薛岳進(jìn)，李春曉，張璐莎，王倩怡，方樂(lè)玉，楊文杰，冷雨澤，孫偉，李夢(mèng)瑤，陳璐，王虹

近年來(lái)，由于社會(huì)的快速發(fā)展和人類(lèi)生活水平的提高，缺血性腦血管疾?。↖CVD）、冠狀動(dòng)脈粥樣硬化性心臟?。ü谛牟。珻HD）和心絞痛（AP）的發(fā)病率呈上升趨勢(shì)，對(duì)人類(lèi)健康和生命造成極大的威脅。缺血性腦血管疾病病因復(fù)雜多樣，是一種嚴(yán)重的神經(jīng)系統(tǒng)疾病，由急性、持續(xù)性腦缺血或缺氧引起，主要與動(dòng)脈狹窄、血液成分改變、血流動(dòng)力學(xué)改變等有關(guān)，以動(dòng)脈粥樣硬化為病理基礎(chǔ)[1-3]。冠心病是由心肌缺血、缺氧引起的臨床綜合征，又稱(chēng)為缺血性心臟病，即由冠狀動(dòng)脈（冠脈）粥樣硬化使血管管腔狹窄、阻塞或體力過(guò)強(qiáng)、精神應(yīng)激時(shí)引起[4]，臨床癥狀包括心絞痛、心肌梗死、缺血性心肌病和猝死。心絞痛作為冠心病的一種常見(jiàn)類(lèi)型，多由冠脈供血不足而引起心肌缺血缺氧[5]。腦心同治是基于中醫(yī)藥的辨證論治理論而提出的，根據(jù)同病異治或異病同治的方法來(lái)治療心腦血管疾病。心腦血管疾病的共同病理基礎(chǔ)是動(dòng)脈粥樣硬化，如何防治動(dòng)脈粥樣硬化成為腦心同治關(guān)鍵[6,7]。

銀杏蜜環(huán)口服溶液有效成分為銀杏葉提取物和蜜環(huán)粉，用于治療冠心病、心絞痛、缺血性腦血管疾病，可改善心、腦缺血癥狀[8]。銀杏葉提取物證實(shí)有明顯的保護(hù)心腦血管缺血損傷、抗氧化、防治冠心病和防止動(dòng)脈粥樣硬化等作用[9-13]，蜜環(huán)菌也被證實(shí)具有心腦血管保護(hù)和改善冠狀動(dòng)脈的血液循環(huán)等作用[14-16]。臨床上多用西藥聯(lián)合銀杏蜜環(huán)口服溶液治療心腦血管疾病，并且療效明顯，但是銀杏蜜環(huán)口服溶液腦心同治的具體作用機(jī)制不夠完善。

網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)是近年來(lái)提出的新理念，是融合了藥理學(xué)、信息網(wǎng)絡(luò)學(xué)和計(jì)算機(jī)科學(xué)的一門(mén)學(xué)科，通過(guò)數(shù)據(jù)挖掘、構(gòu)建網(wǎng)絡(luò)、網(wǎng)絡(luò)分析等途徑來(lái)預(yù)測(cè)藥物的作用機(jī)制[17]。中醫(yī)藥理論具有整體觀念的特點(diǎn)，而中藥及復(fù)方制劑具有多成分、多靶點(diǎn)、多途徑的作用特點(diǎn)，網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)研究思路與中藥研究思路吻合，對(duì)中藥發(fā)展具有積極促進(jìn)作用[18,19]。因此，本研究通過(guò)網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)來(lái)研究銀杏蜜環(huán)口服溶液對(duì)腦心同治的作用機(jī)制。

1 材料與方法

1.1 有效成分的收集、篩選和作用靶點(diǎn)的預(yù)測(cè)通過(guò)TCMSP數(shù)據(jù)庫(kù)（http://tcmspw.com/tcmsp.php）[20]和文獻(xiàn)挖掘銀杏葉提取物、蜜環(huán)粉有效成分，并且根據(jù)OB≥30%、DL≥0.18進(jìn)行篩選，蜜環(huán)粉中補(bǔ)充成分[8,14,16,21]通過(guò)Pubchem（https://pubchem.ncbi.nlm.nih.gov/）查找結(jié)構(gòu)式，在SwissADME（http://www.swissadme.ch/）進(jìn)行篩選[22]。然后，在Swiss Target Prediction（http://www.swisstargetprediction.ch/）進(jìn)行靶點(diǎn)預(yù)測(cè)[23]，基于Homo sapiens按照可能性大于0.3進(jìn)行篩選，銀杏葉提取物成分的補(bǔ)充靶點(diǎn)[13,24,25]在CTD數(shù)據(jù)庫(kù)（http://ctdbase.org/）進(jìn)行挖掘[26]，將成分靶點(diǎn)在Uniprot數(shù)據(jù)庫(kù)（https://www.uniprot.org/）中進(jìn)行校正。

