張貴鑫，宋鳳瑞，朱禹奇，關(guān)松磊＊＊，鄭 重＊＊

（1.吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院 長(zhǎng)春 130000；2.中國(guó)科學(xué)院長(zhǎng)春應(yīng)用化學(xué)研究所 長(zhǎng)春 130002）

草烏（Aconitum kusnezoffiiReichb.）為毛莨科一年生草本植物北烏頭的干燥塊根，隸屬烏頭屬草烏種，質(zhì)地較硬，別稱(chēng)有“鴨頭”“藥羊蒿”“雞頭草”“百步草”等，截面為灰棕色或深灰色，氣味微弱，味辛、麻舌。在傳統(tǒng)中醫(yī)藥領(lǐng)域的應(yīng)用具有悠久的歷史。最早記載于《神農(nóng)本草經(jīng)》中，與川烏作為藥材入藥時(shí)，可統(tǒng)稱(chēng)為“烏頭”。野生草烏在我國(guó)分布廣泛、種類(lèi)豐富，約有200余種，集中分布在東北、華北等地，四川、云南、新疆維吾爾自治區(qū)的高山地帶也有分布。草烏有劇毒，劑量控制不當(dāng)便可中毒甚至死亡，因此在使用過(guò)程中，必須率先考慮其安全性，但是由于產(chǎn)地不同、炮制方法各異，減毒存效的原理也不盡相同。

草烏在蒙藥中的應(yīng)用和炮制方法具有一定的特色，近些年來(lái)愈來(lái)愈受到學(xué)者們的關(guān)注。在草烏炮制的過(guò)程中，由于個(gè)人味覺(jué)差異，“口嘗無(wú)麻舌感或微有麻舌感”的炮制經(jīng)驗(yàn)缺乏科學(xué)依據(jù)，因此借助現(xiàn)代檢測(cè)手段對(duì)蒙藥草烏的炮制減毒工藝進(jìn)行規(guī)范化研究，構(gòu)建質(zhì)量控制體系具有重要意義。本文總結(jié)了草烏的毒性成分、炮制減毒工藝、規(guī)范和質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)構(gòu)建方法，希望為今后蒙藥制草烏的研究提供全面科學(xué)的資料。

1 草烏在蒙醫(yī)藥中的應(yīng)用

草烏作為蒙醫(yī)藥種常見(jiàn)藥材，蒙藥名為“泵阿”，在諸多著作中均有記載。據(jù)不完全統(tǒng)計(jì)，在《蒙醫(yī)金匱》《甘露四部》《中國(guó)醫(yī)學(xué)百科全書(shū)·蒙醫(yī)學(xué)》《蒙醫(yī)方劑學(xué)》《內(nèi)蒙古蒙成藥標(biāo)準(zhǔn)》中所記載的蒙藥方劑中含草烏入藥的就占11.27%[1]。蒙醫(yī)認(rèn)為草烏辛、溫、輕，有大毒[2-3]，其主要活性成分為烏頭類(lèi)生物堿，但同時(shí)也是致毒成分，因而生草烏多用于外用，生草烏經(jīng)過(guò)炮制后多與訶子配伍使用以達(dá)到降低毒性、增強(qiáng)藥效等作用。本實(shí)驗(yàn)室研究的蒙藥經(jīng)典方—扎沖十三味丸，又名嘎日迪-13，是由禹糧土、制草烏、沉香、訶子、煅磁石等共13味藥配伍組成的水丸制劑，具有祛風(fēng)活血、鎮(zhèn)靜安神等功效，多用于左痰右瘓，腰腿不利，筋骨疼痛，關(guān)節(jié)疼痛，風(fēng)濕。因其臨床療效確切，收錄于歷代蒙醫(yī)藥經(jīng)典書(shū)籍。盡管不同古籍對(duì)該方劑中藥材配伍的入味量有一定差異，但制草烏（草烏經(jīng)過(guò)訶子湯進(jìn)行炮制）作為該方劑的第一味藥的地位未發(fā)生改變[4]。另一劑主治瘟疫熱癥，感冒咳嗽的特色蒙藥—清感九位丸（呼和嘎日迪-9）的組方成分有制草烏、訶子、土木香、黑云香等；此外蒙藥那如三味丸、嘎日迪五位丸等均含有制草烏、訶子等成分，適用于散寒與風(fēng)濕濕痹治療等方面，葉子、芽也在臨床治療牙痛中效果顯著。綜上所述，草烏在蒙藥制劑中應(yīng)用廣泛，可以生用，還可以炮制用，用藥部位也不局限于塊根。

