殷 聰，謝吳成，朱 峰

（1.佛山科學(xué)技術(shù)學(xué)院 食品科學(xué)與工程學(xué)院，廣東佛山 528200；2.佛山科學(xué)技術(shù)學(xué)院 環(huán)境與化學(xué)工程學(xué)院，廣東佛山 528200）

食品是人類生存和發(fā)展的基本物質(zhì)，與人們的生活密切相關(guān)。我國食品需求較大，各類食品研發(fā)生產(chǎn)銷售企業(yè)較多，但由于個別相關(guān)企業(yè)法治思維和責(zé)任意識較弱，在食品研制生產(chǎn)營銷過程中經(jīng)常出現(xiàn)對各類農(nóng)藥、獸藥和其他食品添加劑的不合理使用、濫用、誤用等情況，導(dǎo)致各種食品生產(chǎn)問題頻發(fā)，嚴(yán)重危害到人們的身體健康和生態(tài)環(huán)境的可持續(xù)發(fā)展。食品安全問題不僅關(guān)系到人們的健康狀況，還與經(jīng)濟(jì)社會的發(fā)展密不可分，要解決這一安全問題必須做到準(zhǔn)確和快速地監(jiān)測食品安全情況。因此，開發(fā)一種及時、迅速、準(zhǔn)確、便捷的食品檢測分析技術(shù)十分重要。

1 熒光檢測基本原理及常用熒光檢測技術(shù)

熒光是指物質(zhì)在受到特定波長的強(qiáng)光激化和氧化之后，大于激發(fā)波長的藍(lán)光在很短的時間內(nèi)自動釋放，這種光被稱為熒光。這種發(fā)光現(xiàn)象的應(yīng)用和其在各個方面相關(guān)研究的基本方法稱為熒光技術(shù)。目前在研究生產(chǎn)中已經(jīng)被廣泛采用的檢測方法有薄層色譜-熒光法、熒光分光光度法、原子熒光法及高效液相色譜-熒光法等。

近年來在新技術(shù)的基礎(chǔ)上開發(fā)研制了一些較先進(jìn)的新型熒光檢測技術(shù)，例如，免疫細(xì)胞熒光分析診斷分析技術(shù)系統(tǒng)、熒光定量聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)技術(shù)系統(tǒng)、分析診斷檢測技術(shù)系統(tǒng)等技術(shù)、酶聯(lián)免疫分子熒光分子診斷及分析診斷分析技術(shù)系統(tǒng)等。

2 熒光檢測技術(shù)在食品安全檢測中的應(yīng)用情況

2.1 熒光檢測技術(shù)在果蔬中的應(yīng)用

當(dāng)前國內(nèi)種植業(yè)中經(jīng)常使用農(nóng)藥來抑制病蟲害，種植過程中對農(nóng)藥的濫用、誤用、過量使用等問題導(dǎo)致了嚴(yán)重的農(nóng)藥殘留超標(biāo)，極大地威脅了消費(fèi)者的健康。因此急需一種方法來快速靈敏地檢測食品中的農(nóng)藥殘留。

敵草隆是一種除草劑，被廣泛用于防治棉花、大豆、番茄和煙草等作物的田間雜草，其化學(xué)性質(zhì)穩(wěn)定，在一般土壤、地面水、地下孔隙水中也可以長時間連續(xù)存在，具有生物蓄積作用。目前對水中敵草隆的分析檢測主要是一些高效液相法，新型研制的ToxY-PAM 是雙通道脈沖振幅調(diào)制葉綠素?zé)晒鈨x，是目前檢測葉綠素較新的一項(xiàng)熒光技術(shù)。其利用了水中有害物質(zhì)影響水生藻類正常光合活性的特點(diǎn)，用藻類作為指示物，將這項(xiàng)技術(shù)用于水體中有害物質(zhì)的檢測。王麗等[1]利用ToxY-PAM 這一熒光法的特點(diǎn)，選擇三角褐指藻作為指示生物，測試出了水中殘留的敵草隆。所需的ToxY-PAM 熒光儀體積易于攜帶，指示藻易于培養(yǎng)，且操作簡便、檢測快速、靈敏度較高，為敵草隆的現(xiàn)場監(jiān)測提供了方法。