1.2 疾病靶點(diǎn)的獲取疾病靶點(diǎn)在GeneCards數(shù)據(jù)庫(kù)（https://www.genecards.org/）中進(jìn)行查找，輸入Ischemic Cerebrovascular Disease、Coronary Atherosclerotic Heart Disease、Angina Pectoris獲取疾病靶點(diǎn)，運(yùn)用R軟件將得到的成分靶點(diǎn)和疾病靶點(diǎn)分別取交集，得到三個(gè)疾病交集靶點(diǎn)再取交集即為腦心同治的作用靶點(diǎn)，將交集靶點(diǎn)在Uniprot數(shù)據(jù)庫(kù)（https://www.uniprot.org/）中進(jìn)行校正，并繪制Venn圖。

1.3 成分-靶點(diǎn)-疾病網(wǎng)絡(luò)的構(gòu)建在Excel2019中，根據(jù)成分、成分靶點(diǎn)、腦心同治交集靶點(diǎn)構(gòu)建“成分-靶點(diǎn)-疾病”數(shù)據(jù)庫(kù)，用Cytoscape3.7.2[27]軟件進(jìn)行可視化、構(gòu)建網(wǎng)絡(luò)，并用CytoHubba根據(jù)度值來(lái)篩選核心成分。

1.4 蛋白相互作用（PPI）網(wǎng)絡(luò)的構(gòu)建在String數(shù)據(jù)庫(kù)（https://string-db.org）中導(dǎo)入交集靶點(diǎn)數(shù)據(jù)，選擇“homo sapiens”物種，按照默認(rèn)設(shè)置，導(dǎo)出PPI網(wǎng)絡(luò)互作圖和tsv文件。

1.5 GO功能富集分析和KEGG通路富集分析利用R軟件“clusterProfiler”軟件包對(duì)腦心同治交集靶點(diǎn)進(jìn)行GO功能富集分析和KEGG通路富集分析，設(shè)置P＜0.05，得到相應(yīng)柱狀圖和氣泡圖。

2 銀杏蜜環(huán)口服溶液的有效成分及作用靶點(diǎn)

通過(guò)TCMSP數(shù)據(jù)庫(kù)和文獻(xiàn)挖掘銀杏葉提取物、蜜環(huán)粉有效成分，并且根據(jù)OB≥30%、DL≥0.18進(jìn)行篩選，補(bǔ)充成分在SwissADME進(jìn)行篩選。然后，在Swiss Target Prediction、CTD數(shù)據(jù)庫(kù)進(jìn)行靶點(diǎn)預(yù)測(cè)，將成分靶點(diǎn)在Uniprot數(shù)據(jù)庫(kù)中進(jìn)行校正。最后根據(jù)靶點(diǎn)情況，銀杏提取物篩選出19個(gè)有效成分、蜜環(huán)粉5個(gè)成分，一共得到397個(gè)靶點(diǎn)，去重后得到183個(gè)靶點(diǎn)，表1。

表1 銀杏蜜環(huán)口服溶液的有效成分及其靶點(diǎn)數(shù)量

2.1 疾病靶點(diǎn)疾病靶點(diǎn)在GeneCards數(shù)據(jù)庫(kù)中進(jìn)行查找，以“Ischemic Cerebrovascular Disease”、“Coronary Atherosclerotic Heart Disease”、“Angina Pectoris”為關(guān)鍵詞檢索，分別獲得1074個(gè)、1865個(gè)、3707個(gè)疾病靶點(diǎn)。運(yùn)用R軟件將得到的成分靶點(diǎn)和疾病靶點(diǎn)分別取交集，分別得到集靶點(diǎn)91個(gè)、97個(gè)、134個(gè)，再將三種疾病靶點(diǎn)取交集，獲得腦心同治71個(gè)靶點(diǎn)，在Uniprot數(shù)據(jù)庫(kù)中進(jìn)行校正，并繪制三種疾病靶點(diǎn)交集Venn圖（圖1）。

