苑小龍，魏 征，王紅艷，張俊萍，蔡小平

(1.河南中醫(yī)藥大學(xué)研究生院，河南 鄭州 450046；2.河南省中西醫(yī)結(jié)合醫(yī)院腫瘤血液科，河南 鄭州 450004)

全球范圍內(nèi),惡性腫瘤已成為一種較為常見(jiàn)的疾病。其中，食管癌的發(fā)病率排在第8位,病死率排在第6位[1]。根據(jù)世界衛(wèi)生組織國(guó)際癌癥研究署近期發(fā)布的 GLOBOCAN 2020數(shù)據(jù)，2020年全球共新發(fā)食管癌病例約60.4萬(wàn)例，世界人口年齡標(biāo)化發(fā)病率高達(dá)6.3/10萬(wàn)，病死率也有5.6/10萬(wàn)，而發(fā)展中國(guó)家的發(fā)病和病死病例占比超過(guò)80%[2]。另一方面，我國(guó)2020年由食管癌引發(fā)的死亡順位(第4位)也高于食管癌的發(fā)病順位(第6位)，發(fā)病率與病死率更是達(dá)到世界均值的2倍以上[3]。目前，食管癌的治療方法有手術(shù)治療、放療、化療、內(nèi)鏡治療等。其中手術(shù)切除治療是食管癌最主要、最根本的治療方法，但食管癌患者早期癥狀不甚明顯，就診時(shí)多已至中晚期，出現(xiàn)區(qū)域轉(zhuǎn)移或遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移，癥狀嚴(yán)重，行單純手術(shù)切除治療易復(fù)發(fā)、轉(zhuǎn)移，遠(yuǎn)期療效不佳[4-5]。化療也是腫瘤的一種重要治療方法，但絕大多數(shù)化療藥物缺乏特異性，在殺滅腫瘤細(xì)胞的同時(shí)也會(huì)對(duì)正常人體細(xì)胞造成不可逆的損害[6]。因此，開(kāi)發(fā)新的有效的藥物來(lái)殺滅腫瘤細(xì)胞、治療食管癌、改善預(yù)后已迫在眉睫。既往對(duì)于化療耐藥性的研究多專(zhuān)注于腫瘤細(xì)胞本身,其機(jī)制可能包括細(xì)胞膜表面藥物轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白的變化、藥物代謝途徑受細(xì)胞影響而產(chǎn)生的變化、相關(guān)細(xì)胞的基因突變等[1]。根據(jù)近年來(lái)的研究[7]，在腫瘤耐藥性的產(chǎn)生與作用中，腫瘤微環(huán)境扮演著重要的角色,其包括腫瘤相關(guān)成纖維細(xì)胞(CAFs)、免疫細(xì)胞、血管內(nèi)皮細(xì)胞和腫瘤相關(guān)巨噬細(xì)胞等,其中CAFs是腫瘤微環(huán)境中的主要部分,它在腫瘤發(fā)生、發(fā)展以及化療耐藥性中發(fā)揮著關(guān)鍵作用,被視為癌癥治療的潛在靶點(diǎn)。CAFs發(fā)揮作用的機(jī)制是通過(guò)影響免疫反應(yīng)、細(xì)胞因子及其黏附等調(diào)節(jié)腫瘤微環(huán)境,最終導(dǎo)致腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)。中醫(yī)藥相關(guān)治療方法是抑制腫瘤生長(zhǎng)的重要途徑，通過(guò)深入研究發(fā)現(xiàn)，中藥有效成分能有效抑制成纖維細(xì)胞的生成與生長(zhǎng)，從而調(diào)控食管癌的免疫微環(huán)境，改善患者的耐藥情況，達(dá)到良好的抗腫瘤效果?，F(xiàn)對(duì)中醫(yī)學(xué)對(duì)腫瘤相關(guān)成纖維細(xì)胞的認(rèn)識(shí)以及近年來(lái)中醫(yī)藥抑制成纖維細(xì)胞生成治療食管癌的研究進(jìn)行探討，介紹如下。

1 中醫(yī)學(xué)對(duì)腫瘤微環(huán)境的認(rèn)識(shí)

