范俊鋒 周 艷 吳雪茹 嚴(yán)春霞

（廣州中醫(yī)藥大學(xué)第三附屬醫(yī)院藥學(xué)部，廣東 廣州 510378）

凝膠貼膏系指原料藥物與適宜的親水性基質(zhì)混勻后涂布于背襯材料上制成的貼膏劑[1]。與傳統(tǒng)糊劑、橡膠膏劑相比，具有載藥量大、使用方便、刺激性小、安全性高、保濕性好、透皮吸收率高及用藥依從性高等顯著優(yōu)點(diǎn)[2-4]。它能防止肝臟首過效應(yīng)，降低胃腸刺激，減少給藥次數(shù)，提高患者的依從性，可以作為傳統(tǒng)橡皮膏、黑膏藥的替代品，成為近年來的研究熱點(diǎn)和焦點(diǎn)[5]。通絡(luò)止痛貼膏是廣州中醫(yī)藥大學(xué)第三附屬醫(yī)院治療痛癥的臨床經(jīng)驗(yàn)方，主要由三棱、莪術(shù)、姜黃、琥珀、乳香、沒藥、薄荷腦、薄荷油、冰片、松節(jié)油等組成，具有活血通絡(luò)、破氣止痛、化瘀散結(jié)的功效，臨床上用于治療癌癥等引起的身痛、骨痛、關(guān)節(jié)痛等痛癥，效果顯著，深受患者喜愛。該方以往以傳統(tǒng)中藥貼敷制劑應(yīng)用于臨床，在使用過程中有不易控制劑量、易污染衣物、不便儲(chǔ)存等缺點(diǎn)[6]，故將其研制成凝膠貼膏。為控制通絡(luò)止痛貼膏的質(zhì)量，本文采用薄層色譜法（TLC）對(duì)方中三棱、姜黃、琥珀和冰片進(jìn)行鑒別，并對(duì)其進(jìn)行穩(wěn)定性考察。

1 儀器與試藥

1.1 儀器 KS-150EI 型超聲波清洗機(jī)（寧波海曙科生超聲波設(shè)備有限公司）；WFH-203B 三用紫外分光儀（上海精科實(shí)業(yè)有限公司）；MSE125P-OCE-DU 分析天平[賽多利斯科學(xué)儀器（北京）有限公司]；LHS-150SC 型恒溫恒濕培養(yǎng)箱（上海一恒科學(xué)儀器有限公司）；MTC-250 藥品穩(wěn)定性試驗(yàn)箱（上海三騰儀器有限公司）；CZY-G 初粘性測(cè)試儀（濟(jì)南蘭光機(jī)電技術(shù)有限公司）；DHG-9140 型電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱（上海精宏實(shí)驗(yàn)設(shè)備有限公司）；LRH-70 生化培養(yǎng)箱（上海一恒科學(xué)儀器有限公司）；MIR-150A 霉菌培養(yǎng)箱（上海三騰儀器有限公司）；BOS-150 干熱滅菌器（上海三騰儀器有限公司）；持粘力測(cè)試裝置（自制）；剝離強(qiáng)度測(cè)試裝置（自制）。

1.2 試藥 通絡(luò)止痛傷貼膏（批號(hào)：220201、220202、220203）由廣州中醫(yī)藥大學(xué)第三附屬醫(yī)院制劑室提供；三棱、莪術(shù)、姜黃、琥珀、乳香、沒藥等中藥飲片購自嶺南中藥飲片有限公司，由廣州中醫(yī)藥大學(xué)吳雪茹教授鑒定均為正品；冰片對(duì)照品（批號(hào)：110743-200504）由中國(guó)食品藥品檢定研究院提供；所用試劑均為分析純；硅膠G 薄層板由實(shí)驗(yàn)室自制。

