田甲春，張 潔，葛 霞，田世龍，*，李守強(qiáng)

（1.甘肅省農(nóng)業(yè)科學(xué)院農(nóng)產(chǎn)品貯藏加工研究所，甘肅 蘭州 730070；2.中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院農(nóng)產(chǎn)品加工研究所重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，北京 100193）

馬鈴薯（Solanum tuberosum）是一年生茄科植物，在全球100 多個(gè)國(guó)家和地區(qū)都有種植[1-3]，已經(jīng)成為我國(guó)繼水稻、小麥、玉米之后的第四大糧食作物[4-5]。在世界人口急劇增長(zhǎng)的今天，糧食危機(jī)不容小覷，作為全球的重要主糧，馬鈴薯的貯藏保鮮在保障糧食安全和營(yíng)養(yǎng)方面意義重大。為延長(zhǎng)馬鈴薯的貯藏期，收獲的塊莖通常在4 ℃的低溫條件下貯藏，低溫貯藏會(huì)使馬鈴薯塊莖中的糖代謝平衡被打破，發(fā)生低溫糖化現(xiàn)象，這對(duì)于馬鈴薯加工是非常不利的[6]。相關(guān)研究發(fā)現(xiàn)，改變貯藏環(huán)境中的氣體組分可有效抑制果蔬的呼吸作用和微生物增長(zhǎng)[7-8]。馬鈴薯的相關(guān)研究發(fā)現(xiàn)，低溫貯藏條件下改變貯藏環(huán)境中的氣體組分對(duì)抑制塊莖的還原糖含量上升有積極的影響，可起到減弱塊莖糖化的作用[9-10]，有利于馬鈴薯的貯藏保鮮。加工薯通常貯藏于8～10 ℃的環(huán)境中，但此環(huán)境極易造成馬鈴薯塊莖失水發(fā)芽[11-14]。馬鈴薯塊莖的發(fā)芽受諸多因素影響，其中內(nèi)源激素含量的動(dòng)態(tài)變化對(duì)塊莖的休眠與萌發(fā)起著主導(dǎo)性的作用，外在的環(huán)境條件變化通過(guò)影響塊莖內(nèi)源激素含量來(lái)影響塊莖的休眠和萌發(fā)[15]。

本課題組在前期進(jìn)行了氣調(diào)貯藏馬鈴薯的相關(guān)研究，已初步確定了5%O2+2%CO2貯藏環(huán)境可改善馬鈴薯的貯藏品質(zhì)[14]。本試驗(yàn)利用氣調(diào)貯藏技術(shù)研究加工薯在（10±1）℃，5%O2+2%CO2氣體環(huán)境下塊莖的營(yíng)養(yǎng)品質(zhì)、外觀品質(zhì)以及內(nèi)源激素含量的變化情況，探討貯藏氣體環(huán)境對(duì)馬鈴薯品質(zhì)的影響，為今后加工薯的生產(chǎn)實(shí)踐提供理論參考。

1 材料與方法

1.1 材料與設(shè)備

1.1.1 材料與試劑

大西洋馬鈴薯，由定西薯香園農(nóng)業(yè)科技有限公司提供。IAA、GA3、ABA 標(biāo)準(zhǔn)品（純度≥98%），上海源葉生物科技股份有限公司；HPLC 級(jí)甲醇，上海合勒化學(xué)科技有限公司；乙酸乙酯（純度≥99.5%），石油醚（純度≥99.5%），國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司；檸檬酸（AR），上海麥克林生化科技有限公司；冰醋酸，上海生工生物有限公司；碘、碘化鉀、乙醇、氫氧化鈉、鹽酸、酒石酸鉀鈉，天津市光復(fù)科技發(fā)展有限公司。三元混合氣體（O2、CO2、N2），蘭州裕隆氣體有限公司。

