林維 梁詩(shī)敏 柴莉娜

復(fù)方草豆蔻合劑是中山市博愛醫(yī)院兒科常用中藥制劑,主要由草豆蔻、干姜、小茴香、肉桂等組成。方中草豆蔻,味辛,性溫,入脾胃經(jīng),具溫中祛寒、行氣燥濕之功效,能健脾胃,助運(yùn)化［1,2］。而干姜、肉桂具有溫中驅(qū)寒、以助豆蔻化濕溫中之力,為臣藥［3］；小茴香溫腎散寒、和胃理氣止痛,為佐藥［4］。薄荷素油辛香走竄,平抑前藥之溫性,而且具導(dǎo)引之功,為使藥［5］。各藥協(xié)同,共奏溫中驅(qū)寒、健胃驅(qū)風(fēng)的功效。用于小兒或成人脾胃虛寒所致的胃脹、食欲不振、惡性嘔吐等胃腸道疾病,療效顯著,一直以來深受醫(yī)生和廣大患者的歡迎［6］。本制劑質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)為干姜的薄層色譜鑒別,經(jīng)過前期薄層色譜鑒別方法摸索,建立了方中干姜薄層鑒別方法,為驗(yàn)證此方法在不同廠家的薄層板、展開劑預(yù)飽和與否、不同濕度及不同溫度的情況下對(duì)薄層色譜鑒別檢查結(jié)果產(chǎn)生的影響,故對(duì)上述薄層色譜鑒別方法進(jìn)行耐藥性試驗(yàn)。

1 材料與方法

1.1 儀器 TG328A 型電光分析天平(湘儀天平儀器設(shè)備有限公司)；T1000 型電子分析天平(常熟市雙杰測(cè)試儀器廠)；AS 系列超聲波清洗機(jī)(天津奧特賽恩斯儀器有限公司)；ZF-1 型三用紫外分析儀(上海力辰儀器科技有限公司)。

1.2 試劑 干姜對(duì)照藥材(批號(hào)：120942-201309)購(gòu)自中國(guó)食品藥品檢定研究院；復(fù)方草豆蔻合劑(批號(hào)：20210520,20210601,20210629)均由中山市博愛醫(yī)院制劑室生產(chǎn)提供；薄層板：硅膠G 薄層板［青島海洋化工有限公司,默克化工技術(shù)(上海)有限公司］；研究中所用的乙酸乙酯、石油醚(30～60℃)、三氯甲烷等均為分析純,均購(gòu)于廣州化學(xué)試劑廠。

1.3 方法

1.3.1 供試品溶液制備 本品100 ml,置分液漏斗中,用石油醚(30～60℃)40 ml振搖提取2次,合并石油醚液,揮干,殘?jiān)邮兔?30～60℃)1 ml 使溶解,作為供試品溶液。

1.3.2 對(duì)照藥材溶液制備 對(duì)照藥材溶液的制備：取干姜對(duì)照藥材1 g,加乙酸乙酯10 ml,超聲處理20 min,濾過,濾液揮干,殘?jiān)右宜嵋阴? ml 溶解,作為對(duì)照藥材溶液。

1.3.3 陰性對(duì)照溶液制備 陰性對(duì)照溶液制備：取姜酊的陰性對(duì)照,按照供試品溶液制備方法,制成缺姜酊的陰性對(duì)照溶液。

1.3.4 薄層色譜鑒別 吸取上述3 種溶液各5 μl,分別點(diǎn)于同一硅膠G 薄層板上,以石油醚(60～90℃)-三氯甲烷-乙酸乙酯(2∶1∶1)為展開劑,展開,取出,完成后取出并進(jìn)行晾干處理,噴以2%香草醛硫酸溶液,在105℃加熱至斑點(diǎn)清晰［7］。觀察供試品的色譜在與對(duì)照藥材相對(duì)應(yīng)的位置上顯現(xiàn)出相同的斑點(diǎn)。

1.3.5 試驗(yàn)條件 分別在3 種不同的硅膠薄層板、展開劑預(yù)飽和與否、不同濕度(18%和88%)、不同溫度(8℃和25℃)的條件下進(jìn)行薄層試驗(yàn),考察方法的耐用性。其中點(diǎn)樣順序：①缺姜酊的陰性對(duì)照；②復(fù)方草豆蔻合劑(批號(hào)：20210520)；③復(fù)方草豆蔻合劑(批號(hào)：20210601)；④復(fù)方草豆蔻合劑(批號(hào)：20210629)；⑤干姜對(duì)照藥材(批號(hào)：120942-201309)。

2 結(jié)果

2.1 不同薄層板試驗(yàn) 考察不同薄層板對(duì)薄層色譜的影響,結(jié)果表明,Merck 高效硅膠預(yù)制板(10×20 cm)和硅膠預(yù)制板(10×20 cm)圖譜斑點(diǎn)清晰,分離效果好。見圖1,圖2；硅膠G 自制硅膠板圖譜主斑點(diǎn)清晰,分離效果好。見圖3。

圖1 Merck 高效硅膠預(yù)制板

圖2 硅膠預(yù)制板

圖3 硅膠G 自制硅膠板

2.2 展開劑預(yù)飽和與否 展開劑預(yù)飽和15 min 的圖譜(見圖4)和未飽和的圖譜(見圖5)斑點(diǎn)都很清晰,分離效果都很好。

圖4 展開劑預(yù)飽和后薄層色譜圖

圖5 展開劑未預(yù)飽和后薄層色譜圖

2.3 不同濕度試驗(yàn) 在雙槽展開缸的一側(cè)加不同濃度的硫酸,濕度18%(硫酸∶水=100∶95.5)薄層色譜與濕度88%(硫酸∶水=10.8∶100)相比較為清晰［8,9］,分離效果相近。見圖6,圖7。

圖6 濕度18% 薄層色譜圖

圖7 濕度88%薄層色譜圖

2.4 不同溫度試驗(yàn) 低溫(8℃)與室溫(25℃)薄層色譜見圖8,圖9,結(jié)果表明,低溫下下薄層色譜,色譜斑點(diǎn)分離效果不好,對(duì)主斑點(diǎn)有影響。

圖8 低溫(8℃) 薄層色譜圖

圖9 室溫(25℃)薄層色譜圖

3 小結(jié)

干姜薄層色譜鑒別受溫度影響較大,實(shí)驗(yàn)過程中應(yīng)注意控制溫度條件。新建干姜的薄層色譜鑒別方法在3 種不同的硅膠薄層板,展開劑預(yù)飽和與否,不同濕度條件下各斑點(diǎn)的分離度均較好,在與對(duì)照藥材相應(yīng)位置上均顯相同斑點(diǎn),且斑點(diǎn)顯色清晰,表明該種薄層色譜鑒別方法耐用性較好,可作為復(fù)方草豆蔻合劑的質(zhì)控方法。