磺胺類藥物（Sulfonamides，SAs）是一種治療細(xì)菌感染的抗菌藥，被廣泛應(yīng)用于治療動物及水產(chǎn)生物的疾病。但動物使用這類抗生素后，其代謝物會直接在畜禽糞便中長期持續(xù)存在，并會通過多種途徑進(jìn)入水體環(huán)境系統(tǒng)造成污染。近年來隨著動物糞肥的大面積農(nóng)用，越來越多的抗生素農(nóng)藥進(jìn)入農(nóng)田土壤中。SAs被其他農(nóng)作物種子吸收或蓄積后，威脅農(nóng)產(chǎn)品食用安全，最終通過破壞食物鏈來影響人體的健康。李學(xué)德等[2]研究建立了HPLC 法，把經(jīng)過提取的樣品濃縮脫水后，通過柱前衍生化后分離測定，省去了復(fù)雜的前處理過程，該方法經(jīng)濟(jì)高效且準(zhǔn)確迅速。

吡蟲啉是一種殺蟲劑，由于本身特有的低毒、高效等優(yōu)點(diǎn)，在農(nóng)產(chǎn)品種植過程中被用來防治害蟲，但在使用過程中產(chǎn)生的農(nóng)藥殘留給消費(fèi)者帶來很多潛在危險。傳統(tǒng)的檢測技術(shù)普遍存在一些缺點(diǎn)，例如樣品消耗多、樣品分析前的處理過程費(fèi)時煩瑣等不足，無法做到快速檢測。雖然目前近紅外光譜檢測分析技術(shù)已經(jīng)在檢測工作中得到了廣泛地應(yīng)用，但在農(nóng)藥殘留含量方面的檢測還有待進(jìn)一步提高；相比之下，熒光分析法檢測分析迅速，靈敏度較高。季仍東等[3]用熒光光譜方法實(shí)現(xiàn)了對蘋果果汁中吡蟲啉農(nóng)藥的檢測與分析，與已有的檢測方法相比，本方法更為快速和可行有效。

同時，果蔬產(chǎn)品中的防腐劑等食品添加劑也是需要重點(diǎn)檢測和關(guān)注的內(nèi)容。乙氧基喹啉是一種抗氧化劑，為黃褐色黏稠液體。因其具有較好的防霉保鮮作用被作為天然食品防腐劑、水果保鮮劑，以及多種食品、飲料、油脂乳化劑及天然藥品原料等的活性抗氧化劑，但攝入過量會損害人體組織器官。乙氧基喹啉在酸性水果基質(zhì)中提取困難，傳統(tǒng)的檢測手段如氣相色譜法、液相色譜法、質(zhì)譜法等均沒有考慮到這一問題。丁濤等[4]的方法未關(guān)注乙氧基喹啉可與水果中自由基發(fā)生反應(yīng)的問題；黃超群等[5]的提取方法未仔細(xì)關(guān)注到乙氧基喹啉衍生物在濃縮純化過程中樣品易損失的相關(guān)問題。因此，余曉琴等[6]建立和完善了另一種可以通過抑制對乙氧基喹啉類藥物的選擇性氧化還原反應(yīng)，在微堿性條件作用下完成提取后，再濃縮并測定樣品的高效液相色譜-薄層熒光法。該檢測方法通過對儀器的分析操作條件、抗氧化劑、樣品微堿化作用及溶液濃縮時溫度要求等一系列因素上的合理優(yōu)化，使方法的分離準(zhǔn)確度、靈敏度進(jìn)一步得到提高。本檢驗(yàn)方法雖然儀器設(shè)備較為簡單，但卻具有較強(qiáng)的實(shí)用性和可操作性，可用于果蔬產(chǎn)品中乙氧基喹啉含量的準(zhǔn)確測定。

2.2 水產(chǎn)品中的應(yīng)用

孔雀石綠（Malachite Green，MG）是一種人工合成的工業(yè)染料，易溶于水、乙醇醛類染料和苯甲醇類等染料，具有殺蟲、抗菌等作用而被用于水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)中[7]。但有研究表明孔雀石綠在進(jìn)入生物體內(nèi)后，會代謝成脂溶性的無色孔雀石綠，這些代謝物具有潛在的致癌作用，嚴(yán)重威脅人類身體健康。因此，2002 年被國家列入禁用藥物清單[8]。

