相萌，張旭東

（1.西安醫(yī)學(xué)院臨床醫(yī)學(xué)院婦產(chǎn)科教研室，陜西西安 710021；2.西安醫(yī)學(xué)院臨床醫(yī)學(xué)院拉吉姆實(shí)驗(yàn)室，陜西西安 710021）

胎兒生長(zhǎng)受限（fetal growth restriction，F(xiàn)GR）是最常見的產(chǎn)前疾病之一，可造成早產(chǎn)及成年期神經(jīng)障礙及慢性疾病發(fā)生率增加，懷孕初期子宮螺旋動(dòng)脈重構(gòu)不足是造成其發(fā)生的主要原因，而人絨毛膜滋養(yǎng)層細(xì)胞侵襲功能異?？蓪?dǎo)致子宮螺旋動(dòng)脈重構(gòu)障礙的發(fā)生，因此了解人絨毛膜滋養(yǎng)層細(xì)胞的侵襲、遷移機(jī)制，對(duì)胎兒的生長(zhǎng)發(fā)育及健康十分重要［1-3］。微小RNA（miRNA）作為轉(zhuǎn)錄后調(diào)節(jié)劑，可與其靶基因mRNA 3'-非翻譯區(qū)（3'-UTR）特異性結(jié)合，以此抑制其翻譯，從而參與FGR、先兆子癇、流產(chǎn)、妊娠期糖尿病等妊娠疾病的發(fā)生［4］。妊娠期糖尿病可導(dǎo)致FGR 的發(fā)生，而在妊娠期糖尿病患者胎盤滋養(yǎng)細(xì)胞系中miR-130b 表達(dá)水平異常增加，除此之外miR-130b-5p 與多種細(xì)胞的侵襲、遷移能力有關(guān)［5-6］。胰島素樣生長(zhǎng)因子-1（insulinlike growth factor-1，IGF-1）主要分泌于胎盤中，其作為子宮內(nèi)生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑，在FGR 發(fā)生時(shí)其循環(huán)濃度異常降低［7］。研究發(fā)現(xiàn)在膠質(zhì)母細(xì)胞瘤中miR-130b 與IGF-1表達(dá)水平呈負(fù)相關(guān)關(guān)系［8］。目前，關(guān)于miR-130b-5p 是否可通過調(diào)控IGF-1來影響人絨毛膜滋養(yǎng)層細(xì)胞（HTR-8∕SVneo）遷移及侵襲還未可知，因此本研究通過對(duì)其探究，以期為FGR 的治療提供新的靶點(diǎn)。

1 材料與方法

1.1 試劑和儀器

HTR8∕SVneo 細(xì)胞（南京賽泓瑞生物科技有限公司，貨號(hào)：SHC1187）；Lipofectamine?2000 Transfection Reagent 轉(zhuǎn)染試劑盒（杭州沃森生物技術(shù)有限公司，貨號(hào)：11668019）；青鏈霉素、DMEM 基礎(chǔ)培養(yǎng)基、胎牛血清、胰酶溶液（上海中喬新舟生物科技有限公司，貨號(hào)：0503、ZQ-100、0025、0103）；蛋白提取試劑盒（武漢純度生物科技有限公司，貨號(hào)：CD-13559-ML）；HRP 標(biāo)記的山羊抗兔IgG 二抗抗體（艾美捷科技有限公司，貨號(hào)：AAT-16793）；BCA蛋白檢測(cè)試劑盒（北京索萊寶科技有限公司，貨號(hào)：PC0020）；兔抗β-actin、波形蛋白（Vimentin）、c-Myc、神經(jīng)型鈣粘附蛋白（N-cadherin）抗體（Cell Signaling Technology，貨號(hào)：4967、5741、5605、13116）；細(xì)胞周期蛋白D1（CyclinD1）（Biorbyt，貨號(hào)：orb77046）；兔抗基質(zhì)金屬蛋白酶9（matrix metalloproteinase 9，MMP9）、基質(zhì)金屬蛋白酶2（matrix metalloproteinase 2，MMP2）、鈣粘附蛋白E（E-cadherin）抗體（Proteintech，貨號(hào)：20874-1-AP、10375-2-AP、10373-2-AP）；pcDNA3.1、pcDNA3.1-IGF-1、miR-130b-5pmimics、miR-NC 由賽默飛世爾科技合成；CCK-8 細(xì)胞增殖及細(xì)胞毒性檢測(cè)試劑盒（貝博-Bestbio，貨號(hào)：BB-4202）。

