梁五林，蔡夢(mèng)如，崔爽，張明倩，伍永鴻，歐文靜，賈占紅，張碩峰（北京中醫(yī)藥大學(xué)中藥學(xué)院，北京 102488）

目前，心血管疾?。–VDs）仍然是人類健康的主要威脅。在CVDs 導(dǎo)致的死亡事件中，約有50%由心肌缺血引起。臨床上以及時(shí)的心肌血流灌注和心功能保護(hù)為心肌缺血的主要治療原則，但缺血心肌恢復(fù)血流再灌注之后會(huì)出現(xiàn)心肌損傷進(jìn)一步加重的現(xiàn)象，被稱為心肌缺血再灌注（I/R）損傷，是造成CVDs 病死率升高的主要原因。CVDs 的另一大危險(xiǎn)因素是血栓形成，血栓形成是冠心病的重要病變過(guò)程，血栓形成后會(huì)進(jìn)一步加重組織缺血損傷，抗凝是抑制血栓形成的臨床常用方法。

注射用紅花黃色素（SYI）為紅花的改良制劑，臨床上廣泛用于治療冠心病心絞痛，療效顯著。但SYI 改善心肌缺血損傷及抗凝作用量效關(guān)系暫不明確。因此本文旨在研究SYI 抗心肌缺血及抗凝作用量效關(guān)系，為SYI 的臨床合理用藥提供理論參考和實(shí)踐指導(dǎo)。

1 材料

1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物

SPF 級(jí)SD 大鼠，雄性，體質(zhì)量190 ～210 g，由斯貝福（北京）生物技術(shù)有限公司提供，許可證編號(hào)：SCXK（京）2019-0010；普通級(jí)日本大耳白兔，體質(zhì)量2.5 ～3 kg，由北京金牧陽(yáng)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物養(yǎng)殖有限責(zé)任公司提供，許可證號(hào)：SCXK（京）2020-0002。

1.2 試藥

SYI（規(guī)格：50 mg/瓶，浙江永寧藥業(yè)股份有限公司，批號(hào)：1810216）；烏拉坦（上海麥克林生化科技有限公司，批號(hào)：C10821102，用生理鹽水配制成25%溶液使用）；3.8%枸櫞酸鈉（北京雷根生物技術(shù)有限公司，批號(hào)：0507A21）；二磷酸腺苷（ADP，北京世帝科學(xué)儀器公司）；花生四烯酸（AA，上海吉至生化科技有限公司，批號(hào)：Z404335EA）；凝血活酶時(shí)間（APTT）、凝血酶原時(shí)間（PT）、凝血酶時(shí)間（TT）測(cè)定試劑盒（上海長(zhǎng)島生物技術(shù)有限公司，批號(hào)分別為201200800、2010004501、201003201）。

1.3 儀器

BL-420I 信息化集成化信號(hào)采集與處理系統(tǒng)（成都泰盟科技有限公司）；離體心臟灌流裝置（美國(guó)Radnoti 公司）；Milli-Q 型超純水系統(tǒng)（北京五洲東方科技發(fā)展有限公司）；MP36 型四道生理信號(hào)記錄儀、SS19L 型壓力換能器（美國(guó)BIOPAC公司）；智能恒溫水油槽（蘇州帕瓦西爾實(shí)驗(yàn)設(shè)備有限公司）；5810R 高速常溫/冷凍離心機(jī)（德國(guó)Eppendorf 公司）；LG-PABER-1 型血小板聚集凝血因子分析儀（北京世帝科學(xué)儀器公司）。

2 方法

2.1 K-H 液配制

以配制1 L K-H 液為例， 稱取NaCl 118 mmol，NaHCO24 mmol，KCl 4.7 mmol，KHPO1.2 mmol，MgSO1.2 mmol，EDTA 二鈉 0.5 mmol加入到900 mL 超純水中，每加入一種試劑均充分搖勻溶解，再單獨(dú)稱取CaCl2.5 mmol 加入到100 mL 超純水中充分溶解，分多次加入至之前所配的900 mL 溶液中，搖勻，最后加入葡萄糖11 mmol，混合均勻，即可得到澄清的K-H 液1 L。