圖1 藥物成分靶點(diǎn)及腦心同治疾病靶點(diǎn)交集Venn圖

2.2 銀杏蜜環(huán)口服溶液成分-靶點(diǎn)-疾病網(wǎng)絡(luò)的構(gòu)建運(yùn)用Cytoscape軟件，將建立好的成分-靶點(diǎn)-疾病數(shù)據(jù)庫(kù)導(dǎo)入，繪制網(wǎng)絡(luò)圖（圖2）。共得到208個(gè)節(jié)點(diǎn)（其中24個(gè)成分，183個(gè)靶點(diǎn)，1個(gè)疾病名稱(chēng)）和468條邊，圖2中綠色三角代表銀杏葉提取物成分，黃色三角代表蜜環(huán)粉成分，粉色橢圓形代表疾病，藍(lán)色V型圖形代表靶點(diǎn)，圖中的連線(xiàn)代表各個(gè)節(jié)點(diǎn)之間的關(guān)系。其中Degree值排名前5的活性成分是quercetin（槲皮素）、kaempferol（山奈酚）、luteolin（木犀草素）、Ginkgolide B（銀杏內(nèi)酯B）、Ginkgolide A（銀杏內(nèi)酯A）。Degree值排名前5的靶點(diǎn)是AKR1B1（醛酮還原酶1成員B）、XDH（黃嘌呤脫氫酶/氧化酶）、CYP19A1（細(xì)胞色素P450家族成員19A1）、CYP1B1（細(xì)胞色素P450家族成員1B1）、CA2（碳酸酐酶2）。

圖2 銀杏蜜環(huán)口服溶液成分-靶點(diǎn)-疾病網(wǎng)絡(luò)圖

2.3 PPI網(wǎng)絡(luò)的構(gòu)建和關(guān)鍵靶點(diǎn)的分析通過(guò)String網(wǎng)站，將腦心同治71個(gè)交集靶點(diǎn)導(dǎo)入，得到PPI網(wǎng)絡(luò)互作圖（圖3）。在交集靶點(diǎn)PPI網(wǎng)絡(luò)圖中，共有71個(gè)節(jié)點(diǎn)，779條邊，平均節(jié)點(diǎn)度為21.9。圖中節(jié)點(diǎn)代表基因蛋白，連線(xiàn)代表蛋白之間的關(guān)系，線(xiàn)條的粗細(xì)代表蛋白互作關(guān)系的強(qiáng)弱。利用R軟件計(jì)算各基因靶點(diǎn)Degree值，并且制作核心靶點(diǎn)柱狀圖（圖4）。其中，排名前5的靶點(diǎn)是ALB（白蛋白）、IL-6（白細(xì)胞介素-6）、AKT1（蛋白激酶B1）、TNF（腫瘤壞死因子）、MAPK3（絲裂原活化蛋白激酶-3）。

圖3 交集靶點(diǎn)蛋白-蛋白相互作用圖

圖4 交集靶點(diǎn)互作Barplot圖

2.4 GO功能富集分析和KEGG通路富集分析利用R軟件“clusterProfiler”軟件包對(duì)腦心同治交集靶點(diǎn)進(jìn)行GO功能富集分析，設(shè)置P＜0.05，得到相應(yīng)柱狀圖（圖5）和氣泡圖（圖6）。其中，柱狀圖X軸代表富集在GO上的基因數(shù)目，Y軸代表GO名稱(chēng)，柱形圖代表富集在GO上的基因，P代表富集的顯著性，顏色越紅，富集程度越高，P值越??；氣泡圖中，X軸表示關(guān)聯(lián)基因數(shù)與信號(hào)通路上總基因數(shù)的比值，氣泡面積大小代表富集于GO的基因數(shù)量，氣泡顏色代表P值，顏色越紅，富集程度越高，P值越小，Y軸表示GO名稱(chēng)。銀杏蜜環(huán)口服溶液腦心同治的核心靶點(diǎn)基因的GO功能主要和轉(zhuǎn)錄共激活因子結(jié)合（transcription coactivator binding）、血紅素結(jié)合（heme binding）、四吡咯結(jié)合（tetrapyrrole binding）、磷酸酶結(jié)合（phosphatase binding）、核受體活性（nuclear receptor activity）、電子傳遞活性（electron transfer activity）、轉(zhuǎn)錄輔因子結(jié)合（transcription cofactor binding）、配體激活的轉(zhuǎn)錄因子活性（ligand-activated transcription factor activity）等有關(guān)。