2 方法與結(jié)果

2.1 通絡(luò)止痛貼膏的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究

2.1.1 三棱的薄層鑒別 取本品1 貼，除去蓋襯，剪碎，加乙酸乙酯40 mL，加熱回流30 min，濾過，濾液蒸干，殘?jiān)右宜嵋阴? mL 使溶解，作為供試品溶液。另取三棱對(duì)照藥材2 g，同法制成對(duì)照藥材溶液。參照2020版《中華人民共和國(guó)藥典》四部0502 通則[1]下薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述2 種溶液各10 μ L，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以石油醚（60～90 ℃）-乙酸乙酯（4∶1）為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈（365 nm）下檢視。結(jié)果供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)，陰性對(duì)照無干擾。見圖1。

圖1 三棱TLC 鑒別圖譜

2.1.2 姜黃的薄層鑒別 取本品1 貼，除去蓋襯，剪碎，置具塞錐形瓶中，加無水乙醇40 mL，超聲處理30 min，濾過，濾液蒸干，殘?jiān)訜o水乙醇1 mL 使溶解，作為供試品溶液[7]。另取姜黃對(duì)照藥材0.2 g，置具塞錐形瓶中，加無水乙醇20 mL，同法制成對(duì)照藥材溶液。參照2020 版《中華人民共和國(guó)藥典》四部0502通則[1]下薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述2 種溶液各10 μ L，分別點(diǎn)于同一硅膠G 薄層板上，以二氯甲烷-無水乙醇-濃氨試液（30∶2∶0.5）為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈（365 nm）下檢視。結(jié)果供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)，陰性對(duì)照無干擾。見圖2。

圖2 姜黃TLC 鑒別圖譜

2.1.3 琥珀的薄層鑒別 取本品1 貼，除去蓋襯，剪碎，置具塞錐形瓶中，加乙酸乙酯40 mL，超聲提取30 min，過濾，濾液蒸干，殘?jiān)右宜嵋阴? mL 作為供試品溶液[8]。另取琥珀對(duì)照藥材1 g，加乙酸乙酯10 mL 同法制成對(duì)照藥材溶液。參照2020 版《中華人民共和國(guó)藥典》四部0502 通則[1]下薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述2 種溶液各10 μ L，分別點(diǎn)于同一硅膠G 薄層板上，以石油醚（60～90 ℃）-乙酸乙酯（4∶1）為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5%香草醛硫酸溶液顯色，在105 ℃加熱至斑點(diǎn)顯色清晰。結(jié)果供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)，陰性對(duì)照無干擾。見圖3。

圖3 琥珀TLC 鑒別圖譜

2.1.4 冰片的薄層鑒別 取本品1 貼，除去蓋襯，剪碎，置具塞錐形瓶中，加甲基叔丁基醚40 mL，振搖10 min，超聲處理20 min，濾過，濾液蒸干，殘?jiān)右掖? mL 使溶解，作為供試品溶液。另取冰片對(duì)照品，加甲醇制成每1 mL 含2 mg 的溶液，作為對(duì)照品溶液。參照2020 版《中華人民共和國(guó)藥典》四部0502 通則[1]下薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述2 種溶液各10 μ L，分別點(diǎn)于同一硅膠G 薄層板上，以石油醚（60～90 ℃）-乙酸乙酯（5∶1）為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10%磷鉬酸乙醇溶液，在105 ℃加熱至斑點(diǎn)顯色清晰。結(jié)果供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)，陰性對(duì)照無干擾。見圖4。

圖4 冰片TLC 鑒別圖譜

2.2 通絡(luò)止痛貼膏的穩(wěn)定性考察

2.2.1 加速試驗(yàn) 根據(jù)2020 版《中華人民共和國(guó)藥典》四部9000 通則[1]指導(dǎo)原則中的原料藥物與制劑穩(wěn)定性試驗(yàn)指導(dǎo)原則，將3 批通絡(luò)止痛貼膏分別于恒溫恒濕條件下進(jìn)行考察，溫度（40±2）℃、相對(duì)濕度（75±5）%，分別于第1 個(gè)月、2 個(gè)月、3 個(gè)月、6 個(gè)月末各考察1 次，按照制劑穩(wěn)定性重點(diǎn)考察項(xiàng)目（包括性狀、鑒別、檢查、微生物限度）進(jìn)行檢查，結(jié)果樣品各項(xiàng)指標(biāo)均無明顯變化，質(zhì)量穩(wěn)定。見表1。