2 草烏的藥用價(jià)值及化學(xué)成分

2.1 草烏的藥用價(jià)值

草烏具有祛風(fēng)、除濕、散寒、止痛等功能。早在《神農(nóng)本草經(jīng)》中就有記載：“草烏主中風(fēng)，惡風(fēng)，洗洗出汗，除寒濕痹，咳逆上氣，破積聚寒熱?！闭f(shuō)明其作為搜風(fēng)勝濕，祛寒止痛的中草藥有悠久的歷史。《實(shí)用蒙藥學(xué)》認(rèn)為“北烏頭辛、苦、熱；有大毒。用于溫性方劑有溫?zé)嶂?；用于寒涼之劑有增?qiáng)寒涼之效；其性為初熱,而后平、涼,有大毒”,總結(jié)了蒙醫(yī)藥對(duì)草烏藥性的認(rèn)識(shí)[5]。因其兼具抗炎、鎮(zhèn)痛的功效，廣泛應(yīng)用于風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的治療當(dāng)中。

2.2 草烏的化學(xué)成分

草烏最早被記載是用在箭頭上獵殺動(dòng)物，經(jīng)過(guò)古代醫(yī)學(xué)的積累，現(xiàn)代草烏的臨床多應(yīng)用于麻醉、抗炎及痹癥等方面。草烏的臨床療效主要取決于化學(xué)成分。草烏的主要化學(xué)成分是二萜類(lèi)生物堿，包括C18、C19、C20、雙二萜生物堿四大類(lèi)，其中C19-二萜類(lèi)生物堿在草烏中的含量最大，具有抗炎、鎮(zhèn)痛和防止心率失常的生物活性，同時(shí)也是毒性最為劇烈的成分，根據(jù)C19-二萜類(lèi)生物堿中酯化類(lèi)型分為單酯型生物堿、雙酯型生物堿和多酯型生物堿。草烏中的雙酯型生物堿最常見(jiàn)，有很多藥理活性，也是草烏質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中需要限定的因素。C18-二萜生物堿的含量較低，也具有抗炎、止痛和防止心率失常的作用，其中的草烏甲素作為麻醉鎮(zhèn)痛藥已經(jīng)應(yīng)用于臨床，用于癌癥晚期疼痛的治療。C20-雙二萜類(lèi)生物堿的結(jié)構(gòu)相對(duì)復(fù)雜，除具有抗炎、鎮(zhèn)痛作用以外，還具有抗腫瘤、抗心律失常的生物學(xué)活性，近年來(lái)逐漸受到重視[6]。草烏中除含有生物堿成分（表1）以外，還含有黃酮類(lèi)、甾醇、酯、糖苷等化學(xué)成分，其含有的總黃酮對(duì)超氧陰離子自由基具有較強(qiáng)的清除作用[7]。

表1 草烏中的生物堿分類(lèi)

