陳小敏，盧庭啟，鐘鉬芝，黎 倩，侍守佩，張躍非

(四川省綿陽(yáng)市農(nóng)業(yè)科學(xué)研究院，四川 綿陽(yáng) 621000)

食用菌生產(chǎn)是現(xiàn)代農(nóng)業(yè)的重要組成部分，在農(nóng)林畜生產(chǎn)廢棄物資源化利用、土壤改良、農(nóng)業(yè)生態(tài)環(huán)境保護(hù)以及大健康等領(lǐng)域中具有不可替代的重要地位，是生態(tài)農(nóng)業(yè)、循環(huán)農(nóng)業(yè)、設(shè)施農(nóng)業(yè)、智慧農(nóng)業(yè)、都市農(nóng)業(yè)重要的載體，是有效解決農(nóng)村面源污染、促進(jìn)農(nóng)村可持續(xù)發(fā)展、助力鄉(xiāng)村振興戰(zhàn)略的重要支撐產(chǎn)業(yè)。四川綿陽(yáng)地區(qū)菌種資源豐富、農(nóng)林生產(chǎn)廢棄物多，林下資源面積廣，食用菌栽培面積逐年上升，經(jīng)濟(jì)效益日益顯著，但是存在種植技術(shù)不統(tǒng)一、原料使用單一、科技創(chuàng)新研究、集成示范與推廣基礎(chǔ)薄弱，林下經(jīng)濟(jì)發(fā)展緩慢，農(nóng)林-菌循環(huán)農(nóng)業(yè)沒(méi)有系統(tǒng)的、標(biāo)準(zhǔn)的技術(shù)規(guī)程等問(wèn)題，嚴(yán)重阻礙了現(xiàn)代農(nóng)業(yè)發(fā)展。

大球蓋菇在分類學(xué)上隸屬于擔(dān)子菌門，傘菌綱，傘菌目，球蓋菇科，球蓋菇屬。大球蓋菇營(yíng)養(yǎng)豐富、色澤艷麗、蓋滑柄脆、清香可口，富含蛋白質(zhì)、多糖、礦質(zhì)元素等生物活性物質(zhì)，是國(guó)際菇類交易市場(chǎng)上的十大品種之一，也是聯(lián)合國(guó)糧農(nóng)組織向發(fā)展中國(guó)家推薦的新菇種。近年來(lái)在東北、湖北等地開(kāi)發(fā)推廣，已成為當(dāng)?shù)剞r(nóng)業(yè)經(jīng)濟(jì)來(lái)源的支柱產(chǎn)業(yè)，依靠種植大球蓋菇走上生財(cái)路的屢見(jiàn)不鮮，出現(xiàn)了大球蓋菇的種植熱潮，取得了良好的經(jīng)濟(jì)效益和社會(huì)效益。大球蓋菇抗性強(qiáng)，栽培技術(shù)簡(jiǎn)便，可操作性強(qiáng)，栽培模式多種多樣。栽培原料來(lái)源豐富，可以充分利用各種作物秸稈、林業(yè)生產(chǎn)的廢木屑等，如玉米秸稈、玉米芯、稻草、稻殼、油菜秸稈、木屑枝條等，這些資源都是農(nóng)林牧生產(chǎn)的副產(chǎn)品，成本低，為可再生資源。種植大球蓋菇不僅可以有效解決秸稈露天焚燒及直接還田所帶來(lái)的病蟲害加重 的問(wèn)題，還可提升秸稈綜合利用水平和效益，變廢為寶，是生態(tài)農(nóng)業(yè)的主力軍。大球蓋菇菌絲分解后的菌渣可直接還田，也可以作為育苗基質(zhì)，改良土壤，增加土壤肥力，產(chǎn)業(yè)發(fā)展形成了良好的生態(tài)循環(huán)農(nóng)業(yè)。種植大球蓋菇是一項(xiàng)短平快的脫貧致富項(xiàng)目，可帶動(dòng)村民致富，產(chǎn)業(yè)化符合國(guó)家發(fā)展綠色農(nóng)業(yè)、高質(zhì)量農(nóng)業(yè)、鄉(xiāng)村振興的發(fā)展需要，產(chǎn)業(yè)大有可為，市場(chǎng)前景廣泛。