CFX384?Touch 熒光定量PCR 系統(tǒng)購(gòu)自伯樂（Bio-Rad）公司；M4激光全息細(xì)胞成像及分析系統(tǒng)購(gòu)自瑞典Phiab 公司；Invitrogen 凝膠成像系統(tǒng)購(gòu)自賽默飛。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

1.2.1 HTR8∕SVneo 細(xì)胞培養(yǎng) 將已復(fù)蘇的HTR8∕SVneo 細(xì)胞接種于含1%青鏈霉素及10 g∕L 胎牛血清的DMEM 培養(yǎng)基后，在體積分?jǐn)?shù)5%CO2、37 ℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)到細(xì)胞融合至約80%時(shí)經(jīng)2.5 g∕L 胰酶消化、傳代培養(yǎng)。

1.2.2 雙熒光素酶報(bào)告基因檢測(cè)miR-130b-5p 和IGF-1 的靶向關(guān)系 TargetScan 網(wǎng)址確定miR-130b-5p和IGF-1的結(jié)合位點(diǎn)并對(duì)二者間的靶向關(guān)系進(jìn)行驗(yàn)證。將與miR-130b-5p 靶向序列相結(jié)合的IGF-1 3＇-UTR 片段經(jīng)擴(kuò)增、酶切后進(jìn)行連接，構(gòu)建野生型pmirGLO-IGF-1-wt，再通過基因突變技術(shù)對(duì)結(jié)合位點(diǎn)進(jìn)行突變，構(gòu)建突變型pmirGLOIGF-1-mut 載體；根據(jù)轉(zhuǎn)染試劑盒說明書將pmir-GLO-IGF-1-wt 及pmirGLO-IGF-1-mut 分別與miR-130b-5p mimics 和miR-NC 進(jìn)行共轉(zhuǎn)染，分為pmirGLO-IGF-1-wt+miR-130b-5p mimics 組、pmirGLO-IGF-1-wt+miR-NC 組、pmirGLO-IGF-1-mut+miR-130b-5p mimics 組、pmirGLO-IGF-1-mut+miR-NC 組，于48 h 后添加報(bào)告基因細(xì)胞裂解液（200μL）及熒光素酶反應(yīng)液（50μL）檢測(cè)熒光強(qiáng)度A，之后添加反應(yīng)終止液檢測(cè)熒光強(qiáng)度B，A∕B 即為熒光素酶相對(duì)活性。

1.2.3 分組及HTR8∕SVneo 細(xì)胞轉(zhuǎn)染 設(shè)置對(duì)照組、miR-NC 組、miR-130b-5pmimics 組、miR-130b-5pmimics+pcDNA3.1 組和miR-130b-5pmimics+pcDNA3.1-IGF-1 組；將HTR8∕SVneo細(xì)胞（1mL）以2×106個(gè)∕孔的密度接種到6孔板中（設(shè)置5個(gè)復(fù)孔）培養(yǎng)至貼壁后，按照Lipofectamine?2000說明書進(jìn)行操作，以5 nmol∕L 為終濃度分別將miR-NC、miR-130b-5pmimics、pcDNA3.1、pcDNA3.1-IGF-1 轉(zhuǎn)至相應(yīng)的HTR8∕SVneo 細(xì)胞中后培養(yǎng)48 h，檢測(cè)miR-130b-5p表達(dá)水平。

1.2.4 qRT-PCR檢測(cè)HTR8∕SVneo細(xì)胞樣本中miR-130b-5p 及IGF-1 表達(dá)水平 將各組轉(zhuǎn)染后的HTR8∕SVneo 細(xì)胞根據(jù)Trizol 法提取細(xì)胞中總RNA并檢測(cè)其濃度，取所得RNA反轉(zhuǎn)錄為cDNA后進(jìn)行qRT-PCR擴(kuò)增（5個(gè)復(fù)孔）；引物由Oligo 7軟件設(shè)計(jì)（表1），上海生工合成，以U6和GAPDH為內(nèi)參分別對(duì)miR-130b-5p 及IGF-1進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)化，2-ΔΔCt計(jì)算基因表達(dá)水平。