2.2 動(dòng)物模型建立及分組給藥

2.2.1 大鼠在體心肌I/R 損傷模型 將大鼠隨機(jī)分為假手術(shù)組，模型組，SYI 2.5、5、10、20、40 mg·kg組，每組10 ～11 只。給藥組于冠狀動(dòng)脈左前降支穿線后即刻尾靜脈注射相應(yīng)濃度藥物一次，假手術(shù)組和模型組同法給予生理鹽水。大鼠稱重后腹腔注射10%水合氯醛（3.5 mg·kg）麻醉，仰臥位固定，氣管插管，連接呼吸機(jī)進(jìn)行人工輔助呼吸，并連接心電圖，剪開胸部皮膚、肌肉，在第四肋間，打開胸腔，暴露心臟，用6-0 手術(shù)線，在主動(dòng)脈圓錐與左心耳交界處下1 mm 處（冠狀動(dòng)脈左前降支）穿線結(jié)扎，假手術(shù)組僅穿線不結(jié)扎。以心電圖QRS 波幅加大、ST 段抬高或降低，T 波高聳或倒置作為缺血是否成功的判斷標(biāo)準(zhǔn)。結(jié)扎45 min 后，剪開結(jié)扎線，實(shí)現(xiàn)再灌注，再灌注120 min 后，采集血液及心肌組織樣本進(jìn)行檢測(cè)。

2.2.2 Langendorff 離體大鼠心臟灌流模型將K-H 液倒入至Langendorff 離體灌流裝置中，打開智能恒溫水油槽，使K-H 液溫度穩(wěn)定在（37±0.5）℃，往K-H 液中持續(xù)充入混合氣體（95%O，5%CO），使K-H 液呈氧飽和狀態(tài)。將大鼠隨機(jī)分為對(duì)照組，SYI 0.125、0.25、0.5、1、2 mg·L組，每組8 ～10 只。大鼠稱重后腹腔注射10%水合氯醛（3.5 mg·kg）麻醉。打開胸腔，暴露心臟，左手拇指、食指和中指輕輕提起心臟，暴露心底血管，迅速將其剪斷，取出心臟立即放入4℃ K-H 液中。漂凈血液，剪去肺組織、食道等多余組織，留出長(zhǎng)度約1 cm 左右的主動(dòng)脈。將分離干凈的心臟迅速轉(zhuǎn)移，進(jìn)行主動(dòng)脈插管，連接Langendorff 離體心臟灌流系統(tǒng)。在左心耳下剪一小口，將自制乳膠球囊經(jīng)左心耳置入左心室內(nèi)，固定球囊。球囊與壓力換能器相連，可通過(guò)多道生理信號(hào)采集處理系統(tǒng)監(jiān)視并記錄左心室內(nèi)壓力的變化。對(duì)照組用K-H 液平穩(wěn)灌流60 min，給藥組先使用K-H 液灌流，在灌流30 min 后切換含SYI 的K-H 液灌流30 min。

2.3 心肌梗死面積測(cè)定

再灌注結(jié)束后，取下在體心肌I/R 模型大鼠心臟，用生理鹽水清洗干凈，置－20 ℃冰箱冷凍10 min，將心臟左心耳以下部分均勻切成5 片，每片厚度約為1 mm，放入1% TTC 溶液中，于37 ℃下染色30 min，正常心肌呈深紅色，缺血心肌呈蒼白色，再將染好的心臟薄片放入4%多聚甲醛中固定，24 h 后掃描拍照，使用Image J 軟件測(cè)量每片心肌面積及梗死區(qū)面積，計(jì)算心肌梗死區(qū)面積占心肌總面積的百分比。

2.4 生化指標(biāo)檢測(cè)