圖5 GO功能富集分析柱狀圖

圖6 GO功能富集分析氣泡圖

利用R軟件“clusterProfiler”軟件包對(duì)腦心同治交集靶點(diǎn)進(jìn)行KEGG通路富集分析，設(shè)置P＜0.05，得到相應(yīng)氣泡圖（圖7），靶點(diǎn)較多的通路有6條（表3）。氣泡圖中，X 軸表示關(guān)聯(lián)基因數(shù)與信號(hào)通路上總基因數(shù)的比值，氣泡面積大小代表富集于KEGG的基因數(shù)量，氣泡顏色代表P值，顏色越紅，富集程度越高，P值越小，Y軸表示KEGG名稱(chēng)。從KEGG通路富集分析圖中可以明顯看出，銀杏蜜環(huán)口服溶液的腦心同治作用主要和焦點(diǎn)黏附（Focal adhesion）、內(nèi)分泌抵抗（Endocrine resistance）、表皮生長(zhǎng)因子受體酪氨酸激酶抑制劑抵抗（EGFR tyrosine kinase inhibitor resistance）、磷脂酰肌醇3激酶-蛋白激酶信號(hào)通路（PI3K-Akt signaling pathway）、缺氧誘導(dǎo)因子-1信號(hào)通路（HIF-1 signaling pathway）、絲裂原活化激酶信號(hào)通路（MAPK signaling pathway）等信號(hào)通路有關(guān)，其中富集最顯著通路的是PI3K-Akt signaling pathway。

表3 靶點(diǎn)較多的信號(hào)通路

圖7 KEGG通路富集分析氣泡圖

3 討論

銀杏蜜環(huán)口服溶液主要由銀杏葉提取物、蜜環(huán)粉組成。銀杏葉最早在《神農(nóng)本草經(jīng)》中記載，歸經(jīng)入心、肺，具有斂肺平喘、通絡(luò)止痛、活血化瘀和化濁降脂的功效，用于瘀血阻絡(luò)、胸痹心痛，中風(fēng)偏癱、肺虛咳喘和高脂血癥。蜜環(huán)菌是天麻的共生菌，最早在《皇和蕈譜》中記載，藥理作用與天麻相似，歸經(jīng)入肝，具有平肝熄風(fēng)止痙、定驚的功效，臨床常用于治療眩暈頭痛、肢體麻木、驚風(fēng)癲癇、腰膝酸軟、破傷風(fēng)等癥狀。近年來(lái)，心腦血管疾病的發(fā)病率不斷升高，嚴(yán)重威脅人類(lèi)的生命健康，銀杏蜜環(huán)口服溶液可以有效改善心、腦缺血，因此，通過(guò)網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)來(lái)研究銀杏蜜環(huán)口服溶液心腦血管保護(hù)的作用機(jī)制?；谝陨涎芯拷Y(jié)果發(fā)現(xiàn)，在確定的2味中藥共24個(gè)有效成分的基礎(chǔ)上，通過(guò)靶點(diǎn)預(yù)測(cè)，篩選出71個(gè)與腦心同治極為密切的潛在靶點(diǎn)。銀杏蜜環(huán)口服溶液通過(guò)作用于ALB、IL-6、AKT1、TNF、MAPK3等多個(gè)靶點(diǎn)，從而調(diào)節(jié)相關(guān)信號(hào)通路，發(fā)揮心腦血管保護(hù)的作用。

