廖正睿，張立，高萍，江青艷，彭艷，朱曉彤

（1.華南農(nóng)業(yè)大學動物科學學院，廣東省動物營養(yǎng)調控重點實驗室，廣東 廣州 510642；2.上海美農(nóng)生物科技股份有限公司，上海 201807）

早期斷奶是集約化養(yǎng)豬生產(chǎn)中普遍采取的措施，但是仔豬過早斷奶不僅會加重其應激反應，更加劇了斷奶仔豬由于消化系統(tǒng)發(fā)育不成熟而引發(fā)的一系列不良后果，如仔豬對飼糧的消化吸收障礙，仔豬生長抑制，抵抗力下降和死淘率增加等［1-3］。

有研究表明，仔豬斷奶后不能繼續(xù)從母體中攝取乳糖等營養(yǎng)物質，再加上其胃酸的分泌不足，消化道發(fā)育不完全，最終導致仔豬對飼糧養(yǎng)分的消化不充分，養(yǎng)分獲取量減少，影響仔豬的生長［4-5］。為解決仔豬早期斷奶所引發(fā)的上述問題，目前養(yǎng)豬生產(chǎn)中廣泛采取在斷乳仔豬飼糧中添加酸化劑等飼料添加劑，以促進仔豬腸道發(fā)育，提高仔豬對養(yǎng)分的消化效率［6］。但是在實際生產(chǎn)中，很多酸化劑的作用極不穩(wěn)定，主要原因是酸化劑中的氫離子進入小腸后會與小腸分泌的弱堿性腸液中和，最終不能到達小腸后段［7］。因此，研制安全、穩(wěn)定和高效的酸化劑已成為當前亟待解決的問題。本研究通過對酸化劑產(chǎn)品進行工藝改造，經(jīng)飼養(yǎng)試驗綜合評價不同工藝制備的酸化劑對斷奶仔豬生長性能、胃腸消化酶及飼料蛋白消化的影響，旨在為酸化劑的合理使用及效果評價提供參考依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗材料和場地

試驗中所用的未包被和包被酸化劑均由上海美農(nóng)生物科技有限公司提供，酸化劑主要成分和配方見表1。試驗場地和試驗動物由惠州益發(fā)豬場提供，飼養(yǎng)試驗全程在惠州益發(fā)豬場保育舍中進行。

表1 酸化劑的配方說明Table 1 Formula description of the compound acidizer

1.2 試驗設計與分組

選擇90頭遺傳背景一致且體質量接近的杜長大三元雜仔豬，均在25日齡斷奶，隨機分成2個酸化劑處理組和1個對照組，每組3個重復，每個重復10頭豬。正式試驗前，飼喂斷奶仔豬10 d教槽料，然后分別使用不同工藝處理的酸化劑（未包被酸化劑或包被酸化劑）對試驗組進行3 d的預飼，酸化劑劑量為3 kg/t飼糧，對照組不做處理（采食不含酸化劑的飼糧，其他飼養(yǎng)條件與處理組相同），試驗的正試期為28 d。

表2 試驗動物的分組與處理Table 2 Group and treatment of test animals

1.3 試驗飼糧組成和營養(yǎng)水平

試驗飼糧由廣州華紅飼糧有限公司配制，主要原料有豆粕、玉米、礦物質、魚粉、維生素、賴氨酸和蛋氨酸等，飼糧組成成分及營養(yǎng)水平見表3。

表3 試驗飼糧組成及主要營養(yǎng)指標Table 3 Test diets composition and nutrition level

1.4 試驗測定指標

1.4.1 生長性能試驗前后每頭仔豬均稱質量，記錄采食量，并根據(jù)以上數(shù)據(jù)計算試驗過程中斷奶仔豬的平均增質量和料重比。

斷奶仔豬的平均增質量：

1.4.2 血清中相關生化指標試驗結束時，每組選取8頭斷奶仔豬屠宰，前腔靜脈采血，分離制備血清，測定血清中球蛋白（免疫球蛋白G測試盒，南京建成生物工程研究所）、白蛋白（白蛋白測定試劑盒，南京建成生物工程研究所）、總蛋白（總蛋白定量測定試劑盒，南京建成生物工程研究所）、甘油三酯（甘油三酯測試盒，中生北控生物科技股份有限公司）、膽固醇（總膽固醇測試盒，中生北控生物科技股份有限公司）和尿素氮（尿素氮測試盒，南京建成生物工程研究所）的含量。

1.4.3 仔豬血清中相關激素含量的測定采用放射免疫分析法（RIA）測定各組仔豬血清中T3（三碘甲狀腺原氨酸試劑盒，天津九鼎生物技術有限公司）、T4（甲狀腺素試劑盒，天津九鼎生物技術有限公司）、IGF-Ⅰ（IGF-Ⅰ試劑盒，天津九鼎生物技術有限公司）、胰島素（胰島素測試盒，天津九鼎生物技術有限公司）、皮質醇（皮質醇測試盒，天津九鼎生物技術有限公司）的含量。

