4(C-4')?；衔锖舜艛?shù)據(jù)與參考文獻(xiàn)[12]比對一致，確定化合物9 為環(huán)(L-苯丙氨酸-L-脯氨酸)。

化合物10 白色粉末；ESI-MS：m/z211.3 [M+H]+，分子式為C11H18N2O2。1H NMR(CDCl3，500 MHz)δ: 6.14(1H，m，-NH)，4.08(1H，t，J= 8.1 Hz，H-2)，3.94(1H，dd，J= 8.8 Hz，3.1 Hz，H-2')，3.48(2H，m，H-5)，2.31(1H，m，H-3a)，2.02(1 H，m，H-3b)，2.04(1H，m，H-3'a)，2.01(1H，m，H-4a)，1.88(1H，m，H-4b)，1.71(1H，m，H-4')，1.47(1H，dd，J=9.1 Hz，4.8 Hz，H-3'b)，0.92(3H，d，J= 6.6 Hz，H-5')，0.89(3H，d，J= 7.0 Hz，H-6')；13C NMR(CDCl3，125 MHz)δ: 171.2(C-1)，166.4(C-1')，59.3(C-2)，53.7(C-2')，45.8(C-5)，38.9(C-3')，28.6(C-3)，24.1(C-4')，23.6(C-5')，22.3(C-4)，21.8(C-6')。化合物核磁數(shù)據(jù)與參考文獻(xiàn)[13]比對一致，確定化合物10為環(huán)（脯氨酸-亮氨酸）。

化合物11 白色粉末；ESI-MS：m/z227.1 [M+H]+，分子式為C12H22O2N2。1H NMR(DMSO-d6，500 MHz)δ: 8.04(1H，m，-NH),7.17(1H，m，-NH)，4.17(1H，d，H-2)，3.67(1H，d，H-2')，3.10(1H，t，H-3)，1.78(1H，m，H-3')，1.56(1H，m，H-4)，1.39(1H，m，H-4')，0.91(3H，s，H-5)，0.93(3H，s，H-5')，0.86(3H，s，H-6)，0.90(3H，s，H-6')；13C NMR(DMSO-d6，125MHz)δ: 173.3(C-1')，173.1(C-1)，58.7(C-2)，58.6(C-2')，41.2(C-3)，40.9(C-3')，24.4(C-4)，24.3(C-4')，22.8(C-5')，22.7(C-6')，22.6(C-6)，22.5(C-5)?；衔锖舜艛?shù)據(jù)與參考文獻(xiàn)[14]比對一致，確定化合物11為3,6-雙(2-甲基丙基)-2,5-哌嗪二酮。

化合物12 白色粉末；ESI-MS：m/z139.1 [M+H]+，分子式為C8H10O2。1H NMR(DMSO-d6，500MHz)δ: 9.06(1H，s，4-OH)，6.98(2H，d，J= 7.1 Hz，H-3，H-5)，6.68(2H，d，J= 7.1 Hz，H-2，H-6)，4.58(1H，s，2'-OH)，3.63(2H，t，J= 8.2 Hz，H-2')，2.87(2H，t，J= 8.2 Hz，H-1')；13C NMR(DMSO-d6，125 MHz)δ:154.7(C-4)，130.9(C-1)，130.6(C-2)，130.6(C-6)，115.9(C-3)，115.8(C-5)，64.1(C-2')，38.6(C-1')?；衔锖舜艛?shù)據(jù)與參考文獻(xiàn)[15]比對一致，確定化合物12為4-羥基苯乙醇。

化合物13 白色粉末；ESI-MS：m/z155.2 [M+H]+，分子式為C7H6O4。1H NMR(DMSO-d6，500 MHz)δ: 16.47(1H，s，-COOH)，12.04(1H，s，4-OH)，10.10(1H，s，2-OH)，6.40(1H，s，H-3)，7.83(1H，d，J= 6.8 Hz，H-6)，6.47(1H，d，J= 6.8 Hz，H-5)；13C NMR(DMSO-d6，125 MHz)δ: 168.3(C-7)，150.1(C-4)，144.6(C-2)，121.1(C-1)，107.9(C-6)，103.5(C-5)，102.8(C-3)?；衔锖舜艛?shù)據(jù)與參考文獻(xiàn)[16]比對一致，確定化合物13為2,4-二羥基苯甲酸。

