張昊翔

（和縣市場監(jiān)督檢驗(yàn)所，安徽馬鞍山 238200）

食品是人類生存發(fā)展的最基本物質(zhì)，也會(huì)直接或間接地影響經(jīng)濟(jì)發(fā)展與社會(huì)穩(wěn)定。蔬菜作為食品中重要的組成部分之一，其安全問題關(guān)系到整個(gè)國民的健康。目前，蔬菜在種植過程中容易遭受病蟲害，蔬菜病蟲害的防治主要還是依靠化學(xué)防治[1]。一些農(nóng)業(yè)設(shè)施發(fā)達(dá)地區(qū)也有使用物理防治、生物防治等方法，但高毒、高殘留的農(nóng)藥仍然屢禁不止。在蔬菜上市季節(jié)，有些農(nóng)民在蔬菜生產(chǎn)中雖然沒有使用“雙高”和禁限農(nóng)藥，但將未過安全期的蔬菜采收上市，同樣會(huì)導(dǎo)致銷售的蔬菜農(nóng)殘超標(biāo)。此外，在監(jiān)管力度不夠的部分地區(qū)沒有禁止銷售和使用“雙高”農(nóng)藥，導(dǎo)致稻、棉田農(nóng)藥進(jìn)入蔬菜區(qū)，農(nóng)殘超標(biāo)時(shí)有發(fā)生。蔬菜農(nóng)藥殘留超標(biāo)問題已引起人們的普遍關(guān)注，必須加強(qiáng)農(nóng)藥殘留檢測技術(shù)的研究，以保障人們的生活食用物資安全[2-4]。蔬菜的種類繁多，所用農(nóng)藥種類各不相同，化學(xué)性質(zhì)各異，這樣就需要不同的檢測技術(shù)和標(biāo)準(zhǔn)。本文對(duì)蔬菜中農(nóng)藥殘留檢測的檢測標(biāo)準(zhǔn)以及檢測檢測過程中的前處理方法進(jìn)行總結(jié)，并闡述其原理，方便廣大檢驗(yàn)工作者根據(jù)實(shí)際來應(yīng)用。

1 蔬菜樣品中農(nóng)藥殘留檢測標(biāo)準(zhǔn)

現(xiàn)階段關(guān)于蔬菜中農(nóng)藥殘留檢測方法的現(xiàn)行標(biāo)準(zhǔn)較多，由不同的國家部門單獨(dú)發(fā)布或幾個(gè)部門聯(lián)合發(fā)布。具體的檢測農(nóng)藥品種有幾百個(gè)，涉及不同的檢測技術(shù)方法，具體如下[5-9]。

1.1 國家強(qiáng)制性標(biāo)準(zhǔn)（GB）及國家推薦性標(biāo)準(zhǔn)（GB/T）

中華人民共和國國家衛(wèi)生和計(jì)劃生育委員會(huì)、中華人民共和國農(nóng)業(yè)部和國家食品藥品監(jiān)督管理總局3 個(gè)部門聯(lián)合發(fā)布的《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 水果和蔬菜中500 種農(nóng)藥及相關(guān)化學(xué)品殘留量的測定 氣相色譜-質(zhì)譜法》（GB 23200.8—2016）、《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 蔬菜中非草隆等15 種取代脲類除草劑殘留量的測定 液相色譜法》（GB 23200.18—2016）、《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 水果和蔬菜中噻菌靈殘留量的測定 液相色譜法》（GB 23200.17—2016）、《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 水果和蔬菜中阿維菌素殘留量的測定 液相色譜法》（GB 23200.19—2016）、《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 水果和蔬菜中唑螨酯殘留量的測定 液相色譜法》（GB 23200.29—2016）等。GB 為國家強(qiáng)制執(zhí)行的標(biāo)準(zhǔn)，涉及的產(chǎn)品均要執(zhí)行該標(biāo)準(zhǔn)，當(dāng)出現(xiàn)檢驗(yàn)不合格的情況可以作為法定的判定依據(jù)。