3 草烏的毒性成分和減毒方式

3.1 草烏的毒性成分及致毒機(jī)理

古中醫(yī)認(rèn)為烏頭（草烏、川烏等）全株有毒，以根頭最毒，枝葉枯萎后的草烏根頭毒性最大，烏頭品種不同，其中毒劑量不同。草烏（尤其是根和根塊）具有神經(jīng)毒性、消化系統(tǒng)毒性、心臟毒性、皮膚吸收毒性、胚胎毒性等[8]。主要毒性成分是雙酯型生物堿，包括烏頭堿、新烏頭堿和次烏頭堿等。除此之外，草烏中也含有毒性較低的單酯型生物堿和醇胺型生物堿。其中烏頭類(lèi)生物堿所引起的嚴(yán)重的心律失常及呼吸中樞抑制是其致死的主要原因。其機(jī)制是烏頭類(lèi)生物堿可以造成心肌、神經(jīng)和肌肉在內(nèi)的可興奮組織的細(xì)胞膜的鈉離子通道敏感性增強(qiáng)，烏頭堿和新烏頭堿以高親與開(kāi)放狀態(tài)的電壓敏感鈉通道結(jié)合，引起鈉通道的持續(xù)激活，使鈉通道對(duì)興奮刺激不敏感。誘導(dǎo)心律失常的電生理表現(xiàn)是延遲去極化后和去極化后的早觸發(fā)活動(dòng)，是由于其拮抗迷走神經(jīng)介導(dǎo)的膽堿能作用，通過(guò)延長(zhǎng)動(dòng)作電位期間鈉的流入時(shí)間。另外，由于下丘腦腹膜內(nèi)側(cè)核的激活，還具有降壓和引起心動(dòng)過(guò)緩的作用。對(duì)呼吸肌的毒性作用主要是因?yàn)闉躅^堿通過(guò)對(duì)軸突中的電壓敏感鈉通道起作用，降低乙酰膽堿的定量釋放來(lái)阻斷神經(jīng)肌肉的興奮傳遞，抑制呼吸肌收縮，引起窒息。消化系統(tǒng)毒性是由于烏頭堿、新烏頭堿和次烏頭堿可以通過(guò)誘導(dǎo)神經(jīng)節(jié)后膽堿能神經(jīng)釋放乙酰膽堿導(dǎo)致回腸強(qiáng)烈收縮[9]，引起劇烈腹痛。不同烏頭類(lèi)生物堿的小鼠給藥半數(shù)致死量（表2）。

表2 烏頭類(lèi)生物堿的小鼠口服給藥[10]

3.2 草烏的減毒工藝

3.2.1 草烏的常用減毒工藝

生草烏內(nèi)因具有毒性劇烈的雙酯型生物堿不能直接入藥，含草烏藥物的濫用和服用不當(dāng)所導(dǎo)致的中毒事件時(shí)有發(fā)生，人們逐漸重視含草烏藥物使用的安全性。因此，草烏的減毒工藝研究成為熱點(diǎn)。草烏中的雙酯型烏頭堿性質(zhì)不穩(wěn)定，容易水解，因此通過(guò)簡(jiǎn)單的浸泡、水煮來(lái)使草烏中的雙酯型生物堿水解減弱毒性的炮制方法沿用至今，2020版《中國(guó)藥典》一部中收載了草烏的水浸炮制方法。然而傳統(tǒng)的水煮方法不僅溶出了大量有效成分，降低了藥效，而且也并沒(méi)有應(yīng)用傳統(tǒng)中醫(yī)藥通過(guò)多味藥材協(xié)同作用減毒的理論，因此除水浸泡以外，還衍生出加入輔料浸泡，《本草綱目拾遺》中就提到了用姜漬和豆制。民間還有用米泔水浸泡、麻油浸泡等方法。不同炮制方法，去毒機(jī)理不盡相同，藥物效果還有待研究。草烏不同炮制方法特點(diǎn)比較見(jiàn)表3。

