陳楊，王楚茵，姚妮，趙希彤，張謙，關(guān)君（北京中醫(yī)藥大學(xué) 中藥學(xué)院，北京 102488）

雄黃，又名石黃、雞冠石等，屬于傳統(tǒng)礦物類中藥，在我國古代應(yīng)用廣泛，具有解毒殺蟲、燥濕祛痰、截瘧的功效?，F(xiàn)代醫(yī)學(xué)研究表明雄黃還兼具抗腫瘤的功效，可用于治療肝癌、宮頸癌、白血病等多種惡性疾病。但雄黃中含有重金屬砷元素，長期、大量服用雄黃，會導(dǎo)致砷在體內(nèi)蓄積中毒，造成多種組織和器官的損傷。

雄黃的功效和毒性與其含有的砷元素的形態(tài)和價態(tài)密切相關(guān)。若能基于雄黃的已有研究開發(fā)出毒性小且療效好的形態(tài)砷，將大大促進(jìn)雄黃的臨床應(yīng)用。然而，目前已有的形態(tài)砷和價態(tài)砷的綜述多集中在水、土壤、植物等研究領(lǐng)域。雖然，雄黃在人體、實驗動物體內(nèi)的形態(tài)砷、價態(tài)砷方面的研究眾多，但尚未見詳實的綜述總結(jié)。有鑒于此，本文綜述了現(xiàn)有的關(guān)于形態(tài)砷和價態(tài)砷的研究，以期為雄黃藥用的安全性和科學(xué)性提供理論依據(jù)。

1 雄黃的形態(tài)砷和價態(tài)砷及其毒性研究

1.1 形態(tài)砷

1.1.1 雄黃在體外的形態(tài)砷 雄黃性溫，味辛苦，有毒，入心肝二經(jīng)。歷版《中國藥典》都將雄黃記載為：“硫化物類礦物雄黃族雄黃，主含二硫化二砷（AsS）”。但是，已有的研究結(jié)果表明，雄黃主要成分很可能為四硫化四砷（AsS），而AsS為其分解產(chǎn)物。關(guān)于雄黃的主要成分，爭議頗多。一方面，由于X射線衍射法難以檢測到含量低于下限值的物相（每個物相具有不同的下限值），也無法檢測到?jīng)]有對應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)衍射卡片（powder diffraction file，PDF 卡片）的物相；另一方面，雄黃的組成成分復(fù)雜，存在多樣的同分異構(gòu)體，給X 射線衍射分析造成了很大的困難。

基于量子化學(xué)計算方法，AsS有兩種穩(wěn)定存在的異構(gòu)體（可以看作是兩種不同的形態(tài)砷），見圖1。AsS也有兩種可能穩(wěn)定存在的異構(gòu)體，見圖2。

圖1 As4S4 的兩種異構(gòu)體[11]Fig 1 Two isomers of As4S4[11]

圖2 As2S2 的兩種異構(gòu)體[16]Fig 2 Two isomers of As2S2[16]

1.1.2 雄黃在體內(nèi)轉(zhuǎn)化而成的形態(tài)砷 AsS在室溫下能以固體形式存在，但難溶于水，難以吸收，在機體內(nèi)的生物利用度低。因此，雄黃入藥后主要起治療作用和毒性的成分應(yīng)該為其可溶性成分，即可溶性砷。如無機砷中的As（Ⅲ）、As（Ⅴ），有機砷中的一甲基砷酸（MMA）、二甲基砷酸（DMA）等。在酶催化下，砷在體內(nèi)可進(jìn)行氧化還原、生物甲基化、生物合成等多種過程，并產(chǎn)生多種形態(tài)砷，在機體內(nèi)發(fā)揮主要作用。

已有多項研究證實，雄黃中的主要成分AsS進(jìn)入機體后會代謝成不同的形態(tài)砷。雄黃中的砷在生物體內(nèi)的存在形式主要包括四類：無機砷，如亞砷酸鹽（AsO，Ⅲ）、砷酸鹽（AsO，Ⅴ）等；有機砷小分子，如MMA、DMA、三甲基氧化砷（TMAO）、四甲基砷離子（TMAs）等；砷的有機化合物，如砷甜菜堿（AsB）、乳酸三甲基砷、砷膽堿（AsCh）、砷酯（AsL）、砷糖、二甲基砷氧基乙醇、二甲基砷氧基核苷、二甲基砷氧基核苷硫酸酯、