1.1.2 儀器與設(shè)備

氣調(diào)保鮮箱，北京恒青園科技有限公司；PBI-200616-I 型手持O2/CO2分析儀，丹麥Dansensor 公司；L-1200 型高效液相色譜儀，Agilent 科技有限公司；Cary100 型紫外-可見(jiàn)分光光度計(jì)，美國(guó)瓦里安（中國(guó)）有限公司；TGL -16M 型臺(tái)式高速冷凍離心機(jī)，湖南湘儀離心機(jī)儀器有限公司；CR-10PLUS 型色差儀，日本柯尼卡美能達(dá)公司。

1.2 方法

1.2.1 處理方法

將采收后的馬鈴薯置于黑暗通風(fēng)條件下（10～12 ℃）愈傷15 d。愈傷結(jié)束后，挑選大小均勻、無(wú)病蟲(chóng)害的塊莖作為試驗(yàn)樣品。將挑選后的塊莖分裝于6 個(gè)規(guī)格為50 cm×30 cm×30 cm 的氣調(diào)保鮮箱中，其中處理組和對(duì)照組（CK）各3 箱，每箱馬鈴薯的質(zhì)量約為10 kg，置于（10±1）℃條件下貯藏，用手持O2/CO2分析儀對(duì)箱內(nèi)氣體濃度進(jìn)行檢測(cè)，精確控制氣調(diào)箱內(nèi)氣體體積分?jǐn)?shù)：CA 組為5%O2+2%CO2（各試驗(yàn)組氣體組分除O2、CO2外，其余組分用N2平衡），對(duì)照組（CK）為自然條件氣調(diào)箱不加蓋貯藏。

1.2.2 測(cè)定項(xiàng)目與方法

1.2.2.1 營(yíng)養(yǎng)品質(zhì)

淀粉含量：參照GB 5009.9—2016[16]，采用旋光法測(cè)定；還原糖含量：參照GB 5009.7—2016[17]，采用直接滴定法測(cè)定；干物質(zhì)含量：參照GB 5009.3—2016[18]，采用直接干燥法測(cè)定。

1.2.2.2 外觀品質(zhì)

失重率：每個(gè)處理固定30 個(gè)塊莖進(jìn)行測(cè)定，分別測(cè)定每個(gè)塊莖貯藏前的質(zhì)量（m1）和貯藏后各時(shí)間點(diǎn)的質(zhì)量（mx），失重率按公式（1）進(jìn)行計(jì)算[19]。

腐爛率：每個(gè)處理隨機(jī)選取30 個(gè)塊莖，腐爛率按公式（2）進(jìn)行計(jì)算[20]。

發(fā)芽率：固定30 個(gè)馬鈴薯塊莖，以10 個(gè)為1 組，以塊莖第1 個(gè)芽長(zhǎng)大于2 mm 作為發(fā)芽的標(biāo)準(zhǔn)，發(fā)芽率按公式（3）進(jìn)行計(jì)算[21]。

薯皮色度：每個(gè)處理隨機(jī)選取5 個(gè)塊莖，清洗晾干后在每個(gè)薯塊光滑平整的部位用記號(hào)筆進(jìn)行標(biāo)記，用色差儀測(cè)定標(biāo)記部位的L*值及a*值[22]。

1.2.2.3 內(nèi)源激素（生長(zhǎng)素（IAA）、赤霉素（GA3）、脫落酸（ABA））含量

提取及檢測(cè)方法：稱(chēng)取約0.15 g 馬鈴薯樣本，放入研缽中磨碎，加入1.0 mL 80%甲醇，于4 ℃浸提過(guò)夜。8500 r/min 離心10 min 后取出上清液，氮吹至只剩水相。用石油醚調(diào)pH 值至2～3，用乙酸乙酯萃取3次，合并乙酸乙酯相至上述吹干的EP 管內(nèi)，氮?dú)獯蹈?。甲醇?fù)溶并定容至0.5 mL，用針頭式過(guò)濾器過(guò)濾于帶有內(nèi)襯管的樣品瓶?jī)?nèi)待測(cè)[23]。色譜柱為：Kromasil C18反相色譜柱（250 m×4.6 mm，5 μm），IAA測(cè)定流動(dòng)相為甲醇：水（含1%乙酸）=4：6（V/V），流速0.8 mL/min，柱溫30 ℃，分析時(shí)間為40 min，熒光檢測(cè)器激發(fā)波長(zhǎng)275 nm，發(fā)射波長(zhǎng)345 nm。用于測(cè)定GA3和ABA 的流動(dòng)相A 為甲醇，流動(dòng)相B 為1%乙酸水溶液，流速1 mL/min，柱溫30 ℃，走樣時(shí)間為40 min，紫外檢測(cè)器波長(zhǎng)254 nm。

