余真妍，楊洪賓，紀帥帥，閆 潔，程 秀，霍 強

(蚌埠醫(yī)學(xué)院藥學(xué)院，安徽 蚌埠 233030)

現(xiàn)如今，許多化合物由于疏水、不穩(wěn)定與難到達靶部位發(fā)揮藥效等特點而應(yīng)用受限，因此，研究者們開發(fā)出多種靶向制劑，提高靶向性，降低副作用。這其中，金屬有機骨架材料自問世以來，以其獨特的優(yōu)勢迅速發(fā)展起來。金屬有機骨架(Metal organic Framework，MOFs)是一類由金屬簇或金屬離子與有機配體配位形成的多孔材料，具有高表面積、高孔隙率、可調(diào)節(jié)的孔結(jié)構(gòu)和易于功能化等特點，在吸附、催化、載藥等方面具有廣闊的應(yīng)用前景[1-2]。沸石咪唑框架(Zeolitic imidazolate frameworks，ZIFs)作為MOFs的一個亞科，是金屬有機骨架在藥物靶向遞送方面的代表材料，近幾年被廣泛用于各類藥物的靶向遞送?，F(xiàn)在，未經(jīng)修飾的ZIF-8的靶向能力，已遠遠不能滿足人們對于靶向制劑的要求，基于咪唑骨架材料本身易于修飾的特點，開發(fā)基于ZIF-8為載體，合成修飾形成多功能復(fù)合載體成為研究熱點[3]。近幾年對于ZIF-8主要是通過在其表面橋接相應(yīng)的特異性靶向配體，用于藥物的定位靶向和響應(yīng)釋藥。當然還有一些修飾的方法，例如，仿生細胞膜或其他材料包裹，從本身的合成工藝上進行優(yōu)化，自身結(jié)構(gòu)摻入其他成分形成復(fù)合載體材料。這些方式可分別提高載藥量，響應(yīng)性，靶向能力，體內(nèi)循環(huán)時間等。本文主要是介紹近幾年ZIF-8在改造修飾方面的研究進展。

1 ZIF-8的形成

ZIF-8以金屬離子作為節(jié)點，咪唑及其衍生物作為橋梁形成多孔網(wǎng)狀骨架材料。此結(jié)構(gòu)不穩(wěn)定，粒子形成與粒徑易受溶劑、溫度、反應(yīng)時間、pH、調(diào)節(jié)劑、金屬離子與有機配體之間的比例等諸多因素的影響[4-5]。因此，通過調(diào)控上述條件，我們可以合成滿足實際用途的ZIF-8的其他亞型。

2 ZIF-8外修飾

2.1 葉酸與透明質(zhì)酸及其衍生物的外修飾透明質(zhì)酸是人體重要的組成成分，具有多種優(yōu)越性質(zhì)，在多數(shù)腫瘤細胞表面通過表達與透明質(zhì)酸結(jié)合的CD44受體，因此常常作為靶向腫瘤細胞的特異性配體。與之性質(zhì)類似的還有葉酸，但在后期構(gòu)建靶向制劑的過程中發(fā)現(xiàn)了透明質(zhì)酸與葉酸的靶向性不足，在體內(nèi)易被吞噬系統(tǒng)清除，因此對其進一步優(yōu)化。對于ZIF-8的外修飾，通常是利用透明質(zhì)酸或葉酸等來改良其疏水性和靶向性。上述改良均屬于簡單的外修飾，他們之間各有優(yōu)劣，利用透明質(zhì)酸或葉酸進行包裹ZIF-8，能夠提高在體內(nèi)循環(huán)中的穩(wěn)定性，并且利用其對CD44受體和葉酸受體的靶向結(jié)合，增強細胞的靶向性和細胞內(nèi)化能力。

Ding等[6]利用透明質(zhì)酸包裹ZIF-8搭載光敏劑Ce6和細胞色素C組建癌細胞活性靶向納米載體，體內(nèi)外實驗表明，該納米載體能夠?qū)崿F(xiàn)蛋白質(zhì)療法與光療兩者協(xié)同效果。Yan等[7]利用葉酸包裹ZIF-8負載阿霉素(Adriamycin，DOX)前藥，并根據(jù)葉酸層的解離、ZIF-8結(jié)構(gòu)的分解和前藥的pH敏感裂解層層響應(yīng)，精確釋放到靶部位產(chǎn)生良好療效。并且此平臺也開辟了新領(lǐng)域，擴展了基于MOFs的遞藥系統(tǒng)和DOX的靶向給藥。使葉酸與透明質(zhì)酸修飾后包裹ZIF-8，提高其在體內(nèi)的穩(wěn)定性，避免被體內(nèi)網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)清除，降低所帶電勢，延長在體內(nèi)循環(huán)時間。Zhang等[8]利用PEG化的葉酸包裹ZIF-8作為載體材料負載VER和鹽酸阿霉素實現(xiàn)長時間循環(huán)和主動靶向給藥，修飾后的ZIF-8載藥量達到40.9%，遠高于一般MOFs的載藥量。利用透明質(zhì)酸羧基易連接其他基團的特點，在其表面連接一些特異性配體，針對特定部位靶向治療，雖然會增加合成工藝的復(fù)雜性，但是修飾后的載體綜合性能更優(yōu)越。

