董一楠 賈佩琦

作者單位：300308 天津 天津市腫瘤醫(yī)院空港醫(yī)院腫瘤科

腫瘤免疫治療包括主動(dòng)免疫治療、過繼細(xì)胞轉(zhuǎn)移治療和免疫檢查點(diǎn)阻斷治療，是極具前景的腫瘤治療手段。在腫瘤患者中，腫瘤細(xì)胞可以“劫持”某些免疫檢查點(diǎn)通路，逃避免疫監(jiān)視，抵抗宿主T細(xì)胞的細(xì)胞毒性作用。因此，阻斷免疫檢查點(diǎn)能降低腫瘤細(xì)胞的免疫逃逸，抑制腫瘤生長(zhǎng)[1]。目前免疫檢查點(diǎn)阻斷療法在黑色素瘤、腎癌、非小細(xì)胞肺癌等實(shí)體腫瘤治療中已表現(xiàn)出顯著的臨床療效，而且隨著研究的深入，越來越多的免疫檢查點(diǎn)相繼被報(bào)道。CD200及其受體CD200R均屬于Ⅰ型免疫球蛋白超家族成員，CD200與CD200R結(jié)合在抑制抗腫瘤免疫應(yīng)答中發(fā)揮重要作用。近年來，研究顯示免疫檢查點(diǎn)CD200/CD200R在多種腫瘤中異常表達(dá)，且與腫瘤侵襲、轉(zhuǎn)移及患者預(yù)后相關(guān)，可能成為抗腫瘤治療的潛在靶點(diǎn)。本文就CD200的結(jié)構(gòu)、生物學(xué)功能及其在腫瘤中的表達(dá)及臨床意義進(jìn)行綜述。

1 CD200結(jié)構(gòu)及其生物學(xué)功能

CD200（又稱為OX2、OX-90、MOX-2）是分子量為48 kDa的細(xì)胞表面糖蛋白，基因定位于染色體3q13.2，屬于Ⅰ型免疫球蛋白超家族成員。CD200與CD47、PD-1、CTLA-4等免疫檢查點(diǎn)分子具有結(jié)構(gòu)相似性，其包含2個(gè)胞外免疫球蛋白樣結(jié)構(gòu)域：1個(gè)單跨膜的結(jié)構(gòu)域和1個(gè)沒有信號(hào)模體的短細(xì)胞質(zhì)尾[2-3]。CD200的受體CD200R（在小鼠為CD200R1-5；在人類為CD200R1，R2）也屬于Ⅰ型免疫球蛋白超家族成員，是CD200的同源受體，具有2個(gè)細(xì)胞外免疫球蛋白樣結(jié)構(gòu)域和1個(gè)細(xì)胞質(zhì)NPxY模體[4-5]。

CD200是一種免疫耐受信號(hào)分子，在維持機(jī)體自身免疫耐受中發(fā)揮重要作用[6-7]。CD200-CD200R相互作用能抑制促炎分子如TNF-α、IFN-γ及誘導(dǎo)型一氧化氮合酶的表達(dá)，繼而通過調(diào)節(jié)炎癥免疫反應(yīng)的激活閾值，保護(hù)免疫特權(quán)部位、干細(xì)胞和其他重要組織細(xì)胞免受免疫損傷，以及促進(jìn)外周免疫耐受[2，4，8]。此外，CD200-CD200R產(chǎn)生的免疫抑制效應(yīng)在組織修復(fù)過程、移植物排斥反應(yīng)、自身免疫性疾病及癌癥監(jiān)測(cè)中也起到關(guān)鍵性的作用[9]。CD200與CD200R結(jié)合后可導(dǎo)致CD200R的NPxY序列中的酪氨酸302磷酸化，激活Dok2-RasGAP復(fù)合物，抑制Ras-ERK信號(hào)傳導(dǎo)，進(jìn)而抑制髓系細(xì)胞活化[5]。CD200與CD200R相互作用還能有效抑制T細(xì)胞免疫應(yīng)答及NK細(xì)胞的殺傷活性，促進(jìn)巨噬細(xì)胞分泌免疫抑制性色氨酸分解酶——吲哚胺-2，3-雙加氧酶（IDO），并且誘導(dǎo)調(diào)節(jié)性T細(xì)胞（regulatory T cell，Treg）擴(kuò)增，導(dǎo)致Th1細(xì)胞因子轉(zhuǎn)變?yōu)?Th2 細(xì)胞因子，從而抑制免疫應(yīng)答反應(yīng)[8，10]。CD200/CD200R主要通過調(diào)節(jié)免疫和血管生成在腫瘤和非腫瘤疾病中發(fā)揮重要作用[11-14]。由此可見，CD200/CD200R主要通過調(diào)節(jié)免疫和血管生成在腫瘤和非腫瘤疾病中發(fā)揮重要作用。此外，PANKRATOVA等[15]發(fā)現(xiàn)CD200的新功能，能促進(jìn)中樞神經(jīng)系統(tǒng)神經(jīng)發(fā)生，且與免疫調(diào)節(jié)作用無關(guān)。

