郝振坤， 張文娥， 田風(fēng)華， 魏 蓉， 付麗蓉， 潘學(xué)軍(.貴州大學(xué)農(nóng)學(xué)院， 貴陽(yáng) 550025； 2.貴州省果樹(shù)工程技術(shù)研究中心， 貴陽(yáng) 550025)

我國(guó)核桃種植面積和產(chǎn)量均穩(wěn)居世界第一，隨著我國(guó)核桃產(chǎn)業(yè)的快速發(fā)展，核桃產(chǎn)業(yè)良種化栽培體系不斷完善[1]。核桃林經(jīng)品種改良產(chǎn)生了大量的核桃木材剩余物，目前處理核桃木材多采用堆放、燃燒等傳統(tǒng)利用方式，這不僅導(dǎo)致木屑剩余物中大量的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)被浪費(fèi)，還極易造成環(huán)境污染[2]。如何合理有效利用這巨大的生物質(zhì)資源，實(shí)現(xiàn)其資源化利用，成為當(dāng)前急需解決的重要問(wèn)題。研究表明，果樹(shù)修剪廢棄枝條中含有大量的木質(zhì)素、纖維素和半纖維素以及其他有機(jī)物質(zhì)[3]，食用菌可靠自身產(chǎn)生的胞外酶，將這些堅(jiān)硬、復(fù)雜的有機(jī)物分解成易被吸收利用的單糖，供菌細(xì)胞吸收利用[4]；隨著國(guó)家對(duì)森林資源管控力度的逐步加強(qiáng)，供食用菌生產(chǎn)的木屑價(jià)格不斷攀升，產(chǎn)業(yè)發(fā)展與資源短缺的“菌林”矛盾日益突出[5]；若能將核桃木屑用于食用菌栽培，則既能合理利用核桃木屑資源，又能有效緩解菌林矛盾，助力建設(shè)美麗鄉(xiāng)村。

前人成功利用核桃殼栽培平菇[6]、黑木耳[7]，核桃木屑栽平菇[8]，山核桃外果皮栽培黑木耳[9]及山核桃木屑栽培靈芝[10]，初步證明利用核桃科相關(guān)剩余物栽培食用菌具有可行性；但針對(duì)貴州省種植廣泛的食用菌，尚不明確哪種能較好地分解利用核桃木屑。食用菌在木質(zhì)纖維素分解過(guò)程中產(chǎn)生的胞外漆酶和多酚氧化酶是木質(zhì)素降解主要酶類(lèi)，纖維素是纖維素降解的主要酶類(lèi)，木聚糖酶為半纖維素降解主要酶類(lèi)，蛋白酶是在底物氮源有限的情況下產(chǎn)生的[11]。研究表明，在一定程度上這些胞外酶活性的強(qiáng)弱可以反映菌絲對(duì)基質(zhì)的生物轉(zhuǎn)化率[12]，因此食用菌對(duì)底物營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的利用和轉(zhuǎn)化能力可以用其產(chǎn)生的木質(zhì)纖維素降解酶的活性來(lái)表示[13]。本試驗(yàn)選取貴州省栽培廣泛的11種木腐型食用菌，測(cè)定各食用菌在以核桃木屑為主料的培養(yǎng)基上菌絲生長(zhǎng)過(guò)程中胞外酶活性及菌絲生長(zhǎng)速率，基于隸屬函數(shù)法對(duì)11種食用菌在核桃木屑上生長(zhǎng)適應(yīng)性進(jìn)行綜合評(píng)價(jià)，通過(guò)聚類(lèi)分析，探尋可有效利用核桃木屑的食用菌種類(lèi)，為核桃木屑資源化利用奠定基礎(chǔ)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

黑木耳、毛木耳、皺木耳、玉木耳、黑皮雞樅、白玉菇、蟹味菇、滑子菇、香菇、猴頭菇、桑黃菌株及雜木屑等栽培原料由貴州大學(xué)農(nóng)學(xué)院田風(fēng)華教授提供，泡核桃木屑由貴州楓核農(nóng)業(yè)發(fā)展有限責(zé)任公司提供。

表1 供試菌株信息Table 1 Information of tested strains

1.2 試驗(yàn)方法

1.2.1試驗(yàn)設(shè)計(jì)