1.4.4 酸化劑對斷奶仔豬胃中飼糧蛋白消化和腸道消化功能的影響采集斷奶仔豬胃和小腸各段的食糜，測定食糜的pH值，同時留取各段的食糜，-20℃保存?zhèn)溆?。通過酶促反應和顯色反應測定胃腸道消化酶活性。凱氏定氮法分別測定胃中和回腸末端內容物食糜中單位質量粗蛋白的含量，BCA法測定胃中上清液蛋白的含量，SDS-PAGE和Tricine-SDSPAGE法分析胃上清液中蛋白的分布情況。

1.5 數(shù)據(jù)統(tǒng)計

試驗數(shù)據(jù)以（mean±se）表示，并用SPSS 18.0統(tǒng)計學軟件進行單因素方差分析和多重比較。

2 結果與分析

2.1 酸化劑對斷奶仔豬生長性能的影響

2.1.1 酸化劑對斷奶仔豬生長性能及血液相關指標的影響由表4的結果可知，飼糧中添加包被或未包被酸化劑均顯著提高斷奶仔豬的平均增質量、平均日采食量和平均料重比（P<0.05）。

表4 酸化劑對斷奶仔豬生長的影響Table 4 Effects of acidizers on the growth of weaned piglets

由表5結果可知，飼糧中添加包被或未包被酸化劑均顯著提高斷奶仔豬血清中白蛋白的含量。另外，飼糧中添加未包被酸化劑還明顯提高了斷奶仔豬血清中甘油三酯的含量。

表5 酸化劑對斷奶仔豬血清生化指標的影響Table 5 Effects of acidizers on serum biochemical indicators of weaned piglets

由表6結果可知，飼糧中添加包被酸化劑具有提高斷奶仔豬血清中IGF-Ⅰ含量的趨勢（P=0.06），但對其他激素的含量無顯著性影響。

表6 酸化劑對斷奶仔豬血清相關激素水平的影響Table 6 Effects of acidizers on serum-related hormone level in weaned piglets

2.1.2 酸化劑對斷奶仔豬胃中飼糧蛋白消化的影響由表7的結果可知，飼糧中添加包被或未包被酸化劑均顯著降低斷奶仔豬胃內pH值。另外，飼糧中添加包被酸化劑還明顯降低了斷奶仔豬胃內食糜中粗蛋白的含量（P<0.05）。

表7 酸化劑對斷奶仔豬胃中飼糧蛋白消化相關指標的影響Table 7 Effects of acidizers on digestion of gastric feed protein in weaned piglets

由圖1-A和圖1-B可知，對照組的胃食糜上清蛋白分子量主要集中在50～150 kU。2個處理組的胃食糜上清蛋白分子量主要集中在35～50 kU。另外，2個處理組的肽分子量主要集中在3.3～14.4 kU。上述結果提示，飼糧中添加包被或未包被酸化劑均顯著促進了斷奶仔豬胃內對飼糧蛋白的消化。

圖1 各組胃食糜上清蛋白分布Figure 1 Distribution of upper albumin of chyme in stomach

2.2 酸化劑對斷奶仔豬腸道蛋白酶活性的影響

由表8結果可知，飼糧中添加包被或未包被酸化劑均顯著提高斷奶仔豬十二指腸的胰蛋白酶活性，降低其回腸的pH。包被酸化劑還顯著提高了斷奶仔豬十二指腸糜蛋白酶和空腸胰蛋白酶的活性，而未包被酸化劑明顯降低了其空腸的pH（P<0.05）。

表8 酸化劑對小腸各段pH值以及胰蛋白酶和糜蛋白酶活性的影響Table 8 Effects of acidizers for each section of the small intestine on pH and activities of trypases and chylproteinases

由表9結果可知，飼糧中添加包被或未包被酸化劑均顯著降低斷奶仔豬十二指腸食糜上清蛋白的總濃度和回腸末端飼糧殘渣內粗蛋白的含量。另外，飼糧中添加包被酸化劑還明顯降低了斷奶仔豬空腸中食糜上清蛋白的含量（P<0.05）。

表9 酸化劑對斷奶仔豬小腸食糜上清蛋白濃度以及回腸末端食糜中CP含量的影響Table 9 Effects of acidizers on the concentration of upper albumin and CP at the end of the ileum of weaned piglets