2 CD200/CD200R在腫瘤中的作用

2.1 血液系統(tǒng)惡性腫瘤

既往研究已證實(shí)CD200在多種血液系統(tǒng)腫瘤中過表達(dá)，包括B細(xì)胞非霍奇金淋巴瘤（B-cell non-Hodgkin lymohoma，B-NHL）、急性B淋巴細(xì)胞白血病（acute B lymphoblastic leukemia，B-ALL）、急性髓細(xì)胞白血病（acute ayelocytic leukemia，AML）、慢性淋巴細(xì)胞白血?。╟hronic lymphocytic leukemia，CLL）和多發(fā)性骨髓瘤（multiple myeloma，MM）等，并且CD200高表達(dá)與患者預(yù)后不良相關(guān)，有望作為腫瘤治療靶點(diǎn)。AREF等[2]應(yīng)用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)52例初治AML患者治療前骨髓細(xì)胞CD200的表達(dá)情況，發(fā)現(xiàn)CD200陽性表達(dá)率為28.8%（15/52），其中CD200+患者的總生存率明顯低于 CD200-患者（19.2%vs35.3%，P=0.049）。KANDEEL等[16]對(duì)89例兒童AML患者治療前后的骨髓標(biāo)本進(jìn)行分析，發(fā)現(xiàn)CD200過表達(dá)與微小殘留病灶及淋巴結(jié)腫大相關(guān)，CD200和CD123共表達(dá)與較差的細(xì)胞遺傳學(xué)核型和較高的白細(xì)胞計(jì)數(shù)相關(guān)，且對(duì)完全緩解（complete response，CR）、微小殘留病灶陽性率和總生存期均有不利影響。在B-ALL研究中也顯示CD200和（或）CD56陽性表達(dá)的B-ALL患者預(yù)后不良，表現(xiàn)為CD200+和CD56+患者的總生存期（overall survival，OS）和 無 病生存期（disease-free survival，DFS）均低于CD200-和CD56-患者，因此檢測(cè)CD200和CD56表達(dá)水平，可能有助于對(duì)成人B-ALL患者進(jìn)行分層[8]。