試驗(yàn)設(shè)硬雜木屑配方(ck)和核桃木屑配方兩個(gè)處理，每處理5次重復(fù)。硬雜木屑為樺木、青岡木等混合木材，取自貴州省納雍縣；泡核桃木屑取自貴州省德江縣。以核桃木屑代替基礎(chǔ)配方(硬雜木屑78%、麥麩20%、石灰1%、石膏1%)[14]中的硬雜木屑，其他輔料成分占比不變，基質(zhì)充分混合均勻，控制含水量60%，均勻平鋪到直徑為9 cm的玻璃培養(yǎng)皿中，121 ℃高壓滅菌1 h后冷卻至室溫，在無(wú)菌條件下使用5 mm的打孔器，沿長(zhǎng)滿(mǎn)菌絲的PDA平板邊緣均勻打孔，將菌塊接種至培養(yǎng)基中心，24 ℃暗培養(yǎng)，培養(yǎng)第10天測(cè)定菌絲生長(zhǎng)速率及胞外酶活性[15]。其中香菇和猴頭菇培養(yǎng)基中1%的石灰用1%的蔗糖代替。

1.2.2指標(biāo)測(cè)定方法

供試木屑烘干粉碎后，碳含量采用硫酸-重鉻酸鉀氧化法測(cè)定，氮含量采用凱氏定氮法測(cè)定，計(jì)算木屑碳氮比(C/N)；木質(zhì)纖維素含量均采用比色法測(cè)定；礦質(zhì)元素含量采用電感耦合等離子體質(zhì)譜法測(cè)定。

采用十字劃線(xiàn)法測(cè)得各食用菌培養(yǎng)10 d時(shí)的菌落直徑，菌絲平均生長(zhǎng)速率(mm/d)=菌落半徑/培養(yǎng)天數(shù)[15]。

粗酶液的提取與測(cè)定方法：準(zhǔn)確稱(chēng)取菌質(zhì)2 g，適當(dāng)研磨后移入試管，加去離子水20 mL，37 ℃水浴浸提2 h，四層紗布過(guò)濾，將濾液定容至25 mL，4 ℃、8 000 r/min離心10 min，上清液即為粗酶液于-80 ℃保存[16]。多酚氧化酶、蛋白酶、漆酶酶活性的測(cè)定參照韓增華等[11]的方法，纖維素酶酶活性的測(cè)定參照安琪等[17]的方法，木聚糖酶酶活性的測(cè)定參照曹永佳等[18]的方法。

多酚氧化酶酶活力單位：在室溫條件下，當(dāng)pH值為6時(shí)，每克樣品每分鐘吸光度值變化0.001為1個(gè)多酚氧化酶活力單位，以U表示[11]。在室溫條件下，當(dāng)pH值為5時(shí)，每克樣品每分鐘吸光度值變化0.1為1個(gè)漆酶活力單位，以U表示[11]。木聚糖酶酶活力單位：在37 ℃、pH值為5.50的條件下，每克樣品每分鐘從濃度為5 mg/mL的木聚糖溶液中降解釋放1 μmol還原糖所需要的酶量為1個(gè)酶活力單位，以U表示[18]。蛋白酶酶活力單位：在40 ℃、pH值為3.0的條件下，每克樣品每分鐘水解酪蛋白產(chǎn)生相當(dāng)于1 μg酚基氨基酸(由酪氨酸等同物表示)的酶量為1個(gè)酶活力單位，以U表示[11]。纖維素酶酶活力單位：在37 ℃、pH值為5.5的條件下，每克樣品每分鐘從濃度為7.5 mg/mL的羧甲基纖維素鈉溶液中降解釋放1 μmol還原糖所需酶量為1個(gè)酶活力單位，以U表示[17]。

注：各處理測(cè)定指標(biāo)的多重比較采用LSD測(cè)驗(yàn)，不同小寫(xiě)字母表示 p<0.05 差異顯著；圖中AA代表黑木耳、AP代表毛木耳、AD代表皺木耳、AC代表玉木耳、HR代表黑皮雞樅、WHM代表白玉菇、HM代表蟹味菇、PN代表滑子菇、LE代表香菇、HE代表猴頭菇、SB代表桑黃。下同。圖1 不同基質(zhì)條件下各食用菌菌絲生長(zhǎng)速率Fig.1 The growth rate of mycelium of each edible fungus under different substrate conditions