定性定量方法：配制IAA、GA3、ABA 不同濃度的激素標(biāo)準(zhǔn)品，進(jìn)行HPLC 檢測(cè)，通過(guò)不同的濃度對(duì)應(yīng)不同的檢測(cè)峰面積，進(jìn)行線性擬合，制作標(biāo)準(zhǔn)曲線，用于樣本中激素含量的定量；在標(biāo)準(zhǔn)品對(duì)應(yīng)的保留時(shí)間，進(jìn)行積分操作，計(jì)算峰面積，帶入標(biāo)準(zhǔn)曲線，計(jì)算出樣本中激素的濃度含量及激素含量。IAA、ABA 及GA3檢出限分別為0.5 ng/mL、0.01 μg/mL、0.05 μg/mL。

1.2.3 數(shù)據(jù)處理

2 結(jié)果與分析

2.1 氣調(diào)貯藏對(duì)馬鈴薯塊莖中干物質(zhì)、淀粉、還原糖含量的影響

圖1 為氣調(diào)貯藏對(duì)馬鈴薯塊莖中干物質(zhì)含量的影響情況，由圖可見(jiàn)，塊莖的干物質(zhì)含量均隨貯藏時(shí)間的延長(zhǎng)呈先上升后下降的趨勢(shì)，整個(gè)貯藏期CA貯藏環(huán)境下塊莖的干物質(zhì)含量均較CK 低，貯藏至150 d 時(shí)CA 和CK 貯藏環(huán)境下塊莖中的干物質(zhì)含量均較初值高。干物質(zhì)含量上升的主要原因是馬鈴薯在貯藏過(guò)程中仍然進(jìn)行著呼吸、蒸騰作用等一系列生化反應(yīng)，導(dǎo)致薯塊水分含量降低，干物質(zhì)含量上升。

圖1 氣調(diào)貯藏對(duì)馬鈴薯塊莖中干物質(zhì)含量的影響Fig.1 Effect of controlled atmosphere storage on dry matter content of potato tubers

淀粉是馬鈴薯塊莖中的主要能量來(lái)源和營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，淀粉含量的高低直接影響馬鈴薯塊莖的食用品質(zhì)。圖2 為馬鈴薯貯藏150 d 期間淀粉含量的變化情況，如圖所示，貯藏0～30 d 時(shí)，CA 組和對(duì)照組塊莖中的淀粉含量無(wú)明顯差異，30 d 后CA 環(huán)境下貯藏塊莖的淀粉含量均顯著高于CK（P＜0.05）。

圖2 氣調(diào)貯藏對(duì)馬鈴薯塊莖中淀粉含量的影響Fig.2 Effects of controlled atmosphere storage on the starch content of potato tubers

圖3 為氣調(diào)貯藏對(duì)馬鈴薯塊莖中還原糖含量的影響，由圖可見(jiàn)，CA 組和對(duì)照組塊莖中的還原糖含量均隨貯藏時(shí)間的延長(zhǎng)呈上升趨勢(shì)，貯藏至150 d 時(shí)，CK 組塊莖中的還原糖含量比CA 組高15.21%，說(shuō)明適宜的氣調(diào)貯藏可延緩馬鈴薯在相對(duì)低溫長(zhǎng)期貯藏過(guò)程中還原糖含量的上升。

圖3 氣調(diào)貯藏對(duì)馬鈴薯塊莖中還原糖含量的影響Fig.3 Effects of controlled atmosphere storage on reducing sugar content of potato tubers