表3 草烏不同炮制方法特點(diǎn)比較

3.2.2 蒙藥草烏的去毒工藝

（1）炮制減毒與傳統(tǒng)中醫(yī)藥相同，蒙藥草烏的主要減毒方式也是通過(guò)炮制來(lái)實(shí)現(xiàn)的。古籍《必用藥劑諸品》中載到：“秋季采挖泵阿塊根，去泥土須根……泡于童便尿，干燥?！保弧端牟酷t(yī)典》記載：“冬季采挖不傷皮，無(wú)煙火熏制七天”；《蒙醫(yī)金匱》中寫(xiě)道：“麝糞大小塊，泡于酒一晝夜”；在《甘露四部》中有：“有毒根莖類(lèi)的藥的毒，宿于外皮，去皮之”。除上述傳統(tǒng)蒙藥草烏炮制方法，還有酸奶泡、奶濕炒、烘干等方法?，F(xiàn)代的《中華民族共和國(guó)衛(wèi)生部藥品標(biāo)準(zhǔn)（蒙藥分冊(cè)）》記載蒙藥草烏的訶子湯泡法：取草烏，放入訶子湯中，室溫浸泡3-5天，日翻動(dòng)3-5次，至口嘗稍有麻舌感取出，低溫干燥。《內(nèi)蒙古蒙成藥標(biāo)準(zhǔn)》也有甘草湯泡法，另外，此書(shū)中還收載了蒙藥草烏的炮制方法，包括烘制、童尿制、訶子湯泡制以及發(fā)酵草烏。其中訶子湯泡草烏作為蒙醫(yī)主要的炮制方法具有非常悠久的歷史，通過(guò)現(xiàn)代高效液相色譜法（HPLC）、高效液相色譜與質(zhì)譜聯(lián)用（HPLC-MS）等檢測(cè)手段發(fā)現(xiàn)訶子湯泡制的草烏中雙酯型生物堿的變化明顯小于其他炮制方法。盡管近年來(lái)對(duì)草烏炮制工藝的研究較多，但其炮制減毒機(jī)理以及炮制工藝如何統(tǒng)一標(biāo)準(zhǔn)并應(yīng)用于工業(yè)大量生產(chǎn)仍是值得研究的課題。

（2）配伍減毒在蒙醫(yī)理論里，訶子在減毒方面的地位不亞于甘草，有“蒙藥之王”的美稱(chēng)，不僅在草烏的炮制過(guò)程中應(yīng)用廣泛，還在草烏的配伍使用中起到至關(guān)重要的作用，在《蒙藥部頒標(biāo)準(zhǔn)中》，包括口服制草烏的藥品有16個(gè)品種，其中訶子作為配伍和使用的就有12種，且制草烏與訶子的配伍使用比例從1:0.3到1:2。先用訶子對(duì)草烏進(jìn)行炮制解毒，再與訶子配伍入藥，雙重相互作用即可最大程度地降低草烏的毒性，以確保"減毒增效"的功效。

（3） 用法滯毒蒙醫(yī)理論在長(zhǎng)期臨床實(shí)踐的過(guò)程中，認(rèn)為疾病的潛伏、發(fā)作、平息的規(guī)律與季節(jié)和時(shí)間的交替有一定的關(guān)系，臨床用藥會(huì)根據(jù)這一規(guī)律調(diào)整藥的使用方法，施以辨證施治[15]。歸結(jié)疾病本身的特點(diǎn)、入藥的方法、發(fā)病規(guī)律結(jié)合進(jìn)食方法，總結(jié)出了一套獨(dú)有的用法滯毒體系，例如空腹服用、飯前服用、飯后服用、寢前服用等。《部頒標(biāo)準(zhǔn)（蒙藥分冊(cè)）》中含草烏的蒙藥服用時(shí)間大都在睡覺(jué)前，這是蒙醫(yī)長(zhǎng)期臨床經(jīng)驗(yàn)的總結(jié)，符合現(xiàn)代時(shí)辰藥理學(xué)的用藥原理。

（4）劑型緩毒劑型不同，藥物發(fā)揮效果也不完全相同。生草烏因其毒性大，多用于外敷使用，不宜內(nèi)服。內(nèi)服多用經(jīng)炮制后的丸劑，丸劑經(jīng)口服后，藥物成分會(huì)隨著外層的逐漸吸收而逐步釋放，從而達(dá)到持久、緩釋藥效的作用，緩解藥物的毒性。因此含草烏蒙藥在臨床應(yīng)用當(dāng)中多以丸劑為主。

