吳子峰，徐阿妹，遲元?jiǎng)P，曹 舜，何艷秋，戚仁德，趙 偉*

（1.安徽省農(nóng)業(yè)技術(shù)推廣總站，合肥 230001；2.安徽省農(nóng)業(yè)科學(xué)院植物保護(hù)與農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全研究所，合肥 230031）

我國(guó)小麥赤霉病發(fā)生普遍且嚴(yán)重，長(zhǎng)江中下游和江淮麥區(qū)為小麥赤霉病的常發(fā)區(qū)，常年發(fā)生面積達(dá)4 000萬(wàn)～5 000萬(wàn)畝。近年來(lái)，受氣候變化、耕作制度、秸稈還田等多種因素影響，小麥赤霉病逐年向北部、西部遷移，并有逐年加重的趨勢(shì)，甚至逐步上升為小麥主產(chǎn)區(qū)的主要病害之一。小麥赤霉病在全世界小麥主要種植區(qū)域均普遍發(fā)生，對(duì)小麥產(chǎn)量和品質(zhì)影響巨大。在一般年份，小麥赤霉病造成的損失為10%～20%，在赤霉病流行年份，損失可達(dá)20%～40%，甚至部分田塊絕收[1-2]。除了影響產(chǎn)量之外，麥穗被侵染后，還會(huì)產(chǎn)生多種毒素，如DON毒素和ZEN毒素等，可引起食用者頭暈、嘔吐，且容易導(dǎo)致流產(chǎn)。該類(lèi)毒素異常穩(wěn)定，高溫下也不易降解，污染的麥粒作為畜牧飼料，最終還能傳導(dǎo)到食物鏈最頂端的人體內(nèi)，毒素在人體肝臟內(nèi)常年累積后，易引發(fā)肝臟癌變[3]。因此，從食品安全角度考慮，小麥赤霉病的高效、安全防控是關(guān)系糧食安全的大事。在我國(guó)，小麥赤霉病菌的優(yōu)勢(shì)種主要為禾谷鐮孢（Fusarium graminearum）和燕麥鐮孢（F.avenaceum）。近年來(lái)，在黃淮麥區(qū)，假禾谷鐮孢（F.pseudogramineaqum）也逐漸上升成為優(yōu)勢(shì)種群之一[4-5]。

小麥赤霉病可防不可治，在小麥齊穗揚(yáng)花初始期選擇有效藥劑，是保證防控效果的關(guān)鍵。然而，長(zhǎng)期單一藥劑的使用以及不合理的施藥方式，使得病原菌很容易產(chǎn)生抗藥性，導(dǎo)致藥效下降、病害暴發(fā)，進(jìn)而增加用藥量，形成惡性循環(huán)，提高用藥成本，加劇環(huán)境污染，這也是化學(xué)防治的一大難題。在江蘇、安徽等省份，小麥赤霉病菌已經(jīng)對(duì)多菌靈等苯并咪唑類(lèi)殺菌劑產(chǎn)生了顯著的抗藥性，而使此類(lèi)藥劑防治效果下降[6-8]。因此，選擇具有不同化學(xué)結(jié)構(gòu)、作用機(jī)理的農(nóng)藥合理復(fù)配是克服抗藥性發(fā)生與發(fā)展的有效措施，可以改進(jìn)藥劑性能、減少單位面積的用藥量，提高防治效果。

目前市場(chǎng)上用于防控小麥赤霉病的主要藥劑包括苯并咪唑類(lèi)殺菌劑如多菌靈，咪唑類(lèi)殺菌劑如咪鮮胺，三唑類(lèi)殺菌劑如戊唑醇、丙硫菌唑、氟環(huán)唑等，琥珀酸脫氫酶抑制劑氟唑菌酰羥胺以及2-氰基丙烯酸酯類(lèi)殺菌劑氰烯菌酯等[9]。以上藥劑靶標(biāo)作用位點(diǎn)不同，防控效果存在較為顯著的差異[10]。因此，利用現(xiàn)有不同作用位點(diǎn)的小麥赤霉病防控藥劑進(jìn)行混配，進(jìn)而提高防控效果、減少抗藥的風(fēng)險(xiǎn)，達(dá)到將“存量”技術(shù)進(jìn)行革新的目的，為小麥生產(chǎn)中赤霉病的高效科學(xué)防控提供技術(shù)支撐。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

供試藥劑：20%氟唑菌酰羥胺SC，先正達(dá)公司；12.5%氟環(huán)唑SC，巴斯夫作物保護(hù)有限公司；30%丙硫菌唑OD，安徽久易農(nóng)業(yè)股份有限公司；25%氰烯菌酯SC，江蘇省農(nóng)藥研究所股份有限公司；45%咪鮮胺OD，南京華洲藥業(yè)有限公司。