1.3 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析

采用Excel軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)，SPSS 13.0軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行方差分析，DPS v 7.05軟件進(jìn)行主成分分析；最終對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行隸屬函數(shù)分析。

隸屬函數(shù)分析：適應(yīng)性系數(shù)α=處理測(cè)定值/對(duì)照測(cè)定值；對(duì)各指標(biāo)適應(yīng)性系數(shù)進(jìn)行主成分分析；利用周廣生等[19]的公式，U(Xj)=(Xj-Xmin)/(Xmax-Xmin)，求出所有綜合指標(biāo)的隸屬函數(shù)值；根據(jù)綜合指標(biāo)貢獻(xiàn)率的大小，求出各綜合指標(biāo)的權(quán)重Wj=Pj/∑Pj[20]；根據(jù)鈕福祥等[21]的公式D=∑(U(Xj)×Wj)，計(jì)算綜合評(píng)價(jià)值。聚類(lèi)分析：對(duì)D值進(jìn)行聚類(lèi)分析(歐氏距離、最長(zhǎng)距離法)，得出11種食用菌在核桃木屑上的生長(zhǎng)適應(yīng)能力強(qiáng)弱。

2 結(jié)果與分析

2.1 木屑營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)含量

由表2可知，核桃木屑和硬雜木屑碳含量及木質(zhì)纖維素含量均無(wú)顯著性差異，核桃木屑氮含量顯著高于硬雜木屑，核桃木屑(C/N)及纖維素含量低于硬雜木屑，半纖維素及木質(zhì)素含量均高于硬雜木屑；由表3可知，核桃木屑中P、K、Ca、Mg、Cu含量均顯著高于對(duì)照，與對(duì)照相比分別提高了265.38%、81.16%、55.49%、50.00%、6.25%；而Fe、Zn含量均顯著低于對(duì)照，與對(duì)照相比分別降低了15.24%、51.61%。

表2 木屑營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)含量Table 2 Nutrient content of sawdust

表3 木屑礦質(zhì)元素含量Table 3 Mineral element content of sawdust

2.2 泡核桃木屑對(duì)各食用菌菌絲生長(zhǎng)速率的影響

由圖1可知，核桃木屑作為基質(zhì)主料，顯著提高了黑木耳、毛木耳、皺木耳、玉木耳4種木耳屬食用菌及桑黃的菌絲平均生長(zhǎng)速率；與對(duì)照相比分別提高了50.84%、30.29%、32.60%、30.94%和30.23%，對(duì)黑木耳菌絲平均生長(zhǎng)速率提升幅度最大；白玉菇、蟹味菇、香菇、猴頭菇在核桃木屑培養(yǎng)基上菌絲生長(zhǎng)速率與對(duì)照相比，差異未達(dá)到顯著水平；黑皮雞樅、滑子菇在核桃木屑培養(yǎng)基上菌絲生長(zhǎng)速率顯著低于對(duì)照。這表明，核桃木屑作為基質(zhì)主料，有利于4種木耳屬食用菌及多孔菌類(lèi)桑黃的菌絲生長(zhǎng)。

2.3 泡核桃木屑對(duì)各食用菌胞外酶活性的影響

由圖2可以看出，核桃木屑作為栽培基質(zhì)主料，顯著提高了黑木耳、毛木耳、皺木耳、玉木耳、蟹味菇、滑子菇、香菇、桑黃胞外多酚氧化酶酶活性，比對(duì)照分別提高了292.25%、231.44%、100.49%、317.28%、24.07%、53.65%、22.14%、4.87%，核桃木屑對(duì)4種木耳屬食用菌胞外多酚氧化酶酶活性提升幅度較大。猴頭菇在核桃木屑培養(yǎng)基上胞外多酚氧化酶酶活性，與對(duì)照相比差異不顯著。黑皮雞樅、白玉菇在核桃木屑培養(yǎng)基上胞外多酚氧化酶酶活性顯著低于對(duì)照。其中黑皮雞樅、白玉菇、蟹味菇、香菇、猴頭菇、桑黃和4種木耳屬食用菌相比，胞外多酚氧化酶酶活性相對(duì)較低，多酚氧化酶用于底物中木質(zhì)素的降解，這表明4種木耳屬食用菌對(duì)核桃木屑中的木質(zhì)素利用能力更強(qiáng)。