3.3 炮制對(duì)草烏的影響

現(xiàn)代研究表明，雙酯型生物堿在水炮制過(guò)程中會(huì)水解去掉一個(gè)酯基，轉(zhuǎn)化為毒性較低的單酯型生物堿。王啟隆采用HPLC對(duì)草烏及《中國(guó)藥典》（2020版一部）制草烏中6種烏頭類(lèi)生物堿的含量進(jìn)行了考察，發(fā)現(xiàn)炮制后的單酯型生物堿中的苯甲酰烏頭原堿、苯甲酰新烏頭原堿和苯甲酰次烏頭原堿的質(zhì)量分?jǐn)?shù)分別由3.8%、9.2%、0.4%提高至22.7%、32.9%、2.1%，而雙酯型烏頭堿中的烏頭堿、新烏頭堿、次烏頭堿的質(zhì)量分?jǐn)?shù)分別由19.6%、24.3%、2.0%降低至0.5%、0.6%、0.3%。張小峰[17]選取了四川、新疆維吾爾自治區(qū)、吉林3個(gè)不同產(chǎn)地的草烏及其經(jīng)蒙醫(yī)傳統(tǒng)方法訶子湯泡制后的草烏，采用高效液相色譜法對(duì)其雙酯型生物堿的含量做了比較，實(shí)驗(yàn)表明，炮制后雙酯型生物堿的含量變化新疆維吾爾自治區(qū)產(chǎn)＞吉林產(chǎn)＞四川產(chǎn)，；吉林產(chǎn)地的所含烏頭類(lèi)生物堿最為全面、品質(zhì)最好；新疆維吾爾自治區(qū)產(chǎn)地的草烏烏頭類(lèi)生物堿總堿含量最高、毒性最強(qiáng)，不同產(chǎn)地草烏在生物堿的種類(lèi)和含量上具有較大差異。蒙藥訶子制草烏減毒是通過(guò)草烏在訶子湯浸泡當(dāng)中，訶子中的鞣質(zhì)類(lèi)成分會(huì)進(jìn)入草烏與其中的生物堿成分結(jié)合成難溶性的物質(zhì)，在胃液的作用下逐步消融，以達(dá)到減毒存效的作用。同時(shí)，由于每天進(jìn)行更換訶子湯，酸性的的訶子湯也會(huì)溶解掉草烏中的部分生物堿成分；訶子對(duì)草烏致大鼠心臟毒性有一定的保護(hù)作用,訶子湯炮制能降低草烏的心肌毒性[18]。松林等人采用LC-MS分析方法研究草烏及訶子體內(nèi)吸收代謝情況，結(jié)果表明草烏經(jīng)過(guò)訶子湯的炮制會(huì)降低其有毒成分含量；炮制后使多成分分解吸收速度降低及延遲入血時(shí)間；炮制也會(huì)影響草烏成分吸收代謝具體位點(diǎn)，可以使草烏毒性成分緩慢降解以此避免過(guò)多量的攝入導(dǎo)致中毒的機(jī)理[19]。即便炮制會(huì)減少草烏的毒性，但研究發(fā)現(xiàn)，通過(guò)對(duì)小鼠灌服經(jīng)《中國(guó)藥典》（2020版一部）炮制后的草烏提取液，依舊會(huì)對(duì)小鼠的心、肝、腎有一定的損傷，因此草烏的臨床應(yīng)用劑量仍需嚴(yán)格控制。

4 草烏質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的研究

4.1 基于《中國(guó)藥典》（2020版一部）的草烏質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)

草烏中毒治療過(guò)程十分困難。因此建立更為精確的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的測(cè)定方法，是保證用藥安全的關(guān)鍵。隨著草烏中活性成分研究的深入，人們的研究側(cè)重點(diǎn)已經(jīng)從分離鑒定新的化合物轉(zhuǎn)變?yōu)椴轂踔械挠行С煞值亩糠治觯徊轂跬渌兴幣湮槭褂煤蟪煞值亩糠治鲆约安轂踹M(jìn)入機(jī)體后的代謝物的分析等。這些研究不單單是保證草烏的藥用效果，更是為了減少中毒事件的發(fā)生。目前國(guó)內(nèi)外常用的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究主要是通過(guò)高效液相色譜法/超高效液相色譜法（HPLC/UPLC）、氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法（GC-MS）、高效液相色譜/超高效液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法（HPLC/UPLC-MS）等來(lái)實(shí)現(xiàn)的[20-21]?！吨袊?guó)藥典》（2020年版一部）中收載了草烏的質(zhì)量控制方法，應(yīng)用高效液相色譜分離草烏中的烏頭雙酯型生物堿，其含量應(yīng)當(dāng)保證在0.15%-0.75%，但是對(duì)毒性較低的單酯型生物堿的含量并沒(méi)有限定標(biāo)準(zhǔn)，對(duì)制草烏的質(zhì)量限定也只針對(duì)《中國(guó)藥典》（2020年版一部）中炮制方法的制草烏質(zhì)量研究，且在草烏的炮制過(guò)程當(dāng)中，通過(guò)“口嘗無(wú)麻舌感或微有麻舌感”為草烏炮制標(biāo)準(zhǔn)不夠嚴(yán)謹(jǐn)。不同草烏炮制方法減毒方式也不相同，僅僅以烏頭單酯型生物堿的含量作為制草烏質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的因素具有局限性，因此，通過(guò)波譜、光譜、質(zhì)譜等多方位指紋圖譜的方式構(gòu)建草烏的質(zhì)量控制體系具有重要意義。