O

-磷酸酰三甲基砷乳酸等；含砷的生物大分子，如砷化物（Ⅲ或V）與轉(zhuǎn)鐵蛋白或血紅蛋白的結(jié)合物。

1.2 價態(tài)砷

砷屬于氮族元素，有四種常見的氧化值，分別為－3、0、＋3 和＋5[備注：在國際純化學(xué)和應(yīng)用化學(xué)聯(lián)會（IUPAC）尚未推薦使用氧化值這個概念之前，人們通常用“化合價”或“價態(tài)”來表示元素原子的成鍵能力，且“價態(tài)”的說法一直沿用至今]。砷元素的四種常見氧化值可以分別表示為－Ⅲ、0、Ⅲ和Ⅴ四種價態(tài)。價態(tài)砷這種說法，重點強調(diào)在不同形態(tài)砷中砷元素的氧化值，因為該氧化值與形態(tài)砷的毒性密切相關(guān)。

1.3 形態(tài)砷和價態(tài)砷的毒性研究

雄黃的主要成分AsS經(jīng)研究顯示其口服吸收有限，大多隨糞便排泄出體外，對機體毒性較小。同時藥代動力學(xué)研究表明，雄黃中的砷在人體內(nèi)可利用率較低。因此，雄黃進(jìn)入人體內(nèi)經(jīng)生物轉(zhuǎn)化后，產(chǎn)生毒性的多為其形態(tài)砷和價態(tài)砷。雄黃的不同形態(tài)砷和價態(tài)砷之間的毒性差異較大。研究表明，無機砷的毒性大于有機砷，其中，從價態(tài)的角度，無機砷（Ⅲ）的毒性又大于無機砷（Ⅴ），有機砷（Ⅲ）的毒性大于有機砷（Ⅴ）。因此，價態(tài)砷的毒性排序通常為：無機砷（Ⅲ）＞無機砷（Ⅴ）＞有機砷（Ⅲ）＞有機砷（Ⅴ）。

過往研究表明，雄黃中的形態(tài)砷和價態(tài)砷能對人體造成多種毒性。Yi 等連續(xù)給予雄黃30 d 后觀察大鼠體內(nèi)的形態(tài)砷蓄積和毒性，結(jié)果顯示亞砷酸鹽[iAs（Ⅲ）]主要積累于肝臟中，而DMA 在肝、腎都有一定蓄積，推測雄黃引起的肝腎毒性可能與DMA 有關(guān)。Zhang 等采用無標(biāo)記定量蛋白質(zhì)組學(xué)方法探討雄黃的腎毒性機制，檢測出多種可能影響細(xì)胞凋亡過程和氧化應(yīng)激的蛋白發(fā)生變化，說明雄黃誘導(dǎo)腎毒性機制可能與細(xì)胞凋亡和氧化應(yīng)激有關(guān)。而該團隊進(jìn)一步通過考察雄黃誘導(dǎo)的急性腎損傷小鼠的血清和腎臟內(nèi)源性代謝物譜，證實氨基酸代謝、脂質(zhì)代謝、谷胱甘肽（GSH）代謝和嘌呤代謝途徑與雄黃腎毒性呈現(xiàn)主要相關(guān)模式。Zhang 等采用非靶向代謝組學(xué)法研究雄黃對小鼠神經(jīng)系統(tǒng)的影響，結(jié)果顯示雄黃能通過加重氧化損傷和脂質(zhì)功能障礙從而引發(fā)神經(jīng)毒性。

陳吳越等分析了大鼠服用六神丸后肝臟組織中的四種砷形態(tài)，顯示六神丸中的無機砷代謝后轉(zhuǎn)變?yōu)槎拘暂^小的DMA，安全性提升。劉敏敏等應(yīng)用原子熒光光譜法（AFS）和液相色譜-原子熒光聯(lián)用法（HPLC-AFS）測定出含雄黃制劑和標(biāo)準(zhǔn)砷溶液中砷的主要形態(tài)砷，其毒性由大到小的順序為：亞砷酸鹽、砷酸鹽、MMA、DMA 和AsB、AsCh，后兩者幾乎無毒。