供試菌株：禾谷鐮孢（Fusarium graminearum），安徽省農(nóng)業(yè)科學(xué)院植保質(zhì)安所分離自安徽省小麥田病株樣本，純化鑒定后經(jīng)致病性檢測(cè)為強(qiáng)致病力菌株并保存。

供試小麥品種：‘泛麥5號(hào)’。

1.2 藥劑室內(nèi)毒力測(cè)定

取測(cè)試藥劑，按照有效成分折算成一定質(zhì)量濃度梯度：0.05、0.1、0.2、0.4、0.8、1.6、3.2和6.4 μg/mL。使用PDA培養(yǎng)基（馬鈴薯20.0 g、葡萄糖20.0 g、瓊脂20.0 g、蒸餾水1 000 mL定容），將活化的菌株用打孔器制取5 mm直徑的菌絲塊，分別移到含有供試藥液培養(yǎng)基平板上，于25℃培養(yǎng)。待空白對(duì)照的菌落直徑達(dá)到培養(yǎng)皿直徑的90%左右，采用十字交叉法測(cè)量菌落直徑，按式（1）計(jì)算菌絲生長(zhǎng)抑制率。

將菌絲生長(zhǎng)抑制率換算成抑制機(jī)率值（y），藥劑濃度換算成濃度對(duì)數(shù)（x），按濃度對(duì)數(shù)為橫坐標(biāo)、機(jī)率值為縱坐標(biāo)作毒力回歸直線，求得不同藥劑對(duì)小麥赤霉病菌的毒力回歸方程，并計(jì)算EC50及相關(guān)系數(shù)r值。根據(jù)Wadley方法評(píng)價(jià)混劑的相互作用，按式（2）和（3）計(jì)算EC50（理論值）和協(xié)同增效系數(shù)（SR）。

式中：a、b是各組分在混劑中含量比例，EC50（A）、EC50（B）分別表示氟環(huán)唑和氟唑菌酰羥胺單劑的EC50值。根據(jù)SR值分析混配的效果，SR≤0.5，則2種藥劑混配有拮抗作用；SR=0.5～1.5，則2種藥劑混配有加和作用；SR≥1.5，則2種藥劑混配有增效作用[11]。

1.3 田間防控試驗(yàn)

1.3.1 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

2021年度試驗(yàn)地點(diǎn)位于壽縣安豐塘鎮(zhèn)，為稻茬麥，選擇土壤肥力中等、均勻一致、排灌良好的地塊。小麥于2021年10月26日播種，于小麥揚(yáng)花初期（4月11日）進(jìn)行施藥，所用藥劑見(jiàn)表1。處理6～7為現(xiàn)配現(xiàn)用。試驗(yàn)每個(gè)小區(qū)為30 m2，小區(qū)隨機(jī)排列，每個(gè)處理設(shè)3個(gè)重復(fù)。

表1 供試藥劑使用量及有效使用量

1.3.2 調(diào)查方法

藥后22 d（5月3日）進(jìn)行調(diào)查，每個(gè)小區(qū)隨機(jī)調(diào)查3個(gè)點(diǎn)，按照不同分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)記錄穗數(shù)，根據(jù)病穗率與發(fā)病嚴(yán)重度計(jì)算病情指數(shù)，根據(jù)病情指數(shù)計(jì)算防效。小麥赤霉病嚴(yán)重度按照0、1、3、5、7分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)，詳情見(jiàn)表2。病穗率、病情指數(shù)和防效分別按式（4）、（5）和（6）計(jì)算[12]。

表2 小麥赤霉病分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)

1.3.3 數(shù)據(jù)分析

利用SPSS 24.0軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，采用LSD法對(duì)試驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行差異顯著性分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 室內(nèi)毒力測(cè)定結(jié)果

室內(nèi)平板毒力測(cè)定結(jié)果表明，氟唑菌酰羥胺和氟環(huán)唑單劑對(duì)小麥赤霉病菌的菌絲生長(zhǎng)均具有較強(qiáng)的抑制作用，氟環(huán)唑的EC50為0.870 2 mg/L，氟唑菌酰羥胺EC50為0.289 5 mg/L。將氟環(huán)唑和氟唑菌酰羥胺按照一定質(zhì)量比進(jìn)行混配后，在5∶1～1∶5的范圍內(nèi)，除比例為1∶1外，其抑制菌絲的生長(zhǎng)均具有加和作用，比例為1∶1時(shí)，EC50值為0.270 6 mg/L，SR值為1.605 6，具有增效作用（表3）。