2.2 氣調(diào)貯藏對(duì)馬鈴薯塊莖發(fā)芽率、腐爛率和失重率的影響

圖4 為氣調(diào)貯藏對(duì)馬鈴薯塊莖發(fā)芽率的影響，如圖所示，貯藏0～60 d 期間，兩組塊莖均無(wú)發(fā)芽現(xiàn)象，60 d 后塊莖的發(fā)芽率隨貯藏時(shí)間的延長(zhǎng)而升高，貯藏至150 d 時(shí)，CK 組塊莖的發(fā)芽率達(dá)100%，而CA 組塊莖的發(fā)芽率僅為19.14%，說(shuō)明將塊莖貯藏于CA環(huán)境可延長(zhǎng)休眠期，降低塊莖的發(fā)芽率。

圖4 氣調(diào)貯藏對(duì)馬鈴薯塊莖發(fā)芽率的影響Fig.4 Effects of controlled atmosphere storage on sprout rate of potato tubers

圖5 為氣調(diào)貯藏對(duì)馬鈴薯塊莖腐爛率的影響，如圖所示，貯藏至90 d 時(shí)，CK 組出現(xiàn)腐爛塊莖，而CA 組仍無(wú)腐爛現(xiàn)象，隨貯藏時(shí)間的延長(zhǎng)，兩組腐爛率均呈上升趨勢(shì)，且CK 組的腐爛率顯著高于CA 組（P＜0.05）。

圖5 氣調(diào)貯藏對(duì)馬鈴薯塊莖腐爛率的影響Fig.5 Effects of controlled atmosphere storage on rot rate of potato tubers

圖6 為氣調(diào)貯藏對(duì)馬鈴薯塊莖失重率的影響情況，由圖可見(jiàn)，失重率隨貯藏時(shí)間的延長(zhǎng)均呈上升趨勢(shì)，在整個(gè)貯藏期，CA 組塊莖的失重率均顯著低于CK 組，貯藏至150 d 時(shí)，CA 和CK 組的失重率分別為2.87%和8.39%。說(shuō)明氣調(diào)處理可顯著抑制馬鈴薯因?yàn)楹粑⒄趄v等作用引起的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)消耗及失水。

圖6 氣調(diào)貯藏對(duì)馬鈴薯塊莖失重率的影響Fig.6 Effects of controlled atmosphere storage on weight loss rate of potato tubers

2.3 氣調(diào)貯藏對(duì)馬鈴薯薯皮色度的影響

圖7 為氣調(diào)貯藏對(duì)馬鈴薯塊莖薯皮L*值的影響，如圖所示，隨貯藏時(shí)間的延長(zhǎng)，對(duì)照組和CA 組塊莖的薯皮L*值均呈下降趨勢(shì)。L*值的大小反映薯皮的亮暗程度，L*值越大薯皮亮度越大，反之則越暗。本試驗(yàn)中CA 組塊莖的薯皮L*值在整個(gè)貯藏期均高于CK 組，說(shuō)明CA 貯藏環(huán)境可減緩馬鈴薯貯藏過(guò)程中薯皮的褐變。

圖7 氣調(diào)貯藏對(duì)馬鈴薯塊莖薯皮L*值的影響Fig.7 Effects of controlled atmosphere storage on L*value of potato tuber skins

圖8 為氣調(diào)貯藏對(duì)馬鈴薯塊莖薯皮a*值的影響，馬鈴薯貯藏期間易出現(xiàn)表皮綠變的現(xiàn)象，a*值能夠反映馬鈴薯紅綠程度，a*值越小物體的顏色越偏向綠色，反之則越紅。由圖8 可見(jiàn)，隨貯藏時(shí)間的延長(zhǎng)，馬鈴薯塊莖薯皮的a*值均有不同程度的下降，相比而言CA 環(huán)境下貯藏塊莖的a*值下降程度低于CK組，說(shuō)明CA 貯藏環(huán)境可減緩馬鈴薯塊莖薯皮的綠變。