2 雄黃的形態(tài)砷和價態(tài)砷在生物體內(nèi)的轉(zhuǎn)化與蓄積

在機體內(nèi)，不同形態(tài)砷和不同價態(tài)砷之間能相互轉(zhuǎn)化。無機砷在體內(nèi)經(jīng)過氧化甲基化過程（主要在肝臟中進(jìn)行）和還原過程（主要在血液中進(jìn)行），產(chǎn)生多種甲基化砷的代謝產(chǎn)物。因為砷甲基化化合物的急性毒性較小，與組織大分子的反應(yīng)較小，而且在尿液中排泄速度比無機砷快，因此，無機砷的甲基化過程通常被認(rèn)為是生物體對砷的一種解毒機制。

2.1 雄黃中的形態(tài)砷和價態(tài)砷在體內(nèi)的轉(zhuǎn)化途徑

砷在體內(nèi)的經(jīng)典代謝過程如圖3 所示，其中iAs（V）表示砷酸鹽、MMA（Ⅲ）表示一甲基砷酸（Ⅲ）、MMA（Ⅴ）表示一甲基砷酸（Ⅴ）、DMA（Ⅲ）表示二甲基砷酸（Ⅲ）、DMA（Ⅴ）表示二甲基砷酸（Ⅴ）。iAs（V）通過GSH 反應(yīng)還原為iAs（Ⅲ），iAs（Ⅲ）在砷甲基轉(zhuǎn)移酶作用下，以

S

-腺苷甲硫氨酸（

S

-adenosylmethionine，SAM）或者甲基鈷胺素（甲基維生素B）作為甲基供體，將iAs（Ⅲ）轉(zhuǎn)化為一甲基砷和二甲基砷化合物，或者進(jìn)一步生成揮發(fā)性的三甲基砷化合物TMAs 等。

圖3 雄黃中砷在體內(nèi)的簡要代謝過程[21]Fig 3 Brief metabolism process of arsenic in realgar in vivo[21]

同時，砷還有另外一種代謝模式學(xué)說。如圖4 所示，這種學(xué)說認(rèn)為iAs（Ⅲ）通過砷甲基轉(zhuǎn)移酶（Cyt19）代謝并通過砷-谷胱甘肽（As-GSH）復(fù)合物代謝、轉(zhuǎn)化為DMA（Ⅴ），而不是通過重復(fù)和氧化甲基化。該模式的機制如下：iAs（Ⅴ）被還原為iAs（Ⅲ）后，iAs（Ⅲ）與GSH 生成復(fù)合物砷-三谷胱甘肽（ATG），ATG 在SAM和Cyt19 的存在下被甲基化為單甲基胂二谷胱甘肽（MADG），MADG 可轉(zhuǎn)化為MMA（Ⅲ），再進(jìn)一步氧化形成MMA（Ⅴ）。同樣的，MADG也能被Cyt19 進(jìn)一步甲基化為二甲基胂谷胱甘肽（DMAG），DMAG 不穩(wěn)定，轉(zhuǎn)化為DMA（Ⅲ）后快速轉(zhuǎn)化為DMA（Ⅴ）。該機制中As-GSH 復(fù)合物（ATG、MADG 和DMAG）穩(wěn)定與否取決于GSH 的濃度。

圖4 雄黃中砷在體內(nèi)代謝的另一過程[31]Fig 4 Another metabolism process of arsenic in realgar in vivo[31]

