周曉蘭，鄒福賢，楊真真，陳 紅

（1.福建中醫(yī)藥大學(xué)附屬泉州市正骨醫(yī)院，福建 泉州 362000；2.福建中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院，福建 福州 350122）

芍甘濃縮丸處方來(lái)源于福建中醫(yī)藥大學(xué)附屬泉州市正骨醫(yī)院臨床上常用的特色院內(nèi)制劑芍甘散（閩藥制備字：Z20200045000），具有柔肝祛濕、散瘀止痛的功效，臨床上治療跌仆、濕熱所致筋骨酸痛、關(guān)節(jié)僵硬等癥，效果顯著［1-3］。但根據(jù)臨床反饋，芍甘散不溶于水，服用困難，且口感較苦，患者依從性較差，故擬將其劑型改為濃縮丸。濃縮丸具有服用劑量小、便于攜帶、利于貯藏、不易霉變等特點(diǎn)，既符合中醫(yī)用藥特點(diǎn)，又適合機(jī)械化生產(chǎn)，且制劑工藝簡(jiǎn)單，生產(chǎn)效率高［4］。本研究就芍甘濃縮丸處方進(jìn)行分析，采用正交試驗(yàn)法優(yōu)選水提工藝，并以濃縮丸的外觀成丸情況、溶散時(shí)限、水分、重量差異等作為指標(biāo)，通過(guò)單因素考察，確定芍甘濃縮丸最佳成型工藝，為中醫(yī)藥劑型改良提供科學(xué)依據(jù)和解決思路。

1 材料與儀器

1.1 材料 生白芍（批號(hào)：201201）、甘草片（批號(hào)：201101）、薏苡仁（批號(hào)：201201）、醋乳香（批號(hào)：200901）、醋沒(méi)藥（批號(hào)：200203）均購(gòu)自安徽盛安堂藥業(yè)有限公司，經(jīng)福建中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院中藥鑒定教研室黃澤豪教授鑒定，符合2020 年版《中華人民共和國(guó)藥典：一部》［5］相關(guān)要求。

1.2 儀器 YP20002 電子天平（上海佑科儀器儀表有限公司）；LG-02 粉碎機(jī)（浙江瑞安市百信藥機(jī)器械廠）；LQ-A3002 電子天平（深圳市飛亞衡器有限公司）；FA1204B 分析天平（上海菁海儀器有限公司）；ZB-1E 智能崩解儀（天津市天大天發(fā)科技有限公司）；DHG-9070A 電熱鼓風(fēng)干燥箱（上海一恒科學(xué)儀器有限公司）；PTHW 電熱套（鞏義市予華儀器有限責(zé)任公司）。

2 方法與結(jié)果

2.1 提取方法考察

2.1.1 醋乳香、醋沒(méi)藥揮發(fā)油提取工藝 參考張文州等［6］提取醋乳香、醋沒(méi)藥揮發(fā)油的方法，分別稱取醋乳香、醋沒(méi)藥各50 g，粉碎成粗粉，加入8 倍水量，浸泡10 h，煎煮6 h 提取揮發(fā)油。平行操作3 次，計(jì)算每100 g 藥材揮發(fā)油得率，結(jié)果見(jiàn)表1。結(jié)果說(shuō)明工藝較為穩(wěn)定，可作為醋乳香、醋沒(méi)藥揮發(fā)油提取工藝。

表1 醋乳香、醋沒(méi)藥揮發(fā)油得率

2.1.2 正交試驗(yàn)優(yōu)選水提工藝

2.1.2.1 浸出物得率的測(cè)定 按2020 年版《中華人民共和國(guó)藥典：四部》［7］232中“通則2201 水溶性浸出物測(cè)定法”中熱浸法，精密量取濾液100 mL，置已干燥至恒重的蒸發(fā)皿中，在水浴上蒸干后，于105 ℃干燥3 h，置干燥器中冷卻30 min，迅速精密稱定重量，計(jì)算浸出物得率。

2.1.2.2 水提工藝 醋乳香、醋沒(méi)藥經(jīng)揮發(fā)油提取后的藥渣與白芍、甘草混合，以水為溶劑，以浸出物得率為評(píng)價(jià)指標(biāo)，通過(guò)正交設(shè)計(jì)試驗(yàn)，考察提取時(shí)間（A）、提取次數(shù)（B）、提取水量（C）對(duì)提取工藝的影響，得出最佳水提工藝。正交設(shè)計(jì)因素水平見(jiàn)表2，正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)及結(jié)果見(jiàn)表3，各因素方差分析結(jié)果見(jiàn)表4。

表2 正交試驗(yàn)因素水平表

表3 正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)及結(jié)果

表4 以浸出物得率為指標(biāo)的方差分析

由直觀分析法可知：影響芍甘濃縮丸水提工藝效果的因素依次為B＞A＞C，即提取次數(shù)＞提取時(shí)間＞提取水量。而提取次數(shù)、提取時(shí)間對(duì)提取工藝有非常顯著性影響，提取水量影響不顯著。因此，確定最佳工藝條件為A3B3C2，即提取時(shí)間2 h，提取3 次，提取水量為藥材量的8 倍。