目前，大球蓋菇種植正往規(guī)?；?、產(chǎn)業(yè)化方向，伴隨著種植面積的逐年增大、產(chǎn)業(yè)化快速發(fā)展，影響該產(chǎn)業(yè)發(fā)展的主要問(wèn)題也凸顯出來(lái)，栽培品種選擇是主要問(wèn)題之一。部分地方出現(xiàn)盲目引種，引進(jìn)菌種與當(dāng)?shù)丨h(huán)境氣候不適應(yīng)，導(dǎo)致減產(chǎn)，造成一定的經(jīng)濟(jì)損失。因此篩選適宜當(dāng)?shù)胤N植的大球蓋菇種質(zhì)資源顯得尤為重要，本研究將廣泛收集大球蓋菇優(yōu)勢(shì)菌株，通過(guò)適應(yīng)性出菇試驗(yàn)，篩選適宜綿陽(yáng)地區(qū)種植的大球蓋菇種質(zhì)資源。選育適宜本地種植的大球蓋菇種質(zhì)資源，是開(kāi)拓大球蓋菇種植的推廣空間、提升其經(jīng)濟(jì)效益和生態(tài)效益、形成種植模式規(guī)?；a(chǎn)業(yè)化的重要抓手。

1 材料與方法

1.1 供試菌株

供試大球蓋菇菌株10株，采自各地生產(chǎn)用種，具體信息見(jiàn)表1。

表1 供試菌株

1.2 菌株分離

PDA培養(yǎng)基配方： 200g土豆，20g瓊脂，20g葡萄糖，加水定容至1L。

PDA斜面培養(yǎng)基的制作：將土豆洗凈去皮，切成小塊，加水煮20～30min，用四層紗布過(guò)濾得到澄清液體。瓊脂經(jīng)冷水溶解，倒入過(guò)濾土豆水中繼續(xù)加熱，煮沸后加入葡萄糖使其充分溶解，加水定容。分裝至試管中，加塞包扎，121℃滅菌20min，取出后放置冷卻。剔除大球蓋菇子實(shí)體表面泥土，用75%消毒酒精對(duì)采集到的大球蓋菇進(jìn)行表面消毒，在超凈工作臺(tái)上掰開(kāi)子實(shí)體，在無(wú)菌環(huán)境下，用鑷子取中間部分置于PDA斜面培養(yǎng)基中，25℃避光恒溫培養(yǎng)7d左右。挑取表面未感染的菌絲轉(zhuǎn)接于新的PDA斜面培養(yǎng)基中，繼續(xù)恒溫培養(yǎng)，純化得到大球蓋菇菌絲。

1.3 菌絲生長(zhǎng)速度比較

用打孔器取一塊4cm×4cm的大球蓋菇菌絲固體培養(yǎng)物，分別接種于PDA平板培養(yǎng)基中央，置于25℃恒溫培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。每天測(cè)量菌絲圈半徑直至長(zhǎng)滿整個(gè)培養(yǎng)皿，每個(gè)菌株設(shè)置3個(gè)重復(fù)。

1.4 大球蓋菇原種、栽培種的制作

大球蓋菇原種、栽培種配方：木屑33%、谷殼33%、玉米芯33%、石膏1%。原料選用新鮮無(wú)霉變的，用之前進(jìn)行預(yù)濕發(fā)酵，將上訴配方按比例進(jìn)行混合，含水量控制在60%～70%，裝瓶(袋)進(jìn)行滅菌，高溫高壓滅菌6h。待菌料冷卻后，于接種室進(jìn)行接種，全程注意無(wú)菌操作，避免雜菌感染。接種后的原種、栽培種，放置于25℃恒溫暗光培養(yǎng)，保持室內(nèi)空氣清新、干燥。隨時(shí)觀察菌絲生長(zhǎng)情況，發(fā)現(xiàn)有感染的菌袋，即使剔除，防止感染。