2.2 雄黃及其復(fù)方中形態(tài)砷和價態(tài)砷在機體內(nèi)蓄積研究

多項研究探討了雄黃進(jìn)入機體后在機體內(nèi)存在的形態(tài)砷和價態(tài)砷。張云靜等給大鼠灌胃雄黃和牛黃解毒片后考察大鼠血漿中砷的形態(tài)，結(jié)果顯示大鼠血漿中的主要形態(tài)砷為DMA，其他形態(tài)砷如iAs（Ⅲ）、MMA（Ⅴ）和iAs（V）等，在各時間點均未檢測到，表明無機砷進(jìn)入體內(nèi)后被迅速甲基化。Zhang 等的實驗顯示Beagle犬經(jīng)口服給予雄黃和牛黃解毒片后，血漿中的主要砷形態(tài)為DMA，并有少量iAs（Ⅴ），未測到iAs（Ⅲ）和MMA。強淑萍等使用高效液相色譜-氫化物發(fā)生原子熒光光譜（HPLC-HG-AFS）聯(lián)用法測定并比較灌胃給藥牛黃解毒片或雄黃后Beagle 犬血漿中的形態(tài)砷變化，結(jié)果顯示Beagle犬血漿中主要的形態(tài)砷為DMA，并有少量iAs（Ⅴ）；相比雄黃組，牛黃解毒片組的血漿中DMA 濃度較低，消除較快，說明該復(fù)方中其他味中藥能減少形態(tài)砷的蓄積。Wu 等考察了含雄黃中成藥（如牛黃解毒片）中的砷在大鼠體內(nèi)的藥代動力學(xué)和蓄積情況，結(jié)果顯示，長期用藥砷在大鼠體內(nèi)的消除半衰期（

t

）長，積累指數(shù)（AI）高，且在多個組織中蓄積，血漿中DMA 占比最多，而牛黃解毒片組的組織損傷低于雄黃組，且其組方中其他中藥能降低大鼠體內(nèi)砷的濃度，減少砷在體內(nèi)的蓄積。姜新等對大鼠口服雄黃與納米雄黃后血清、肝、腎、脾中iAs（Ⅲ）、iAs（Ⅴ）、MMA、DMA 四種砷形態(tài)進(jìn)行定量分析，結(jié)果顯示，在血清和腎臟中四種砷形態(tài)均被檢出；在肝臟中只檢測到 iAs（Ⅲ）、iAs（Ⅴ） 和 DMA，脾臟中只檢測到 iAs（Ⅴ）和 DMA。這些實驗結(jié)果均證實了雄黃進(jìn)入機體經(jīng)簡要代謝后，其主要成分轉(zhuǎn)化為多種形態(tài)砷并在機體內(nèi)各器官中蓄積。

目前，常用高效液相色譜-電感耦合等離子質(zhì)譜（HPLC-ICP-MS）聯(lián)用技術(shù)測定雄黃中多種形態(tài)砷的含量，該方法融合了幾種檢測方法的優(yōu)點，具有高效性、高靈敏、高重現(xiàn)性、低檢測限、寬線性范圍等特點，用該法測定雄黃及含雄黃制劑中可溶性砷含量，效果良好；王啟錚等用HPLC-ICP-MS 法測定對比雄黃和六神丸中可溶性砷含量，結(jié)果顯示六神丸復(fù)方可顯著抑制雄黃中可溶性砷的溶出，從而降低雄黃毒性。陳紹占等用HPLC-ICP-MS 法分析雄黃在大鼠臟器中代謝的砷形態(tài)，表明雄黃代謝后大鼠肝臟中砷形態(tài)主要以DMA 形式存在，還存在少量的iAs（Ⅲ）和未知物2；腎臟中主要存在DMA、MMA、iAs（Ⅲ）、未知物1、未知物2 和未知物3。同時，經(jīng)牛黃解毒片暴露后大鼠血清中檢出AsB、DMA（Ⅴ）、未知砷化物U1 和U2，其中DMA（Ⅴ）和U1 為經(jīng)牛黃解毒片暴露后主要的代謝產(chǎn)物，少量的AsB 來源于飼料；砷化物U1 可能為DMA（Ⅲ），砷化物U2 尚不能確定。張慶麗等研究了Beagle 犬服用不同劑量雄黃和六神丸后組織中總砷及各形態(tài)砷的分布情況，結(jié)果顯示Beagle 犬組織中總砷含量、iAs（Ⅲ）、DMA 含量呈現(xiàn)一定的劑量依賴性；含相同劑量雄黃的六神丸組與雄黃組相比，多數(shù)組織中總砷含量降低，所有組織中的iAs（Ⅲ）和DMA 濃度均降低，而肝、脾、腎中的AsB 濃度升高，表明六神丸復(fù)方配伍后對雄黃具有一定的減毒作用。而在Shi 等的研究中，通過分析食蟹猴靜脈和灌胃給藥三氧化二砷后的血液，結(jié)果顯示iAs（Ⅲ）是一種有效的抗癌物，食蟹猴體內(nèi)組織中含量最多的形態(tài)砷為DMA，為最終代謝產(chǎn)物。