圖2 不同基質(zhì)條件下各食用菌胞外多酚氧化酶酶活性Fig.2 Extracellular polyphenol oxidase enzyme activity of each edible fungus under different substrate conditions

通過(guò)對(duì)各食用菌在不同基質(zhì)條件下胞外漆酶酶活性進(jìn)行比較，結(jié)果表明，猴頭菇在核桃木屑培養(yǎng)基上胞外漆酶酶活性與對(duì)照無(wú)顯著性差異，黑皮雞樅、白玉菇、蟹味菇在核桃木屑培養(yǎng)基上胞外漆酶酶活性顯著低于對(duì)照。由圖3可知，核桃木屑作為主料栽培食用菌，顯著提高了黑木耳、毛木耳、皺木耳、玉木耳、滑子菇、香菇、桑黃胞外漆酶酶活性，而且同樣對(duì)4種木耳屬食用菌漆酶酶活性提升幅度較大。漆酶與多酚氧化酶同屬于木質(zhì)素降解酶類(lèi)，這表明木耳屬食用菌對(duì)核桃木屑中木質(zhì)素利用能力較強(qiáng)，白玉菇、蟹味菇、桑黃在核桃木屑培養(yǎng)基和對(duì)照培養(yǎng)基上胞外漆酶酶活性均較低，說(shuō)明其對(duì)底物中木質(zhì)素的分解能力較弱。

圖3 不同基質(zhì)條件下各食用菌胞外漆酶酶活性Fig.3 Extracellular laccase enzyme activity of each edible fungus under different substrate conditions

通過(guò)對(duì)各食用菌在不同基質(zhì)條件下胞外木聚糖酶酶活性進(jìn)行比較，發(fā)現(xiàn)絕大多數(shù)食用菌在核桃木屑培養(yǎng)基上，胞外木聚糖酶酶活性低于對(duì)照；由圖4可知，黑木耳、毛木耳、皺木耳、黑皮雞樅、白玉菇、蟹味菇、香菇、猴頭菇、桑黃胞外木聚糖酶酶活性顯著低于對(duì)照。木聚糖酶用于底物中半纖維素的降解，結(jié)合各食用菌在不同基質(zhì)條件下胞外多酚氧化酶、漆酶酶活性分析，這表明以核桃木屑作為主料，食用菌大多表現(xiàn)為優(yōu)先利用核桃木屑中豐富的木質(zhì)素和纖維素，而后分解半纖維素。

圖4 不同基質(zhì)條件下各食用菌胞外木聚糖酶酶活性Fig.4 Extracellular xylanase enzyme activity of each edible fungus under different substrate conditions

由圖5可知，核桃木屑作為栽培基質(zhì)，顯著提高了黑木耳、毛木耳、皺木耳、玉木耳、黑皮雞樅、滑子菇、香菇、猴頭菇、桑黃胞外纖維素酶酶活性，對(duì)毛木耳、桑黃提升幅度最大，分別為338.86%、244.62%；蟹味菇在核桃木屑培養(yǎng)基上胞外纖維素酶酶活性高于對(duì)照，但差異不顯著；白玉菇在核桃木屑培養(yǎng)基上胞外纖維素酶酶活性顯著低于對(duì)照。這表明，核桃木屑可提高絕大多數(shù)食用菌胞外纖維素酶酶活性，提高對(duì)底物中纖維素的分解能力。

圖5 不同基質(zhì)條件下各食用菌胞外纖維素酶酶活性Fig.5 Extracellular cellulase enzyme activity of each edible fungus under different substrate conditions

對(duì)各食用菌在不同基質(zhì)條件下胞外蛋白酶酶活性進(jìn)行比較，結(jié)果(圖6)表明，除香菇外的10種食用菌在核桃木屑培養(yǎng)基上胞外蛋白酶酶活性顯著高于對(duì)照，核桃木屑培養(yǎng)基對(duì)白玉菇蛋白酶酶活性提升幅度最大，達(dá)到了60%。蛋白酶是在底物氮源不足的情況下產(chǎn)生的，絕大多數(shù)食用菌在核桃木屑培養(yǎng)基上蛋白酶活性高于對(duì)照，說(shuō)明以核桃木屑為主料的培養(yǎng)基中的氮源，不能滿(mǎn)足大多數(shù)食用菌的生長(zhǎng)。

圖6 不同基質(zhì)條件下各食用菌胞外蛋白酶酶活性Fig.6 Extracellular protease enzyme activity of each edible fungus under different substrate conditions