化合物14 白色針晶；ESI-MS：m/z413.3 [M+H]+，分子式為C29H48O。1H NMR(CDCl3，500 MHz)δ: 5.32(1H，s，H-6)，3.50(1H，m，H-3)，1.09(3H，s，H-19)，0.92(3H，s，H-21)，0.85(3H，d，J= 6.5 Hz，H-29)，0.84(3H，d，J= 7.0 Hz，H-26)，0.83(3H，d，J= 7.0 Hz，H-27)；13C NMR(CDCl3，125 MHz)δ:140.8(C-5)，138.3(C-22)，129.3(C-23)，121.7(C-6)，71.8(C-3)，56.9(C-14)，56.0(C-17)，51.2(C-24)，50.1(C-9)，42.3(C-13)，42.1(C-4)，40.5(C-20)，39.7(C-12)，37.3(C-1)，36.5(C-10)，31.9(C-25)，31.7(C-2)，30.9(C-7)，28.9(C-16)，25.4(C-28)，24.4(C-15)，21.2(C-21)，21.0(C-11)，19.8(C-26)，19.4(C-19)，19.0(C-27)，12.3(C-29)，12.0(C-18)?；衔锖舜艛?shù)據(jù)與參考文獻(xiàn)[17]比對一致，確定化合物14為豆甾醇。

化合物15 白色針晶；ESI-MS：m/z112.0 [M+H]+，分子式為C5H4O3。1H NMR(CDCl3，500 MHz)δ:7.65(1H，s，H-3)，7.35(1H，m，H-5)，6.57(1H，t，J=8.5 Hz，H-4)；13C NMR(CDCl3，125 MHz)δ: 163.4(C-6)，147.8(C-5)，143.7(C-2)，120.1(C-3)，112.3(C-4)?；衔锖舜艛?shù)據(jù)與參考文獻(xiàn)[18]比對一致，確定化合物15為2-呋喃甲酸。

化合物16 白色粉末；白色粉末。ESI-MS：m/z117.1 [M+H]+，分子式為C5H11O2N。1H NMR(CDCl3，500 MHz)δ: 3.59(1H，d，J= 7.1 Hz，H-2)，2.26(1H，m，H-3)，1.02(3H，d，J= 7.0 Hz，H-4)，0.97(3H，d，J= 7.1 Hz，H-5)；13C NMR(CDCl3，125 MHz)δ: 175.5(C-1)，60.3(C-2)，29.0(C-3)，17.9(C-4)，16.6(C-5)。以上波譜數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[19]一致，確定化合物16為纈氨酸。

化合物17 白色粉末；ESI-MS：m/z186.3 [M+H]+，分子式為C8H14O3N2。1H NMR(CDCl3，500MHz)δ: 8.76(2H，s，-NH2)，4.33(1H，d，J= 11.5 Hz，H-2)，3.67(2H，m，H-7)，3.51(2H，d，J= 8.3 Hz，H-5)，2.33(2H，m，H-3)，2.02(2H，d，J= 8.1 Hz，H-4)，1.27(3H，s，H-8)；13C NMR(CDCl3，125 MHz)δ:175.9(C-1)，173.3(C-6)，66.6(C-2)，49.9(C-5)，47.7(C-7)，28.6(C-3)，24.5(C-4)，17.1(C-8)。以上波譜數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[20]一致，確定化合物17 為L-丙氨酰-L-脯氨酸。