再灌注結(jié)束后，取在體心肌I/R 模型大鼠腹主動(dòng)脈血，3000 r·min離心15 min，取上清液，按肌酸激酶（CK）和腫瘤壞死因子-

α

（TNF-

α

）測(cè)定試劑盒說(shuō)明書進(jìn)行操作，檢測(cè)血清中CK、TNF-

α

的含量。

2.5 離體心臟心功能測(cè)定

所有心功能指標(biāo)由MP36 型四道生理信號(hào)記錄儀測(cè)定采集，使用AcqKnowledge 4.4 軟件分析心功能指標(biāo)左心室收縮壓（LVSP）、左心室舒張壓（LVEDP）并計(jì)算左心室發(fā)展壓（LVDP）（LVDP ＝LVSP－LVEDP）、左心室壓力最大升高速率（＋dp/dt）和左心室壓力最大下降速率（－dp/dt），同時(shí)實(shí)時(shí)記錄冠脈流量（CF），在整個(gè)實(shí)驗(yàn)過(guò)程中以記錄心臟插管灌流后第30 min時(shí)的穩(wěn)定的數(shù)據(jù)作為最初的指標(biāo)值，而后分別記錄給藥后固定時(shí)間點(diǎn)（給藥10、20、30 min）的相關(guān)指標(biāo)值。計(jì)算給藥后各時(shí)間點(diǎn)數(shù)值相對(duì)于灌流30 min 時(shí)的數(shù)值的變化百分率。

2.6 SYI 體外抗ADP、AA 誘導(dǎo)的家兔血小板聚集作用

取健康兔，禁食12 h，按4 mg·kg耳緣靜脈注射25%烏拉坦，分離頸主動(dòng)脈取血，收集于預(yù)先加入了3.8%枸櫞酸鈉抗凝劑的離心管中（抗凝劑與全血的比例為1∶9），800 r·min離心10 min，取上層液即得富血小板血漿（PRP），剩下部分以3000 r·min離心10 min 取上層液即得貧血小板血漿（PPP），PRP 呈乳白色，PPP呈清亮透明的淡黃色。使用基于比濁法的血小板聚集儀測(cè)量血小板聚集率，整個(gè)測(cè)定控制在4 h內(nèi)完成，且PRP 不可低溫保存和過(guò)度振蕩。測(cè)定時(shí)以300 μL PPP 調(diào)零，以300 μL PRP 作空白對(duì)照。測(cè)試杯通道加入攪拌珠，將50 μL 不同質(zhì)量濃度SYI（10、20、30、40、50 mg·mL）與300 μL PRP 在37 ℃的測(cè)試杯內(nèi)孵育3 min，分別加入誘導(dǎo)劑 ADP（5 μmol·L）、AA（5 mg·mL）各10 μL 誘導(dǎo)血小板聚集，測(cè)試并記錄10 min 內(nèi)最大聚集率，計(jì)算抑制率。

血小板聚集抑制率（%）＝（對(duì)照組血小板聚集率－給藥組血小板聚集率）/對(duì)照組血小板聚集率×100%。

2.7 SYI 對(duì)APTT、TT、PT 的影響

取“2.6”項(xiàng)下中所得PPP，按APTT、TT、PT 試劑盒說(shuō)明書操作，測(cè)定并記錄不同質(zhì)量濃度SYI（5、10、20、30、40 mg·mL）對(duì)APTT、TT、PT 的作用。

2.8 統(tǒng)計(jì)方法

使用SPSS 24 軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行單因素方差分析，以

P

＜0.05 表示差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，數(shù)據(jù)以

x

±

s

形式表示。

3 結(jié)果

3.1 SYI 對(duì)心肌I/R 大鼠心肌梗死面積的影響

與假手術(shù)組比較，模型組大鼠心肌梗死面積顯著增加（

P

＜0.01）；而SYI 各劑量組心肌梗死面積均小于模型組（

P

＜0.01），說(shuō)明各給藥組均能一定程度保護(hù)心臟組織。SYI 各劑量組之間的心肌梗死面積沒(méi)有顯著差異，但隨著給藥劑量增加，心肌梗死面積呈下降趨勢(shì)。結(jié)果見(jiàn)表1。

表1 SYI 對(duì)心肌I/R 大鼠心肌梗死面積的影響
Tab 1 Effect of SYI on myocardial infarct size in myocardial I/R rats

注：與假手術(shù)組組比較， ＜0.01；與模型組比較， ＜0.01。
Note：Compared with the sham group， ＜0.01；compared with the model group， ＜0.01.