表3 氟環(huán)唑和氟唑菌酰羥胺及5種配比對(duì)禾谷鐮孢的毒力測(cè)定結(jié)果

2.2 田間防治效果

從表4可知，該區(qū)域小麥赤霉病發(fā)病嚴(yán)重，空白對(duì)照區(qū)域的病穗率達(dá)到36.56%，病情指數(shù)為17.72。不同藥劑處理對(duì)小麥赤霉病均具有一定的防效。不同單劑處理中，在有效劑量都為180 g a.i./hm2時(shí)，45%咪鮮胺OD防效較差，為41.25%；20%氟唑菌酰羥胺SC和12.5%氟環(huán)唑SC單劑防效較好，分別為74.19%和71.70%；30%丙硫菌唑OD和25%氰烯菌酯SC防效分別為69.71%和66.29%，且不同處理間防效差異顯著。將12.5%氟環(huán)唑SC和20%氟唑菌酰SC按照有效濃度折算成質(zhì)量比為1∶1進(jìn)行混配，即單個(gè)劑型的有效劑量為90 g a.i./hm2，復(fù)配后在總有效成分施用量同樣為180 g a.i./hm2的情況下，其對(duì)小麥赤霉病的防效顯著高于單劑，為81.13%。進(jìn)一步將單個(gè)成分有效劑量提升到120 g a.i./hm2，按照質(zhì)量比為1∶1進(jìn)行混配后總的有效使用劑量為240 g a.i./hm2，其防效進(jìn)一步提升，可達(dá)90.16%。

表4 不同殺菌劑處理對(duì)小麥赤霉病的田間防效

3 結(jié)論與討論

目前市場(chǎng)上常用于防控小麥赤霉病的藥劑作用靶標(biāo)單一，而單一藥劑的長(zhǎng)期使用存在潛在的抗藥性風(fēng)險(xiǎn)。氰烯菌酯通過(guò)抑制Ⅰ型肌球蛋白ATPase酶活性而發(fā)揮作用，室內(nèi)突變導(dǎo)致Ⅰ型肌球蛋白的217位和420位氨基酸發(fā)生了點(diǎn)突變，這可導(dǎo)致病原菌產(chǎn)生抗藥性[13]。本文中所用的氟環(huán)唑是三唑類(lèi)殺菌劑，為甾醇生物合成抑制劑，主要通過(guò)抑制菌體細(xì)胞膜重要組成部分麥角甾醇的生物合成，從而影響真菌細(xì)胞膜的形成而實(shí)現(xiàn)殺菌的目的。目前尚未出現(xiàn)禾谷鐮孢對(duì)三唑類(lèi)化合物具有顯著抗性的發(fā)現(xiàn)和報(bào)道。琥珀酸脫氫酶抑制劑（SDHI）類(lèi)殺菌劑對(duì)小麥赤霉病敏感度均較低，在防控小麥赤霉病的應(yīng)用中較少，直到氟唑菌酰羥胺的問(wèn)世[14]。SDHI類(lèi)殺菌劑主要通過(guò)抑制電子傳遞鏈中的蛋白質(zhì)復(fù)合體II，從而阻止植物病原菌產(chǎn)能，抑制真菌生長(zhǎng)，該類(lèi)殺菌劑作用位點(diǎn)單一，具有潛在的抗藥性風(fēng)險(xiǎn)，在田間防控時(shí)要避免單獨(dú)使用。

本研究將目前使用范圍較廣、作用機(jī)理和作用靶標(biāo)不同的三唑類(lèi)殺菌劑氟環(huán)唑和琥珀酸脫氫酶抑制劑（SDHI）類(lèi)殺菌劑氟唑菌酰羥胺進(jìn)行室內(nèi)毒力測(cè)定、增效組合篩選及田間實(shí)際防控驗(yàn)證。室內(nèi)聯(lián)合作用測(cè)定結(jié)果表明，氟環(huán)唑和氟唑菌酰羥胺對(duì)禾谷鐮孢有很好的生長(zhǎng)抑制效果，EC50分別為0.870 2和0.289 5 mg/L，兩組分不同配比之間存在明顯加和或增效作用，按照1∶1配比時(shí)增效系數(shù)為1.605 6，其增加了抑菌效果。田間試驗(yàn)結(jié)果表明，在各藥劑使用相同劑量（180 g.i./hm2）的條件下，氟環(huán)唑和氟唑菌酰羥胺單劑防效都在70%以上，顯著好于45%咪鮮胺OD的防效；當(dāng)兩者復(fù)配有效質(zhì)量濃度為240 g a.i./hm2時(shí)，防效更是可提高到90%以上，其防控效果顯著好于單劑防效。

綜上，氟環(huán)唑和氟唑菌酰羥胺具有不同作用靶標(biāo)位點(diǎn)，兩者之間不存在交互抗性，且殺菌譜也有所差異，兩組分混合使用可延緩病菌對(duì)單一藥劑的抗藥性，同時(shí)增加作物防病譜，達(dá)到兼防其他病害的目的，可有效減少農(nóng)藥的施用量，為作物防病、增產(chǎn)提供新的方案。