袁 健，陳夢(mèng)元，鄭 義，樊紅鳥(niǎo)

(1貴州省分析測(cè)試研究院，貴州 貴陽(yáng) 550014；2貴州省酒類(lèi)產(chǎn)品質(zhì)量檢驗(yàn)檢測(cè)院，貴州 貴陽(yáng) 550014；3.貴州省檢測(cè)技術(shù)研究應(yīng)用中心，貴州 貴陽(yáng) 550002)

鄰苯二甲酸酯(PAEs)是一種被廣泛使用的塑化劑，能夠顯著提升塑料制品的柔韌性和延展性[1]，并且占有80%以上的塑化劑市場(chǎng)[2]，常見(jiàn)于塑料玩具，醫(yī)用血袋以及護(hù)理產(chǎn)品等，而在現(xiàn)代餐飲業(yè)中廣受歡迎的酒水飲品里也能檢測(cè)到PAEs。釀酒過(guò)程中，酒水能通過(guò)接觸到塑料輸送管、塑料酒桶、塑料包裝等制品，從而受到PAEs污染，也有違法企業(yè)直接向酒水中加入PAEs，以增加酒水粘度，提高口感。研究表明，PAEs能夠通過(guò)呼吸道、消化道、皮膚以及其他途徑進(jìn)入人體，其原型、代謝產(chǎn)物以及降解產(chǎn)物均可對(duì)腎臟、肺臟、內(nèi)分泌系統(tǒng)以及生殖系統(tǒng)等造成損傷[3]，因此酒水中的PAEs污染一直是國(guó)內(nèi)公共衛(wèi)生健康的一個(gè)關(guān)注重點(diǎn)，加強(qiáng)對(duì)酒水中PAEs含量的檢測(cè)力度對(duì)改善公共衛(wèi)生條件具有重大意義。常見(jiàn)的PAEs檢測(cè)方法包括高效液相色譜法(HPLC)、高效液相色譜質(zhì)譜聯(lián)用(HPLC/MS)、氣相色譜法(GC)以及氣相色譜質(zhì)譜聯(lián)用(GC/MS)。大量文獻(xiàn)表明了這些方法在檢測(cè)PAEs時(shí)對(duì)定性和定量分析展現(xiàn)出的高精準(zhǔn)性，如Fan等人通過(guò)HPLC在11個(gè)紅酒樣品以及30個(gè)烈酒樣品中檢測(cè)出4種PAEs[4]；Dul等人通過(guò)GC/MS確定多個(gè)茶水樣品中的PAEs成分[5]；Xu等人則通過(guò)液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜(LC-MS/MS)從包括乳制品、蒸餾酒、罐頭食品在內(nèi)的多種食物樣品中檢測(cè)出23種PAEs[6]。除了傳統(tǒng)檢測(cè)方法，近年來(lái)也有研究者針對(duì)PAEs的檢測(cè)提出了更快捷簡(jiǎn)便且精確的新技術(shù)，如表面增強(qiáng)拉曼光譜(SERS)[7]和頂空固相微萃取-氣質(zhì)聯(lián)用(HS-SPME-GC-MS)[8]等，然而傳統(tǒng)檢測(cè)手段發(fā)展成熟，應(yīng)用廣泛，依然是多數(shù)檢測(cè)研究的首要選擇[9]。

許多國(guó)家政府部門(mén)都針對(duì)食品中的殘留PAEs作出了有關(guān)規(guī)定，以鄰苯二甲酸二正丁酯(DBP)為例，包括歐洲環(huán)境局、美國(guó)環(huán)保署和中國(guó)衛(wèi)生部的政府機(jī)構(gòu)都設(shè)定了300 ng/mL的殘留限量標(biāo)準(zhǔn)[10]。此外，我國(guó)于2016年發(fā)布了最新版本的GB 5009.271—2016《食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 食品中鄰苯二甲酸酯的測(cè)定》，對(duì)PAEs的分析檢測(cè)方法標(biāo)準(zhǔn)做出了明確規(guī)范與指導(dǎo)[11]。盡管我國(guó)對(duì)于酒水食品中的DBP和DEHP含量并未出臺(tái)明確規(guī)定作為限制，但國(guó)家食品安全風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估中心在綜合分析了不同國(guó)際組織提出的安全限值后，于2014年發(fā)布了文件《國(guó)家衛(wèi)生計(jì)生委辦公廳關(guān)于通報(bào)成人飲酒者DEHP和DBP初步風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估結(jié)果的函》(國(guó)衛(wèi)辦食品函〔2013〕283號(hào))。文件中提出，白酒中塑化劑DEHP和DBP的含量分別在5 mg/kg和1 mg/kg以下時(shí)，對(duì)飲酒者的健康風(fēng)險(xiǎn)處于可接受水平。本研究依據(jù)該項(xiàng)規(guī)定，采用GC-MS對(duì)貴州省仁懷市某釀酒生產(chǎn)廠近3年生產(chǎn)以及貯存5年至10年的大曲醬香基酒樣品進(jìn)行鄰苯二甲酸二正丁酯(DBP)與鄰苯二甲酸二(2-乙基)己酯(DEHP)含量檢測(cè)與分析，為仁懷市白酒品質(zhì)監(jiān)控與評(píng)估提供參考依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)材料