1.5 播種及田間管理

田間試驗(yàn)于綿陽(yáng)市農(nóng)業(yè)科學(xué)研究院大棚進(jìn)行，每個(gè)處理長(zhǎng)10m，寬1m，即栽培面積10m2。播種前將新鮮無(wú)霉變的木屑、玉米芯、谷殼進(jìn)行等比例混合，提前噴水使得菌料保持濕潤(rùn)，堆料進(jìn)行發(fā)酵，菌料溫度過(guò)高時(shí)及時(shí)翻堆。播種前去除田間的雜草和上茬作物，讓表面土壤充分暴曬，減少后續(xù)病蟲害。播種采用地面直接鋪料方式(20kg/m2)，第一層鋪料厚8～10cm，然后播50%菌種。第二層鋪料厚6～8cm，再播種50%菌種。最后鋪料蓋3～5cm。播種時(shí)將菌種掰成鴿子蛋大小，采用梅花形穴播法，菌種之間間隔5～8cm。播完種后在菌料表面覆蓋3～5cm泥土，表面噴灑霧狀水，保持菌料及表層土壤濕潤(rùn)。一般播種后3d菌絲開(kāi)始萌發(fā)，整個(gè)發(fā)菌期間要保持表面濕潤(rùn)，做到少噴、勤噴，噴水量過(guò)大容易造成菌絲衰退。菌絲長(zhǎng)滿箱面后，噴大水，增加表面濕度，保持通風(fēng)換氣，促進(jìn)原基形成。子實(shí)體成熟標(biāo)志為菌蓋邊緣卷曲，但尚未開(kāi)傘，此時(shí)抓住菌腳輕輕向上拔起，及時(shí)填補(bǔ)空隙，以便于菌絲恢復(fù)出二潮菇。

1.6 數(shù)據(jù)處理

觀察記載每個(gè)菌株的菌絲生長(zhǎng)情況，量取菌絲生長(zhǎng)速度。稱取重量，統(tǒng)計(jì)累計(jì)產(chǎn)量，觀察子實(shí)體形態(tài)特征，評(píng)價(jià)子實(shí)體的農(nóng)藝性狀，計(jì)算不同菌株的生物轉(zhuǎn)化率等?？偨Y(jié)不同大球蓋菇菌株菌絲生長(zhǎng)的情況產(chǎn)量的多少。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同菌株菌絲生長(zhǎng)速度的影響

將不同的大球蓋菇菌絲接種至PDA平板培養(yǎng)基中，置于25℃恒溫培養(yǎng)，直至菌絲圈長(zhǎng)滿整個(gè)培養(yǎng)基，不同菌絲的生長(zhǎng)速度有著明顯的差異(表2所示)。接種3d后，QG-10號(hào)菌株率先萌發(fā)，生長(zhǎng)初期菌絲生長(zhǎng)緩慢，隨著培養(yǎng)時(shí)間的增加，菌絲生長(zhǎng)速度變快。菌絲圈生長(zhǎng)速度結(jié)果顯示：QG-10號(hào)菌株生長(zhǎng)速度最快，其次是QG-6，而QG-9菌株生長(zhǎng)速度最慢。

表2 不同菌株生長(zhǎng)速度的比較

2.2 不同菌株菌絲發(fā)菌的影響

對(duì)不同菌株進(jìn)行出菇試驗(yàn)，9月下旬在大棚里進(jìn)行了田間出菇試驗(yàn)。不同大球蓋菇菌株的菌絲均為白色毛絨狀，菌絲附著在培養(yǎng)料上，長(zhǎng)滿整個(gè)培養(yǎng)料后，菌絲開(kāi)始紐結(jié)，生長(zhǎng)出許多白色的小原基。

從表3可以看出，大球蓋菇播種后，不同菌株在田間生長(zhǎng)時(shí)期表現(xiàn)出明顯的差異。菌株QG-10的發(fā)菌速度最快，菌絲生長(zhǎng)勢(shì)旺盛，發(fā)菌40d后出現(xiàn)原基,原基粗壯且數(shù)量多。其次是菌株QG-9。菌株QG-8的發(fā)菌速度最慢，菌絲纖細(xì)，生長(zhǎng)緩慢，播種52d后菌絲才長(zhǎng)滿箱面，55d后才出現(xiàn)原基，原基弱小且數(shù)量較少。

表3 不同菌株現(xiàn)原基時(shí)間的比較

2.3 不同菌株產(chǎn)量的比較

從表4可以看出，不同菌株在田間出菇試驗(yàn)中，產(chǎn)量存在明顯的差異。其中QG-10號(hào)菌株的產(chǎn)量最高，為12.45 Kg/m2，其次是QG-9，為11.46Kg/m2。QG-8號(hào)菌株的產(chǎn)量最低，僅有4.97Kg/m2。從子實(shí)體的品相來(lái)看，QG-10號(hào)菌株長(zhǎng)出的大球蓋菇菇型圓整，肉質(zhì)較為厚實(shí)，菌蓋不易開(kāi)傘，子實(shí)體的整齊度較為一致，優(yōu)質(zhì)菇較高，達(dá)60.07%，整體表現(xiàn)最佳。其次是QG-9，子實(shí)體品相、產(chǎn)量、優(yōu)質(zhì)菇比例等整體表現(xiàn)也較好，稍次于QG-10號(hào)菌株。而QG-8號(hào)菌株生長(zhǎng)出的大球蓋菇效果最差，子實(shí)體品相差，腿長(zhǎng)易開(kāi)傘，產(chǎn)量低，出菇期間整齊度低，且優(yōu)質(zhì)菇的比例較少。