組別劑量/（mg·kg－1） 樣本數(shù)心肌梗死面積/%假手術(shù)組－10 0.00±0.00模型組－1125.31±7.15△△SYI 組40 11 7.30±3.78**20 11 9.60±6.64**101110.50±4.66**5 1012.72±7.29**2.5 1013.89±6.69**

3.2 SYI 對(duì)心肌I/R 大鼠血清CK、TNF-α 含量的影響

與假手術(shù)組比較，模型組血清CK、TNF-

α

含量明顯升高（

P

＜0.01）。與模型組比較，SYI 5、10、20、40 mg·kg組血清中CK、TNF-

α

含量明顯降低（

P

＜0.05）。SYI 各劑量組之間CK、TNF-

α

含量沒(méi)有顯著差異，但隨著給藥劑量增加，CK、TNF-

α

呈下降趨勢(shì)。結(jié)果見(jiàn)表2。

表2 SYI 對(duì)心肌I/R 大鼠血清CK、TNF- 含量的影響
Tab 2 Effect of SYI on serum CK and TNF- content in myocardial I/R rats

注：與假手術(shù)組比較， ＜0.01；與模型組比較， ＜0.05。
Note：Compared with the sham group， ＜0.01；compared with the model group， ＜0.05.

TNF-α/（ng·L－1）假手術(shù)組－100.77±0.25103.3±35.2模型組－111.56±0.69△△199.6±61.4△△SYI 組40111.04±0.33*136.7±43.9*20111.06±0.21*151.3±24.1*10111.09±0.60*142.7±64.0*組別劑量/（mg·kg－1）樣本數(shù)CK/（U·mL－1）5101.12±0.37*155.7±42.6*2.5101.20±0.48155.1±51.1

3.3 SYI 對(duì)離體大鼠心臟心功能的作用

3.3.1 SYI 對(duì)離體大鼠心臟CF 變化率的影響對(duì)照組大鼠心臟CF 相對(duì)穩(wěn)定，而SYI 0.25 ～1 mg·L組在不同的時(shí)間段可增加CF，其中0.25 mg·L組效果更好， 而0.125 mg·L和2 mg·L組CF 增加幅度較小。結(jié)果見(jiàn)表3。

表3 SYI 對(duì)離體大鼠心臟CF 變化率的影響
Tab 3 Effect of SYI on change rate of CF in isolated rat heart

注：與對(duì)照組比較， ＜0.05， ＜0.01。
Note：Compared with the control group， ＜0.05， ＜0.01.

組別劑量/（mg·L－1）樣本數(shù)CF 變化率/%～10 min～20 min～30 min對(duì)照組－10 1.29±6.78 1.40±7.38－0.10±6.91 SYI 組0.125 8 2.28±6.09 4.36±4.62 8.22±4.69 0.251010.35±10.00*12.04±8.88** 14.00±8.75**0.510 4.55±6.73 9.69±7.77* 14.07±8.03**1 10 6.72±8.09 9.05±10.61 10.97±15.38*2 10 3.02±6.14 3.36±8.42 3.71±8.69

3.3.2 SYI 對(duì)離體大鼠心臟LVDP 變化率的影響

對(duì)照組離體大鼠心臟LVDP 隨灌流時(shí)間的延長(zhǎng)緩慢下降，灌流至60 min（SYI 灌流30 min）時(shí)LVDP 降低約8.28%。SYI 0.125 mg·L組對(duì)離體大鼠心臟LVDP 影響與對(duì)照組相似；而SYI 0.25 ～1 mg·L在給藥后不同時(shí)間點(diǎn)均可減緩離體大鼠心臟LVDP 的減低，其中1 mg·L組效果較好，可使LVDP 增加7.63%～9.36%；SYI 2 mg·L組對(duì)LVDP 有抑制作用。結(jié)果見(jiàn)表4。

表4 SYI 對(duì)離體大鼠心臟LVDP 變化率的影響
Tab 4 Effect of SYI on change rate of LVDP in isolated rat heart

注：與對(duì)照組比較， ＜0.05， ＜0.001。
Note：Compared with the control group， ＜0.05， ＜0.001.

