宋曉明

(黃陵縣漁政監(jiān)督管理站，陜西黃陵 727300)

克氏原螯蝦(Procambarusclarkii)又稱小龍蝦，原產(chǎn)于墨西哥北部及美國東南部[1]?？耸显r生長迅速、繁殖力較強(qiáng)、營養(yǎng)豐富、味道鮮美。隨著我國克氏原螯蝦養(yǎng)殖規(guī)模的壯大，目前對(duì)克氏原螯蝦的研究主要體現(xiàn)在養(yǎng)殖模式、繁殖技術(shù)、生物學(xué)特征及疾病等[2-3]?？耸显r養(yǎng)殖的快速發(fā)展使養(yǎng)殖方式由原先的粗放式轉(zhuǎn)變?yōu)榧s化，導(dǎo)致克氏原螯蝦的養(yǎng)殖密度增大，且投放的飼料過多，使養(yǎng)殖水體環(huán)境惡化，進(jìn)而影響克氏原螯蝦的健康生長，疾病發(fā)生率升高。對(duì)于以上問題可以從提高克氏原螯蝦機(jī)體免疫力方面來改善此問題。目前，在水產(chǎn)養(yǎng)殖中使用生物發(fā)酵飼料得到普遍認(rèn)可和推廣。生物發(fā)酵飼料是以動(dòng)植性蛋白原料為底物，在特定菌種的發(fā)酵下產(chǎn)生的一種新型飼料[4]。生物發(fā)酵飼料具有適口性好、飼料中抗?fàn)I養(yǎng)因子少、營養(yǎng)成分含量高等特點(diǎn)，應(yīng)用到動(dòng)物養(yǎng)殖生產(chǎn)中具有改善動(dòng)物腸道健康、提高機(jī)體免疫力、改善生長性能的優(yōu)勢。因此，該研究以克氏原螯蝦為受試對(duì)象，探討?zhàn)B殖中使用生物發(fā)酵飼料對(duì)其機(jī)體免疫水平的影響，為生物發(fā)酵飼料在克氏原螯蝦的健康養(yǎng)殖中的應(yīng)用提供理論數(shù)據(jù)支撐。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)飼料

該試驗(yàn)使用的生物發(fā)酵飼料和硬顆粒飼料均為市售產(chǎn)品。生物發(fā)酵飼料由玉米、小麥、豆粕等原料組成，使用釀酒酵母和乳桿菌發(fā)酵制成。生物發(fā)酵飼料和硬顆粒飼料的主要營養(yǎng)成分含量見表1。

表1 生物發(fā)酵飼料和硬顆粒飼料的主要營養(yǎng)成分含量

1.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

試驗(yàn)場地選擇生態(tài)環(huán)境相近的6口池塘，面積約為1hm2。試驗(yàn)開始前先對(duì)池塘進(jìn)行改造，主要種植輪葉黑藻，面積大概為池底面積的一半。試驗(yàn)組和對(duì)照組各3口池塘，每口池塘投放的克氏原螯蝦的密度為20kg/畝。預(yù)試驗(yàn)7d，使克氏原螯蝦適應(yīng)養(yǎng)殖環(huán)境。正式試驗(yàn)開始后，對(duì)照組克氏原螯蝦投喂硬顆粒飼料，試驗(yàn)組克氏原螯蝦投喂生物發(fā)酵飼料。每日投喂2次，分別為上午8:30和下午16:30?？耸显r養(yǎng)殖期間，需要定期觀察和檢測水質(zhì)，主要監(jiān)測氨氮、溶解氧、pH值、硫化氫等指標(biāo)。試驗(yàn)周期為60d。

1.3 檢測項(xiàng)目

試驗(yàn)結(jié)束后，每口池塘隨機(jī)選取20尾克氏原螯蝦進(jìn)行免疫相關(guān)指標(biāo)的檢測。采用肝素鈉抗凝管采集血液，經(jīng)4500r/mins離心10mins之后，取上層血清-20℃保存。將以上采完血液的克氏原螯蝦迅速解剖，挑取肝胰腺裝入無菌管中-80℃液氮中保存。