表4 不同菌株產(chǎn)量的比較

3 討論

種植大球蓋菇具有良好的發(fā)展前景，栽培模式簡(jiǎn)單粗放，具有較強(qiáng)的抗逆性，可利用原料非常廣泛。近些年由于農(nóng)戶盲目引種，導(dǎo)致引進(jìn)菌株不適宜本地環(huán)境和氣候，導(dǎo)致減產(chǎn)。針對(duì)這一問(wèn)題，開(kāi)展適合綿陽(yáng)地區(qū)栽培的大球蓋菇菌株篩選試驗(yàn)。廣泛收集大眾栽培的大球蓋菇菌株，通過(guò)測(cè)定菌絲生長(zhǎng)速度判斷菌株活性。結(jié)果表明，不同大球蓋菇菌株在生長(zhǎng)速度上存在明顯的差異，從河南引進(jìn)的QG-10菌株率先萌發(fā)，生長(zhǎng)速度較快，說(shuō)明該菌株活性較強(qiáng)。通過(guò)田間出菇試驗(yàn)，來(lái)篩選適宜綿陽(yáng)地區(qū)種植的大球蓋菇菌株。結(jié)果表明，雖然不同菌株均能出菇，但在出菇期間的表現(xiàn)存在明顯的差異。QG-10、QG-9這2個(gè)菌株形成原基速度較快，且原基數(shù)量較多。從出菇情況來(lái)看，QG-10菌株在田間出菇試驗(yàn)中表現(xiàn)最佳，產(chǎn)量最高，子實(shí)體的品質(zhì)較好，菇形矮胖，肉質(zhì)緊實(shí)，菌蓋開(kāi)傘率較低，優(yōu)質(zhì)菇比例及整齊度高。QG-9菌株在田間出菇試驗(yàn)中表現(xiàn)良好，產(chǎn)量明顯高于其它8個(gè)菌株，子實(shí)體品質(zhì)優(yōu)，優(yōu)質(zhì)菇比例及整齊度較高。而QG-8菌株在田間出菇試驗(yàn)中表現(xiàn)極差，產(chǎn)量明顯低于其它菌株，子實(shí)體品質(zhì)差，菇形菌柄細(xì)長(zhǎng)，菌蓋小易開(kāi)傘，優(yōu)質(zhì)菇比例及整齊度較低。從不同地區(qū)引進(jìn)的10個(gè)大球蓋菇種質(zhì)資源，在綿陽(yáng)地區(qū)進(jìn)行出菇試驗(yàn)，在田間的表現(xiàn)存在明顯的差異性。從陜西、河南引進(jìn)的QG-10、QG-9這2個(gè)種質(zhì)資源能很好地適應(yīng)綿陽(yáng)地區(qū)的環(huán)境和氣候，可以進(jìn)行田間栽培。而從遂寧引進(jìn)的QG-8菌株田間栽培效果不佳，這可能是QG-8原始種植區(qū)的氣候與綿陽(yáng)地區(qū)存在明顯的差異，導(dǎo)致該菌株不適應(yīng)綿陽(yáng)地區(qū)種植。從外省引進(jìn)的QG-10、QG-9菌株明顯優(yōu)于四川本地菌株，這可能是四川本地種植的大球蓋菇種質(zhì)資源存在明顯退化現(xiàn)象，亟需對(duì)本地大球蓋菇種質(zhì)資源進(jìn)行優(yōu)化選育。

從上述結(jié)果可以看出，QG-10、QG-9菌株在田間出菇試驗(yàn)中表現(xiàn)良好。從引進(jìn)的10個(gè)大球蓋菇菌株中，篩選得到適宜綿陽(yáng)地區(qū)種植的大球蓋菇菌株2個(gè)，分別為QG-10、QG-9，其特點(diǎn)是生長(zhǎng)速度快，菌絲潔白濃密，抗逆性強(qiáng)，產(chǎn)量高且子實(shí)體品相好，菇型圓整，肉質(zhì)厚實(shí)，優(yōu)質(zhì)菇的比例高。