組別劑量/（mg·L－1）樣本數(shù)LVDP 變化率/%10 min20 min30 min對(duì)照組－10－3.64±3.11 －6.13±3.44 －8.28±4.66 SYI 組0.125 8－5.28±4.00 －8.18±3.39 －8.42±5.17 0.25 10－2.07±5.85 －3.89±5.15 －4.28±6.32 0.5 10－0.06±4.44 －1.07±6.73 －3.27±7.20 1 10 7.63±9.15*** 8.62±8.54*** 9.36±9.87***2 10－9.99±5.81*－11.61±7.45－12.76±6.72

3.3.3 SYI 對(duì)離體大鼠心臟＋dp/dt變化率的影響 對(duì)照組離體大鼠心臟＋dp/dt隨灌流時(shí)間的延長(zhǎng)緩慢下降，灌流至60 min 時(shí)（SYI 灌流30 min）＋dp/dt降低約2.73%。而SYI 0.125 ～1 mg·L組可隨給藥時(shí)間延長(zhǎng)不同程度地增加離體大鼠心臟＋dp/dt值，其中1 mg·L組效果最好，可使＋dp/dt增加9%～14.1%；SYI 2 mg·L組則隨給藥時(shí)間延長(zhǎng)不同程度降低離體大鼠心臟＋dp/dt值。結(jié)果見(jiàn)表5。

3.3.4 SYI 對(duì)離體大鼠心臟－dp/dt變化率的影響 對(duì)照組離體大鼠心臟－dp/dt隨灌流時(shí)間的延長(zhǎng)緩慢下降，灌流至60 min（SYI 灌流30 min）時(shí)降低約7.74%。而SYI 0.125 ～1 mg·L組可隨給藥時(shí)間延長(zhǎng)不同程度地增加離體大鼠心臟－dp/dt值，其中1 mg·L組效果最好，可使－dp/dt增加12.13%～14.95%；而2 mg·L組則隨給藥時(shí)間延長(zhǎng)可不同程度地促進(jìn)離體大鼠心臟－dp/dt值的降低。結(jié)果見(jiàn)表5。

表5 SYI 對(duì)離體大鼠心臟＋dp/dt 及－dp/dt 變化率的影響
Tab 5 Effect of SYI on change rate of ＋dp/dt and －dp/dt in isolated rat heart

注：與對(duì)照組比較， ＜0.05， ＜0.01， ＜0.001。
Note：Compared with the control group， ＜0.05， ＜0.01， ＜0.001.

組別劑量/（mg·L－1）樣本數(shù)＋dp/dtmax 變化率/%－dp/dtmax 變化率/%10 min20 min30 min10 min20 min30 min對(duì)照組－10－0.31±1.45 －1.27±3.06 －2.73±5.80 0.23±3.63 －3.41±2.98 －7.74±4.08 SYI 組0.125 8 0.88±3.31 1.46±3.32 3.40±4.04 0.11±4.51 －0.90±4.91 －1.77±5.32 0.25 10 3.64±7.75 2.94±6.25 3.51±5.58* 3.04±10.14 －0.05±7.57 －1.91±8.06 0.5 10 5.04±4.99 6.54±7.33** 7.02±7.61** 6.86±8.53 6.40±11.71* 3.80±11.93**1 10 9.00±7.23** 12.03±7.15*** 14.10±7.39*** 12.13±11.43** 14.35±11.44*** 14.95±13.77***2 10－5.11±5.48 －6.51±5.43* －6.21±4.87 －8.84±7.96*－11.19±5.96*－13.33±5.80

3.4 SYI 體外抗ADP、AA 誘導(dǎo)的家兔血小板聚集作用

與對(duì)照組比較，SYI 在20 ～50 mg·mL范圍內(nèi)均可顯著抑制ADP、AA 誘導(dǎo)的血小板聚集（

P

＜0.001），且隨著質(zhì)量濃度的增加，SYI對(duì)血小板聚集的抑制率也增加，呈現(xiàn)出量效關(guān)系。結(jié)果見(jiàn)表6。

表6 SYI 對(duì)ADP 和AA 誘導(dǎo)的血小板聚集作用
Tab 6 Effect of SYI on ADP and AA induced platelet aggregation

注：與對(duì)照組相比， ＜0.001。
Note：Compared with the control group， ＜0.001.