目前的檢測技術(shù)方法有分光光度法、薄層色譜法、酶聯(lián)免疫法等，但均具有一定缺點(diǎn)。熒光檢測因其靈敏度更高、選擇性更好、干擾峰損失更少等一系列顯著的優(yōu)點(diǎn)被廣泛用于對孔雀石綠的檢測[9]。葉四化等[10]在此基礎(chǔ)上采用高效液相色譜-紫外可見檢測器完成了對兩種物質(zhì)的準(zhǔn)確定量。張海琪[11]采用的方法檢測限為0.1 μg/kg，但因采用高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法，測定時對儀器設(shè)施和有關(guān)實(shí)驗(yàn)室人員的素質(zhì)要求都普遍較高，檢測的試劑費(fèi)用也相當(dāng)昂貴，沒有得到大量推廣。隨著該研究的不斷深入，超高液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法被推出，彌補(bǔ)了目前傳統(tǒng)的HPLC 系統(tǒng)設(shè)計(jì)上的缺點(diǎn)，高速度節(jié)省了用戶的時間，高質(zhì)量節(jié)省了溶劑，高分離度技術(shù)可直接幫助用戶輕松面對許多復(fù)雜有機(jī)化合物的快速高效分離，高靈敏度技術(shù)幫助用戶快速檢測分析更多的有痕量代謝物的目標(biāo)化合物[12]。對于一些需要高分離和高靈敏度要求的相關(guān)檢測，該技術(shù)將會是最有效的工具之一。

2.3 肉制品中的應(yīng)用

紅肉是日常生活中常見的一種肉類，有研究表示紅肉中的非人類唾液酸是一種致癌物，在人體細(xì)胞內(nèi)富集會促發(fā)炎癥并有致癌風(fēng)險。目前檢測方法主要有硫代己比妥酸（Thiobarbituric acid，TBA）法、間苯二酚法、熒光高效液相色譜法等。熒光高效液相色譜法主要針對在生鮮紅肉、動物內(nèi)臟、乳及乳制品中Neu5Gc 的含量檢測。晏印雪[13]采用酸鹽水解4,5-亞甲基二氧基-1,2-鄰苯二胺鹽，衍生的熒光高效液相色譜法來直接檢測發(fā)酵紅肉制品中Neu5Gc 的質(zhì)量分?jǐn)?shù)，此研究方法不僅準(zhǔn)確靈敏、耗時較短，而且回收率也較高，實(shí)現(xiàn)了對發(fā)酵紅肉制品中Neu5Gc 的有效測定，彌補(bǔ)了過去對發(fā)酵紅肉制品中Neu5Gc 含量測定方面上的缺失。

乙氧酰胺苯甲酯（Ethopabate，ETP）又名球蟲酯，是一種幾乎無味的白色粉末（或呈現(xiàn)類白色），微溶于水，是一種生物廣譜類抗蟲增效劑。一些養(yǎng)殖戶在飼養(yǎng)過程中為提高藥效會添加使用，導(dǎo)致動物體內(nèi)藥物大量殘留，危害消費(fèi)者的健康。吳榮等[14]利用熒光檢測器選擇性強(qiáng)、靈敏度高的特點(diǎn)建立了檢測ETP 殘留量的超高液相色譜-熒光檢測法，該檢測方法成本低、步驟簡單、重復(fù)性較好、靈敏度準(zhǔn)確度相對更高，解決了過去檢測方法耗時、成本高和步驟煩瑣等問題。

3 結(jié)語

食品安全關(guān)系著人們的身體健康，一直是人們廣泛關(guān)注的重點(diǎn)。隨著科學(xué)技術(shù)的不斷進(jìn)步，經(jīng)濟(jì)的持續(xù)發(fā)展，食品安全檢測方法也在不斷更新，熒光檢測技術(shù)作為新型的檢測技術(shù)因其具有分析迅速、成本低廉、操作簡便等特點(diǎn)受到國內(nèi)外科研人員的廣泛關(guān)注，被應(yīng)用于農(nóng)藥、獸藥、添加劑等各個領(lǐng)域中。未來隨著熒光檢測技術(shù)的不斷發(fā)展完善及自身優(yōu)勢的凸顯，其在食品快速檢測領(lǐng)域中將得到大量應(yīng)用。