2.1.2.3 提取工藝驗(yàn)證 按得到的優(yōu)選提取方法A3B3C2分別制備3 批樣品，測(cè)得浸出物得率見(jiàn)表5。結(jié)果與正交試驗(yàn)結(jié)果相近，且浸出物得率RSD 值為1.44%，說(shuō)明該工藝穩(wěn)定、可行。

表5 3 批樣品驗(yàn)證試驗(yàn)結(jié)果

2.2 成型工藝考察

2.2.1 制備方法 處方中醋乳香、醋沒(méi)藥采用8 倍加水量，浸泡10 h，煎煮6 h 提取揮發(fā)油，備用；其藥渣與白芍、甘草加水煎煮3 次，每次2 h，合并煎液，濾過(guò)，濾液濃縮成稠膏；薏苡仁粉碎成細(xì)粉。將上述揮發(fā)油、稠膏、細(xì)粉混勻，采用塑制法制丸［8］，干燥，即得。

2.2.2 稠膏相對(duì)密度的選擇 按“2.2.1”項(xiàng)下制備方法，分別制成相對(duì)密度（60 ℃測(cè)定）為1.23、1.24、1.25、1.26、1.27、1.28、1.29、1.30 的稠膏，與薏苡仁細(xì)粉（過(guò)100 目篩）、揮發(fā)油混合制軟材。軟材的性狀結(jié)果見(jiàn)表6。

表6 不同相對(duì)密度稠膏對(duì)軟材性狀的影響

結(jié)果表明稠膏相對(duì)密度在1.27～1.28，軟材性狀最佳，因此，將稠膏相對(duì)密度定為1.27～1.28。

2.2.3 藥粉細(xì)度的選擇 分別取過(guò)65、80、100、120 目的薏苡仁細(xì)粉，按“2.2.1”制備方法制備供試品，60 ℃測(cè)定稠膏相對(duì)密度為1.28，50 ℃烘干48 h，考察不同藥粉細(xì)度對(duì)成丸情況與溶散時(shí)限的影響。結(jié)果見(jiàn)表7。

表7 藥粉細(xì)度對(duì)綜合評(píng)分的影響（±s） 分

表7 藥粉細(xì)度對(duì)綜合評(píng)分的影響（±s） 分

藥粉細(xì)度65目80目100目120目外觀成丸評(píng)分32.05±6.45 38.46±2.96 47.44±2.56 50.00±2.56溶散時(shí)限評(píng)分50.00±1.72 44.40±0.79 39.94±1.29 37.20±0.95綜合評(píng)分82.05 82.86 87.38 87.20

2.2.3.1 外觀成丸評(píng)分 滿分為100 分，評(píng)價(jià)藥丸色澤和圓整度，每個(gè)評(píng)價(jià)項(xiàng)目分好、較好、一般、較差、差、極差6 個(gè)等級(jí)，分別計(jì)10、8、6、4、2、0 分［10］。收集4 人評(píng)分結(jié)果，計(jì)算每組外觀總得分。以外觀總得分最高的一組計(jì)為100 分，然后按如下公式計(jì)算外觀評(píng)分，此項(xiàng)權(quán)重50%。

2.2.3.2 溶散時(shí)限評(píng)分 按照2020 年版《中華人民共和國(guó)藥典：四部》［7］10-11溶散時(shí)限方法測(cè)定溶散時(shí)限，以測(cè)得最小值的一組記為100 分，然后按如下公式計(jì)算溶散時(shí)限評(píng)分，此項(xiàng)權(quán)重50%。

2.2.3.3 綜合評(píng)分 以上2項(xiàng)求和，即綜合評(píng)分。綜合評(píng)分越高，表明工藝越優(yōu)。

結(jié)果表明：隨著藥粉細(xì)度的增大，丸粒表面越細(xì)膩，光澤度越好，而溶散則相對(duì)較慢。參考綜合評(píng)分，將最佳藥粉細(xì)度定為100 目。

2.2.4 烘干時(shí)間的選擇 按“2.2.1”項(xiàng)下制備方法，平行制備2 份樣品，60 ℃測(cè)定稠膏相對(duì)密度為1.28，與薏苡仁細(xì)粉（過(guò)100 目篩）、揮發(fā)油混合制丸，50 ℃烘干，分別考察0、12、24、36、48、60、72、84、96 h不同烘干時(shí)間對(duì)水分［7］114-115與溶散時(shí)限［7］10-11的影響。結(jié)果見(jiàn)表8 及圖1。

