閻曉菲，劉宜勇，童 婷，丁克奇，鄧海峰，王培明，吐來(lái)力江，熱西旦，劉明軍,王鈺琪

(1.石河子大學(xué) 動(dòng)物科技學(xué)院，新疆 石河子 832000；2.新疆農(nóng)業(yè)大學(xué) 生命科學(xué)學(xué)院,新疆 烏魯木齊 830052；3.伊犁哈薩克自治州畜牧總站，新疆 伊寧 835000；4.尼勒克縣畜牧獸醫(yī)工作站，新疆 尼勒克 835700；5.伊犁哈薩克自治州昭蘇馬場(chǎng)，新疆 昭蘇 835602；6.新疆畜牧科學(xué)院 生物技術(shù)研究所/農(nóng)業(yè)部草食家畜遺傳育種與繁殖重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室/新疆動(dòng)物生物技術(shù)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，新疆 烏魯木齊 830011；7.新疆農(nóng)業(yè)大學(xué) 動(dòng)物醫(yī)學(xué)學(xué)院，新疆 烏魯木齊 830052)

消化道線蟲(chóng)感染是綿羊重要寄生蟲(chóng)病之一，涉及9科、21屬、76種線蟲(chóng)，給畜牧業(yè)帶來(lái)了巨大的經(jīng)濟(jì)損失。在臨床上消化道線蟲(chóng)的感染大多為混合感染。寄生于消化道的線蟲(chóng)吸附于胃腸黏膜，吸食羊的血液和營(yíng)養(yǎng)，同時(shí)蟲(chóng)體還可以分泌毒素，引起胃腸黏膜的損傷、炎癥、出血，引發(fā)胃腸炎、消化機(jī)能障礙、消瘦、貧血和營(yíng)養(yǎng)不良等癥狀，嚴(yán)重時(shí)可造成死亡。其對(duì)北方放牧羊群的危害尤為嚴(yán)重，造成的羊死亡數(shù)是傳染病的2～2.75倍。20世紀(jì) 80～90年代僅青海省年均春季死亡成年羊和幼羊150×10只左右，約占年初存欄羊總數(shù)的10%。據(jù)國(guó)內(nèi)外多個(gè)地區(qū)綿羊消化道線蟲(chóng)感染調(diào)查情況來(lái)看，由于氣候、地域、生長(zhǎng)環(huán)境不同，感染情況存在差異。

綿羊球蟲(chóng)感染是由艾美耳屬(spp.)球蟲(chóng)寄生于羊腸道引起的以腹瀉、消瘦、貧血和發(fā)育不良為特征的原蟲(chóng)病，尤其對(duì)羔羊危害較大，可使其生長(zhǎng)發(fā)育停滯，嚴(yán)重時(shí)可導(dǎo)致大批死亡，給養(yǎng)羊業(yè)造成了巨大的損失。羊球蟲(chóng)病感染極為普遍。Koudela等調(diào)查捷克共和國(guó)的13個(gè)農(nóng)場(chǎng)，發(fā)現(xiàn)羊球蟲(chóng)病的感染率為92.2%。Kusiluka等調(diào)查坦桑尼亞山羊球蟲(chóng)病的感染率為91%，綿羊球蟲(chóng)病感染率為93%。本研究旨在結(jié)合伊犁兩個(gè)地區(qū)的地理氣候條件和飼養(yǎng)條件，對(duì)綿羊進(jìn)行消化道線蟲(chóng)和球蟲(chóng)區(qū)系調(diào)查和季節(jié)動(dòng)態(tài)研究，掌握兩個(gè)地區(qū)的流行規(guī)律，選取最佳驅(qū)蟲(chóng)時(shí)間、驅(qū)蟲(chóng)藥物，有針對(duì)性地制定科學(xué)合理的防治措施。