化合物18 白色粉末；ESI-MS：m/z305.3 [M+H]+，分子式為C15H12O7。1H NMR(DMSO-d6，500 MHz)δ: 12.05(1H，s，5-OH)，10.29(1H，s，7-OH)，9.48(1H，s，4'-OH)，9.46(1H，s，5'-OH)，6.78(1H，d，J= 8.1 Hz，H-5')，6.67(1H，d，J= 2.0 Hz，H-2')，6.65(1H，dd，J= 2.1 Hz，2.4 Hz，H-6')，6.46(1H，H-3')，6.06(1H，d，J= 2.2 Hz，H-8)，5.95(1H，d，J=2.1 Hz，H-6)，5.51(1H，d，J= 11.5 Hz，H-2)，5.44(1H，d，J= 11.5 Hz，H-3)；13C NMR(DMSO-d6，125 MHz)δ: 196.9(C-3)，166.6(C-1)，164.9(C-7)，163.8(C-6)，146.2(C-5)，145.9(C-4)，129.0(C-10)，120.0(C-15)，116.2(C-14)，114.2(C-13)，100.6(C-9)，95.1(C-12)，94.6(C-11)，87.4(C-2)，71.9(C-8)?；衔锖舜艛?shù)據(jù)與參考文獻(xiàn)[21]比對一致，確定化合物18為二氫槲皮素。

化合物19 白色粉末；ESI-MS：m/z311.2 [M+Na]+，分子式為C15H12O6。1H NMR(DMSO-d6，500 MHz)δ: 12.05(1H，s，5-OH)，10.29(1H，s，7-OH)，9.48(1H，s，4'-OH)，9.46(1H，s，5'-OH)，6.63(1H，d，J= 2.0 Hz，H-2')，6.58(1H，dd，J= 2.1 Hz，2.4 Hz，H-6')，6.41(1H，H-3')，6.12(1H，d，J= 2.2 Hz，H-8)，5.91(1H，d，J= 2.1 Hz，H-6)，5.51(1H，t，J= 7.1Hz，H-2) 5.35(1H，dd，J= 17.0 Hz，3.0 Hz，H-3b)，3.12(1H，dd，J= 17.0 Hz，3.0 Hz，H-3a)；13C NMR(DMSO-d6，125 MHz)δ: 179.3(C-3)，166.5(C-6)，163.3(C-4)，161.5(C-13)，159.0(C-8)，158.5(C-1)，135.4(C-2)，132.3(C-11)，123.3(C-15)，122.8(C-10)，116.1(C-12)，105.7(C-9)，104.1(C-14)，100.1(C-5)，94.8(C-7)?；衔锖舜艛?shù)據(jù)與參考文獻(xiàn)[22]比對一致，確定鑒定化合物19 為5，7，3'，4'-四羥基二氫黃酮。

化合物20 淡黃色粉末；ESI-MS：m/z302.4[M+H]+，分子式為C15H10O7。1H NMR(DMSO-d6，500 MHz)δ: 12.05(1H，s，5-OH)，10.29(1H，s，7-OH)，10.68(1H，s，3-OH)，9.48(1H，s，4'-OH)，9.46(1H，s，5'-OH)，7.62(1H，d，J= 2.2 Hz，H-2')，7.48(1H，dd，J= 8.3 Hz，2.2 Hz，H-6')，6.81(1H，d，J=8.2 Hz，H-3')，6.45(1H，d，J= 2.1 Hz，H-8)，6.14(1H，d，J= 2.1 Hz，H-6)；13C NMR(DMSO-d6，125 MHz)δ: 176.6(C-4)，164.8(C-7)，161.8(C-9)，156.8(C-5)，148.3(C-4')，147.2(C-2)，145.9(C-3')，136.5(C-3)，122.5(C-1')，120.2(C-6')，116.4(C-5')，115.3(C-2')，103.1(C-10)，98.2(C-6)，93.1(C-8)?；衔锖舜艛?shù)據(jù)與參考文獻(xiàn)[23]比對一致，確定化合物20為槲皮素。

化合物21 白色針狀結(jié)晶；ESI-MS：m/z272.1 [M+H]+，分子式為C15H12O5。1H NMR(DMSOd6，500 MHz)δ: 12.83(1H，s，5-OH)，7.55(2H，d，J=8.0 Hz，H-2'，H-6')，7.22(2H，dd，H-3'，H-5')，6.49(1H，d，J= 4.0 Hz，H-8)，6.18(1H，s，H-6)，5.51(1H，m，J= 4.0 Hz，H-2)，5.32(2H，s，H-6，H-8)，3.33(1H，m，J= 12.0 Hz，H-3a)，2.90(1H，m，J=4.0 Hz，H-3b)；13C NMR(DMSO-d6，125 MHz)δ:196.5(C-4)，168.6(C-7)，165.2(C-5)，164.0(C-9)，159.5(C-4')，129.8(C-1')，128.9(C-2'，C-6')，116.4(C-3'，C-5')，102.8(C-10)，97.2(C-6)，96.11(C-8)，79.7(C-2)，43.3(C-3)?；衔锖舜艛?shù)據(jù)與參考文獻(xiàn)[24]比對一致，確定化合物21為柚皮素。