4.2 基于指紋圖譜的草烏質(zhì)量評(píng)價(jià)體系

最新版的《中國(guó)藥典》（2020版一部）中將草烏的性狀、灰分、水分、薄層鑒定和高效液相色譜鑒定作為草烏的質(zhì)量評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)。中藥指紋圖譜可以最大程度的綜合評(píng)價(jià)藥品的品質(zhì)。隨著檢測(cè)方法的改進(jìn)和更新，草烏的質(zhì)量評(píng)價(jià)方法有很大的提升空間，可從草烏質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)體系和代謝指紋圖譜出發(fā)，建立指紋圖譜的綜合數(shù)據(jù)庫(kù)、微量元素的指紋圖譜和生產(chǎn)過(guò)程數(shù)字化指紋圖譜質(zhì)量控制體系。草烏指紋圖譜的完善可以更好的保證臨床應(yīng)用的安全性、有效性和穩(wěn)定性，有利于提升中藥的品質(zhì)、減少中毒事件的發(fā)生，為其他中藥的品質(zhì)鑒定奠定基礎(chǔ)。

中藥指紋圖譜體系包括中藥化學(xué)指紋圖譜和中藥生物指紋圖譜，是唯一一種被國(guó)際認(rèn)可的控制中藥提取物(自然藥物)和其制劑質(zhì)量的技術(shù)。其中中藥指紋圖譜是對(duì)中藥產(chǎn)品的化學(xué)特征進(jìn)行分析和總結(jié)[22-23]。中藥指紋圖譜可以更直觀、全面地反映中藥質(zhì)量，中藥指紋圖譜是實(shí)現(xiàn)中藥鑒別、品質(zhì)評(píng)價(jià)和產(chǎn)品穩(wěn)定性的可執(zhí)行模式，具有信息量多、特征性強(qiáng)、整體性和模糊性等特點(diǎn)[24]。中藥生物指紋圖譜主要應(yīng)用于分析中藥材的基因及其蛋白水平的表達(dá)規(guī)則和結(jié)構(gòu)識(shí)別真?zhèn)蝃25]，是目前在中藥生物指紋圖譜技術(shù)領(lǐng)域發(fā)展的最高階段。

指紋圖譜的評(píng)價(jià)方法主要分為監(jiān)督化學(xué)模式分析法、無(wú)監(jiān)督化學(xué)模式識(shí)別法和相似度評(píng)價(jià)方法。監(jiān)督化學(xué)模式分析法是通過(guò)將現(xiàn)已明確的樣品信息輸入到計(jì)算機(jī)當(dāng)中，再與待測(cè)試樣品信息譜圖進(jìn)行判別來(lái)確定目標(biāo)成分的一致性。無(wú)監(jiān)督化學(xué)模式識(shí)別方法就是不需要向計(jì)算機(jī)中輸入已知的樣品信息，直接對(duì)若干批次的待測(cè)樣品的圖譜數(shù)據(jù)進(jìn)行對(duì)比，按照樣品之間相似性進(jìn)行分類(lèi)，該方法可以最直接的進(jìn)行系統(tǒng)性的分析。