關(guān)于CD200/CD200R的作用機(jī)制，CD200可能通過增強(qiáng)Treg的功能促進(jìn)腫瘤免疫逃逸，從而影響腫瘤進(jìn)展，導(dǎo)致患者預(yù)后不良。在腫瘤免疫中，過表達(dá)CD200的腫瘤細(xì)胞能抑制表達(dá)CD200R的髓細(xì)胞正常激活，最終導(dǎo)致免疫抑制性級(jí)聯(lián)反應(yīng)，并且導(dǎo)致混合淋巴細(xì)胞反應(yīng)中的細(xì)胞因子譜改變，從Th1細(xì)胞因子（IFNs，IL-2）轉(zhuǎn)變?yōu)門h2細(xì)胞因子（IL-10，IL-4），從而誘導(dǎo)Treg擴(kuò)增，抑制免疫應(yīng)答反應(yīng)。此外，CD200-CD200R還能抑制細(xì)胞毒性T淋巴細(xì)胞以及NK細(xì)胞的活性[2，12]。有研究報(bào)道，CD200在AML患者中過表達(dá)，并且通過上調(diào)CD4+CD25+FoxP3+Treg、調(diào)節(jié)性樹突狀細(xì)胞及免疫抑制性細(xì)胞因子，抑制AML記憶性Th1免疫反應(yīng)，且直接損害NK細(xì)胞功能，協(xié)同免疫逃逸，促進(jìn)腫瘤進(jìn)展[2，16]。MCWHIRTER 等[17]發(fā)現(xiàn)CLL患者B細(xì)胞表面CD200高表達(dá)；在體外混合淋巴細(xì)胞反應(yīng)中加入原代CLL細(xì)胞后發(fā)現(xiàn)，IL-2和IFN-γ下調(diào)并抑制Th1免疫反應(yīng)，而應(yīng)用抗CD200抗體能恢復(fù)Th1免疫反應(yīng)并抑制Treg功能。還有研究表明，表達(dá)于腫瘤細(xì)胞表面的CD200經(jīng)金屬蛋白酶切割后能以可溶性形式釋放，腫瘤釋放的CD200與抗原提呈細(xì)胞上的CD200R相互結(jié)合，抑制促炎細(xì)胞因子如IL-2和IFN-γ的分泌，增加髓源性抑制細(xì)胞和Treg的產(chǎn)生并抑制抗腫瘤免疫反應(yīng)[11]。AREF等[18]發(fā)現(xiàn)CD200在MM患者中高表達(dá)，且CD200表達(dá)水平與Treg百分比呈顯著正相關(guān)；CD200-患者的無進(jìn)展生存期（progression-free survival，PFS）和OS均優(yōu)于CD200+患者。該研究提示CD200過表達(dá)及Treg的擴(kuò)增可能在MM進(jìn)展中起到一定的作用，且CD200高表達(dá)是MM預(yù)后不良的因素。此外，SHI等[19]通過分析47例CD200+MM患者在治療過程中CD200表達(dá)的動(dòng)態(tài)變化發(fā)現(xiàn)，38例（80.9%）患者在治療期間CD200表達(dá)轉(zhuǎn)陰，提示CD200表達(dá)可能是MM治療期間可用于評(píng)估預(yù)后的一個(gè)獨(dú)立標(biāo)志物。

此外，CD200在慢性淋巴細(xì)胞增生性疾病的診斷中也具有重要意義。EL DIN FOUAD等[20]發(fā)現(xiàn)CD200對(duì)鑒別CLL、套細(xì)胞淋巴瘤（mantle cell lymphoma，MCL）和非典型CLL有較高的價(jià)值，在CLL預(yù)后和治療療效預(yù)測(cè)中也具有一定的應(yīng)用潛力。CD160和CD200也被報(bào)道可能作為診斷CLL的敏感標(biāo)志物，兩者聯(lián)合還能提高對(duì)CLL和B-NHL的鑒別敏感性[3]。VAUGHAN等[21]發(fā)現(xiàn)所有CD200+單形性移植后淋巴細(xì)胞增生性疾病（post-transplantation lymphoproliferative diseases，PTLDs）均為彌漫性大B細(xì)胞淋巴瘤，并且CD200+PTLDs患者的中位FoxP3+Treg水平高于CD200-PTLDs患者，且CD200+PTLDs患者的5年總生存率更低。

以上研究結(jié)果提示，CD200在多種血液系統(tǒng)腫瘤中廣泛表達(dá)，且與腫瘤的免疫逃逸、預(yù)后不良、療效評(píng)估等方面相關(guān)，可能作為血液系統(tǒng)腫瘤診斷的重要標(biāo)志物及腫瘤治療的潛在靶點(diǎn)。