1 材料與方法

1.1 主要儀器

數(shù)碼顯微鏡及顯微圖像采集分析處理系統(tǒng)(Nikon)，電子天平(AL104，d=0.0001 g，梅特勒-托利多儀器有限公司)，改良麥克馬斯特計(jì)數(shù)板(中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院上海獸醫(yī)研究所)。

1.2 試劑

飽和鹽水，食鹽購(gòu)自新疆鹽湖制鹽有限責(zé)任公司。

1.3 方法

1.3.1 樣本采集 于2019年4月(春季)、7月(夏季)、9月(秋季)、12月(冬季)，在伊犁昭蘇地區(qū)和尼勒克地區(qū)，對(duì)哈薩克羊和哈薩克與特克塞爾雜交1代成年母羊，直腸采集糞便樣本(表1)。每份糞便樣本20～30 g，分別裝入潔凈的封口袋內(nèi)，記錄品種、性別、年齡、芯片號(hào)、臨床表現(xiàn)，帶回實(shí)驗(yàn)室置冰箱4 ℃保存，待檢。采樣時(shí)間與驅(qū)蟲(chóng)時(shí)間間隔3個(gè)月。春季采樣后，肌肉注射氯氰碘柳胺鈉(0.2 mL/kg)和伊維菌素(0.04 mL/kg)進(jìn)行驅(qū)蟲(chóng)；秋季采樣后，口服阿苯達(dá)唑(0.15 mL/kg)和肌肉注射伊維菌素(0.04 mL/kg)進(jìn)行驅(qū)蟲(chóng)。

表1 樣本采集情況

1.3.2 定性檢測(cè)及感染種類(lèi)鑒定 定性檢測(cè)采用飽和鹽水漂浮法檢查糞便中感染的蟲(chóng)種，取3 g糞樣置于研缽中，倒入適量飽和鹽水，搗碎混勻糞樣，用紗布過(guò)濾后倒入青霉素小瓶至瓶口，蓋上蓋玻片，靜置15 min，將蓋玻片放于載玻片上鏡檢。采用數(shù)碼顯微鏡及顯微圖像采集分析處理系統(tǒng)觀察形態(tài)結(jié)構(gòu)、顏色、大小，并拍照保存，參照文獻(xiàn)進(jìn)行種類(lèi)鑒定。

1.3.3 定量檢測(cè)及蟲(chóng)卵計(jì)數(shù) 定量檢測(cè)采用改良麥克馬斯特法，取2 g糞樣置于研缽中，先加水10 mL研磨，再加飽和鹽水50 mL，混勻后吸取糞液，注入改良麥克馬斯特計(jì)數(shù)板的計(jì)數(shù)室內(nèi)，靜置1～2 min后，在顯微鏡下計(jì)數(shù)2個(gè)刻度室中的線蟲(chóng)蟲(chóng)卵數(shù)和卵囊數(shù)，2個(gè)計(jì)數(shù)室計(jì)數(shù)的平均值A(chǔ)×200即為每克糞便中的蟲(chóng)卵數(shù)(EPG)和卵囊數(shù)(OPG)。

1.3.4 數(shù)據(jù)計(jì)算及統(tǒng)計(jì)分析 計(jì)算感染率及感染強(qiáng)度，感染率=(感染樣本數(shù)/樣本總數(shù))×100%，感染強(qiáng)度包括最低、最高和平均感染強(qiáng)度，平均感染強(qiáng)度=(陽(yáng)性樣本感染強(qiáng)度總和/陽(yáng)性樣本總數(shù))±標(biāo)準(zhǔn)差。采用SPSS軟件計(jì)算平均感染強(qiáng)度，使用獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)分析不同地區(qū)綿羊消化道線蟲(chóng)和球蟲(chóng)感染強(qiáng)度的差異性。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同地區(qū)綿羊消化道線蟲(chóng)和球蟲(chóng)感染情況