表1 qRT-PCR引物Table 1 qRT-PCR primers

1.2.5 CCK-8法檢測(cè)HTR8∕SVneo細(xì)胞增殖情況將轉(zhuǎn)染后的HTR8∕SVneo 細(xì)胞以1×104個(gè)∕孔的密度接種于96 孔板中（重復(fù)5 孔），培養(yǎng)24 h 后添加CCK-8（10μL∕孔）培養(yǎng)2 h后在酶標(biāo)儀450 nm 處測(cè)定OD 值，計(jì)算HTR8∕SVneo 細(xì)胞增殖抑制率(%)=[(對(duì)照組OD值-實(shí)驗(yàn)組OD值)∕(對(duì)照組OD值-空白組OD值)]× 100%。

1.2.6 全息細(xì)胞儀分析HTR8∕SVneo 細(xì)胞遷移能力 將轉(zhuǎn)染后的HTR8∕SVneo 細(xì)胞以2×105個(gè)∕孔的密度接種于6 孔板中培養(yǎng)24 h 后，通過激光全息細(xì)胞分析及成像系統(tǒng)監(jiān)測(cè)細(xì)胞在24 h 內(nèi)的遷移情況。

1.2.7 Transwell 法檢測(cè)HTR8∕SVneo細(xì)胞侵襲能力用無血清培養(yǎng)基以1：8 的比例稀釋Matrigel后加入到Transwell 小室上室4 h 孵育，將各組200μL HTR8∕SVneo 細(xì)胞懸液以1×105個(gè)∕mL 接種到上室后在下室加入600 μL DMEM 培養(yǎng)基培養(yǎng)12 h，PBS 清洗后用棉簽擦拭上室HTR8∕SVneo 細(xì)胞，10 min 甲醇固定后30 min 結(jié)晶紫染色，選取5 個(gè)視野進(jìn)行觀察，對(duì)穿膜細(xì)胞進(jìn)行計(jì)數(shù)。

1.2.8 Western blot 檢測(cè)HTR8∕SVneo細(xì)胞中的蛋白表達(dá)情況添加400μL RIPA 蛋白裂解液裂解HTR8∕SVneo 細(xì)胞后12 000 r∕min（r=10 cm）10 min離心取上清，BCA 法定量分析總蛋白；將40 μg 蛋白樣品通過SDS-PAGE 凝膠電泳（40 μg∕孔）進(jìn)行分離后在低溫條件下將蛋白轉(zhuǎn)移至PVDF膜上，1 h脫脂奶粉封閉后加入兔抗MMP9、MMP2、c-Myc、CyclinD1、E-cadherin、N-cadherin、Vimentin、β-actin、IGF-1 抗體（1：1 000）一抗孵育（4 ℃）過夜，用Tris-HCl 緩沖鹽溶液加Tween（Tris Buffered saline Tween，TBST）進(jìn)行洗膜后添加HRP 標(biāo)記的山羊抗兔IgG 二抗（1：10 000）進(jìn)行孵育2 h，TBST 洗膜、化學(xué)發(fā)光試劑（ECL Reagent）顯色，蛋白凝膠成像儀顯影觀察后Image J 軟件檢測(cè)條帶灰度值，β-actin為內(nèi)參，計(jì)算蛋白含量（重復(fù)5孔）。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

2 結(jié)果

2.1 miR-130b-5p 和IGF-1 在HTR8/SVneo 細(xì)胞中的靶向關(guān)系驗(yàn)證

TargetScan 在線網(wǎng)址預(yù)測(cè)結(jié)果顯示：miR-130b-5p 和IGF-1二者間具有靶向結(jié)合位點(diǎn)（圖1）；如圖2 所示，熒光素酶報(bào)告基因?qū)嶒?yàn)結(jié)果顯示：與pmirGLO-IGF-1-wt+miR-NC 組相比，pmirGLOIGF-1-wt+miR-130b-5p mimics組熒光素酶活性顯著降低（t=6.040，P＜0.001）；其余兩組熒光素酶活性無顯著變化（t=0.243，P＞0.05）。

圖1 miR-130b-5p和IGF-1間的具有靶向結(jié)合位點(diǎn)Fig.1 Targeted binding site between miR-130b-5p and IGF-1