2.2 實(shí)體腫瘤

在實(shí)體腫瘤中，CD200/CD200R也可作為關(guān)鍵免疫檢查點(diǎn)。既往研究已表明CD200在多種實(shí)體腫瘤中過表達(dá)，且與腫瘤組織分化程度差及轉(zhuǎn)移相關(guān)，有望作為預(yù)后評(píng)估指標(biāo)[22]。在皮膚鱗狀細(xì)胞癌（cutaneous squamous cell carcinoma，CSCC）[23]中，CD200 高表達(dá)與腫瘤分化程度差及臨床分期高相關(guān)；且CD200高表達(dá)組患者OS短于CD200低表達(dá)組（31.3個(gè)月vs41.9個(gè)月）。REXIN等[4]發(fā)現(xiàn)在人膀胱移行細(xì)胞癌組織中CD200表達(dá)顯著高于正常膀胱組織，發(fā)生轉(zhuǎn)移的患者CD200表達(dá)水平明顯高于未發(fā)生轉(zhuǎn)移患者；且CD200表達(dá)水平與腫瘤組織分級(jí)呈正相關(guān)。BISGIN等[24]對(duì)直腸癌組織和正常直腸黏膜組織進(jìn)行免疫組織化學(xué)分析，結(jié)果顯示，腫瘤細(xì)胞CD200高表達(dá)，正常黏膜上皮和基質(zhì)細(xì)胞中的CD200R1高表達(dá)；其中87%的轉(zhuǎn)移性癌癥患者腫瘤細(xì)胞CD200表達(dá)上調(diào)，且基質(zhì)細(xì)胞中CD200R1高表達(dá)，而CD200低表達(dá)與患者的較好OS相關(guān)。也有研究顯示CD200在卵巢癌、黑色素瘤、神經(jīng)母細(xì)胞瘤和腎細(xì)胞癌的腫瘤細(xì)胞系上表達(dá)，抑制抗腫瘤免疫反應(yīng)[25]。以上研究表明CD200/CD200R的表達(dá)水平與多種實(shí)體腫瘤患者復(fù)發(fā)風(fēng)險(xiǎn)、轉(zhuǎn)移和預(yù)后相關(guān)，可能成為實(shí)體腫瘤潛在治療靶點(diǎn)。

既往研究表明CD200可能通過參與免疫逃逸機(jī)制促進(jìn)腫瘤生長(zhǎng)。在結(jié)腸癌肝轉(zhuǎn)移患者中，CD200低表達(dá)組患者CD4+、CD8+、CD45RO+腫瘤浸潤(rùn)淋巴細(xì)胞明顯高于CD200高表達(dá)組[26]。 ZGODZINSKI等[27]發(fā)現(xiàn)胃癌患者中表達(dá)CD200抗原的CD3+、CD3+/CD4+和CD3+/CD8+T細(xì)胞百分比均高于對(duì)照組，而表達(dá)CD200R的CD3+、CD3+/CD4+和CD3+/CD8+T細(xì)胞頻率均低于對(duì)照組；且胃癌患者CD19+/CD200+B淋巴細(xì)胞百分比高于健康對(duì)照組，而CD19+/CD200R+B淋巴細(xì)胞百分比低于健康對(duì)照組。以上研究提示CD200/CD200R可能與腫瘤的免疫逃逸機(jī)制有關(guān)，阻斷CD200/CD200R可能成為腫瘤免疫治療的新靶點(diǎn)。

此外，CD200-CD200R相互作用可能是調(diào)節(jié)腫瘤微環(huán)境的重要因素[28]。既往研究表明CD200可能通過增強(qiáng)骨髓源性抑制細(xì)胞（myeloid-derived suppressor cells，MDSCs）的功能促進(jìn)腫瘤生長(zhǎng)。例如，BELKIN等[29]在CSCC小鼠模型研究中發(fā)現(xiàn)CD200通過調(diào)節(jié)MDSC的功能來抑制抗腫瘤免疫反應(yīng)，促進(jìn)轉(zhuǎn)移性CSCC細(xì)胞的存活及轉(zhuǎn)移瘤形成。同樣，CHOUERIRY等[30]發(fā)現(xiàn)CD200在人胰腺細(xì)胞系、胰腺導(dǎo)管腺癌細(xì)胞及平滑肌肌動(dòng)蛋白陽性的基質(zhì)細(xì)胞中均有表達(dá)；而CD200R在胰腺導(dǎo)管腺癌患者的CD11b+CD33+HLADRlo/-MDSC中表達(dá)上調(diào)。該研究進(jìn)一步通過體內(nèi)實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，應(yīng)用抗CD200抗體能抑制皮下荷瘤小鼠的腫瘤生長(zhǎng)，CD200抗體治療的小鼠腫瘤組織中MDSC的比例顯著降低，并且能顯著提高PD-1檢查點(diǎn)抗體治療的療效。體外實(shí)驗(yàn)表明，與重組CD200蛋白共培養(yǎng)后能提高人MDSC介導(dǎo)的細(xì)胞因子表達(dá)和其抑制免疫細(xì)胞應(yīng)答的能力。