2.4 單項(xiàng)指標(biāo)的適應(yīng)性系數(shù)及其相關(guān)性分析

由表4可以看出，不同食用菌種類(lèi)相同指標(biāo)或同種食用菌不同指標(biāo)，其適應(yīng)性系數(shù)均不相同，有的表現(xiàn)為上升(α>100%)，有的則表現(xiàn)為下降(α<100%)。因此，以不同單項(xiàng)指標(biāo)的適應(yīng)性系數(shù)評(píng)價(jià)食用菌在核桃木屑培養(yǎng)基上的生長(zhǎng)適應(yīng)性，所得結(jié)果也不相同。這表明，食用菌在不同基質(zhì)上的生長(zhǎng)適應(yīng)性是一個(gè)綜合性狀，用某一單項(xiàng)指標(biāo)評(píng)價(jià)其生長(zhǎng)適應(yīng)性存在片面性，相同條件下單一指標(biāo)表征不同種食用菌在底物上的生長(zhǎng)適應(yīng)性存在差異，不能得出較為科學(xué)的結(jié)果。

表4 各單項(xiàng)指標(biāo)的適應(yīng)性系數(shù)Table 4 Adaptability coefficient of each individual index

從表5可以看出，菌絲生長(zhǎng)速率與多酚氧化酶、漆酶酶活性均呈極顯著正相關(guān)，漆酶與多酚氧化酶酶活性之間同樣呈極顯著正相關(guān)性；而蛋白酶與其余各指標(biāo)均呈負(fù)相關(guān)性，但均未達(dá)到顯著水平。

表5 各單項(xiàng)指標(biāo)適應(yīng)性系數(shù)的相關(guān)性分析Table 5 Correlation analysis on the adaptability coefficient of each individual index

2.5 各單項(xiàng)指標(biāo)的適應(yīng)性系數(shù)的主成分分析

對(duì)6個(gè)單項(xiàng)指標(biāo)的適應(yīng)性系數(shù)進(jìn)行主成分分析，由表6可知，前3個(gè)綜合指標(biāo)(Z 1、Z 2、Z 3)的貢獻(xiàn)率分別為54.511%、19.300%和12.934%，累計(jì)貢獻(xiàn)率達(dá)86.745%，這表明，前3個(gè)綜合指標(biāo)代表了原有6個(gè)指標(biāo)86.745%的信息，可分別用這3個(gè)主成分對(duì)各食用菌在核桃木屑培養(yǎng)基上的生長(zhǎng)適應(yīng)性進(jìn)行概括分析；3個(gè)主成分的特征值分別為3.271、1.158和0.776，第一主成分貢獻(xiàn)率最大。

表6 各主成分的特征值及貢獻(xiàn)率Table 6 Eigenvalue and contribution rate of each principal component

根據(jù)表7，得出各主成分對(duì)應(yīng)的特征向量表達(dá)式分別為：

表7 各主成分特征向量Table 7 Eigenvectors of principal components

第一主成分Z1=0.471 5X1+0.486 6X2+0.519 3X3+0.174 0X4+0.345 6X5-0.348 6X6

第二主成分Z2=0.363 2X1-0.046 1X2+0.167 2X3-0.833 5X4+0.104 7X5+0.363 8X6

第三主成分Z3=0.194 0X1+0.505 4X2+0.048 1X3+0.192 0X4-0.662 3X5+0.478 6X6

其中，X1為菌絲生長(zhǎng)平均速率、X2為多酚氧化酶酶活性、X3為漆酶酶活性、X4為木聚糖酶酶活性、X5為纖維素酶酶活性、X6為蛋白酶酶活性。

單項(xiàng)指標(biāo)的載荷系數(shù)反映了各單項(xiàng)指標(biāo)對(duì)綜合指標(biāo)影響的大小，正負(fù)代表變化方向的差別，絕對(duì)值越大表明該單項(xiàng)指標(biāo)對(duì)主成分影響越大，正號(hào)表示對(duì)主成分正向影響，負(fù)號(hào)表示對(duì)主成分負(fù)向影響。第一主成分Z 1中菌絲平均生長(zhǎng)速率、多酚氧化酶酶活性和漆酶酶活性系數(shù)較大，表明Z 1受這3個(gè)指標(biāo)影響較大；第二主成分Z 2中木聚糖酶酶活性系數(shù)為負(fù)數(shù)且絕對(duì)值較大，表明木聚糖酶酶活性對(duì)Z 2起負(fù)向影響；Z 3中多酚氧化酶、纖維素酶和蛋白酶酶活性系數(shù)絕對(duì)值均較大，表明Z 3受這3種酶酶活性影響較大。