中華人民共和國國家質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)檢疫總局和中國國家標(biāo)準(zhǔn)化管理委員會(huì)聯(lián)合發(fā)布的《水果和蔬菜中450 種農(nóng)藥及相關(guān)化學(xué)品殘留量的測定 液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法》（GB/T 20769—2008）、《水果、蔬菜及茶葉中吡蟲啉殘留的測定 高效液相色譜法》（GB/T 23379—2009）、《水果、蔬菜中啶蟲脒殘留量的測定 液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法》（GB/T 23584—2009）等。中華人民共和國衛(wèi)生部和中國國家標(biāo)準(zhǔn)化管理委員會(huì)聯(lián)合發(fā)布的《水果和蔬菜中多種農(nóng)藥殘留量的測定》（GB/T 5009.218—2008）、《蔬菜中有機(jī)磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥殘留量快速檢測》（GB/T 5009.199—2003）、《蔬菜、水果中甲基托布津、多菌靈的測定》（GB/T 5009.188—2003）等。GB/T 為自愿采用的國家標(biāo)準(zhǔn)，企業(yè)在使用中可以根據(jù)情況進(jìn)行參照?qǐng)?zhí)行。推薦性標(biāo)準(zhǔn)技術(shù)方法較為成熟，方法較為可靠。

1.2 農(nóng)業(yè)部的推薦標(biāo)準(zhǔn)（NY/T）

中華人民共和國農(nóng)業(yè)部發(fā)布的《蔬菜中334 種農(nóng)藥多殘留的測定 氣相色譜質(zhì)譜法和液相色譜質(zhì)譜法》（NY/T 1379—2007）、《蔬菜和水果中有機(jī)磷、有機(jī)氯、擬除蟲菊酯和氨基甲酸酯類農(nóng)藥多殘留的測定》（NY/T 761—2008）、《蔬菜、水果中51 種農(nóng)藥多殘留的測定 氣相色譜-質(zhì)譜法》（NY/T 1380—2007）等幾十個(gè)現(xiàn)行標(biāo)準(zhǔn)。NY/T 標(biāo)準(zhǔn)為行業(yè)的推薦性標(biāo)準(zhǔn)。當(dāng)國家的強(qiáng)制性標(biāo)準(zhǔn)頒布實(shí)施后，其自動(dòng)作廢。

1.3 蔬菜進(jìn)出口標(biāo)準(zhǔn)

中華人民共和國國家質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)檢疫總局發(fā)布的《出口水果和蔬菜中敵敵畏、四氯硝基苯、丙線磷等88 種農(nóng)藥殘留量的篩選檢測QuEChERS-氣相色譜-負(fù)化學(xué)源質(zhì)譜法》（SN/T 4138—2015）、《出口水果蔬菜中脫落酸等60 種農(nóng)藥殘留量的測定 液相色譜-質(zhì)譜/質(zhì)譜法》（SN/T 4591—2016）。SN/T是商檢行業(yè)推薦性標(biāo)準(zhǔn)，為進(jìn)出口產(chǎn)品的質(zhì)量判定依據(jù)。

不同的檢測標(biāo)準(zhǔn)所應(yīng)用的領(lǐng)域不同，需要根據(jù)具體的檢測用途選擇。一個(gè)標(biāo)準(zhǔn)中通常也收載幾個(gè)不同的檢測方法，檢驗(yàn)檢測單位根據(jù)自己單位的儀器配置情況和分析人員的掌握情況以及樣品的本身基質(zhì)的情況來綜合分析所采用的標(biāo)準(zhǔn)及方法。同時(shí)，隨著新的農(nóng)藥研發(fā)上市，相應(yīng)新的農(nóng)藥殘留檢測技術(shù)方法和檢測標(biāo)準(zhǔn)也相繼建立并公布，質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)體系是一個(gè)動(dòng)態(tài)更新的狀態(tài)[10-12]。

2 試樣的制備和保存

蔬菜樣品取樣部位通常按《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)食品中農(nóng)藥最大殘留限量》（GB 2763—2021）要求，將樣品切碎、混勻、均一化制成勻漿，于-18 ℃冷凍密封保存。方法應(yīng)該能夠充分保證樣品中待測農(nóng)藥的均勻性。

3 試樣的提取和凈化

各個(gè)標(biāo)準(zhǔn)的提取方法大致相同，一般都是加入乙腈或甲醇溶劑進(jìn)行勻漿提取目標(biāo)待測物，加入氯化鈉或無水硫酸鈉等進(jìn)行除水，與水形成鹽溶液與有機(jī)相分離，靜置或離心，取上清液分析用。樣品的凈化與蔬菜基質(zhì)的復(fù)雜程度和最終檢測分析儀器的要求有關(guān)。通常反相液相色譜法要求分析樣品為中等極性溶液或極性溶液，如一定濃度的甲醇或乙腈溶液。氣相色譜法要求分析樣品溶液不能含有水，需要無水硫酸鈉脫水處理?，F(xiàn)階段主要的凈化方式可以分為固相萃取法（Solid Phase Extraction，SPE）、QuEChERS 前處理法、凝膠滲透色譜（Gel Permeation Chromatography、GPC）、微波輔助萃取法（Microwave Assisted Extraction，MAE）等[13]。