通過(guò)分析銀杏蜜環(huán)口服溶液的成分-靶點(diǎn)-疾病網(wǎng)絡(luò)圖，可以得知該制劑關(guān)鍵成分為quercetin（槲皮素）、kaempferol（山奈酚）、luteolin（木犀草素）、Ginkgolide B（銀杏內(nèi)酯B）、Ginkgolide A（銀杏內(nèi)酯A）等。槲皮素可保護(hù)心血管、改善心功能，具有減輕心肌肥厚、防止血栓生成、擴(kuò)張血管降血壓、抗動(dòng)脈粥樣硬化、防治心肌缺血再灌注損傷等作用，槲皮素對(duì)缺血性腦血管疾病也有治療效果，具有神經(jīng)保護(hù)和抗氧化的作用，可以改善腦缺血后功能損傷[28-30]。槲皮素的抗動(dòng)脈粥樣硬化作用可能與下調(diào)HMGB1、TLR4表達(dá)有關(guān)，并且依賴(lài)藥物劑量[31]；槲皮素可能通過(guò)抑制IL-1β、TNF-α、IL-6、IFN-γ的表達(dá)來(lái)減輕腦組織損傷[32]。山奈酚具有抗氧化、對(duì)多種損傷組織保護(hù)、抗動(dòng)脈粥樣硬化等作用，可以有效治療心腦血管疾病[33,34]。山奈酚可能通過(guò)抑制TLR4和NF-κB通路表達(dá)來(lái)減少I(mǎi)L-1β、TNF-α的產(chǎn)生，從而發(fā)揮腦缺血再灌注損傷的神經(jīng)保護(hù)作用[35]；山奈酚通過(guò)降脂、提高抗氧化力、抑制炎癥來(lái)抗動(dòng)脈粥樣硬化，其改善炎癥反應(yīng)可能與抑制IL-1β、TNF-α的表達(dá)有關(guān)[36]。木犀草素對(duì)神經(jīng)系統(tǒng)和心血管系統(tǒng)具有保護(hù)作用，可以抗動(dòng)脈粥樣硬化、抗心力衰竭、抗高血壓、保護(hù)心肌缺血再灌注損傷、改善記憶力、提高認(rèn)知功能等作用[37,38]。木犀草素發(fā)揮腦缺血保護(hù)作用，可能與增加Nrf2和Bcl-2的表達(dá)、抑制Bax的表達(dá)有關(guān)[39]；木犀草素通過(guò)抗脂質(zhì)代謝紊亂和抗細(xì)胞凋亡分子機(jī)制來(lái)保護(hù)大鼠離體心肌缺血/再灌注損傷[40]。銀杏內(nèi)酯主要應(yīng)用于心腦血管疾病，具有抗氧化、改善腦缺血、抗心律失常、抗動(dòng)脈粥樣硬化、保護(hù)中樞神經(jīng)系統(tǒng)等作用[41-45]。銀杏內(nèi)酯可能通過(guò)調(diào)節(jié)TWEE-Fn14信號(hào)通路來(lái)保護(hù)心臟和大腦[46]；銀杏內(nèi)酯可能通過(guò)抑制炎癥反應(yīng)、抗氧化、抑制興奮性氨基酸、改善能量代謝和抑制基因表達(dá)等多種途徑預(yù)防和治療ICVD[45]；銀杏內(nèi)酯B通過(guò)抗氧化和抗凋亡信號(hào)通路來(lái)發(fā)揮對(duì)大鼠心肌缺血/再灌注損傷的保護(hù)作用，可能與抑制MAPK信號(hào)通路、提高Bcl-2表達(dá)、降低Bax表達(dá)有關(guān)[47]。因此，銀杏蜜環(huán)口服液溶液中五個(gè)主要活性成分是腦心同治的重要成分，這說(shuō)明銀杏蜜環(huán)口服溶液通過(guò)多成分共同發(fā)揮作用。