如上所述，CD200在多種實(shí)體腫瘤中過表達(dá)，且與腫瘤病理分級(jí)、轉(zhuǎn)移、免疫逃逸相關(guān)，可能是預(yù)后不良的指標(biāo)及腫瘤治療的潛在靶點(diǎn)。然而，近年來也有研究顯示CD200在部分腫瘤中發(fā)揮抑制腫瘤生長(zhǎng)的作用[28]。例如，YOSHIMURA等[12]發(fā)現(xiàn)在非小細(xì)胞肺癌（non-small cell lung cancer，NSCLC）中，CD200R高表達(dá)與預(yù)后不良相關(guān)，而CD200高表達(dá)與較好的預(yù)后相關(guān)，進(jìn)一步在肺癌細(xì)胞系中下調(diào)CD200R，發(fā)現(xiàn)能顯著抑制腫瘤細(xì)胞增殖，改變炎癥和致癌信號(hào)通路相關(guān)基因的內(nèi)源性mRNA表達(dá)水平。ISHIBASHI等[31]發(fā)現(xiàn)了一種特殊的患者特異性癌癥相關(guān)成纖維細(xì)胞（CAFs）亞群，該亞群能增強(qiáng)表皮生長(zhǎng)因子受體（epidermal growth factor receptor，EGFR）基因突變陽性肺癌對(duì)EGFR-酪氨酸激酶抑制劑（EGFR-TKI）吉非替尼的敏感性，而下調(diào)CD200能抑制CAFs的增敏潛能，這表明CD200可能是增強(qiáng)吉非替尼敏感性的功能分子。由此可見，CD200陽性的CAFs可以增強(qiáng)對(duì)EGFR-TKIs的敏感性，并可能在EGFR-TKIs的治療中具有重要的應(yīng)用價(jià)值。

3 CD200抑制劑的應(yīng)用

CD200-CD200R信號(hào)通路能抑制抗腫瘤免疫反應(yīng)。多項(xiàng)實(shí)驗(yàn)和臨床研究已表明阻斷CD200-CD200R信號(hào)通路能增強(qiáng)Th1細(xì)胞相關(guān)細(xì)胞因子表達(dá)及炎癥反應(yīng)，抑制腫瘤生長(zhǎng)[12，32]。CD200抑制劑Samalizumab（ALXN 6000，沙馬組單抗）是一種針對(duì)CD200的新型重組人源化單克隆抗體，能特異性地結(jié)合CD200，阻斷其與CD200R相互作用。目前Samalizumab被合理地設(shè)計(jì)成Ig G2/G4恒定區(qū)域，以最小化效應(yīng)功能并保留免疫細(xì)胞亞群。一項(xiàng)Ⅰ期臨床試驗(yàn)（NCT00648739）[10]探討了Samalizumab在CLL和MM中的治療作用。該研究中共23例晚期CLL患者和3例MM患者參與試驗(yàn)，在“3+3”研究設(shè)計(jì)中，患者被依次分配到7個(gè)劑量水平隊(duì)列中（50 mg/m2，100 mg/m2，200 mg/m2，300 mg/m2，400 mg/m2，500 mg/m2及600 mg/m2），每28 d接受1次單劑量Samalizumab靜脈注射，其中21例（81%）患者接受多次給藥周期，5例（19%）患者（包括2例MM患者）接受1次劑量治療。結(jié)果顯示，Samalizumab可使CLL患者的腫瘤細(xì)胞CD200表達(dá)水平及循環(huán)CD200+CD4+T細(xì)胞頻率呈劑量依賴性下降，但Samalizumab沒有達(dá)到最大耐受劑量（maximal tolerable dose，MTD）；最終14例CLL患者腫瘤負(fù)荷減輕，1例CLL患者部分緩解，16例病情穩(wěn)定，而所有MM患者均出現(xiàn)疾病進(jìn)展。提示在大多數(shù)晚期CLL患者中，Samalizumab具有良好的安全性，且治療療效好與腫瘤負(fù)荷降低有關(guān)。該研究的初步結(jié)果支持了Samalizumab可作為免疫檢查點(diǎn)抑制劑在CLL治療中發(fā)揮作用，但目前相關(guān)臨床試驗(yàn)仍處于初級(jí)階段，仍需要進(jìn)一步的臨床試驗(yàn)研究。