2.6 綜合分析

以所有綜合指標(biāo)的數(shù)值為原始依據(jù)進(jìn)行隸屬函數(shù)分析，所得隸屬函數(shù)值D值見(jiàn)表8。根據(jù)綜合評(píng)價(jià)值，通過(guò)聚類(lèi)分析在距離0.33處將11種食用菌分為4類(lèi)(圖7)，其中黑木耳、毛木耳聚為一類(lèi)，在核桃木屑培養(yǎng)基上表現(xiàn)出較強(qiáng)的生長(zhǎng)適應(yīng)性，其綜合評(píng)價(jià)值分別為0.887、0.882；玉木耳、皺木耳適應(yīng)性中等，D值分別為0.606、0.514；滑子菇、猴頭菇、桑黃、香菇適應(yīng)性較弱，D值分別為0.255、0.263、0.416、0.300；黑皮雞樅、白玉菇、蟹味菇在核桃木屑上生長(zhǎng)適應(yīng)性較差，D值分別為0.074、0.187、0.181。

表8 各種食用菌的綜合指標(biāo)值、隸屬函數(shù)值及D值Table 8 Comprehensive index value, membership function value and D value of various edible fungi

圖7 各種食用菌綜合評(píng)價(jià)值系統(tǒng)聚類(lèi)分析Fig.7 Systematic cluster analysis of comprehensive evaluation value of various edible fungi

3 討 論

食用菌可從栽培基質(zhì)中獲取碳、氮、礦質(zhì)元素等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，基質(zhì)碳氮比是影響食用菌生長(zhǎng)和產(chǎn)量的重要因素之一。研究發(fā)現(xiàn)，不同碳源和氮源物質(zhì)會(huì)影響食用菌對(duì)培養(yǎng)料的分解，而過(guò)量的碳和氮會(huì)抑制食用菌菌絲生長(zhǎng)；食用菌種類(lèi)不同，其菌絲生長(zhǎng)速率和對(duì)基質(zhì)底物的分解能力有較大差異[22]。生長(zhǎng)速度是食用菌生長(zhǎng)特性的重要指標(biāo)，也是食用菌生產(chǎn)中栽培基質(zhì)篩選的重要依據(jù)[23]；菌株間胞外酶活性差異則表征食用菌分解基質(zhì)中營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的速度和能力，也可作為食用菌栽培種類(lèi)篩選的重要生理生化指標(biāo)，為快速準(zhǔn)確鑒別菌株的生產(chǎn)性能提供理論依據(jù)[24]。

食用菌胞外酶能將木質(zhì)纖維素等生物大分子物質(zhì)分解轉(zhuǎn)變成能被吸收的單糖，供菌細(xì)胞吸收利用[4]。漆酶和多酚氧化酶是食用菌分解利用木質(zhì)素等大分子物質(zhì)的主要酚氧化酶，是一種含銅的糖蛋白，在木質(zhì)素降解中起重要作用[25]，在栽培基質(zhì)中添加Cu2+可顯著提高漆酶活性[18]；本研究發(fā)現(xiàn)，核桃木屑中Cu含量明顯高于硬雜木屑的，在核桃木屑培養(yǎng)基中7種食用菌(黑木耳、毛木耳、皺木耳、玉木耳、滑子菇、香菇、桑黃)的胞外漆酶和多酚氧化酶酶活性顯著高于硬雜木屑，這可能與核桃木屑中Cu含量較高有關(guān)。Milica等[26]發(fā)現(xiàn)，黑木耳具有成熟的酶系統(tǒng)和對(duì)木質(zhì)素降解的高選擇性，本試驗(yàn)中在核桃木屑基質(zhì)黑木耳多酚氧化酶酶活性提高292%、漆酶酶活性提高232%，同樣表明黑木耳對(duì)核桃木屑木質(zhì)素具有較強(qiáng)的降解能力。此外，研究發(fā)現(xiàn)食用菌胞外漆酶、多酚氧化酶酶活性呈顯著正相關(guān)，這與韓增華等[11]的結(jié)論一致。在基質(zhì)中木聚糖酶負(fù)責(zé)半纖維素的降解，本研究中核桃木屑基質(zhì)中的10種食用菌胞外木聚糖酶酶活性顯著低于對(duì)照(玉木耳除外)，這表明絕大多數(shù)食用菌會(huì)優(yōu)先利用基質(zhì)中的木質(zhì)素和纖維素，同時(shí)減弱對(duì)半纖維素的利用能力，與方宏陽(yáng)等[27]的結(jié)論相符。尹淑麗等[28]研究發(fā)現(xiàn)，核桃剪枝木屑是一種優(yōu)良的碳氮源，可為香菇生長(zhǎng)提供充足的養(yǎng)分促進(jìn)菌絲的生長(zhǎng)；本研究發(fā)現(xiàn)香菇在核桃木屑基質(zhì)上菌絲更濃密，有效促進(jìn)了香菇菌絲生物量。