2.2 特異性配體外修飾除了上述的利用葉酸與透明質(zhì)酸對ZIF-8進行修飾外，還可以對特異性靶向配體進行修飾。近年來由于特異性靶向富集的特點，多肽成為研究熱點。整合素是多肽中研究較多的一類，它本身是一種跨膜異二聚體蛋白，能夠?qū)⒓毎c周圍微環(huán)境連接起來，整合素在其天然細胞外基質(zhì)配體中識別精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸(RGD)肽，已被研究證實可以作為腫瘤治療靶點[9]。例如，Dong等[10]利用RGD肽修飾ZIF-8負載喜樹堿靶向給藥，其中，RGD肽的修飾賦予ZIF-8良好的靶向性。雙磷酸鹽類自從被發(fā)現(xiàn)與骨基質(zhì)的主要成分羥基磷灰石具有高親和力時，就成為骨靶向納米制劑重要的靶向分子。Wang等[11]利用鄰苯二酚修飾的明膠表面連接骨靶向配體阿侖膦酸鹽，用修飾后的明膠修飾ZIF-8，最終得到以ZIF-8為載體的新型骨靶向傳遞系統(tǒng)，此納米膠囊同時兼有載藥量高和治療骨質(zhì)疏松效果明顯等優(yōu)點。

2.3 其他外修飾除此之外，我們借助其他一些能夠提高載藥量或增強藥物溶解性的分子對ZIF-8進行表面修飾，從而實現(xiàn)了進行靶向遞送。例如，Chen等[12]開發(fā)了利用沸石咪唑骨架-8-聚丙烯酸(ZIF-8-PAA)載體材料靶向傳遞廣譜光敏劑抗菌劑甲苯銨藍(MB)，并用AgNO3/多巴胺對MB負載的ZIF-8-PAA納米粒子進行修飾，將AgNO3原位還原為銀納米粒子(AgNPs)，再通過萬古霉素/NH2-聚乙二醇(Van/NH2-PEG)進行二次修飾形成ZIF-8-PAA-MB@AgNPs@Van-PEG，實現(xiàn)多重效果。上述對于ZIF-8的修飾，在提高藥物療效方面，應(yīng)盡量避免復(fù)雜的合成修飾，簡化合成工藝。總之，研發(fā)簡單可靠又具有普適性的納米遞送策略，是我們追求的目標，也是未來研究的趨勢。

3 摻入、雜化、替換有機或無機材料

目前對于ZIF-8而言，除了對它進行簡單的優(yōu)化，還可以與材料領(lǐng)域相結(jié)合。通過ZIF-8與有機或無機材料的摻入，雜化、替換等方式形成功能更強大的復(fù)合載體。Feng等[13]將Zn(NO3)2·6H2O、2-MIM和SiRNA與預(yù)合成的聚多巴胺納米粒子(PDAs)進行混合構(gòu)建了一種多功能的PDAs-SiRNA-ZIF-8納米平臺。PDAs可作為一種無創(chuàng)成像造影劑和多功能光熱劑，豐富ZIF-8納米載體的功能，并可以用于光療與基因治療協(xié)同作用和診斷引導(dǎo)。PDAs的摻入性改良推進了智能診斷和治療策略的發(fā)展。Yang等[14]利用羧化柱芳烴(WP6)、半乳糖衍生物(G)和阿霉素(DOX)之間的主-客體絡(luò)合作用構(gòu)建了雜化載體材料用于靶向給藥。其中，WP6與ZIF-8的雜化使ZIF-8@DOX在水中的分散性顯著提高，且脫離宿主的WP6和客體G對細胞幾乎無影響，說明利用超分子雜化材料構(gòu)建靶向給藥系統(tǒng)的可行性。Pan等[15]也以ZIF-8 為基礎(chǔ)合成了一種低毒性的雙金屬沸石咪唑骨架(Mn-ZIF-8)具有良好的分散性和高比表面積，高載藥量，而且超順磁金屬離子Mn2+可作為磁共振造影劑，使載體增加了磁共振成像的功能，有助于獲得不同的膠質(zhì)瘤診斷圖像，便于對藥物載體的觀察與判斷。此外，動物實驗表明Mn2+-ZIF-8/5-Fu對U87-MG荷瘤小鼠的治療效果也是極好的，荷瘤小鼠超過40天存活率仍然超過了80%。

雖然與其他領(lǐng)域相結(jié)合開發(fā)性質(zhì)與功能更加優(yōu)越的載體材料用于靶向遞送是一個熱點方向，但現(xiàn)在關(guān)于與ZIF-8相結(jié)合的材料的應(yīng)用還很有限，相信隨著我們對新材料性質(zhì)的深入了解，會有更多與ZIF-8結(jié)合的復(fù)合載體材料出現(xiàn)。