圖2 熒光素酶活性檢測(cè)Fig.2 Luciferase activity assay

2.2 miR-130b-5p及IGF-1表達(dá)水平檢測(cè)

如表2 所示，相較于對(duì)照組，HTR8∕SVneo 細(xì)胞中miR-130b-5p、IGF-1 蛋白及mRNA 表達(dá)水平在miR-NC 組中的差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）；相較于miR-NC 組，miR-130b-5pmimics組中miR-130b-5p 表達(dá)水平顯著增加，IGF-1 蛋白及mRNA表達(dá)水平顯著降低（P＜0.05；表2，圖3）。

圖3 HTR8/SVneo細(xì)胞中IGF-1蛋白表達(dá)情況Fig.3 Expression of IGF-1 protein in HTR8/SVneo cells

表2 miR-130b-5p及IGF-1表達(dá)水平檢測(cè)Table 2 Detection of expression levels of miR-130b-5p and IGF-1（n=5，）

表2 miR-130b-5p及IGF-1表達(dá)水平檢測(cè)Table 2 Detection of expression levels of miR-130b-5p and IGF-1（n=5，）

Compared with the miR-NC group，1）P＜0.05.IGF-1：insulin-like growth factor-1.

2.3 miR-130b-5p 對(duì)HTR8/SVneo細(xì)胞增殖的影響

相較于對(duì)照組，HTR8∕SVneo 細(xì)胞增殖抑制率、c-Myc 和CyclinD1 表達(dá)水平在miR-NC 組中的差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）；相較于miR-NC組，miR-130b-5p mimics 組中細(xì)胞增殖抑制率顯著增加，c-Myc 和CyclinD1 表達(dá)水平顯著降低（P＜0.05）；相較于miR-130b-5p mimics 組，HTR8∕SVneo 細(xì)胞增殖抑制率、c-Myc 和CyclinD1表達(dá)水平在miR-130b-5pmimics+pcDNA3.1 組中的差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）；相較于miR-130b-5pmimics+pcDNA3.1 組，miR-130b-5pmimics+pcDNA3.1-IGF-1 組中細(xì)胞增殖抑制率顯著降低，c-Myc 和CyclinD1 表達(dá)水平顯著增加（P＜0.05；表3，圖4）。

表3 miR-130b-5p對(duì)HTR8/SVneo細(xì)胞增殖的影響Table 3 The effect of miR-130b-5p on the proliferation of HTR8/SVneo cells（n=5，）

表3 miR-130b-5p對(duì)HTR8/SVneo細(xì)胞增殖的影響Table 3 The effect of miR-130b-5p on the proliferation of HTR8/SVneo cells（n=5，）

Compared with the miR-NC group，1）P＜0.05；Compared with the miR-130b-5p mimics+pcDNA3.1 group，2）P＜0.05.

圖4 miR-130b-5p對(duì)HTR8/SVneo細(xì)胞增殖相關(guān)蛋白的影響Fig.4 The effect of miR-130b-5p on the proliferation-related proteins of HTR8/SVneo cells

2.4 miR-130b-5p 對(duì)HTR8/SVneo細(xì)胞遷移的影響

相較于對(duì)照組，HTR8∕SVneo 細(xì)胞遷移距離在miR-NC 組的差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）；相較于miR-NC 組，miR-130b-5p mimics 組中細(xì)胞遷移距離顯著降低（P＜0.05）；相較于miR-130b-5p mimics 組，miR-130b-5pmimics+pcDNA3.1 組中HTR8∕SVneo 細(xì)胞遷移距離的差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）；相較于miR-130b-5pmimics+pcDNA3.1 組，miR-130b-5pmimics+pcDNA3.1-IGF-1 組中細(xì)胞遷移距離顯著增加（P＜0.05；圖5）。

圖5 miR-130b-5p對(duì)HTR8/SVneo細(xì)胞遷移的影響Fig.5 The effect of miR-130b-5p on the migration of HTR8/SVneo cells