圖1 烘干時(shí)間與水分及溶散時(shí)限的相關(guān)曲線

表8 不同烘干時(shí)間對(duì)藥丸水分和溶散時(shí)限的影響

結(jié)果表明：烘干時(shí)間72、84、96 h 的水分均能符合2020 年版《中華人民共和國(guó)藥典：四部》［7］10-11規(guī)定的濃縮水丸不得過(guò)9.0%的要求，同時(shí)溶散時(shí)限也均能控制在2 h 內(nèi)?？紤]烘干時(shí)間在72、84、96 h的溶散時(shí)限無(wú)明顯差異，均在38～42 min 內(nèi)，故選擇含水量?jī)?yōu)者為最佳工藝，最終確定50 ℃烘干96 h為最佳烘干工藝。

2.2.5 烘干工藝對(duì)揮發(fā)油影響考察 按“2.2.1”項(xiàng)下制備方法，制成相對(duì)密度（60 ℃測(cè)定）為1.28 的稠膏，與薏苡仁細(xì)粉（過(guò)100 目篩）混合制軟材，按重量平均分成3 份；用移液管精密量取3 份同等體積的揮發(fā)油分別加入軟材中混合制丸，做好標(biāo)記；50 ℃烘干96 h 后，每份分別加入8 倍量水，加熱回流直至揮發(fā)油不再增加為止，用移液管讀取揮發(fā)油體積，計(jì)算回收率。結(jié)果平均回收率為98.69%，RSD為0.55%，表明制丸烘干工藝對(duì)揮發(fā)油的影響小，此法可行。結(jié)果見(jiàn)表9。

表9 烘干工藝對(duì)揮發(fā)油的影響

2.2.6 成型工藝驗(yàn)證試驗(yàn) 按得到的最佳成型工藝，制備3 批樣品，按照2020 年版《中華人民共和國(guó)藥典：四部》［7］10-11“通則0108”項(xiàng)下進(jìn)行水分測(cè)定、溶散時(shí)限、重量差異的考察，結(jié)果3 次實(shí)驗(yàn)所得丸粒圓整光滑，色澤、大小均勻，水分、溶散時(shí)限均符合規(guī)定，且RSD＜5%，結(jié)果見(jiàn)表10。表10 表明選擇藥粉細(xì)度過(guò)100 目篩，稠膏相對(duì)密度1.27～1.28，50 ℃烘干96 h制得的濃縮丸效果合理、穩(wěn)定、重現(xiàn)性好。

表10 3 批樣品的質(zhì)量評(píng)價(jià)結(jié)果

3 討 論

濃縮丸的制備通常對(duì)黏性大、體積大、富有纖維性的中藥提取制膏，對(duì)貴重、體積小、粉性強(qiáng)的中藥粉碎成細(xì)粉，因此，本方選擇粉性強(qiáng)的薏苡仁作為粉藥。另外，因濃縮丸中加入了醋乳香、醋沒(méi)藥揮發(fā)油，考慮將烘干溫度控制在50 ℃，以減少揮發(fā)油的損失［10-11］。并通過(guò)烘干試驗(yàn)，考察烘干工藝對(duì)醋乳香、醋沒(méi)藥揮發(fā)油的影響，實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)烘干工藝對(duì)醋乳香、醋沒(méi)藥揮發(fā)油含量的影響極小。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明：以醋乳香、醋沒(méi)藥提取揮發(fā)油后的藥渣與白芍、甘草共提制清膏，薏苡仁入粉制丸，軟材適中，可制成丸，因此未考慮添加黏合劑，以減少服用劑量。實(shí)驗(yàn)過(guò)程中發(fā)現(xiàn)藥粉的細(xì)度與成丸情況及溶散時(shí)限相關(guān)，隨著藥粉細(xì)度的增大，丸粒表面越細(xì)膩，光澤度越好，而溶散則相對(duì)較慢，而藥粉細(xì)度對(duì)水分的影響不明顯［12-14］。另外，實(shí)驗(yàn)考察的稠膏相對(duì)密度、藥粉細(xì)度與烘干時(shí)間這3 個(gè)因素之間交互關(guān)系不明顯，故未再進(jìn)行正交試驗(yàn)。在濃縮丸的制備過(guò)程中，發(fā)現(xiàn)稠膏相對(duì)密度是制丸中成型的關(guān)鍵工藝。相對(duì)密度過(guò)低，無(wú)法成型；相對(duì)密度過(guò)高，和出的軟材容易產(chǎn)生粘連，且不容易混勻。經(jīng)過(guò)反復(fù)多次的實(shí)驗(yàn)，確定稠膏相對(duì)密度為1.27～1.28，測(cè)量時(shí)選擇的溫度為60 ℃，此時(shí)膏體流動(dòng)性適中，測(cè)量的相對(duì)密度較為準(zhǔn)確、穩(wěn)定。

本研究成型工藝驗(yàn)證試驗(yàn)中，質(zhì)量評(píng)價(jià)指標(biāo)選擇水分、溶散時(shí)限和重量差異，均是2020 年版《中華人民共和國(guó)藥典：四部》［7］10-11“通則0108”項(xiàng)下規(guī)定的內(nèi)容，后期會(huì)進(jìn)一步深入研究制定芍甘濃縮丸的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，確保芍甘濃縮丸質(zhì)量均一、安全可靠。