4 合成工藝改良或雙納米粒子聯(lián)合

ZIF-8按照一般的合成工藝所合成的能夠包載藥物的種類和量是有限的?；谏鲜鰡栴}，研究者從合成工藝著手，對其結(jié)構(gòu)進行改造，優(yōu)化性質(zhì)。Wang等[16]采用雙光子聚合立體光刻技術(shù)制備了螺旋游泳器，也稱為人工細菌鞭毛(ABF)，并對其修飾改造，最后令ZIF-8在ABF表面生長來組建螺旋靶向給藥平臺，構(gòu)建的ZIF-8@ABF可以通過磁場被人工操縱和控制磁微螺旋運動，更好的靶向釋放藥物。顯然，研究者構(gòu)建螺旋結(jié)構(gòu)并借助磁場、電場、超聲波、光等能量進行實時監(jiān)控，構(gòu)建這種智能化的制劑，無論是對研究者本身專業(yè)能力，還是對機器的精確度都提出更高的要求，目前理論還不夠成熟，需要更多研究進行佐證。除此之外，不同的藥物之間雖然具有協(xié)同作用，但是有的是胞內(nèi)釋藥，有的胞外釋藥，因此單純的一種胞內(nèi)釋藥的載體不利于靶向聯(lián)合用藥，但是一種載體只能在胞內(nèi)或者胞外釋藥，所以通過不同的修飾，使粒子在胞內(nèi)外不同位置分別釋藥，達到雙重給藥的效果。Zhang等[17]一方面，用透明質(zhì)酸修飾光熱劑(IR820)@ZIF-8，實現(xiàn)腫瘤靶向光熱治療，同時釋放腫瘤抗原以便于樹突細胞的識別，另一方面，免疫佐劑+免疫調(diào)節(jié)劑1-甲基-D-色氨酸(R837+1MT)@ZIF-8與甘露聚糖進行修飾，以實現(xiàn)DCs靶向免疫擴增，兩者協(xié)同作用，增強療效?？傊ㄟ^雙粒子不同修飾給藥，可以更好的擴展作用部位不同的藥物發(fā)揮協(xié)同作用。

5 細胞膜包裹構(gòu)建仿生納米載體

ZIF-8通過增強穿透和保留效應(yīng)實現(xiàn)腫瘤的優(yōu)先積累，目前常用各種有機或無機材料進行修飾仍存在一些局限性，潛在的積累可能導(dǎo)致長期毒性，體內(nèi)藥代動力學(xué)不佳，以及體內(nèi)循環(huán)時間不足和網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)清除率較高等。天然細胞膜或囊泡包覆納米技術(shù)的仿生策略，通過直接復(fù)制高度復(fù)雜的功能，在表面上實現(xiàn)生物界面，相比于普通材料修飾ZIF-8的不足，他能夠很好的解決上述問題[18]。最近關(guān)于以ZIF-8為基礎(chǔ)進行仿生載體的研究主要是通過紅細胞膜、癌細胞膜與巨噬細胞膜的包裹進行來優(yōu)化載體性質(zhì)。在膜包裹的基礎(chǔ)上，進行再次修飾優(yōu)化成為研究的熱點。Lin等[19]利用環(huán)狀RGD(cRGD)修飾的紅細胞膜(eM-cRGD)包覆在ZIF-8上作為載體包覆DOX進行給藥。體內(nèi)研究證實，eM-cRGD包裹的ZIF-8具有更強的靶向蓄積和延長血液循環(huán)的能力，并產(chǎn)生了顯著的抗腫瘤作用，腫瘤抑制率高達85.46%。而在相同的條件下，未經(jīng)修飾的ZIF-8載體的藥物血液循環(huán)半衰期僅為3.22 h。Cheng等[20]利用小鼠乳腺癌的細胞膜，對納米顆粒表面進行工程化，實現(xiàn)對腫瘤的特異性富集。結(jié)果表明，癌細胞膜包覆的ZIF-8仿生納米粒子是一種很有前途的載體。將癌細胞膜與其他細胞膜，比如紅細胞膜或免疫細胞雜交，包裹載體形成集逃避免疫、延長循環(huán)時間、靶向腫瘤部位多功能于一體目前已被初步合成，雖然目前還沒有人將ZIF-8與其結(jié)合進行研究，但未來必然會有相關(guān)的研究成果。ZIF-8作為一種性能優(yōu)越的載體材料，除了常規(guī)的合成工藝，研究者們還開發(fā)出包容性與功能性更強的咪唑骨架材料。ZIF-8用有機或無機配體等對其修飾，借助材料和生物領(lǐng)域的方面的研究，進行靶向治療，這一通路已被證明具有明確的療效。在此之上，仿生納米載體系統(tǒng)脫穎而出，不僅可以避免被機體清除，并且靶向性與治療效果更佳。但ZIF-8還有許多潛力尚未被挖掘，易于修飾，決定了它有更多的可能性。盡管這些粒子改造修飾后的長期安全性，還未得到很好的評估，但不能否認其在靶向遞送方面具有良好的前景。