崔秀明[26]采用HPLC測(cè)定了10種不同產(chǎn)地的生草烏的生物堿成分，并按照保留時(shí)間和峰面積制定指紋圖譜，繪制了草烏藥材特有的指紋圖譜全貌，為草烏的質(zhì)量分析和控制提供了依據(jù)。張艷[27]應(yīng)用HPLC同時(shí)測(cè)定草烏中的苯甲酰新烏頭原堿、苯甲酰烏頭原堿、苯甲酰次烏頭原堿、新烏頭堿、烏頭堿、次烏頭堿等6種生物堿的含量，填補(bǔ)了《中國(guó)藥典》（2020版一部）中只限定了雙酯型生物堿的不足，為草烏質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的完善奠定基礎(chǔ)。李俊松等[28]針對(duì)水煮法炮制前后的草烏建立HPLC指紋圖譜，發(fā)現(xiàn)草烏經(jīng)炮制后生物堿成分發(fā)生了明顯的變化，同時(shí)所建立的方法也適用于草烏的藥品飲片的質(zhì)量控制。包懿[29]利用電噴霧介質(zhì)為檢測(cè)手段，檢測(cè)了草烏中的單酯型二萜化合物和雙酯型二萜化合物，比較全面的分析了草烏中藥化學(xué)成分的差異，為草烏藥材中生物堿的定性和定量的分析提供了實(shí)驗(yàn)依據(jù)。鄧廣海[30]等對(duì)10批不同產(chǎn)地的草烏3種雙酯型生物堿和3種單酯型生物堿生品和不同高壓蒸制、不同高溫烘制、不同炮制工藝進(jìn)行了HPLC指紋圖譜研究，為草烏及其炮制品的品種鑒別及質(zhì)量控制提供了科學(xué)的依據(jù)。不同的研究方法有不同的優(yōu)缺點(diǎn)，單一的指紋圖譜具有不確定性，將多種指紋圖譜聯(lián)合來(lái)建立草烏的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的數(shù)據(jù)庫(kù)即可揚(yáng)長(zhǎng)避短（表4）。未來(lái)，通過(guò)完善指紋圖譜數(shù)據(jù)庫(kù)，可方便的了解草烏的全部信息，極大的提高草烏質(zhì)量鑒定及科研分析的效率，通過(guò)科技與信息的交匯提升人類(lèi)的福祉。

表4 草烏指紋圖譜的建立方法和特點(diǎn)

4.3 蒙藥訶子制草烏質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究現(xiàn)狀

由于訶子制草烏中的雙酯型生物堿在炮制過(guò)程中變化不大，且減毒機(jī)制尚未清楚，不能一概以傳統(tǒng)中藥制草烏的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)對(duì)訶子制草烏中的成分進(jìn)行限定。楊暢等[36]對(duì)生草烏、訶子制草烏水煎液及草烏訶子共煎液經(jīng)HPLC法測(cè)其中生物堿的含量，結(jié)果表明訶子草烏共煎液中雙酯型生物堿的含量最多，生草烏煎液中雙酯型生物堿的含量最少，可證明蒙醫(yī)藥中的“訶子可解草烏毒”并不是降低了劇毒的雙酯型生物堿而是其中的鞣質(zhì)成分與生物堿結(jié)合為難溶物質(zhì)，可能是通過(guò)緩慢的溶解達(dá)到持續(xù)發(fā)揮藥效的作用。支美汝等[37]應(yīng)用UPLC-Orbitrap-MS對(duì)經(jīng)訶子炮制前后草烏的成分變化做了分析，發(fā)現(xiàn)訶子制草烏中除了新增沒(méi)食子酸、訶子次酸、莽草酸等10種源自訶子中化學(xué)成分外，生物堿類(lèi)化合物變化較小。蘇都娜[38]對(duì)蒙藥草烏根、花、芽以及葉進(jìn)行了紅外光譜三級(jí)鑒定并建立了炮制草烏的紅外指紋圖譜，提供大量草烏、草烏花、草烏葉、草烏芽的整體信息，能夠較準(zhǔn)確的把握草烏類(lèi)藥材的整體質(zhì)量?，F(xiàn)代儀器的飛速發(fā)展也推動(dòng)了傳統(tǒng)蒙醫(yī)藥的研究，草烏作為蒙醫(yī)藥方劑中常用的一味中藥，至今為止，尚有諸多問(wèn)題需要深入研究?，F(xiàn)如今，越來(lái)越多的學(xué)者利用先進(jìn)的儀器對(duì)傳統(tǒng)蒙醫(yī)藥進(jìn)行分析，以解決蒙醫(yī)藥藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)及中藥現(xiàn)代化等問(wèn)題。