圖8 氣調(diào)貯藏對(duì)馬鈴薯塊莖薯皮a*值的影響Fig.8 Effects of controlled atmosphere storage on a*value of potato tuber skins

2.4 氣調(diào)貯藏對(duì)馬鈴薯塊莖中激素含量的影響

IAA 是馬鈴薯發(fā)芽生長(zhǎng)所必需的物質(zhì)，對(duì)休眠打破后芽的生長(zhǎng)有調(diào)控作用，能促進(jìn)細(xì)胞擴(kuò)張和細(xì)胞分裂[23]。如圖9 所示，隨貯藏時(shí)間的延長(zhǎng)，馬鈴薯塊莖中IAA 含量呈上升趨勢(shì)，貯藏30 d 以后，CA 組的IAA含量顯著低于CK 組（P＜0.05）。貯藏至150 d 時(shí)，CA組貯藏的馬鈴薯塊莖IAA 含量較對(duì)照組低19.63%。

圖9 氣調(diào)貯藏對(duì)馬鈴薯塊莖IAA 含量的影響Fig.9 Effects of controlled atmosphere storage on IAA content of potato tubers

ABA 被認(rèn)為對(duì)塊莖休眠有維持作用。如圖10 所示，隨貯藏時(shí)間的延長(zhǎng)，ABA 含量總體呈下降趨勢(shì)，CA 貯藏的塊莖中ABA 含量在整個(gè)貯藏期間均顯著高于對(duì)照組（P＜0.05），貯藏至150 d 時(shí)，CA 和CK 塊莖中的ABA 含量分別較初始值下降了49.17%、67.61%。

圖10 氣調(diào)貯藏對(duì)馬鈴薯塊莖ABA 含量的影響Fig.10 Effects of controlled atmosphere storage on ABA content of potato tubers

GA3具有促進(jìn)馬鈴薯發(fā)芽的作用。由圖11 可見(jiàn)，兩組馬鈴薯塊莖GA3含量均隨貯藏時(shí)間的延長(zhǎng)呈先上升后下降的趨勢(shì)，貯藏0～60 d 期間CA 和CK 環(huán)境貯藏的塊莖均處于休眠期，GA3含量較低，隨后休眠解除開(kāi)始萌芽，GA3含量迅速增加，貯藏至90 d 時(shí)，CA 和CK 組塊莖的GA3含量均達(dá)到最高，但CA 環(huán)境貯藏塊莖的GA3含量顯著低于CK 組（P＜0.05），貯藏90 d 后兩組塊莖中的GA3含量均呈下降趨勢(shì)，且二者間無(wú)顯著差異。

圖11 氣調(diào)貯藏對(duì)馬鈴薯塊莖GA3 含量的影響Fig.11 Effects of controlled atmosphere storage on GA3 content of potato tubers