1.1 腫瘤微環(huán)境與“體質(zhì)”學(xué)說(shuō)的關(guān)系

《素問(wèn)·寶命全形論篇》曰：“人以天地之氣生，四時(shí)之法成?！笨芍w質(zhì)是相對(duì)來(lái)說(shuō)較為穩(wěn)定的個(gè)性特征，具有靈活可變性，可以在一定程度上影響疾病發(fā)生、發(fā)展傾向[8]。近年來(lái)有研究[9-10]指出，腫瘤患者多可能出現(xiàn)體質(zhì)的偏頗，腫瘤微環(huán)境影響腫瘤細(xì)胞的轉(zhuǎn)移潛能與體質(zhì)有相關(guān)性。

1.2 腫瘤微環(huán)境與正氣盈虧的關(guān)系

《黃帝內(nèi)經(jīng)》曰：“正氣存內(nèi)，邪不可干。”《素問(wèn)·評(píng)熱病論篇》曰：“邪之所湊，其氣必虛?！闭龤馐蔷S系人體基本生存的重要物質(zhì)，其作用相當(dāng)于西醫(yī)學(xué)的免疫系統(tǒng)，發(fā)揮著抵御外邪侵犯、固本培元的重要作用。當(dāng)“正氣存內(nèi)”、正氣勝邪之時(shí)，即免疫系統(tǒng)正常運(yùn)轉(zhuǎn)，其防御、監(jiān)視和清除等功能正常時(shí)，機(jī)體能夠抵御腫瘤細(xì)胞的生成、浸潤(rùn)及生長(zhǎng)；當(dāng)免疫細(xì)胞不足或腫瘤細(xì)胞發(fā)生免疫逃逸時(shí)，體內(nèi)的正氣無(wú)法戰(zhàn)勝邪氣，腫瘤細(xì)胞就會(huì)增殖和遷移，相應(yīng)的病情就會(huì)加重。

2 中醫(yī)學(xué)對(duì)成纖維細(xì)胞生成的認(rèn)識(shí)

2.1 成纖維細(xì)胞的生成與“陰-陽(yáng)”的關(guān)系

《素問(wèn)·陰陽(yáng)應(yīng)象大論篇》言：“陰陽(yáng)者，天地之道也，萬(wàn)物之綱紀(jì)，變化之父母，生殺之本始，神明之府也。”《素問(wèn)·生氣通天論篇》曰：“陰平陽(yáng)秘，精神乃治。”《素問(wèn)·至真要大論篇》言：“謹(jǐn)察陰陽(yáng)所在而調(diào)之，以平為期。”言及陰陽(yáng)，亦談及平衡。由此可以看出，腫瘤的微環(huán)境始終處于一種動(dòng)態(tài)且失衡的狀態(tài)之中，正是這種“陰陽(yáng)失衡”的狀態(tài)導(dǎo)致了機(jī)體局部血管生成、上皮間質(zhì)異常轉(zhuǎn)化、胞外基質(zhì)被侵襲破壞、代謝方式產(chǎn)生轉(zhuǎn)變、免疫相關(guān)炎性因子釋放失衡等，這也進(jìn)一步導(dǎo)致了宿主之間的失衡，最終引起腫瘤生長(zhǎng)、浸潤(rùn)、復(fù)發(fā)及轉(zhuǎn)移[11-12]。有學(xué)者認(rèn)為，在腫瘤啟動(dòng)、浸潤(rùn)、轉(zhuǎn)移三大過(guò)程中，腫瘤微環(huán)境的演進(jìn)變化是陰陽(yáng)不斷交替、持續(xù)失衡的惡性循環(huán)的過(guò)程[13]。

2.2 成纖維細(xì)胞生成與“精氣”學(xué)說(shuō)的關(guān)系

《靈樞·決氣》載：“兩神相搏，合而成形，常先身生，是謂精?！?“精”代表著人體先天相伴而生的免疫系統(tǒng)及其組成物質(zhì)。在后天多種致病因素的影響下，精氣化濁，導(dǎo)致以腫瘤相關(guān)成纖維細(xì)胞生成為代表的腫瘤微環(huán)境的病理性改變。