兩個(gè)地區(qū)綿羊消化道線蟲(chóng)和球蟲(chóng)感染情況見(jiàn)表2。綿羊消化道線蟲(chóng)的感染率和感染強(qiáng)度高于球蟲(chóng)。綿羊消化道線蟲(chóng)感染率為97.06%，球蟲(chóng)感染率為90.55%。綿羊消化道線蟲(chóng)平均感染強(qiáng)度為1 274.92±2 123.21(個(gè)/g)，最高達(dá)到42 300(個(gè)/g)。根據(jù)綿羊消化道線蟲(chóng)感染程度一般分為輕度感染(EPG<500個(gè)/g)、中度感染(EPG=500～1 000個(gè)/g)、嚴(yán)重感染(EPG>1 500個(gè)/g)，本研究綿羊消化道線蟲(chóng)感染程度可劃分為中度感染。球蟲(chóng)平均感染強(qiáng)度為785.11±2 385.73(個(gè)/g)，最高達(dá)到14 4500(個(gè)/g)。根據(jù)綿羊球蟲(chóng)感染程度分為4類(lèi)：1類(lèi)無(wú)感染(OPG=0),2類(lèi)輕度感染(OPG<1 800個(gè)/g),3類(lèi)中度感染(OPG=1 800～6 000個(gè)/g)，4類(lèi)嚴(yán)重感染(OPG>6 000個(gè)/g)，本次綿羊球蟲(chóng)感染程度大部分為輕度感染。昭蘇地區(qū)和尼勒克地區(qū)綿羊消化道線蟲(chóng)和球蟲(chóng)感染情況有所不同，昭蘇地區(qū)綿羊消化道線蟲(chóng)平均感染強(qiáng)度極顯著高于尼勒克地區(qū)(<0.01)，尼勒克地區(qū)球蟲(chóng)感染率和平均感染強(qiáng)度極顯著高于昭蘇地區(qū)(<0.01)。

表2 不同地區(qū)綿羊消化道線蟲(chóng)和球蟲(chóng)感染情況

2.2 各季節(jié)不同地區(qū)綿羊消化道線蟲(chóng)和球蟲(chóng)感染情況

不同地區(qū)綿羊消化道線蟲(chóng)和球蟲(chóng)四季感染情況見(jiàn)表3、表4。總體上除了冬季，兩個(gè)地區(qū)其他季節(jié)綿羊消化道線蟲(chóng)感染率均高于球蟲(chóng)；除了夏季，其他各季節(jié)綿羊消化道線蟲(chóng)感染強(qiáng)度均高于球蟲(chóng)。兩個(gè)地區(qū)綿羊消化道線蟲(chóng)和球蟲(chóng)的平均感染強(qiáng)度呈現(xiàn)出春季最高、夏季次之、秋季較低、冬季最低的流行規(guī)律。

表3 各季節(jié)不同地區(qū)綿羊消化道線蟲(chóng)和球蟲(chóng)感染率

表4 各季節(jié)不同地區(qū)綿羊消化道線蟲(chóng)和球蟲(chóng)的感染強(qiáng)度

4個(gè)季節(jié)昭蘇地區(qū)和尼勒克地區(qū)的綿羊消化道線蟲(chóng)感染率都在90%以上，接近于100%。除了春季，其他季節(jié)尼勒克地區(qū)感染率均高于昭蘇地區(qū)；春季和冬季，昭蘇地區(qū)平均感染強(qiáng)度極顯著高于尼勒克地區(qū)(<0.01)，夏季和秋季昭蘇地區(qū)平均感染強(qiáng)度極顯著低于尼勒克地區(qū)(<0.01)。

除了夏季，昭蘇地區(qū)和尼勒克地區(qū)的綿羊球蟲(chóng)感染率都在90%以上，接近于100%；兩個(gè)地區(qū)綿羊球蟲(chóng)平均感染強(qiáng)度呈現(xiàn)出春季最高、夏季次之、秋季較低、冬季最低的流行規(guī)律。除了春季，其他季節(jié)尼勒克地區(qū)感染率均高于昭蘇地區(qū)；除了冬季，其他季節(jié)尼勒克地區(qū)平均感染強(qiáng)度極顯著高于昭蘇地區(qū)(<0.01)。