根據(jù)成分篩選靶點(diǎn)和疾病靶點(diǎn)取交集，在String平臺(tái)構(gòu)建PPI網(wǎng)絡(luò)互作圖可以明顯看出，ALB、IL-6、AKT1、TNF、MAPK3等是腦心同治重要靶點(diǎn)。研究表明，冠心病、心肌梗死、腦梗死等患者的ALB（血清白蛋白）水平明顯低于正常人，這對(duì)臨床治療冠心病等心腦血管疾病有重要預(yù)測(cè)意義[48-50]。ALB還可以有效保護(hù)腦神經(jīng)，不僅能改善血流還能保護(hù)腦細(xì)胞，從而促進(jìn)神經(jīng)再生[51]，缺血性卒中后大劑量ALB治療可能具有神經(jīng)保護(hù)作用[52]。AKT（蛋白激酶B）屬于絲/蘇氨酸蛋白激酶，主要活化途徑是PI3K-AKT信號(hào)通路，PI3K可以激活A(yù)KT并且使其磷酸化，AKT1對(duì)心血管疾病具有重要意義[53,54]。AKT1具有調(diào)節(jié)炎癥反應(yīng)的功能，AKT1活化可能通過(guò)抑制JNK3信號(hào)通路參與抗缺血性腦損傷的神經(jīng)保護(hù)作用[55]；有研究表明，兒茶素對(duì)冠心病大鼠FXR、STAT3和Akt的激活，可能對(duì)改善冠心病有重要意義[56]。IL-6、TNF是促炎細(xì)胞因子，促炎細(xì)胞因子不僅能夠吸引巨噬細(xì)胞，還能激活NF-κB信號(hào)通路，刺激血管細(xì)胞產(chǎn)生炎性細(xì)胞因子[56]。在冠心病、心絞痛、腦缺血等心腦血管疾病中，IL-6、TNF-α在患者中呈高表達(dá)，因此降低患者IL-6、TNF-α水平對(duì)心腦血管疾病保護(hù)有重要意義[57-61]。有研究表明銀杏黃酮通過(guò)阻斷NF-κB信號(hào)通路和下調(diào)促炎性細(xì)胞因子，保護(hù)神經(jīng)元免受I/R損傷[62]；瑞芬太尼預(yù)處理可以通過(guò)減少JNK信號(hào)通路和TNF-α/TNFR1信號(hào)通路的外源信號(hào)來(lái)保護(hù)腦缺血再灌注損傷，這可能為ICVD提供新的治療途徑[63]；兒茶素可通過(guò)抑制NF-κB信號(hào)通路、下調(diào)IL-6和TNF-α的表達(dá)等來(lái)改善大鼠冠心病[56]。MAPK3（絲裂原活化蛋白激酶-3）基因編碼為ERK1，屬于MAPK信號(hào)通路，可將細(xì)胞外刺激信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)至細(xì)胞內(nèi)，介導(dǎo)細(xì)胞生物化學(xué)反應(yīng)和炎癥反應(yīng)[64,65]。有研究表明Ras/Raf/ERK1/2信號(hào)通路在神經(jīng)細(xì)胞中起著促死亡凋亡的作用[66,67]；通過(guò)激活ERK1/2信號(hào)通路抑制細(xì)胞凋亡和過(guò)度自噬，可減輕心肌損傷[68]。因此，ALB、IL-6、AKT1、TNF、MAPK3等重要靶點(diǎn)可能通過(guò)細(xì)胞再生、細(xì)胞凋亡和炎癥反應(yīng)等途徑來(lái)達(dá)到腦心同治的治療作用。