3.1 固相萃取法（SPE）

基于填料性質(zhì)的不同，可以將SPE分為3類。①正相SPE。萃取柱的填料為極性物質(zhì)，如氧化鋁和硅膠及硅鎂吸附劑等，根據(jù)相似相溶原理，對(duì)極性物質(zhì)萃取效果較好。②反相SPE。萃取柱的填料為非極性或弱極性物質(zhì)，如C8、C18、苯基等，對(duì)中等極性到非極性的化合物萃取效果較好。③離子交換型樹脂柱，通常填充物質(zhì)帶有電荷，如NH2，帶電荷的目標(biāo)化合物可以被萃取出來[14]。

3.2 凝膠滲透色譜

凝膠滲透色譜是目前應(yīng)用比較廣泛的一種樣品前處理方法，其原理是基于體積排阻的分離機(jī)理，通過具有分子篩性質(zhì)的固定相，分離分子質(zhì)量不同的物質(zhì)。因其對(duì)分子量大的雜質(zhì)凈化效率高、適用范圍廣、可重復(fù)使用以及自動(dòng)化程度高等特點(diǎn)，在脂質(zhì)含量高的復(fù)雜基質(zhì)中，凝膠滲透色譜是農(nóng)藥多殘留分析較有效的凈化手段[15]。

3.3 微波輔助萃取法

微波輔助萃取（Microwave Assisted Extraction，MAE）過程是高頻電磁波穿透萃取介質(zhì)，從而導(dǎo)致細(xì)胞破裂，細(xì)胞內(nèi)的物質(zhì)自由流出，提高萃取效率的樣品預(yù)處理技術(shù)，具有設(shè)備簡單，操作簡便，選擇性好，萃取效率較高，應(yīng)用范圍廣泛，能耗低等優(yōu)點(diǎn)，目前已廣泛應(yīng)用于農(nóng)藥殘留提取分析[16]。

3.4 QuEChERS 前處理法

QuEChERS 技術(shù)是利用具有吸附性能的填料和基質(zhì)中的雜質(zhì)相互作用，從而達(dá)到凈化除雜的目的。近年來蔬菜農(nóng)藥多殘留測定較為常用，具有快速、簡單、廉價(jià)、有效、可靠及安全的特點(diǎn)。

閆實(shí)等[17]將供試蔬菜樣品以0.1%醋酸的乙腈（V/V）作為溶劑，DiKMA ProElut 提取試劑盒對(duì)樣品進(jìn)行3 min 提取后，用DiKMA ProElut 凈化試劑盒凈化，快速檢測蔬菜樣品中的農(nóng)藥殘留。優(yōu)化的試驗(yàn)方法縮短了檢測時(shí)間、減少了溶劑用量，7 種農(nóng)藥的平均回收率為72%～123%，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為2.0%～14.1%，檢出限為0.000 9 ～0.016 0 mg/kg。實(shí)現(xiàn)了蔬菜中農(nóng)藥殘留的快速、簡便、廉價(jià)、有效、靈敏和安全檢測。

4 結(jié)語

樣品前處理是蔬菜農(nóng)殘檢測中的重要環(huán)節(jié)，如果處理不當(dāng)，可能對(duì)后續(xù)檢測儀器造成污染，影響檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性。蔬菜種類繁多、基質(zhì)復(fù)雜，施用農(nóng)藥類型豐富，具有含量微量或痕量的特點(diǎn)，多農(nóng)殘檢測難度較高。在對(duì)待測樣品進(jìn)行前處理時(shí)，要根據(jù)樣品的種類、基質(zhì)特點(diǎn)、待測農(nóng)藥類別和性質(zhì)及檢測方法對(duì)前處理方法進(jìn)行科學(xué)合理的選擇。近年來，隨著蔬菜農(nóng)殘檢測方法的不斷發(fā)展，樣品前處理技術(shù)也在朝著高效、快速、技術(shù)聯(lián)用和多殘留同時(shí)檢測的方向發(fā)展。