2.3 綿羊消化道線蟲(chóng)蟲(chóng)卵和球蟲(chóng)卵囊鑒定結(jié)果

根據(jù)綿羊消化道線蟲(chóng)蟲(chóng)卵和球蟲(chóng)卵囊形態(tài)學(xué)特點(diǎn)，參照第2版《家畜寄生蟲(chóng)學(xué)》和第8版《Veterinary Clinical Parasitology》，初步鑒定出9種消化道線蟲(chóng)和12個(gè)綿羊艾美爾屬(spp.)球蟲(chóng)(見(jiàn)圖1和圖2)。

圖1 綿羊消化道線蟲(chóng)種類(lèi)鑒定

圖2 綿羊球蟲(chóng)種類(lèi)鑒定

2.4 藥物驅(qū)蟲(chóng)結(jié)果

驅(qū)蟲(chóng)前綿羊消化道線蟲(chóng)的感染率為92.23%，昭蘇為98.31%，尼勒克為84.09%；驅(qū)蟲(chóng)后綿羊消化道線蟲(chóng)的感染率為45.63%，昭蘇為28.81%，尼勒克為68.18%。昭蘇地區(qū)蟲(chóng)卵轉(zhuǎn)陰率和減少率均高于尼勒克地區(qū)，驅(qū)蟲(chóng)后平均感染強(qiáng)度極顯著低于驅(qū)蟲(chóng)前(<0.01)(見(jiàn)表5)。驅(qū)蟲(chóng)前綿羊球蟲(chóng)的感染率為87.38%，昭蘇為88.14%，尼勒克為86.36%；驅(qū)蟲(chóng)后綿羊球蟲(chóng)的感染率為92.23%，昭蘇為92.22%，尼勒克為90.91%，驅(qū)蟲(chóng)后平均感染強(qiáng)度顯著低于驅(qū)蟲(chóng)前(<0.05)(見(jiàn)表5)。綿羊消化道線蟲(chóng)蟲(chóng)卵轉(zhuǎn)陰率、減少率均高于綿羊球蟲(chóng)，說(shuō)明驅(qū)蟲(chóng)藥的效果對(duì)綿羊消化道線蟲(chóng)較好。

表5 綿羊消化道線蟲(chóng)和球蟲(chóng)驅(qū)蟲(chóng)效果

3 討 論

3.1 伊犁兩個(gè)地區(qū)綿羊消化道線蟲(chóng)和球蟲(chóng)感染情況

本研究對(duì)伊犁昭蘇地區(qū)和尼勒克地區(qū)的綿羊消化道線蟲(chóng)感染情況進(jìn)行調(diào)查，發(fā)現(xiàn)感染率較高，為97.06%，平均感染強(qiáng)度為1274.92±2123.21個(gè)/g，最高達(dá)到42300個(gè)/g。與之前對(duì)昭蘇地區(qū)綿羊寄生蟲(chóng)季節(jié)動(dòng)態(tài)調(diào)查結(jié)果(胃腸道線蟲(chóng)感染率100%，平均強(qiáng)度1967個(gè)/g，范圍12～12027個(gè)/g)較為接近，但高于新疆其他地區(qū)，如石河子地區(qū)感染率為72.34%，阜康市感染率為54.10%，烏魯木齊縣感染率為36.53%。內(nèi)蒙古東部地區(qū)放牧綿羊消化道線蟲(chóng)平均感染率為79.2%，最高感染率達(dá)到了100%，與本研究結(jié)果較為一致；但平均感染強(qiáng)度為1813.2個(gè)/g，高于本研究結(jié)果。伊犁昭蘇地區(qū)和尼勒克地區(qū)球蟲(chóng)感染率90.55%，平均感染強(qiáng)度為785.11±2385.73個(gè)/g，最高達(dá)到144500個(gè)/g。此結(jié)果與各地報(bào)道較為接近，如張菲菲等報(bào)道河南、山東、東北等地區(qū)的綿羊球蟲(chóng)感染率94.80%，總共檢出12種球蟲(chóng)；吳坤報(bào)道西北區(qū)域羊感染球蟲(chóng)12種，患病率為86.8%；北京及河北的球蟲(chóng)患病率為88.7%，不同區(qū)域感染率有差異。王利明等對(duì)庫(kù)車(chē)縣綿羊球蟲(chóng)調(diào)查數(shù)據(jù)顯示球蟲(chóng)感染的患病率為100%，均為混合感染。2016年閻曉菲等對(duì)新疆烏魯木齊綿羊球蟲(chóng)感染調(diào)查結(jié)果顯示烏魯木齊4個(gè)季節(jié)綿羊球蟲(chóng)感染總患病率為71.38%，與本研究結(jié)果相比較低。