研究員們多關(guān)注雄黃在機體內(nèi)各組織器官的蓄積情況，以及通過尿液代謝的情況，較少關(guān)注雄黃在動物、人類大腦的蓄積情況。2007年，Rubio 等研究了大鼠在慢性砷暴露后凍干腦切片中的砷濃度，發(fā)現(xiàn)砷可進(jìn)入大鼠腦內(nèi)，且存在體積砷濃度的飽和值。研究發(fā)現(xiàn)iAs 在大腦的蓄積會損傷大鼠的周圍感覺器官和中樞神經(jīng)系統(tǒng)，破壞信息傳遞，且有機砷化合物比無機砷化合物更容易在大腦中蓄積。同時，Masuda 等對染砷食蟹猴的中樞神經(jīng)系統(tǒng)的實驗顯示，有機砷二苯基砷酸（DPAA）容易在食蟹猴大腦中蓄積，且半衰期長于大鼠。由于食蟹猴基因與人類相近，說明DPAA 可能在人類的中樞神經(jīng)系統(tǒng)中蓄積。多項研究探討了雄黃對未成年大鼠腦組織中氨基酸（如天冬氨酸、谷氨酸等）水平的影響，結(jié)果顯示，雄黃在體內(nèi)的代謝產(chǎn)物為iAs、MMA 和DMA，大鼠腦中砷蓄積形態(tài)以DMA、MMA 為主，具有劑量依賴性，說明MMA 和DMA 可通過血腦屏障進(jìn)入大腦；雄黃染毒可使大鼠腦內(nèi)氨基酸水平失調(diào)，產(chǎn)生神經(jīng)系統(tǒng)毒性。另有研究表明，腦組織也可能具有砷甲基化能力，無機砷在腦內(nèi)可以被甲基化代謝成MMA 和DMA，且腦中砷蓄積形態(tài)以DMA 為主；在腦組織中未檢測到iAs。楊釗等研究雄黃中砷對大鼠新事物識別能力的影響，使用氫化物發(fā)生-冷阱捕集-原子吸收光譜法（HG-CT-AAS）測定大鼠腦組織中iAs、MMA 和DMA 的含量。結(jié)果顯示在雄黃組大鼠大腦中檢測到MMA、DMA，且呈時間-劑量-效應(yīng)關(guān)系。以上研究結(jié)果均顯示雄黃代謝物能通過血腦屏障進(jìn)入動物腦內(nèi)并蓄積，產(chǎn)生神經(jīng)系統(tǒng)毒性進(jìn)而損傷大腦功能，但其機制有待更深入的研究。

關(guān)于雄黃代謝產(chǎn)物在腦部分區(qū)中蓄積與分布規(guī)律也有研究。Huo 等將大鼠暴露于雄黃6 周，檢測雄黃對大鼠的神經(jīng)系統(tǒng)作用及海馬體中砷水平，結(jié)果顯示大鼠出現(xiàn)認(rèn)知能力缺陷，且雄黃中的砷通過血腦屏障在大鼠海馬體中蓄積。Sánchez-Pe?a 等檢測經(jīng)iAs（Ⅲ）暴露后小鼠不同腦區(qū)的砷種類，結(jié)果表明甲基化砷代謝物存在于所有研究的腦區(qū)（大腦皮層、海馬體、丘腦等），垂體中蓄積最多。而Shila 等的研究證實經(jīng)過iAs 暴露的大鼠其大腦皮質(zhì)、下丘腦、紋狀體、小腦和海馬區(qū)GSH 水平及相關(guān)酶活性受砷影響降低。