表1 3 批通絡(luò)止痛貼膏加速試驗(yàn)結(jié)果

2.2.2 綜合評(píng)價(jià) 取通絡(luò)止痛貼膏置于加速試驗(yàn)條件下，溫度（40±2）℃、相對(duì)濕度（75±5）%，分別于第0個(gè)月、1 個(gè)月、2 個(gè)月、3 個(gè)月、6 個(gè)月各取樣1 次，以初黏力、持黏力、綜合感官、剝離強(qiáng)度等為評(píng)價(jià)指標(biāo)進(jìn)行綜合評(píng)分[9]，結(jié)果顯示，綜合評(píng)分總分優(yōu)良。見表2。

表2 3 批通絡(luò)止痛貼膏綜合評(píng)價(jià)結(jié)果

由表1 的結(jié)果可知，通絡(luò)止痛貼膏在加速試驗(yàn)中外觀均為棕色至棕褐色的凝膠貼膏，氣香，符合標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定；各個(gè)時(shí)間點(diǎn)取樣的三棱、姜黃、琥珀和冰片的薄層鑒別均呈正反應(yīng)，符合標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定；含膏量、黏附力和賦形性等各項(xiàng)檢查項(xiàng)也均符合標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定；各個(gè)時(shí)間點(diǎn)的微生物限度均符合規(guī)定。說明通絡(luò)止痛貼膏質(zhì)量穩(wěn)定且可靠。由表2 的結(jié)果可知，在各個(gè)試驗(yàn)階段中通絡(luò)止痛貼膏的初黏力、持黏力、綜合感官、剝離強(qiáng)度的總分都在90 分（滿分100 分）以上，符合制劑的質(zhì)量要求。

3 討論

本課題采用薄層色譜法（TLC）對(duì)通絡(luò)止痛貼膏處方中的各個(gè)藥味進(jìn)行薄層鑒別研究，結(jié)果處方中的三棱、姜黃、琥珀和冰片等藥味的色譜斑點(diǎn)清晰，特征明顯，分離度好，且陰性對(duì)照溶液無干擾，說明該方法專屬性高、重現(xiàn)性好，可作為通絡(luò)止痛貼膏的質(zhì)量控制方法。

通過加速試驗(yàn)[溫度（40±2）℃、相對(duì)濕度（75±5）%]對(duì)3 批通絡(luò)止痛貼膏進(jìn)行了初步穩(wěn)定性考察，結(jié)果顯示，通絡(luò)止痛貼膏的性狀外觀均無變化，三棱、姜黃、琥珀和冰片的鑒別均呈正反應(yīng)，微生物限度均符合規(guī)定，表明通絡(luò)止痛貼膏的質(zhì)量穩(wěn)定可控。

制劑質(zhì)量的穩(wěn)定是制劑在研發(fā)、注冊(cè)管理中非常重要的因素，直接影響到制劑質(zhì)量，進(jìn)而影響制劑的臨床使用安全性，故需對(duì)其進(jìn)行穩(wěn)定性考察。本研究參照《中華人民共和國(guó)藥典》，通過加速試驗(yàn)，對(duì)通絡(luò)止痛貼膏的初步穩(wěn)定性進(jìn)行了考察，結(jié)果顯示其質(zhì)量穩(wěn)定可靠，為通絡(luò)止痛貼膏的醫(yī)院制劑有效期的制定提供了科學(xué)依據(jù)。