3.2 伊犁兩個(gè)地區(qū)綿羊消化道線蟲(chóng)和球蟲(chóng)感染的差異性

據(jù)報(bào)道，氣候變化可能會(huì)導(dǎo)致寄生蟲(chóng)流行病學(xué)和感染強(qiáng)度的變化，氣候的區(qū)域差異對(duì)綿羊消化道線蟲(chóng)感染的流行病學(xué)及其地理分布有重要影響。綿羊消化道線蟲(chóng)的自由生活階段受氣候的強(qiáng)烈影響，極端的高溫和寒冷對(duì)其發(fā)育和生存有害，溫度升高通常會(huì)加速發(fā)育，但會(huì)增加死亡率。幼蟲(chóng)從糞便到牧場(chǎng)的發(fā)育和轉(zhuǎn)化需要水分，因此降雨是感染的限制因素。這些因素共同構(gòu)成了綿羊感染的季節(jié)性模式。Morgan等也報(bào)道，在歐洲，地理差異對(duì)綿羊消化道線蟲(chóng)不同物種流行病學(xué)具有相對(duì)重要性。本研究采樣地點(diǎn)是昭蘇地區(qū)(北緯42°38'～43°15'，東經(jīng)80°10'～80°30')，位于新疆維吾爾自治區(qū)西北部，伊犁哈薩克自治州西南部，昭蘇盆地為中亞腹地一個(gè)群山環(huán)抱的高位山間盆地，屬大陸性溫帶山區(qū)半干旱半濕潤(rùn)冷涼氣候類(lèi)型，冬長(zhǎng)夏短，年均溫度3.23 ℃，年降水量507.88 mm。尼勒克地區(qū)(北緯43°25'～44°17'，東經(jīng)81°85'～84°58')，氣候類(lèi)型接近于昭蘇地區(qū)，但年均溫度8.50 ℃，高于昭蘇地區(qū)，年均降水量335 mm，低于昭蘇地區(qū)。兩個(gè)地區(qū)緯度、氣溫、降水不同，使兩個(gè)地區(qū)的綿羊消化道線蟲(chóng)和球蟲(chóng)感染強(qiáng)度有極顯著差異，昭蘇地區(qū)綿羊消化道線蟲(chóng)感染強(qiáng)度極顯著高于尼勒克地區(qū)，尼勒克地區(qū)球蟲(chóng)感染強(qiáng)度極顯著高于昭蘇地區(qū)。昭蘇地區(qū)和尼勒克地區(qū)都屬于大陸性北溫帶氣候，春季氣溫的變化幅度大，秋季時(shí)間較短，冬季的溫度相差也比較懸殊，表現(xiàn)出四季分明的氣候特點(diǎn)。本研究綿羊消化道線蟲(chóng)和球蟲(chóng)感染強(qiáng)度呈現(xiàn)出春季最高、夏季次之、秋季較低、冬季最低的規(guī)律，其結(jié)果與兩個(gè)地區(qū)的氣候特點(diǎn)有密切的關(guān)系。此結(jié)果也與前人對(duì)北方綿羊消化道線蟲(chóng)感染季節(jié)動(dòng)態(tài)研究的結(jié)論“春季高潮顯著、秋季次之、夏季較低、冬季最低”較為一致。