GAISER等[33]發(fā)現(xiàn)在默克爾細(xì)胞癌（merkel cell carcinoma，MCC）中CD200高表達(dá)，CD200R表達(dá)于腫瘤微環(huán)境中的髓細(xì)胞。將抗CD200抗體靜脈注射到MCC異種移植小鼠體內(nèi)后，發(fā)現(xiàn)抗CD200抗體對(duì)腫瘤具有特異性靶向作用，能增強(qiáng)機(jī)體對(duì)表達(dá)CD200腫瘤細(xì)胞的抗腫瘤免疫活性。因此，應(yīng)用抗CD200抗體可能為MCC提供一種新的不依賴于PD-1/PD-L1阻斷的免疫治療方法。相似地，OLIN等[11]探討了以CD200為靶點(diǎn)的合成肽（CD200AR-L）在犬自發(fā)性膠質(zhì)瘤動(dòng)物模型中療效。結(jié)果顯示，與單獨(dú)皮下注射腫瘤裂解疫苗相比，在自體腫瘤裂解疫苗中加入CD200AR-L能顯著延長(zhǎng)患自發(fā)性膠質(zhì)瘤犬的中位OS（6.36個(gè)月vs12.70個(gè)月）。此外，CD200AR-L能增強(qiáng)抗原提呈細(xì)胞和T淋巴細(xì)胞的功能，抑制CD200R的表達(dá)，從而增強(qiáng)膠質(zhì)母細(xì)胞瘤微環(huán)境中啟動(dòng)免疫反應(yīng)的能力。研究者進(jìn)一步研發(fā)一種人源化的CD200AR-L并證實(shí)其能誘導(dǎo)趨化因子反應(yīng)，刺激未成熟樹突狀細(xì)胞分化并顯著增強(qiáng)抗原特異性應(yīng)答；且應(yīng)用CD200AR-L可下調(diào)CD200R和PD-1受體的表達(dá)[34]。以上結(jié)果提示CD200AR-L可能作為一種新型的膠質(zhì)母細(xì)胞瘤免疫治療藥物。

4 小結(jié)

綜上所述，CD200/CD200R通過參與免疫逃逸機(jī)制，抑制抗腫瘤免疫反應(yīng)，促進(jìn)腫瘤進(jìn)展。免疫檢查點(diǎn)CD200在多種腫瘤中過表達(dá)，且與腫瘤的侵襲性增強(qiáng)、易轉(zhuǎn)移及患者的生存率低相關(guān)。阻斷CD200能增強(qiáng)抗腫瘤免疫反應(yīng)，抑制腫瘤生長(zhǎng)，但是在部分腫瘤中，腫瘤細(xì)胞表達(dá)CD200發(fā)揮抑制腫瘤生長(zhǎng)的作用?？傮w來說，CD200/CD200R在抑制抗腫瘤免疫應(yīng)答反應(yīng)中發(fā)揮了重要作用，因此可能成為抗腫瘤治療的潛在靶點(diǎn)。目前應(yīng)用CD200抑制劑進(jìn)行抗腫瘤治療的試驗(yàn)也取得了一定進(jìn)展，為抗腫瘤治療提供了新的思路。但目前關(guān)于CD200抑制劑的研究仍處于初級(jí)階段，未來仍需大量的臨床試驗(yàn)進(jìn)一步探索。