3 討論與結(jié)論

馬鈴薯在收獲后仍然是鮮活的有機(jī)體，在貯藏過(guò)程中，馬鈴薯塊莖受外界環(huán)境的影響，仍進(jìn)行著一系列生理代謝活動(dòng)。在馬鈴薯貯藏期間加強(qiáng)通風(fēng)管理并保持一定的低溫條件，可使貯藏環(huán)境中的氧氣和二氧化碳濃度保持在一定的范圍內(nèi)，使塊莖處于被迫休眠狀態(tài)而延遲萌發(fā)，有利于馬鈴薯的貯藏，當(dāng)馬鈴薯塊莖貯藏于5%O2+2%CO2氣調(diào)環(huán)境時(shí)，塊莖的發(fā)芽率顯著低于CK 組，說(shuō)明馬鈴薯貯藏于該環(huán)境下可有效延緩塊莖的發(fā)芽。馬鈴薯中的水分含量是影響馬鈴薯新鮮度的重要指標(biāo)，過(guò)度失水會(huì)造成馬鈴薯正常生理代謝紊亂，進(jìn)而造成營(yíng)養(yǎng)品質(zhì)及外觀品質(zhì)的下降，貯藏于5%O2+2%CO2氣調(diào)環(huán)境的馬鈴薯塊莖腐爛率及失重率均低于CK 組。馮犖犖等[24]研究發(fā)現(xiàn)，適宜氣體配比下貯藏的狗頭棗的好果率和鮮度指數(shù)均高于其他試驗(yàn)組；張敏歡等[9]在靜電場(chǎng)結(jié)合自發(fā)氣調(diào)包裝對(duì)馬鈴薯貯藏期間的保鮮效果研究中也發(fā)現(xiàn)，氣調(diào)貯藏可有效保持馬鈴薯的感官及各項(xiàng)營(yíng)養(yǎng)品質(zhì)，主要是由于在氣調(diào)貯藏過(guò)程中嚴(yán)格控制貯藏環(huán)境的溫濕度和氣體條件，有效抑制了果蔬的采后呼吸作用，減少了由于呼吸作用所造成的失水及微生物和酶作用所造成的腐敗變質(zhì)。薯皮的色澤也是評(píng)價(jià)馬鈴薯感官品質(zhì)和商品價(jià)值的重要指標(biāo)。王志華等[25]研究發(fā)現(xiàn)，氣調(diào)處理能提升梨果皮顏色亮度；氣調(diào)貯藏鮮切黃瓜[26]、雙孢蘑菇等也有同樣的作用[27]。本研究也發(fā)現(xiàn)，氣調(diào)貯藏可延緩薯皮色度變暗，并能夠延緩薯皮的綠變。

馬鈴薯塊莖的發(fā)芽受環(huán)境、生理、遺傳因子等因素的調(diào)控，內(nèi)源激素被認(rèn)為是調(diào)節(jié)馬鈴薯休眠與發(fā)芽最重要的內(nèi)部因素之一，這種調(diào)節(jié)并不是單一激素的影響，而是幾種激素相互作用的結(jié)果[28-30]。IAA、ABA、GA3等幾種激素被認(rèn)為參與了馬鈴薯的休眠調(diào)控，IAA 是馬鈴薯發(fā)芽生長(zhǎng)所必需的物質(zhì)，它能促進(jìn)細(xì)胞擴(kuò)張和細(xì)胞分裂，但I(xiàn)AA 對(duì)種子休眠與萌發(fā)的作用也存在爭(zhēng)議，有研究認(rèn)為它對(duì)休眠沒(méi)有任何影響，只在打破休眠并發(fā)芽的塊莖中增加。本研究中發(fā)現(xiàn)隨貯藏時(shí)間的延長(zhǎng)，IAA 含量呈上升趨勢(shì)，IAA 含量與發(fā)芽率呈正相關(guān)關(guān)系，這與杜鵑等[31]的研究結(jié)果一致。GA3也具有促進(jìn)種薯發(fā)芽的作用，其含量通常在塊莖休眠時(shí)很少，在控制隨后的發(fā)芽生長(zhǎng)方面發(fā)揮重要作用。ABA 是最早被發(fā)現(xiàn)可以誘導(dǎo)和維持馬鈴薯塊莖休眠的激素，其含量在塊莖處于深度休眠狀態(tài)時(shí)較高，隨著塊莖休眠解除大幅下降。本研究中塊莖剛收獲時(shí)ABA 含量最高，隨貯藏時(shí)間延長(zhǎng)，ABA 含量呈下降趨勢(shì)，它與塊莖的發(fā)芽率和IAA 含量的變化趨勢(shì)呈負(fù)相關(guān)。本研究結(jié)果表明，將馬鈴薯于（10±1）℃，5%O2+2%CO2氣體環(huán)境下貯藏可延緩塊莖在長(zhǎng)期貯藏過(guò)程中還原糖含量的上升，并且能夠抑制貯藏過(guò)程中薯皮的褐變和綠變，降低馬鈴薯塊莖的失重率、腐爛率及發(fā)芽率，解決加工薯在貯藏過(guò)程中發(fā)芽、失水及還原糖含量升高等問(wèn)題。