本研究發(fā)現(xiàn)不同食用菌對(duì)木質(zhì)纖維素的降解規(guī)律不同，用單一指標(biāo)難以準(zhǔn)確評(píng)價(jià)食用菌在核桃木屑中的生長(zhǎng)適應(yīng)性。模糊數(shù)學(xué)法在植物抗性綜合評(píng)價(jià)中已被廣泛應(yīng)用，可對(duì)多個(gè)性狀進(jìn)行綜合分析[29-30]；本研究先利用主成分分析法將11種食用菌的6個(gè)獨(dú)立的生理指標(biāo)轉(zhuǎn)化成3個(gè)綜合指標(biāo)，然后根據(jù)綜合指標(biāo)值進(jìn)行相應(yīng)的隸屬函數(shù)加權(quán)計(jì)算得到綜合評(píng)價(jià)值，D值能客觀(guān)地反映了11種食用菌在核桃木屑上的生長(zhǎng)適應(yīng)性。最后根據(jù)D值利用系統(tǒng)聚類(lèi)分析法將11種食用菌在核桃木屑上的生長(zhǎng)適應(yīng)性分為4類(lèi)。綜合評(píng)價(jià)結(jié)果表明4種木耳屬食用菌能有效降解利用核桃木屑中的木質(zhì)纖維素，在核桃木屑上菌絲生長(zhǎng)速率較快，為生長(zhǎng)適應(yīng)性較強(qiáng)的類(lèi)型；而黑皮雞樅、白玉菇和蟹味菇在核桃木屑基質(zhì)上木質(zhì)纖維素降解能力較差、生長(zhǎng)較慢，聚類(lèi)為生長(zhǎng)適應(yīng)性最差的一類(lèi)，這與本試驗(yàn)的觀(guān)察結(jié)果和其他研究者的研究結(jié)果一致，本試驗(yàn)結(jié)果表明，綜合評(píng)價(jià)方法可以克服單一指標(biāo)的缺點(diǎn)，全面準(zhǔn)確地評(píng)價(jià)食用菌在基質(zhì)栽培中的生長(zhǎng)適應(yīng)性。

綜上可見(jiàn)，木耳屬食用菌在核桃木屑基質(zhì)中表現(xiàn)出較強(qiáng)的生長(zhǎng)適應(yīng)性，利用核桃木廢棄物栽培食用菌是實(shí)現(xiàn)廢棄物資源循環(huán)利用行之有效的方法；本試驗(yàn)不僅為核桃木屑“菌質(zhì)化”利用提供了菌種選擇依據(jù)，同時(shí)為農(nóng)林廢棄物適生食用菌篩選提供了一種科學(xué)的評(píng)價(jià)方法。徐彥軍等[31]發(fā)現(xiàn)，添加45%茶枝屑會(huì)抑制香菇菌絲的生長(zhǎng)，可能與茶枝屑中多酚物質(zhì)增多有關(guān)；而核桃木中多酚類(lèi)物質(zhì)含量同樣豐富[32]，該特性能否提高適生菌種類(lèi)(如木耳屬食用菌)的內(nèi)在品質(zhì)，黑皮雞樅、白玉菇和蟹味菇等食用菌種類(lèi)在核桃木屑基質(zhì)中生長(zhǎng)不良的原因是否也與其相關(guān)，這些問(wèn)題有待進(jìn)一步探討。