3.3 綿羊消化道線蟲(chóng)和球蟲(chóng)驅(qū)蟲(chóng)效果差異

驅(qū)蟲(chóng)是綜合防治中的重要環(huán)節(jié)，在新疆放牧羊只采取傳統(tǒng)的春秋兩季驅(qū)蟲(chóng)方法進(jìn)行預(yù)防性驅(qū)蟲(chóng)。目前常用藥物主要有大環(huán)內(nèi)酯類(lèi)、苯并咪唑類(lèi)、咪唑并噻唑類(lèi)、硝基酚類(lèi)等。郭建剛報(bào)道，甘肅地區(qū)進(jìn)行驅(qū)蟲(chóng)工作7 a時(shí)間，羊只的死亡率減少了10.8%；6～8月羔羊線蟲(chóng)的感染率最高，因此這3個(gè)月可加強(qiáng)對(duì)羔羊的驅(qū)蟲(chóng)。本研究中的放牧綿羊使用伊維菌素和阿苯達(dá)唑進(jìn)行驅(qū)蟲(chóng)，對(duì)綿羊消化道線蟲(chóng)有一定的效果，且驅(qū)蟲(chóng)前后感染強(qiáng)度差異極顯著。伊維菌素是一種重要的十六元大環(huán)內(nèi)酯類(lèi)抗生素類(lèi)驅(qū)蟲(chóng)藥，具有廣譜、高效、安全、機(jī)體組織滲透性強(qiáng)、持續(xù)時(shí)間長(zhǎng)、不易產(chǎn)生耐藥性等諸多優(yōu)點(diǎn)，對(duì)家畜胃腸道線蟲(chóng)、體外寄生蟲(chóng)具有良好的驅(qū)殺效果。阿苯達(dá)唑是一種廣譜、高效、低毒的苯并咪唑類(lèi)驅(qū)蟲(chóng)藥，主要用于驅(qū)除胃腸道線蟲(chóng)，顯著抑制蟲(chóng)卵的發(fā)育，是治療多種蠕蟲(chóng)病的首選藥物。但本研究發(fā)現(xiàn)球蟲(chóng)卵囊轉(zhuǎn)陰率和減少率都低于蟲(chóng)卵，因此這兩種藥物不建議作為綿羊球蟲(chóng)感染的主要驅(qū)蟲(chóng)藥。雖然綿羊球蟲(chóng)驅(qū)蟲(chóng)前后感染強(qiáng)度差異極顯著，但可能是由于線蟲(chóng)蟲(chóng)卵減少使綿羊抵抗力增強(qiáng)，所以使綿羊球蟲(chóng)的感染量也相對(duì)減少。

4 結(jié) 論

本研究中伊犁兩個(gè)地區(qū)綿羊消化道線蟲(chóng)和球蟲(chóng)的感染率較高，消化道線蟲(chóng)呈中度感染，球蟲(chóng)呈輕度感染。昭蘇地區(qū)綿羊消化道線蟲(chóng)平均感染強(qiáng)度極顯著高于尼勒克地區(qū)(<0.01)，尼勒克地區(qū)球蟲(chóng)感染率和平均感染強(qiáng)度極顯著高于昭蘇地區(qū)(<0.01)。兩個(gè)地區(qū)綿羊消化道線蟲(chóng)和球蟲(chóng)平均感染強(qiáng)度呈現(xiàn)出春季最高、夏季次之、秋季較低、冬季最低的流行規(guī)律。驅(qū)蟲(chóng)藥伊維菌素和阿苯達(dá)唑?qū)d羊消化道線蟲(chóng)有一定效果，但在今后防治中需要輪換用藥避免耐藥性，此外應(yīng)增加磺胺類(lèi)等球蟲(chóng)驅(qū)蟲(chóng)藥。