肖宇,王晹,霍東風(fēng)(通信作者)
1.黑龍江省藥品檢驗(yàn)研究中心(哈爾濱 150088);2.哈爾濱醫(yī)科大學(xué)附屬第四醫(yī)院(哈爾濱 150001)
滴眼劑作為直接接觸眼部的制劑,具有直達(dá)病灶、起效迅速、避免肝臟的首過(guò)效應(yīng)的特點(diǎn),因其給藥途徑具有高風(fēng)險(xiǎn),同時(shí)用藥部位較為特殊,2010版藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范及時(shí)將滴眼劑劃歸無(wú)菌制劑,以無(wú)菌制劑的要求對(duì)其進(jìn)行管理、檢驗(yàn)和檢測(cè)[1],保證其安全、有效、可及,做到全程管控。采用低密度聚乙烯為材料的藥用滴眼劑瓶,為直接接觸內(nèi)容物的材料,通俗稱為“塑料”,滴眼劑的內(nèi)包裝常用此材料[2]。本品是將LDPE的粒料,經(jīng)過(guò)吹入惰性氣體的方式成型,一般情況下由瓶身、瓶嘴及瓶蓋組成,三個(gè)部位分別制得,以干熱、濕熱和輻射滅菌等一系列操作之后,灌裝對(duì)應(yīng)品種藥液;或者直接采用吹塑成型、灌裝藥液,再密封的一體技術(shù)制得滴眼劑[3]。本品選用三氯叔丁醇為抑菌劑,對(duì)細(xì)菌和真菌的繁殖具有抑制作用,對(duì)革蘭陽(yáng)性和革蘭陰性菌(包括銅綠假單胞菌)均有效[4]。此外尚有輕度鎮(zhèn)靜和局部止痛作用。在日常檢驗(yàn)中,采用氣相色譜法對(duì)廠家樣品的抑菌劑(防腐劑)三氯叔丁醇進(jìn)行測(cè)定,以內(nèi)標(biāo)法進(jìn)行計(jì)算,發(fā)現(xiàn)測(cè)得的含量普遍低于處方量的80.0%,推測(cè)采用低密度聚乙烯為材料的瓶身可能吸附一部分三氯叔丁醇[5],本文將進(jìn)行驗(yàn)證。
無(wú)水乙醇,三氯甲烷,四氫呋喃,N-N二甲基甲酰胺均為市售分析純;低密度聚乙烯滴眼劑瓶由廠家提供;三氯叔丁醇對(duì)照品(來(lái)源:中檢院,批號(hào):100492-202003)。
十萬(wàn)分之一電子天平(METTLER TOLEDO),氣相色譜儀(SHIMADZU,GC-2010)
2.1.1 色譜條件 以聚乙二醇(或極性相近)為固定液的毛細(xì)管柱為色譜柱;起始溫度為70℃,維持5分鐘,再以每分鐘20℃的速率升溫至170℃,維持4分鐘;進(jìn)樣口溫度為220℃,檢測(cè)器溫度為250℃。系統(tǒng)適用性要求各峰間的分離度均應(yīng)符合要求[6]。
2.1.2 供試品溶液與對(duì)照品溶液制備 內(nèi)標(biāo)溶液:精密稱取N-N二甲基甲酰胺20.38mg,置200mL量瓶中,加三氯甲烷稀釋至刻度,搖勻,即得。
對(duì)照品溶液:精密稱取三氯叔丁醇對(duì)照品22.16mg,置200mL量瓶中,加三氯甲烷稀釋至刻度,搖勻,作為對(duì)照品貯備液;精密量取上述貯備液與內(nèi)標(biāo)溶液各1mL,置200mL量瓶中,用三氯甲烷稀釋至刻度,搖勻,即得[7]。