3 中醫(yī)藥抑制成纖維細(xì)胞生成的研究進(jìn)展

3.1 中藥有效成分

有研究發(fā)現(xiàn)，姜黃素通過(guò)增加E-鈣黏蛋白水平和降低成纖維細(xì)胞的容量波形蛋白的水平，從而具有消除腫瘤細(xì)胞入侵作用的能力[14]。姜黃素能夠通過(guò)減少腫瘤相關(guān)成纖維細(xì)胞間質(zhì)的距離或上調(diào)腫瘤抑制蛋白來(lái)抑制成纖維細(xì)胞誘導(dǎo)的腫瘤遷移[15]。最近的研究表明，雷公藤甲素(TPL)和雷公藤甲素的水溶性前藥能夠抑制腫瘤上皮細(xì)胞的激活能力，并通過(guò)抑制TGF-b使其信號(hào)通路正?；痆16]。雷公藤內(nèi)酯是雷公藤的主要活性化合物，雷公藤F[17]也能抑制成纖維細(xì)胞的病理功能，從而抑制癌細(xì)胞遷移。Wang等[18]發(fā)現(xiàn)，雷公藤內(nèi)酯通過(guò)下調(diào)miRNA-301a的表達(dá)以及上調(diào)胃癌相關(guān)成纖維細(xì)胞(GCAFs)miRNA-149的表達(dá)，以達(dá)到抑制相關(guān)集落生成、轉(zhuǎn)移及推動(dòng)侵入的能力，結(jié)果顯示，雷公藤內(nèi)酯抑制了GCAFs的促癌能力。黃芪甲苷(ASV)是一種從黃芪的根莖上提取出來(lái)的高純度藥物，它通過(guò)調(diào)節(jié)MAPK和NF-kB信號(hào)通路，從而影響腫瘤相關(guān)成纖維細(xì)胞以及細(xì)胞外基質(zhì)；除了顯著的抗纖維化作用外，ASV還能抑制GCAFs的增殖-遷移-促進(jìn)侵襲能力。Wang等[19]采用ASV治療GCAFs，通過(guò)觀察ASV對(duì)小鼠促腫瘤能力的影響來(lái)探討GCAFs的作用機(jī)制，結(jié)果顯示，ASV顯著抑制了GCAFs的增殖、侵襲和轉(zhuǎn)移，其原理是通過(guò)增強(qiáng)miRNA-214促進(jìn)GCAFs的作用減弱miRNA-301a的表達(dá)；通過(guò)重建miRNA表達(dá)平衡，ASV可有效抑制巨噬細(xì)胞集落刺激因子在CAFs中的表達(dá)，從而發(fā)揮促進(jìn)腫瘤增殖的重要作用，提高金屬蛋白酶抑制因子2在成纖維細(xì)胞中的表達(dá)水平。因此，ASV可以抑制GCAFs的病理功能，從而抑制腫瘤，這表明ASV是一種通過(guò)調(diào)節(jié)CAFs來(lái)治療癌癥的有效藥物。白藜蘆醇可以抑制白細(xì)胞介素(IL)-6的表達(dá)，從而抑制CAFs誘導(dǎo)的腫瘤細(xì)胞侵襲。研究[20]發(fā)現(xiàn)，白藜蘆醇能阻斷CAFs與膽管癌細(xì)胞之間的侵襲性交流通信，以達(dá)到消除CAFs分泌IL-6的目的；CCM能強(qiáng)烈誘導(dǎo)IL-6介導(dǎo)的膽管癌細(xì)胞的運(yùn)動(dòng)，而CAFs培養(yǎng)基預(yù)處理白藜蘆醇能完全抑制癌細(xì)胞的運(yùn)動(dòng)，并能強(qiáng)烈誘導(dǎo)膽管內(nèi)癌細(xì)胞，使其自噬；且白藜蘆醇能抑制cafa誘導(dǎo)的mRNA轉(zhuǎn)錄，這種轉(zhuǎn)錄影響腫瘤細(xì)胞的轉(zhuǎn)移侵襲及相關(guān)介質(zhì)的遷移。大黃素(1,3,8-三羥基-6-甲基蒽醌)是提取于大黃根莖的一種重要的活性成分，具有多種生物活性，有通便、免疫抑制、抗纖維化、抗炎的作用。大黃素也有重要的抗癌作用，如誘導(dǎo)促進(jìn)人體肺腺癌細(xì)胞凋亡[21]。研究表明，大黃素可以調(diào)節(jié)MMP-2和MMP-991侵襲人乳腺癌細(xì)胞；此外，大黃素可以調(diào)節(jié)頭頸鱗癌的EMT相關(guān)基因，從而抑制腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)、轉(zhuǎn)移和侵襲[21]。更重要的是，大黃素還能抑制腫瘤中CAFs的遷移能力。有學(xué)者[21]測(cè)試大黃素對(duì)CCM或培養(yǎng)基誘導(dǎo)的EMT程序影響三陰性乳腺的界面區(qū)成纖維細(xì)胞(inf-cm)癌癥，研究并分析了間充質(zhì)標(biāo)記物的表達(dá)如波形蛋白、b-連環(huán)蛋白和MMP-2，發(fā)現(xiàn)增加CCM或INFs-CM刺激的間充質(zhì)干細(xì)胞標(biāo)記物大黃素的逆轉(zhuǎn)，結(jié)果表明，大黃素可以抑制BT20乳腺癌細(xì)胞中的INFs-CM或CCM誘導(dǎo)的EMT編程，說(shuō)明大黃素是預(yù)防三負(fù)乳腺癌的候選藥物。Lau等[22]從CRL-7522成纖維細(xì)胞的可行性評(píng)價(jià)得出，黃芪、白術(shù)、蒼術(shù)、地黃四種成分對(duì)相關(guān)藥物配伍均有顯著的增強(qiáng)作用；草藥黃芪和地黃能顯著增強(qiáng)CRL-7522的活性；由于上述四種草藥比中藥配方顯示出更大的成纖維細(xì)胞生存能力增強(qiáng)效果(特別是在更高的劑量下)，增加配方中這些草藥的數(shù)量可能會(huì)提高配方的整體效果。