大曲醬香酒輪次基酒樣品(采集自仁懷市某釀酒生產(chǎn)工廠)，3年內(nèi)生產(chǎn)輪次基酒樣品140個(gè)；貯藏5年基酒樣品13個(gè)；貯藏8年基酒樣品5個(gè)；貯藏10年基酒樣品5個(gè)。

1.2 儀器設(shè)備

氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀(GC-MS)(安捷倫 7890A GC/5975 MSD)；分析天平(0.0001 g，梅特勒托利多)；渦旋振蕩器(美國(guó)賽默飛公司)等；超聲波發(fā)生器(昆山市超聲儀器有限公司)。

1.3 藥品和試劑

鄰苯二甲酸二正丁酯(DBP)標(biāo)準(zhǔn)品(Dr.Ehrenstorfer)；鄰苯二甲酸二(2-乙基)己酯(DEHP)標(biāo)準(zhǔn)品(Dr.Ehrenstorfer)；正己烷(色譜純，Aladdin)；丙酮(色譜純，Aladdin)；實(shí)驗(yàn)室自制超純水。

1.4 標(biāo)準(zhǔn)溶液配置

鄰苯二甲酸酯標(biāo)準(zhǔn)中間溶液(10 μg/mL)配置：準(zhǔn)確量取2種標(biāo)準(zhǔn)品(1000 μg/mL)各1 mL，移至100 mL容量瓶中，并使用正己烷準(zhǔn)確定容至容量瓶刻度線。

鄰苯二甲酸酯標(biāo)準(zhǔn)系列工作液配置：準(zhǔn)確量取不同體積的2種鄰苯二甲酸酯標(biāo)準(zhǔn)中間溶液(10 μg/mL)，使用正己烷逐級(jí)稀釋?zhuān)渲贸蓾舛葹?.00 μg/mL、0.02 μg/mL、0.05 μg/mL、0.10 μg/mL、0.20 μg/mL、0.50 μg/mL、1.00 μg/mL的標(biāo)準(zhǔn)系列溶液，現(xiàn)用現(xiàn)配。

1.5 樣品前處理

準(zhǔn)確稱(chēng)取輪次基酒樣品2.0 g(精確至0.0001 g)置于25 mL具塞磨口離心管中，加入2～5 mL蒸餾水，渦旋混勻；再準(zhǔn)確加入10 mL正己烷，渦旋振蕩1 min，劇烈振搖1 min；超聲提取30 min后，1000 r/min，5 min離心；取上清液，供GC-MS分析。

1.6 色譜條件

Agient HP-5ms色譜柱，30 m×0.25 mm×0.25 μm；進(jìn)樣口溫度：260 ℃；程序升溫：初始柱溫60 ℃，保持1 min，以20 ℃/min的速度升溫至220 ℃，保持1 min，以5 ℃/min的速度升溫至250 ℃，保持1 min，再以20 ℃/min的速度升溫至290 ℃，保持7.5 min。

載氣：高純氦(純度>99.999%)，流速：1.00 mL/min；進(jìn)樣方式：不分流進(jìn)樣；進(jìn)樣量：1 μL。

1.7 樣品溶液的測(cè)定

測(cè)定樣品前，將DBP和DEHP兩種鄰苯二甲酸酯的標(biāo)準(zhǔn)系列工作液分別注入氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀中，測(cè)定相應(yīng)的物質(zhì)的色譜峰面積，以標(biāo)準(zhǔn)工作液的質(zhì)量濃度為橫坐標(biāo)，以相應(yīng)的峰面積為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。繪制完成后，將前處理過(guò)的樣品溶液注入氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀中，得到兩種待測(cè)鄰苯二甲酸酯的峰面積，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線得到待測(cè)液中鄰苯二甲酸酯的濃度。