供試品溶液:稱取鹽酸羥芐唑原料藥50.27mg,氫氧化鈉約5mg,氯化鈉392.66mg,三氯叔丁醇150.19mg,置50mL量瓶中,加水溶解并稀釋至刻度,置低密度聚乙烯瓶中[8],室溫放置30天,倒出藥液,洗凈,晾干,將低密度聚乙烯滴眼劑瓶剪碎,置具塞錐形瓶中,分別加入三氯甲烷100mL密塞浸泡7天[9],作為供試品貯備液;精密量取內(nèi)標(biāo)溶液1mL,置200mL量瓶中,用三氯甲烷稀釋至刻度,搖勻,精密量取1mL,與供試品貯備液1mL混勻[10],即得。
2.1.3 試驗(yàn)方法 分別量取對(duì)照品溶液與供試品溶液各6mL,置20mL頂空瓶中,頂空進(jìn)樣。精密量取供試品溶液與對(duì)照品溶液各500μL,分別注入氣相色譜儀,記錄色譜圖。
分別用無(wú)水乙醇與四氫呋喃作為提取溶劑,按“2.1”項(xiàng)下進(jìn)行試驗(yàn)。
低密度聚乙烯滴眼劑瓶對(duì)三氯叔丁醇有一定的吸附,測(cè)定結(jié)果見(jiàn)表1及圖1、圖2。
圖1 對(duì)照品
圖2 供試品
表1 三氯甲烷提取包材對(duì)三氯叔丁醇的吸附
結(jié)果顯示,此低密度聚乙烯滴眼劑瓶會(huì)吸附一部分三氯叔丁醇。
實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,四氫呋喃與無(wú)水乙醇的提取效果接近,三氯甲烷的提取效果弱于四氫呋喃與無(wú)水乙醇。見(jiàn)表2、表3。
表2 四氫呋喃提取包材對(duì)三氯叔丁醇的吸附
表3 無(wú)水乙醇提取包材對(duì)三氯叔丁醇的吸附
低密度聚乙烯滴眼劑瓶對(duì)抑菌劑三氯叔丁醇有吸附,發(fā)現(xiàn)不同提取溶劑的提取效果不同,四氫呋喃與無(wú)水乙醇優(yōu)于三氯甲烷,考慮到操作的安全性,確定無(wú)水乙醇作為提取溶劑。同時(shí),提示企業(yè)使用該材料時(shí),要考慮其是否可搭配三氯叔丁醇作為抑菌劑。
本文中提到的樣品三氯叔丁醇含量低于處方量的80%,除低密度聚乙烯滴眼劑瓶體對(duì)其的吸附,推測(cè)另有其他方式導(dǎo)致其含量低:瓶體本身不夠致密,分子間鍵合度低,一部分三氯叔丁醇透過(guò)瓶體擴(kuò)散至環(huán)境中;三氯叔丁醇與瓶體中物質(zhì)發(fā)生反應(yīng),通過(guò)雙鍵加成,進(jìn)入到瓶體中。上述兩種推測(cè)有機(jī)會(huì)將進(jìn)行更深入的研究。
三氯叔丁醇是一種無(wú)色結(jié)晶體,易溶于無(wú)水乙醇、甘油、乙醚、氯仿,加熱易升華,能隨水蒸氣揮發(fā)。根據(jù)其結(jié)構(gòu)特點(diǎn),帶有羥基,可親水;帶有氯,可親脂。文中提取溶劑除了選擇了無(wú)水乙醇和三氯甲烷(氯仿)之外,考慮到前者極性較大,為親水性溶劑,后者極性較小,為親脂性溶劑,另外選取了四氫呋喃,四氫呋喃極性介于無(wú)水乙醇和三氯甲烷之間,因此,提取溶劑的極性更加全面。通過(guò)實(shí)驗(yàn)可知,無(wú)水乙醇、三氯甲烷和四氫呋喃提取的結(jié)果分別為:2.03%,0.96%,2.08%。可見(jiàn),無(wú)水乙醇和四氫呋喃的提取效果更好,考慮到安全性問(wèn)題,采用無(wú)水乙醇作為浸提溶劑更為合適。