3 腸道菌群對雄黃代謝的作用

雄黃以及含雄黃的復(fù)方中藥多以口服給藥為主，其經(jīng)人體代謝后主要隨糞便排泄，說明胃腸道是雄黃排泄的主要場所。腸道是人口服中藥后體內(nèi)代謝的重要場所，腸道內(nèi)含有豐富的微生物，統(tǒng)稱為腸道菌群。腸道菌群不僅影響藥物在人體內(nèi)的生物轉(zhuǎn)化，同時還關(guān)聯(lián)相當(dāng)多的疾病。人類的腸道菌群非常復(fù)雜，主要包括厚壁菌門、擬桿菌門、變形菌門、放線菌門、梭桿菌門、疣微球菌門、藍(lán)細(xì)菌門等 7 個門，其中厚壁菌門和擬桿菌門在腸道內(nèi)最具優(yōu)勢。目前，關(guān)于腸道菌群對雄黃的作用的研究已有一定進(jìn)展，雄黃通過與腸道菌群相互作用，起到減毒增效的作用，同時對其菌群產(chǎn)生一定影響。

3.1 腸道菌群對雄黃的作用研究

羅世林等探討了雄黃在腸道菌群作用下的初步代謝規(guī)律，將雄黃中可溶性砷與腸道菌群共同在厭氧培養(yǎng)系統(tǒng)中進(jìn)行溫孵化培育，采用HPLC-ICP-MS 法測定其形態(tài)砷。結(jié)果顯示，隨著時間延長，雄黃中可溶性砷中的iAs（Ⅲ）在腸道菌群作用下呈減少趨勢，而iAs（Ⅴ）在0 ～12 h呈上升趨勢，12 ～48 h 呈下降趨勢。這可能與腸道菌群中GSH 的濃度有關(guān)。Chi 等使用腸道菌群干擾小鼠模型考察腸道菌群在砷的生物轉(zhuǎn)化中的作用，結(jié)果顯示砷代謝基因表達(dá)下降，其生物轉(zhuǎn)化受到干擾，導(dǎo)致毒性加重，表明腸道菌群對雄黃中形態(tài)砷的代謝起重要作用。Xu 等同樣使用腸道菌群破壞小鼠模型來探究腸道菌群對雄黃中砷蓄積的影響，結(jié)果顯示腸道菌群被破壞的小鼠全血中砷濃度更高，說明腸道菌群對雄黃起到一個減毒的作用。Coryell 等的研究也證實了腸道菌群能防止急性砷中毒小鼠的死亡，研究選用初級砷解毒酶As3mt 缺失小鼠并分為菌群破壞組和對照組，結(jié)果顯示與正常小鼠比較，菌群破壞的正常小鼠和菌群破壞的缺酶小鼠器官中砷蓄積量大，給缺酶的菌群破壞小鼠移植人類糞便（含微生物）后，能使其免于砷中毒所引發(fā)的死亡。

3.2 雄黃對腸道菌群的作用研究

雄黃對腸道菌群也具有一定的作用。孫宇婷等通過給予小鼠不同劑量的雄黃，探究了雄黃對腸道菌群的影響，結(jié)果顯示各給藥組小鼠腸道中乳酸菌屬均減少，瘤胃球菌屬、黏放線菌屬增多，證明臨床應(yīng)用雄黃后會造成腸道菌群的紊亂，保護性菌減少，產(chǎn)生炎癥，引發(fā)腸道不良反應(yīng)。Xu 等的研究中顯示高劑量（750 mg·kg）雄黃組中，菌群破壞小鼠和對照組小鼠間砷蓄積無顯著差異，說明高劑量的雄黃會破壞腸道菌群穩(wěn)態(tài)。Guo 等研究了砷和鐵共同暴露下對腸道菌群的影響，結(jié)果顯示砷和鐵共同暴露能一定程度緩解兩者單獨使用對腸道菌群的影響，從而影響宿主代謝。

4 雄黃中形態(tài)砷和價態(tài)砷分析在中藥領(lǐng)域中的應(yīng)用

對雄黃中的形態(tài)砷和價態(tài)砷進(jìn)行分析研究，一方面可以明確雄黃在機體內(nèi)的代謝過程，探究其中起到治療作用的藥效成分；另一方面有助于完善雄黃及含雄黃復(fù)方中藥的質(zhì)量評價標(biāo)準(zhǔn)。同時，由于雄黃的臨床應(yīng)用廣泛，分析其所含的形態(tài)砷和價態(tài)砷，能為探究雄黃配伍使用的減毒機制提供理論依據(jù)，提高雄黃在臨床應(yīng)用的安全性和科學(xué)性。