3.2 中藥方劑

斷藤益母湯中含有的南蛇藤素(Celastrol)[23]可通過(guò)調(diào)節(jié)線粒體信號(hào)通路[24]來(lái)促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的凋亡。最近，科學(xué)家們發(fā)現(xiàn)，南蛇藤素可以提高CAFs對(duì)米多沙酮的敏感性。Liu Q等[25]采用南蛇藤素與米多沙酮聯(lián)合治療黑色素瘤，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，細(xì)胞質(zhì)醇可以降低CAF細(xì)胞系中米多沙酮的半抑制濃度。二至丸是近年來(lái)腫瘤治療的重要方劑，它含有的槲皮苷[26]是一種天然的類(lèi)黃酮，能調(diào)節(jié)多種生物信號(hào)通路，誘導(dǎo)癌細(xì)胞萎縮、凋亡，減慢癌細(xì)胞[27]增殖。槲皮素在許多體外研究中也被證明對(duì)不同的細(xì)胞系有抗癌作用。槲皮素的抗癌作用歸功于其抗氧化活性[28]。槲皮素能夠通過(guò)抑制WNT16的表達(dá)來(lái)下調(diào)CAFs誘導(dǎo)的腫瘤變性腫瘤的癌癥耐藥性，WNT16是促進(jìn)惡性腫瘤化療耐藥性的關(guān)鍵因素。但槲皮素卻難溶于水中，這降低了其生物利用度，也限制了其作為一種藥物的廣泛運(yùn)用。因此，Kaili H等[29]基于磷酸化槲皮素羥基開(kāi)發(fā)了一種槲皮素原藥，為了促進(jìn)藥物的傳遞，他們制備了一種由磷酸槲皮素組成的靶向脂質(zhì)/鈣/磷酸鹽納米顆粒制劑，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，槲皮素可以通過(guò)顯著降低WNT16的表達(dá)來(lái)重塑膀胱癌內(nèi)的CAFs和膠原蛋白含量。學(xué)者們還研究了UMUC3膀胱癌移植模型與順鉑納米顆粒的結(jié)合療效，發(fā)現(xiàn)了順鉑的抗腫瘤療效，利用磷酸槲皮蛋白對(duì)納米顆粒進(jìn)行了改進(jìn)。此外，在成纖維細(xì)胞-MCF7細(xì)胞共培養(yǎng)中發(fā)現(xiàn)，采用槲皮素治療可以逆轉(zhuǎn)CAFs表型[30]。

4 小 結(jié)

成纖維細(xì)胞的生長(zhǎng)浸潤(rùn)與食管癌的發(fā)生、發(fā)展、浸潤(rùn)及轉(zhuǎn)移密切相關(guān)，抑制成纖維細(xì)胞生成的相關(guān)藥物在食管癌治療中取得的療效為食管癌患者帶來(lái)希望。近年來(lái)，人們逐漸發(fā)現(xiàn)采用單純西藥抑制成纖維細(xì)胞的治療有諸多的局限性。隨著中醫(yī)學(xué)對(duì)其進(jìn)行的深入研究，中藥及其有效成分在抑制成纖維細(xì)胞生成治療中表現(xiàn)出簡(jiǎn)、便、效、廉的特點(diǎn)。探索中藥抑制成纖維細(xì)胞生成的機(jī)制，并驗(yàn)證其療效，有利于加快中醫(yī)藥現(xiàn)代化進(jìn)程，推動(dòng)中醫(yī)藥真正走向世界。