4 討 論

酒糟自古就被中醫(yī)應(yīng)用到多種病癥中，具有幫助消化、溫寒補(bǔ)虛、提神解乏、解渴消暑、活血通經(jīng)、潤膚、殺蟲等功效。釀酒過程中微生物群發(fā)酵可能會產(chǎn)生各種各樣復(fù)雜的生物化學(xué)變化，使得酒糟具有潛在的化學(xué)成分多樣性和豐富性。為探索酒糟中潛在的活性成分，便于對其進(jìn)行后續(xù)研究和開發(fā)利用，本研究對茅臺酒糟的難揮發(fā)性化學(xué)成分進(jìn)行了研究。

化合物1 ～ 21均是從酒糟中首次分離、純化得到的單體化合物，其中由苯丙氨酸和脯氨酸形成的環(huán)四肽，脯氨酸與亮氨酸形成的二酮哌嗪類化合物均報道為微生物代謝產(chǎn)物，故推測為發(fā)酵過程中產(chǎn)生的。

本研究分離的化合物多數(shù)都具有一定的藥理作用報道，且部分與古籍記載的酒糟功效相一致。十五烷酸可以抑制白色念珠菌和肺炎克雷伯菌等[25]，環(huán)（脯氨酸-亮氨酸）和環(huán)（脯氨酸-苯丙氨酸）可以抑制多種細(xì)菌生長，如能抑制霍亂弧菌毒力因子的產(chǎn)生[26]，4-羥基苯乙醇對金黃色葡萄球菌和大腸埃希菌有抗菌作用[27]，這說明酒糟可能具有一定的抑菌作用。環(huán)二肽類化合物還具有免疫調(diào)節(jié)、心腦血管保護(hù)等生物活性[24]，豆甾醇可通過競爭腸道吸收抑制膽固醇和降低血清膽固醇含量的吸收，具有抗氧化、降血糖及甲狀腺抑制特性[28]。這些相關(guān)的報道說明酒糟對心血管系統(tǒng)方面的疾病有一定的輔助治療作用。二氫槲皮素具有較強(qiáng)的抗氧化特性[23]、調(diào)節(jié)酶活[29]等多種生物活性，槲皮素和柚皮素具有抗氧化活性[30]，十六烷酸可促進(jìn)正確表皮形態(tài)的產(chǎn)生，維護(hù)表皮屏障[31]，亞油酸乙酯可以抑制小鼠B16F10 細(xì)胞黑色素生成[32]，這些文獻(xiàn)表面酒糟具有一定的護(hù)膚功效。

隨著人們對天然、綠色、有機(jī)產(chǎn)品需求的不斷增加，從酒糟中提取有益成分用于醫(yī)藥、保健品、化妝品等領(lǐng)域的開發(fā)和利用已逐漸成為可能。這不僅可以實(shí)現(xiàn)資源再利用，減少環(huán)境污染，還可以為企業(yè)帶來更多的商業(yè)機(jī)會和利潤。值得一提的是，目前酒糟提取技術(shù)已經(jīng)不斷改進(jìn)，已經(jīng)出現(xiàn)了多種高效、安全、可持續(xù)的提取方法，使得酒糟中的有益成分得以更加充分地利用。因此，酒精飲料生產(chǎn)企業(yè)可以通過技術(shù)創(chuàng)新和產(chǎn)業(yè)升級，將廢棄的酒糟轉(zhuǎn)化為價值，實(shí)現(xiàn)良性循環(huán)，同時也可以為人們的身體健康和環(huán)境保護(hù)做出積極貢獻(xiàn)。本研究通過對茅臺酒糟化學(xué)成分進(jìn)行系統(tǒng)研究，可以為進(jìn)一步利用酒糟以及開發(fā)高附加值產(chǎn)品提供研究基礎(chǔ)和思路。