2 結(jié)果與分析

2.1 3年內(nèi)產(chǎn)輪次基酒DBP、DEHP含量測(cè)定

在對(duì)抽取的近3年生產(chǎn)的140個(gè)醬香輪次基酒樣品(七個(gè)輪次，每輪次20個(gè)樣品)進(jìn)行GC-MS檢驗(yàn)后得到樣品中DBP與DEHP含量，結(jié)果如表1、表2所示。140個(gè)受檢樣品中，檢出DBP最大平均濃度為第七輪次的0.128 mg/kg，最小平均濃度為第一輪次的0.084 mg/kg；檢出DEHP最大平均濃度為第七輪次的0.152 mg/kg，最小平均濃度為第五輪次的0.116 mg/kg。由此可見(jiàn)，DBP和DEHP的含量與輪次數(shù)間不存在線性關(guān)系，且各自低于5.0 mg/kg和1.0 mg/kg的風(fēng)險(xiǎn)值，兩種鄰苯二甲酸酯的含量不隨輪次的增加而上升。

表1 3年內(nèi)產(chǎn)大曲醬香輪次基酒DBP含量

表2 3年內(nèi)產(chǎn)大曲醬香輪次基酒DEHP含量

2.2 貯藏5年至10年醬香基酒DBP、DEHP含量測(cè)定

隨機(jī)抽取酒廠中貯藏5年、8年以及10年的大曲醬香基酒樣品共23個(gè)，按年份分為3組，并對(duì)其進(jìn)行DBP和DEHP的含量檢測(cè)，結(jié)果如表3至表5所示。各組樣品中，檢出DBP最大平均濃度為10年基酒組的1.918 mg/kg，最小平均濃度為5年基酒組的1.128 mg/kg；檢出DEHP最大平均濃度為5年基酒組的0.234 mg/kg，最小平均濃度為3年基酒組的0.196 mg/kg。由此可見(jiàn)兩種鄰苯二甲酸酯的濃度并未隨貯存年限的增加而上升，各組中DBP平均濃度均顯著高于DEHP濃度。

表3 大曲醬香基酒(5年基酒)中DBP、DEHP含量

表4 大曲醬香基酒(8年基酒)中DBP、DEHP含量測(cè)定結(jié)果

表5 大曲醬香基酒(10年基酒)中DBP、DEHP含量測(cè)定結(jié)果

3 討論

本文采用了氣相色譜質(zhì)譜聯(lián)用分析方法，對(duì)大曲醬香基酒中的DBP和DEHP兩種塑化劑進(jìn)行了檢測(cè)，目前對(duì)醬香輪次基酒以及醬香成品酒中的塑化劑含量尚未出臺(tái)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)，因此本研究采用國(guó)家食品安全風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估專(zhuān)家委員會(huì)的評(píng)估結(jié)論，將5 mg/kg和1 mg/kg分別設(shè)為DBP與DEHP的風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估值。從表1和表2的數(shù)據(jù)發(fā)現(xiàn)，近三年生產(chǎn)的大曲醬香基酒中DBP和DEHP的最高含量分別為0.438 mg/kg和0.238 mg/kg，均遠(yuǎn)低于風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估值。而從表3～表5的數(shù)據(jù)中發(fā)現(xiàn)，盡管貯存5年至10年的醬香基酒中DEHP含量均低于風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估值，卻存在超過(guò)風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估值濃度的5年基酒樣品A1(5.83 mg/kg)以及接近風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估值濃度的10年基酒樣品C1和C2(3.82 mg/kg和3.46 mg/kg)，表明該地所產(chǎn)基酒具有DBP含量超標(biāo)的潛在風(fēng)險(xiǎn)。

有報(bào)道指出白酒中塑化劑來(lái)源主要分為兩類(lèi)，一是原料引入，釀酒原料在通過(guò)發(fā)酵與蒸餾環(huán)節(jié)后，會(huì)自然產(chǎn)生塑化劑成分，有微量的塑化劑進(jìn)入到白酒中；二是中途接觸，即在釀造過(guò)程中接觸塑料制品，塑化劑從塑料制品表面遷移進(jìn)入到白酒中，這使白酒中塑化劑含量急劇增加[12]。2012年在仁懷市政府大力推動(dòng)下，雖然完成了仁懷區(qū)域內(nèi)白酒生產(chǎn)企業(yè)涉及釀造過(guò)程中接觸塑料制品的接酒管、運(yùn)輸管和轉(zhuǎn)運(yùn)桶等的升級(jí)改造，對(duì)使用塑料制品全部換成了食品級(jí)的不銹鋼管制品，但在從原料到成品的過(guò)程中依舊存在許多可能接觸鄰苯二甲酸酯的環(huán)節(jié)，具體隱患還需進(jìn)一步調(diào)查研究。