將腦心同治71個(gè)交集靶點(diǎn)進(jìn)行GO功能富集分析和KEGG通路富集分析，從P值和基因數(shù)目可以看出，GO功能分析主要涉及到轉(zhuǎn)錄共激活因子結(jié)合（transcription coactivator binding）、血紅素結(jié)合（heme binding）、四吡咯結(jié)合（tetrapyrrole binding）、磷酸酶結(jié)合（phosphatase binding）、核受體活性（nuclear receptor activity）、電子傳遞活性（electron transfer activity）、轉(zhuǎn)錄輔因子結(jié)合（transcription cofactor binding）、配體激活的轉(zhuǎn)錄因子活性（ligand-activated transcription factor activity）等方面。KEGG通路富集分析圖中可以看出，銀杏蜜環(huán)口服溶液的腦心同治作用主要和焦點(diǎn)黏附（Focal adhesion）、內(nèi)分泌抵抗（Endocrine resistance）、表皮生長(zhǎng)因子受體酪氨酸激酶抑制劑抵抗（EGFR tyrosine kinase inhibitor resistance）、磷脂酰肌醇3激酶-蛋白激酶信號(hào)通路（PI3K-Akt signaling pathway）、缺氧誘導(dǎo)因子-1信號(hào)通路（HIF-1 signaling pathway）、絲裂原活化激酶信號(hào)通路（MAPK signaling pathway）等信號(hào)通路有關(guān)。通過(guò)與PPI網(wǎng)絡(luò)中關(guān)鍵靶點(diǎn)對(duì)比，這幾條富集明顯的通路均與IL-6、AKT1、TNF、MAPK3等靶點(diǎn)發(fā)揮協(xié)同作用。銀杏蜜環(huán)口服溶液腦心同治需要多條信號(hào)通路發(fā)揮協(xié)同作用，其中最重要的信號(hào)通路是PI3K-Akt signaling pathway。PI3K-Akt信號(hào)通路是細(xì)胞內(nèi)重要的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路，通過(guò)影響下游多個(gè)靶點(diǎn)來(lái)發(fā)揮抑制凋亡、促進(jìn)增值的作用，對(duì)心腦血管疾病有重要意義。PI3K-Akt信號(hào)通路通過(guò)調(diào)節(jié)細(xì)胞凋亡、血管再生、代謝、炎癥反應(yīng)等進(jìn)而影響其在心腦血管系統(tǒng)的表達(dá)，通過(guò)調(diào)控eNOS、GSK-3、NF-κB、Bcl-2、Caspase-3等發(fā)揮治療心腦缺血疾病的作用[69,70]。木犀草素可能通過(guò)抑制MMP-9，激活PI3K-Akt信號(hào)通路而治療缺血性腦卒中[71]，丹紅注射液對(duì)大鼠缺血再灌注損傷的神經(jīng)保護(hù)作用部分是通過(guò)激活PI3K-Akt信號(hào)通路來(lái)實(shí)現(xiàn)的[72]。淫羊藿苷具有抗I/R損傷的心肌保護(hù)作用，其抗氧化和抗凋亡作用部分與激活PI3K-Akt信號(hào)通路有關(guān)[73]；銀杏內(nèi)酯B可以降低心肌細(xì)胞的凋亡，其機(jī)制與增加PI3K-Akt信號(hào)通路上p-Akt的表達(dá)，上調(diào)Bcl-2的表達(dá)和下調(diào)Bax的表達(dá)有關(guān)[74]；槲皮素通過(guò)激活PI3K/Akt/NF-κB信號(hào)通路，上調(diào)磷酸化PI3K及Akt表達(dá)，抑制NF-κB向核內(nèi)轉(zhuǎn)運(yùn)，發(fā)揮其抗動(dòng)脈粥樣硬化的作用[75]。此外，銀杏葉提取物不僅作用于PI3K-Akt信號(hào)通路來(lái)發(fā)揮神經(jīng)保護(hù)作用，還作用于MAPK和LCN2-JAK2/STAT3這2條信號(hào)通路來(lái)改善缺血性腦卒中；山奈酚可能通過(guò)調(diào)節(jié)ASK1/MAPK信號(hào)通路和氧化應(yīng)激來(lái)抑制心肌肥厚，表明MAPK信號(hào)通路是心腦缺血中的重要信號(hào)通路。因此，銀杏蜜環(huán)口服溶液通過(guò)多途徑、多靶點(diǎn)發(fā)揮腦心同治作用。

綜上所述，銀杏蜜環(huán)口服溶液治療冠心病、心絞痛和缺血性腦血管疾病通過(guò)多成分、多靶點(diǎn)、多途徑發(fā)揮作用，其主要活性成分是槲皮素、山奈酚、木犀草素、銀杏內(nèi)酯A、銀杏內(nèi)酯B等，關(guān)鍵靶點(diǎn)基因?yàn)锳LB、IL-6、AKT1、TNF、MAPK3等，關(guān)鍵信號(hào)通路為Focal adhesion、Endocrine resistance、EGFR tyrosine kinase inhibitor resistance、PI3K-Akt signaling pathway、HIF-1 signaling pathway、MAPK signaling pathway等。本研究基于文獻(xiàn)研究和數(shù)據(jù)庫(kù)數(shù)據(jù)挖掘，成分和靶點(diǎn)的篩選帶有一定的主觀性，數(shù)據(jù)庫(kù)存在許久未更新、收錄不全等問(wèn)題，有一定的局限性。未來(lái)應(yīng)該通過(guò)實(shí)驗(yàn)和臨床分析驗(yàn)證相關(guān)活性成分、靶點(diǎn)基因和關(guān)鍵信號(hào)通路，從而進(jìn)一步闡述銀杏蜜環(huán)口服溶液腦心同治的作用機(jī)制。