組別AA 誘導(dǎo)的血小板聚集10 min 內(nèi)最大聚集率/%ADP 誘導(dǎo)的血小板聚集抑制率/%對(duì)照組38.7±3.2－49.7±1.4－SYI 10 mg·mL－1 組 35.9±2.7 7.147.6±2.4 4.1 SYI 20 mg·mL－1 組 32.7±1.3***15.544.6±2.7*** 10.3 SYI 30 mg·mL－1 組 30.1±1.5***22.338.7±1.6*** 22.1 SYI 40 mg·mL－1 組 27.7±1.3***28.433.7±1.5*** 32.3 SYI 50 mg·mL－1 組 24.8±2.0***35.926.1±2.9*** 47.5抑制率/%10 min 內(nèi)最大聚集率/%

3.5 SYI 對(duì)APTT、TT、PT 的作用

與對(duì)照組比較，SYI 在5 ～40 mg·mL的范圍內(nèi)均可顯著延長(zhǎng)APTT（

P

＜0.001）；在10～40 mg·mL范圍內(nèi)可顯著延長(zhǎng)TT（

P

＜0.05，

P

＜0.001）；在20 ～40 mg·mL范圍內(nèi)可顯著延長(zhǎng)PT（

P

＜0.001），且隨著質(zhì)量濃度的增加，APTT、TT、PT 也相應(yīng)增加，呈現(xiàn)出量效關(guān)系。結(jié)果見(jiàn)表7。

表7 SYI 對(duì)APTT、TT、PT 的作用
Tab 7 Effect of SYI on APTT，TT，and PT

注：與對(duì)照組相比， ＜0.05， ＜0.001。
Note：Compared with the control group， ＜0.05， ＜0.001.

組別APTT/sTT/sPT/s對(duì)照組 33.2±0.915.1±0.815.7±0.6 SYI 5 mg·mL－1 組 37.9±1.0*** 16.4±1.215.9±0.2 SYI 10 mg·mL－1 組 45.4±0.5*** 18.9±1.0*16.0±0.4 SYI 20 mg·mL－1 組 67.8±2.2*** 25.6±1.3***17.6±0.3***SYI 30 mg·mL－1 組 110.4±5.6*** 34.5±3.1***19.7±0.4***SYI 40 mg·mL－1 組 231.9±8.5*** 55.3±4.3***22.5±0.5***

4 討論

心肌I/R 損傷是導(dǎo)致心臟手術(shù)或心肌梗死后發(fā)病率和病死率升高的主要原因。心肌I/R 損傷涉及的病理因素包括氧化損傷、能量代謝障礙、Ca超載、線粒體損傷、炎癥反應(yīng)及細(xì)胞凋亡等。尋找可以預(yù)防或改善心肌I/R 損傷的療法和藥物對(duì)CVDs 的臨床預(yù)后具有重要意義。

目前SYI 對(duì)心肌I/R 損傷的作用尚不清楚。因此本研究使用大鼠體內(nèi)心肌I/R 模型來(lái)評(píng)估SYI 的作用。CK 主要存在于心肌中，在心肌損傷早期會(huì)大量滲漏到血液中，是臨床上診斷心肌梗死的主要指標(biāo)，具有較高的靈敏度和特異性。本次研究結(jié)果可見(jiàn)心肌I/R 模型大鼠血清中CK 明顯增高，提示I/R 對(duì)心肌細(xì)胞已造成不可逆損傷，與心肌梗死面積的結(jié)果相吻合。SYI可劑量依賴性地減少I/R 誘導(dǎo)的大鼠心肌梗死，顯示出對(duì)I/R 大鼠心肌的保護(hù)作用。在再灌注階段，隨著缺血區(qū)域血流的恢復(fù)，大量的氧自由基會(huì)對(duì)血管內(nèi)皮細(xì)胞及心肌細(xì)胞造成氧化應(yīng)激損傷，使TNF-

α

等炎癥因子大量產(chǎn)生且釋放到心肌組織中，引起炎癥反應(yīng)，進(jìn)一步加重心肌組織損傷。SYI 各劑量可不同程度地減少 I/R 模型大鼠血清中TNF-