3 討論與結論

新生仔豬的早期營養(yǎng)對其生長發(fā)育與健康起著重要的作用［8］。但是，早期斷奶的仔豬由于消化道發(fā)育不完全，對飼糧養(yǎng)分的消化利用效率低，從而限制其生長性能的發(fā)揮［9］。本研究發(fā)現(xiàn)，飼糧中添加酸化劑可顯著提高斷奶仔豬的平均增質量和平均日采食量，此結果與張玲玲［10］的研究結果相一致，說明在斷奶仔豬飼糧中添加酸化劑可以促進斷奶仔豬腸道的生長發(fā)育，提高仔豬對飼糧的消化和吸收，進而改善其生長性能。飼糧蛋白在消化道內的主要消化場所是胃和小腸，而主要的吸收場所是小腸。胃和小腸對飼糧蛋白的消化和吸收能力取決于消化酶的活性、分泌量和所處環(huán)境中的pH［11］。本研究發(fā)現(xiàn)，采食含酸化劑飼糧的斷奶仔豬其胃內的pH顯著降低，且飼糧蛋白在其胃內的消化率明顯提高。此外，本研究發(fā)現(xiàn)，飼糧中添加酸化劑降低了斷奶仔豬回腸末端殘渣內粗蛋白的含量和小腸各段食糜上清蛋白的濃度，胃內的蛋白質降解產(chǎn)物的分子量主要集中在3.3～14.4 kU，且包被酸化劑還能顯著降低斷奶仔豬胃內飼糧殘渣中的粗蛋白含量，上述結果與Luo Z F等［12］的研究結果相一致。由此可知，添加酸化劑能夠提高斷奶仔豬小腸對蛋白質的消化能力，而包被后的酸化劑因其緩釋作用，腸道消化效果比未包被的好。

對血液相關生化指標的測定發(fā)現(xiàn)，酸化劑能夠顯著提高斷奶仔豬血液中的白蛋白含量，降低球蛋白含量，對血清中總蛋白的含量無顯著影響，但未包被酸化劑可以提高其甘油三酯含量。血液中尿素、總膽固醇、甘油三酯和內毒素等結果可以反映機體的腎功能、糖類代謝、酯類代謝和腸道免疫等情況［13-14］。有研究發(fā)現(xiàn)，新生仔豬快速生長期除了大量合成白蛋白外，球蛋白因身體的增長和血清容積的增加而含量水平降低［15-16］。此外，白蛋白是動物機體中促進組織生長和修復的原材料，更是機體組織快速生長的基礎［17］。血清中的白蛋白來源于消化道對飼糧蛋白的消化吸收，經(jīng)肝臟合成后轉運至血清［18］。血清中白蛋白的提高也反映了機體對飼糧中蛋白的消化和利用提高。而未包被酸化劑可以提高斷奶仔豬血清中的甘油三酯含量，此結果與周亞麗［19］的研究結果不同。推測未包被酸化劑的作用機制可能是其減少了機體對外源性脂質的吸收，調節(jié)血脂分布、轉運和清除。上述結果表明，采食含酸化劑飼糧的仔豬其消化道對飼糧蛋白的消化和吸收增加。

對斷奶仔豬血液中相關激素的測定發(fā)現(xiàn)，包被酸化劑具有提高斷奶仔豬血清IGF-Ⅰ的趨勢，此結果與Mahdavi等［20］的研究結果一致。IGF-Ⅰ作為生長激素（growth hormone，GH）的外周靶腺激素，其在調控動物的生長中發(fā)揮了極為重要的作用［21］。當動物處于生長旺盛的時期，機體內GH和白蛋白的分泌量增加［22］。包被后的酸化劑促進IGF-Ⅰ的分泌作用與高萍等［23］報道的山梨酸能顯著促進肝臟分泌IGF-Ⅰ的研究結果相似。本研究所用的酸化劑中含有2%的山梨酸，試驗結果發(fā)現(xiàn)未包被的酸化劑對血液中IGF-Ⅰ的含量無明顯影響。推測包被后的酸化劑在小腸中受HCO3-的影響減少，山梨酸是否經(jīng)小腸吸收并促進肝臟IGF-Ⅰ的分泌有待進一步的探討。另外，血清總三碘甲腺原氨酸，甲狀腺素血清總甲狀腺素，胰島素和皮質醇等存在相互作用，對機體發(fā)育，能量代謝和應激反應等方面有所影響［24］。但測定結果發(fā)現(xiàn)，酸化劑對斷奶仔豬的血清總三碘甲腺原氨酸，甲狀腺素血清總甲狀腺素，胰島素和皮質醇等其他激素沒有明顯影響，此結果與石志敏等［25］的研究結果不同。推測斷奶仔豬已度過應激期，機體的能量代謝恢復到斷奶前水平，使機體不需要動員更多的能量來應對應激。上述結果表明，包被技術防止了酸化劑被過早過快地中和，使其酸化效果能夠延伸至空腸。

綜上，飼糧添加酸化劑可以提高斷奶仔豬的生長性能，促進胃腸道對飼糧蛋白質的消化，且包被酸化劑效果優(yōu)于未包被酸化劑。研究結果對深入認識酸化劑的合理使用及效果評價，促進斷奶仔豬的生長發(fā)育具有重要意義。