5 總結(jié)與展望

草烏作為傳統(tǒng)中藥具有悠久的歷史，是藥效與毒性并存的常用天然藥用植物，在我國(guó)產(chǎn)地分布廣泛，藥效突出，千年來(lái)受到中醫(yī)、蒙醫(yī)、藏醫(yī)等不同醫(yī)學(xué)理論體系的青睞。文章對(duì)近年來(lái)傳統(tǒng)中醫(yī)藥和蒙藥制草烏的相關(guān)研究做了概述，包括草烏的化學(xué)成分、毒性成分、炮制減毒工藝及質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究。草烏的毒性劇烈，在應(yīng)用范圍受到很大限制，亟需利用傳統(tǒng)中醫(yī)理論和現(xiàn)代科技手段規(guī)范草烏的炮制工藝并嚴(yán)格控制草烏的質(zhì)量?？陀^評(píng)價(jià)其質(zhì)量?jī)?yōu)劣及毒性，同時(shí)建立完善的質(zhì)量評(píng)價(jià)指標(biāo)，加強(qiáng)中藥質(zhì)量保證以確保藥物臨床應(yīng)用的安全性、有效性、穩(wěn)定性，為進(jìn)一步的開(kāi)發(fā)利用打下堅(jiān)實(shí)的理論基礎(chǔ)。

蒙藥作為我國(guó)傳統(tǒng)的民族醫(yī)藥，現(xiàn)代化研究起步較晚，蘊(yùn)含著巨大的應(yīng)用和研究前景。草烏作為蒙醫(yī)藥方劑中常用的一味中藥，至今為止，尚有諸多問(wèn)題需要深入研究。如訶子制草烏不但在生物堿的成分上沒(méi)有得到統(tǒng)一，且在炮制過(guò)程中對(duì)訶子湯的浸泡方法也未達(dá)成共識(shí)?！秲?nèi)蒙古蒙成藥標(biāo)準(zhǔn)》在附錄中規(guī)定草烏用訶子湯浸泡2-3天，但未給出具體的訶子用量。《內(nèi)蒙古蒙藥材標(biāo)準(zhǔn)》對(duì)訶子制草烏的炮制工藝給出詳細(xì)的工藝流程，但由于年代久遠(yuǎn)且不夠明確，無(wú)法對(duì)訶子制草烏有系統(tǒng)的工藝研究。通過(guò)對(duì)文獻(xiàn)的研究發(fā)現(xiàn)，涉及訶子制草烏炮制工藝的文獻(xiàn)較少，優(yōu)化工藝的方法也不全面，參考價(jià)值較為有限，尚缺乏一套完善的訶子制草烏工藝及質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)。

今后應(yīng)當(dāng)對(duì)傳統(tǒng)中醫(yī)藥和蒙藥制草烏中的化學(xué)成分、代謝成分進(jìn)行更深入的研究，借助于大數(shù)據(jù)時(shí)代“疾病-基因-靶點(diǎn)-藥物”相互作用網(wǎng)絡(luò)建立全方面的草烏質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)體系。建立完善的草烏指紋圖譜信息的數(shù)據(jù)庫(kù)。該數(shù)據(jù)庫(kù)不限于包含不同產(chǎn)地批次草烏及其炮制品的色譜指紋圖譜、核磁共振譜及質(zhì)譜指紋圖譜等信息，數(shù)據(jù)庫(kù)可快速、準(zhǔn)確地進(jìn)行質(zhì)量評(píng)價(jià)，對(duì)草烏減毒炮制工藝的優(yōu)化和臨床安全用藥提供了良好的保障。

1團(tuán)結(jié),其合力嘎.簡(jiǎn)述含草烏蒙藥的安全使用.中國(guó)民間療法,2017,25(2):70-71.