2.5 miR-130b-5p 對(duì)HTR8/SVneo細(xì)胞侵襲的影響

如表4 所示，相較于對(duì)照組，HTR8∕SVneo 細(xì)胞侵襲細(xì)胞數(shù)、MMP9 和MMP2 表達(dá)水平在miR-NC組的差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）；相較于miR-NC組，miR-130b-5p mimics 組中細(xì)胞侵襲細(xì)胞數(shù)、MMP9和MMP2表達(dá)水平顯著降低（P＜0.05）；相較于miR-130b-5p mimics 組，miR-130b-5pmimics+pcDNA3.1組中HTR8∕SVneo細(xì)胞侵襲細(xì)胞數(shù)、MMP9 和MMP2 表達(dá)水平的差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）；相較于miR-130b-5pmimics+pcDNA3.1組，miR-130b-5pmimics+pcDNA3.1-IGF-1 組中細(xì)胞侵襲細(xì)胞數(shù)、MMP9 和MMP2 表達(dá)水平顯著增加（P＜0.05；圖6，圖7）。

圖6 miR-130b-5p對(duì)HTR8/SVneo細(xì)胞侵襲的影響Fig.6 The effect of miR-130b-5p on the invasion of HTR8/SVneo cells

圖7 miR-130b-5p對(duì)HTR8/SVneo細(xì)胞侵襲相關(guān)蛋白的影響Fig.7 Effects of miR-130b-5p on invasion-related proteins of HTR8/SVneo cells

表4 miR-130b-5p對(duì)HTR8/SVneo細(xì)胞侵襲的影響Table 4 The effect of miR-130b-5p on the invasion of HTR8/SVneo cells（n=5，）

表4 miR-130b-5p對(duì)HTR8/SVneo細(xì)胞侵襲的影響Table 4 The effect of miR-130b-5p on the invasion of HTR8/SVneo cells（n=5，）

Compared with the miR-NC group，1）P＜0.05；Compared with the miR-130b-5p mimics+pcDNA3.1 group，2）P＜0.05.MMP9：matrix metalloproteinase 9；MMP2：matrix metalloproteinase 2.

2.6 miR-130b-5p 對(duì)HTR8/SVneo細(xì)胞Ecadherin、Vimentin和N-cadherin蛋白表達(dá)的影響

如表5 所示，相較于對(duì)照組，HTR8∕SVneo 細(xì)胞中E-cadherin、Vimentin 和N-cadherin 表達(dá)水平在miR-NC 組的差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）；相較于miR-NC 組，miR-130b-5p mimics組中E-cadherin表達(dá)水平顯著增加，Vimentin 和N-cadherin 表達(dá)水平顯著降低（P＜0.05）；相較于miR-130b-5p mimics 組，miR-130b-5pmimics+pcDNA3.1 組中E-cadherin、Vimentin 和N-cadherin 表達(dá)水平的差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）；相較于miR-130b-5pmimics+pcDNA3.1 組，miR-130b-5pmimics+pcDNA3.1-IGF-1 組中E-cadherin 表達(dá)水平顯著降低，Vimentin 和N-cadherin表達(dá)水平顯著增加（P＜0.05；圖8）。

表5 miR-130b-5p對(duì)HTR8/SVneo細(xì)胞E-cadherin、Vimentin和N-cadherin蛋白表達(dá)的影響Table5 EffectsofmiR-130b-5pontheexpressionofE-cadherin，VimentinandN-cadherinproteinsinHTR8/SVneocells（n=5，）

表5 miR-130b-5p對(duì)HTR8/SVneo細(xì)胞E-cadherin、Vimentin和N-cadherin蛋白表達(dá)的影響Table5 EffectsofmiR-130b-5pontheexpressionofE-cadherin，VimentinandN-cadherinproteinsinHTR8/SVneocells（n=5，）

Compared with the miR-NC group，1）P＜0.05；Compared with the miR-130b-5p mimics+pcDNA3.1 group，2）P＜0.05.