α

含量升高，提示SYI 可能通過(guò)減少炎性因子水平，抑制炎癥反應(yīng)來(lái)減輕心肌I/R損傷。

離體心臟灌流模型可使研究者在排除神經(jīng)、體液的干擾下研究心臟的收縮功能和冠狀動(dòng)脈特性，從而觀察藥物對(duì)心臟的直接作用。為進(jìn)一步觀察SYI 對(duì)缺血狀態(tài)下心臟的直接作用，本研究采用Langendorff 離體心臟灌流技術(shù)，觀察SYI 對(duì)離體心臟心功能的作用及量效關(guān)系。LVDP和＋dp/dt可反映心肌收縮功能，兩者增加則表明心肌收縮能力增強(qiáng)；－dp/dt反映心肌舒張功能，其絕對(duì)值增大表明心肌舒張功能和順應(yīng)性更好。CF 可用來(lái)反映血管擴(kuò)張和收縮程度。研究結(jié)果表明，SYI 可以改善CF、LVDP、±dp/dt等多個(gè)心功能指標(biāo)，且各個(gè)指標(biāo)的改善程度與其對(duì)藥物的敏感性和耐受性有關(guān)，低劑量SYI 對(duì)CF 效果更好，而高劑量SYI 對(duì)左心室收縮功能更好，并且具有劑量依賴性；但SYI 為2 mg·L時(shí)對(duì)心臟功能顯示抑制作用，除CF 外，各個(gè)指標(biāo)均呈現(xiàn)出下降趨勢(shì)，提升SYI 改善心肌收縮的治療窗口較窄。SYI 對(duì)CF 的作用提示SYI能夠擴(kuò)張冠狀動(dòng)脈從而增加心輸出量，改善組織血流灌注。心肌梗死后左心室異常相關(guān)的收縮和舒張功能障礙是影響患者死亡率的決定性因素，維持左心室收縮舒張功能對(duì)給缺血心肌提供足夠的血液和改善心臟損傷至關(guān)重要。SYI 可增加大鼠離體心臟左心室的收縮能力和CF，因此推測(cè)SYI 改善在體心肌I/R 損傷的作用機(jī)制除了抑制炎癥反應(yīng)減少細(xì)胞凋亡外，還可能與改善心臟收縮和舒張功能，擴(kuò)張血管從而增加心肌供血有關(guān)，但具體的作用機(jī)制還需在體內(nèi)心肌I/R 模型中進(jìn)行驗(yàn)證。

血栓形成可以造成血管閉塞、組織缺血，從而引起許多病變。大多數(shù)CVDs 都與血栓形成有關(guān)，若供應(yīng)心臟血流的動(dòng)脈血栓形成，會(huì)導(dǎo)致缺血性心臟病發(fā)生。血小板聚集是血栓形成的關(guān)鍵因素，血管受損及一些活化誘導(dǎo)劑（如血小板活化因子、ADP、AA 等）均能引起血小板的活化從而誘導(dǎo)血小板聚集。因此本研究采用ADP、AA 體外誘導(dǎo)家兔血小板聚集來(lái)觀察SYI是否具有抗血小板聚集作用。研究結(jié)果表明，不同質(zhì)量濃度SYI 可抑制ADP、AA 誘導(dǎo)的家兔血小板聚集，表明SYI 可阻斷ADP 和AA 途徑抑制血小板活化，對(duì)血栓形成具有抑制作用。預(yù)防血栓形成的另一個(gè)關(guān)鍵過(guò)程是抑制血液凝固。血液凝固主要分為三個(gè)階段，分別是凝血酶原激活物形成、凝血酶形成和纖維蛋白形成。其中第一階段凝血酶原激活物形成可分為內(nèi)源性和外源性兩條途徑。APTT 和PT 分別是內(nèi)源凝血系統(tǒng)和外源凝血系統(tǒng)較為敏感的篩選指標(biāo)。本次研究發(fā)現(xiàn)不同質(zhì)量濃度SYI 可顯著延長(zhǎng)APTT 和PT，表明SYI 對(duì)內(nèi)源性和外源性凝血系統(tǒng)均有抑制作用。TT 為血漿凝血酶時(shí)間，主要反映纖維蛋白酶原轉(zhuǎn)變?yōu)槔w維蛋白的時(shí)間，纖維蛋白原含量是TT 的主要影響因子。SYI 可顯著延長(zhǎng)TT，推測(cè)SYI 可通過(guò)降低纖維蛋白原含量來(lái)起到抗凝血作用。以上研究結(jié)果提示SYI 可能通過(guò)抑制血小板聚集和抗凝血抑制血栓的形成。

SYI 在抗心肌缺血損傷、改善心功能和抗凝血等心血管相關(guān)作用方面表現(xiàn)出藥理活性，量效關(guān)系好，這可為SYI 臨床治療冠心病、心力衰竭、血管閉塞等CVDs 提供理論依據(jù)和用藥參考。但SYI 抗心肌缺血損傷、抗凝血等具體的作用機(jī)制還有待進(jìn)一步研究。