目前，雄黃及其復(fù)方的質(zhì)量控制多以其中的總砷含量來評價，但由于雄黃在人體內(nèi)主要發(fā)揮作用的是其可溶性砷部分，以總砷含量來評價雄黃的毒性并不科學(xué)，可溶性砷才是評價毒性的關(guān)鍵。因此雄黃的質(zhì)量控制應(yīng)檢測其總砷和不同形態(tài)砷、價態(tài)砷的量。許珺輝等使用氫化物發(fā)生-原子熒光光譜法（HG-AFS）測定雄黃、含雄黃中草藥中的形態(tài)砷，結(jié)果顯示少數(shù)雄黃樣品中有 MMA，而在牛黃清心丸、安宮牛黃丸未檢出MMA 和DMA，其含有的 iAs（Ⅲ）和 iAs（V）也低于雄黃樣品。

雄黃因其毒性以及易在人體內(nèi)蓄積，臨床上很少單用，而是常用一些含有雄黃的復(fù)方，如牛黃解毒片、安宮牛黃丸、牛黃清心丸等。研究表明，雄黃與其他中藥配伍可以顯著減少雄黃的毒性。Wu 等研究了牛黃解毒片中砷在大鼠體內(nèi)的積累及安全性，結(jié)果顯示與單用雄黃相比，牛黃解毒片組方中其他中藥能顯著減輕雄黃所致的組織損傷，降低血漿中砷濃度。復(fù)方配伍能削弱雄黃對機體的毒性的機制，推測可能與雄黃中形態(tài)砷和價態(tài)砷與復(fù)方中其他中藥的有效成分發(fā)生化學(xué)反應(yīng)有關(guān)。

5 討論

雄黃中的形態(tài)砷和價態(tài)砷影響其療效和毒性。本文從形態(tài)砷和價態(tài)砷的毒性研究、形態(tài)砷和價態(tài)砷在體內(nèi)的轉(zhuǎn)化與蓄積以及腸道菌群對雄黃生物轉(zhuǎn)化的影響等方面對雄黃相關(guān)研究進(jìn)行了綜述。雄黃中的主要成分AsS難溶于水，生物利用度低，并不能很好地起到治療作用。而雄黃進(jìn)入體內(nèi)分解后的可溶性砷——iAs（Ⅲ）、iAs（Ⅴ）等無機砷，MMA、DMA、TMAO、AsB 等有機砷，才可能是雄黃發(fā)揮藥性和毒性的來源。不同的形態(tài)砷和價態(tài)砷在體內(nèi)吸收、分布、代謝、蓄積和毒性上具有較大差異。不同形態(tài)砷經(jīng)過甲基化后相互轉(zhuǎn)化，最終主要以DMA 的形態(tài)蓄積在體內(nèi)，再經(jīng)腸道通過糞便排泄。

目前，腸道菌群的相關(guān)研究火熱，腸道菌群在人體的各種疾病以及藥物代謝中發(fā)揮重要作用。研究表明，中藥經(jīng)口服后，其有效成分必須經(jīng)過腸道菌群代謝后才能被人體吸收，從而發(fā)揮藥理作用。雄黃中的形態(tài)砷和價態(tài)砷經(jīng)腸道菌群作用后，能有效促進(jìn)其代謝，減少形態(tài)砷在人體內(nèi)的蓄積，從而削弱雄黃對人體的毒性。但同時，大劑量、長期服用雄黃也會損害腸道菌群的穩(wěn)態(tài)，使菌群失調(diào)，引發(fā)炎癥。

近年來，雄黃因其顯著的抗腫瘤作用，越來越受到醫(yī)藥研究者的關(guān)注。但雄黃中的砷毒性及其在人體內(nèi)蓄積的問題影響著雄黃的臨床應(yīng)用。如何減弱雄黃的毒性，增強其療效，更好地利用雄黃來治療惡性疾病是研究的重點。雄黃進(jìn)入機體后發(fā)揮主要作用的是可溶性砷，研究雄黃在機體內(nèi)的形態(tài)砷和價態(tài)砷的代謝及蓄積能更好地實現(xiàn)雄黃的減毒增效，提高其臨床應(yīng)用水平。目前這方面的研究較少，還需研究者們進(jìn)行更加深入、更加系統(tǒng)的研究，為提高雄黃臨床用藥的安全性和科學(xué)性提供依據(jù)。