圖8 miR-130b-5p對(duì)HTR8/SVneo細(xì)胞EMT相關(guān)蛋白的影響Fig.8 Effects of miR-130b-5p on EMT-related proteins in HTR8/SVneo cells

3 討論

FGR 是一種產(chǎn)科疾病，可導(dǎo)致胎兒生長(zhǎng)受損，增加圍產(chǎn)期死亡率［9-11］。絨毛膜滋養(yǎng)層細(xì)胞是胎盤的主要組成細(xì)胞之一，侵襲功能受到抑制會(huì)造成子宮螺旋動(dòng)脈重塑障礙、胎盤缺氧缺血的發(fā)生，從而導(dǎo)致FGR、先兆子癇和胎盤增生等妊娠并發(fā)癥的發(fā)生［3，12］。因此詳細(xì)了解絨毛膜滋養(yǎng)層細(xì)胞在FGR中的侵襲機(jī)制對(duì)疾病治療極其重要。

miRNA 作為高度保守的非編碼RNA，近幾年有研究發(fā)現(xiàn)其參與調(diào)控絨毛膜滋養(yǎng)層細(xì)胞的侵襲和遷移［13］。miR-130b-5p 參與多種癌癥的侵襲遷移過程，其在宮頸癌組織中表達(dá)異常降低，通過促進(jìn)ELK1表達(dá)來促進(jìn)癌細(xì)胞的增殖、侵襲和遷移［14］。而最近有研究表明miR-130b-3p 在妊娠期糖尿病胎盤滋養(yǎng)層細(xì)胞中表達(dá)異常增加，沉默其表達(dá)可保護(hù)細(xì)胞免受氧化應(yīng)激損傷［5］。MMP9、MMP2 由于可降解子宮內(nèi)膜主要成分Ⅳ型膠原而在HTR8∕SVneo 細(xì)胞侵襲子宮內(nèi)膜過程中具有重要作用［3］。人絨毛膜滋養(yǎng)層細(xì)胞經(jīng)過上皮間充質(zhì)轉(zhuǎn)化（Epithelial-Mesenchymal Transition，EMT）滲入母體蛻膜間質(zhì)和血管中，因此EMT 過程對(duì)絨毛膜滋養(yǎng)層細(xì)胞的侵襲功能十分重要［15］。本研究發(fā)現(xiàn)miR-130b-5p 過表達(dá)可顯著促進(jìn)HTR8∕SVneo 細(xì)胞增殖抑制率和E-cadherin 表達(dá)水平，降低c-Myc、CyclinD1表達(dá)水平、遷移距離、侵襲細(xì)胞數(shù)、MMP9、MMP2、Ncadherin、Vimentin 表達(dá)水平，該結(jié)果表明miR-130b-5p 過表達(dá)可顯著抑制HTR8∕SVneo 的增殖和遷移、侵襲能力。

研究發(fā)現(xiàn)在發(fā)育70 d 的豬仔肝臟中miR-130b-3p靶向促進(jìn)IGF-1表達(dá)［16］。本研究雙熒光素酶報(bào)告基因結(jié)果顯示，IGF-1是miR-130b-5p 的潛在靶基因；miR-130b-5p 過表達(dá)可顯著降低IGF-1表達(dá)水平，與前人研究結(jié)果相似。IGF-1 已被證明是滋養(yǎng)層細(xì)胞增殖和侵襲的重要調(diào)節(jié)劑，IGF-1 表達(dá)上調(diào)可促進(jìn)MMP-2 表達(dá)，以此促進(jìn)HTR-8∕SVneo 細(xì)胞的侵襲能力［17-18］。胎盤功能不全造成的宮內(nèi)生長(zhǎng)受限患者胎盤中由于胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白1（insulin-like growth factor-binding protein-1，IGFBP-1）過度磷酸化，導(dǎo)致IGF-1 表達(dá)水平顯著降低［19］。本研究發(fā)現(xiàn)miR-130b-5pmimics+pcDNA3.1-IGF-1 組對(duì)miR-130b-5p 所造成的細(xì)胞增殖、侵襲和遷移的抑制起到逆轉(zhuǎn)作用。提示，miR-130b-5p 過表達(dá)對(duì)HTR8∕SVneo 細(xì)胞的增殖、侵襲和遷移的抑制可能與其抑制IGF-1表達(dá)有關(guān)。

綜上所述，miR-130b-5p 過表達(dá)可能通過抑制IGF-1表達(dá)來抑制HTR8∕SVneo 細(xì)胞的增殖、侵襲和遷移。本研究不僅為FGR 的發(fā)生機(jī)制研究提供進(jìn)一步參考，還為其治療提供了新的潛在治療靶點(diǎn)。但在未來的研究中還需對(duì)miR-130b-5p 在FGR 中的下游調(diào)控機(jī)制進(jìn)行深入探究。