主要檢測血清中溶菌酶、總蛋白、酸性磷酸酶和堿性磷酸酶；肝胰臟中過氧化氫酶、超氧化物歧化酶及丙二醛等指標(biāo)。采用南京建成生物工程研究所的試劑盒進(jìn)行檢測，操作步驟嚴(yán)格參照試劑盒說明書。

1.4 數(shù)據(jù)處理

試驗(yàn)檢測的數(shù)據(jù)先試用Excel進(jìn)行簡單的整理，再試驗(yàn)SPSS24進(jìn)行單因子方差分析顯著性，LSD法進(jìn)行組間數(shù)據(jù)的理論比較，數(shù)據(jù)結(jié)果以“平均值±標(biāo)準(zhǔn)差”表示，P<0.05代表指標(biāo)數(shù)據(jù)具有顯著性差異。

2 結(jié)果

2.1 生物發(fā)酵飼料對(duì)克氏原螯蝦血清非特異性免疫指標(biāo)的影響

生物發(fā)酵飼料對(duì)克氏原螯蝦血清非特異性免疫指標(biāo)的影響見表2。由表2數(shù)據(jù)可知，克氏原螯蝦飼喂生物發(fā)酵飼料可以提高機(jī)體的非特異性免疫功能。生物發(fā)酵飼料組的克氏原螯蝦血清中溶菌酶、酸性磷酸酶、堿性磷酸酶的活性均顯著高于顆粒料飼料組，分別顯著提高了51.40%、38.08%、54.15%(P<0.05)。

表2 生物發(fā)酵飼料對(duì)克氏原螯蝦血清

2.2 生物發(fā)酵飼料對(duì)克氏原螯蝦肝胰臟抗氧化指標(biāo)的影響

生物發(fā)酵飼料對(duì)克氏原螯蝦肝胰臟抗氧化指標(biāo)的影響見表3。由表3數(shù)據(jù)可知，克氏原螯蝦飼喂生物發(fā)酵飼料可以提高機(jī)體的抗氧化功能。生物發(fā)酵飼料組的克氏原螯蝦肝胰臟中過氧化氫酶、超氧化物歧化酶活性均顯著高于顆粒料飼料組，丙二醛含量顯著低于顆粒料飼料組，過氧化氫酶、超氧化物歧化酶活性分別顯著提高了47.80%、28.61%(P<0.05)，丙二醛含量降低了41.98%(P<0.05)。

表3 生物發(fā)酵飼料對(duì)克氏原螯蝦肝胰臟抗氧化指標(biāo)的影響

3 討論與分析

生物發(fā)酵飼料中含有豐富的營養(yǎng)物質(zhì)，如維生素、氨基酸、小肽等，且富含益生菌可以通過調(diào)節(jié)腸道菌群結(jié)構(gòu)，改善腸道健康，提高機(jī)體的抗病力、免疫力。該試驗(yàn)中，生物發(fā)酵飼料組的克氏原螯蝦血清中溶菌酶、酸性磷酸酶、堿性磷酸酶的活性分別比顆粒料飼料組顯著提高了51.40%、38.08%、54.15%；生物發(fā)酵飼料組的克氏原螯蝦肝胰臟中過氧化氫酶、超氧化物歧化酶活性分別比顆粒料飼料顯著提高了47.80%、28.61%(P<0.05)，丙二醛含量比顆粒料飼料顯著降低了41.98%，表明克氏原螯蝦飼喂生物發(fā)酵飼料可以有效改善機(jī)體的免疫功能及抗氧化功能。郭坤等研究發(fā)現(xiàn)，給小龍蝦飼喂生物發(fā)酵飼料可以有效提高小龍蝦的生長性能，增強(qiáng)機(jī)體的免疫力及抗氧化功能，改善肌肉品質(zhì)[5]，與該試驗(yàn)研究結(jié)果類似。在克氏原螯蝦養(yǎng)殖生產(chǎn)中使用生物發(fā)酵飼料是可行的，不僅可以改善克氏原螯蝦的各項(xiàng)機(jī)能，也可以提高養(yǎng)殖的效益。

4 結(jié)論

試驗(yàn)研究表明，在克氏原螯蝦養(yǎng)殖生產(chǎn)中使用生物發(fā)酵飼料可以顯著提高機(jī)體非特異性免疫指標(biāo)及機(jī)體的抗氧化功能。