魏丹丹, 王昌梅,2, 劉健峰,2,3, 趙興玲,2, 吳 凱,2,梁承月, 楊 斌, 尹 芳,2,3, 張無(wú)敵,2,3

(1. 云南師范大學(xué) 能源與環(huán)境科學(xué)學(xué)院, 云南 昆明 650500； 2. 吉林東晟生物質(zhì)能工程研究院, 吉林 通化134118；3. 玉溪市江川寶譽(yù)環(huán)保有限公司, 云南 玉溪 652600)

近些年來(lái),隨著我國(guó)食用菌產(chǎn)業(yè)的快速發(fā)展,食用菌已經(jīng)成為我國(guó)第五大農(nóng)作物,年產(chǎn)量已經(jīng)超過300 萬(wàn)t[1].由于食用菌栽培規(guī)模的不斷擴(kuò)大,每年產(chǎn)生了大量的廢棄食用菌菌渣,菌渣是指栽培食用菌后的培養(yǎng)料,又稱菌糠、下腳料等.目前為止,菌渣的利用問題一直沒有得到解決,如果不能及時(shí)有效地處理菌渣,不僅會(huì)給食用菌的生產(chǎn)發(fā)展帶來(lái)極大危害,還會(huì)對(duì)環(huán)境造成污染.因此,如何高效、環(huán)保、合理地處理菌渣是當(dāng)前農(nóng)業(yè)、環(huán)保等學(xué)科研究的重點(diǎn)課題.

菌渣中具有豐富的有機(jī)物和營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),如蛋白質(zhì)、氨基酸、菌類、多糖及Fe、Ca、Zn、Mg等微量元素和維生素[2],部分有機(jī)物質(zhì)甚至高于原生培養(yǎng)料.由于菌渣自身的這些性質(zhì),對(duì)菌渣的應(yīng)用也逐步多樣化,主要有二次菇的種植研究,如杜國(guó)防等[3]利用金針菇菌糠栽培平菇、王繼磊等[4]將杏鮑菇菌渣作為發(fā)酵料栽培平菇,都很大程度上使菌渣廢料得到充分利用.另外,菌渣還可作為有機(jī)肥、基質(zhì)、養(yǎng)殖墊料等,而且都具有良好的效果[5],是循環(huán)型農(nóng)業(yè)發(fā)展模式中不可或缺的一環(huán)[6].

沼氣工程在節(jié)能減排、農(nóng)村環(huán)境污染治理等方面也占據(jù)重要的地位,但是隨著農(nóng)村生產(chǎn)、生活方式的轉(zhuǎn)變以及區(qū)域性經(jīng)濟(jì)、季節(jié)性條件等出現(xiàn)了厭氧消化原料不足和發(fā)酵產(chǎn)氣不穩(wěn)定的現(xiàn)象[7],將食用菌菌渣作為沼氣發(fā)酵原料,不僅可以一定程度上解決厭氧消化原料供應(yīng)不足的問題,還可以改善大量菌渣不合理處理造成的資源浪費(fèi)和環(huán)境污染.

厭氧消化適合處理有機(jī)質(zhì)含量高的底物,菌渣中的蛋白質(zhì)、糖類、脂肪、纖維素和熱值等相比其他底物具有較高的利用價(jià)值.因此,本文在探究以平菇菌渣為發(fā)酵原料進(jìn)行沼氣發(fā)酵產(chǎn)氣潛力的同時(shí),對(duì)整個(gè)發(fā)酵過程中平菇菌渣有機(jī)質(zhì)的變化進(jìn)行對(duì)比分析,探索的相關(guān)沼氣發(fā)酵參數(shù)不僅對(duì)菌渣沼氣工程的運(yùn)行具有指導(dǎo)意義,也為能源化利用菌渣,實(shí)現(xiàn)對(duì)菌渣的減量化、無(wú)害化、資源化處理提供數(shù)據(jù)支持和理論研究基礎(chǔ).

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料1) 發(fā)酵原料為吉林省通化市平菇種植基地提供.

2) 接種物為實(shí)驗(yàn)室長(zhǎng)期馴化的厭氧活性污泥.試驗(yàn)材料的各項(xiàng)基本參數(shù)見表1.

表 1 原料及接種物的基本特性

1.2 試驗(yàn)裝置試驗(yàn)裝置為實(shí)驗(yàn)室自制的容積為500 mL的批量式發(fā)酵裝置.主要由恒溫裝置、發(fā)酵瓶、集氣瓶和計(jì)量瓶組成.發(fā)酵溫度由恒溫水浴鍋控制,發(fā)酵瓶中產(chǎn)生的沼氣通過導(dǎo)氣管進(jìn)入集氣瓶中,隨后集氣瓶?jī)?nèi)的水通過導(dǎo)水管排放到計(jì)量瓶?jī)?nèi),產(chǎn)生的沼氣量就是排放到計(jì)量瓶中的水量、厭氧消化裝置示意圖如圖1所示.

1.3 試驗(yàn)方法

1.3.1試驗(yàn)設(shè)計(jì) 設(shè)計(jì)2個(gè)處理對(duì)菌渣進(jìn)行厭氧消化試驗(yàn),分別為菌渣組和對(duì)照組,每組設(shè)置3個(gè)平行.采用總發(fā)酵體積為400 mL的批量式發(fā)酵裝置,接種物質(zhì)量分?jǐn)?shù)為30%,一次性投料,運(yùn)轉(zhuǎn)周期內(nèi)不添加原料.試驗(yàn)啟動(dòng)后在發(fā)酵溫度為(35±1) ℃

1-電熱恒溫水浴鍋；2-廣口發(fā)酵瓶；3-橡膠塞；4-玻璃管；5-導(dǎo)氣管；6-取氣口；7-氣柜;8-U形頭；9-底座；10-底蓋；11-集氣瓶；12-通氣管

下運(yùn)行36 d,直至停止產(chǎn)氣.發(fā)酵料液的原料質(zhì)量和接種物量配比如表2所示.

表 2 發(fā)酵料液的原料質(zhì)量和接種物量

1.3.2測(cè)定項(xiàng)目及方法 1) 產(chǎn)氣量：排水集氣法收集沼氣,每天固定時(shí)間記錄計(jì)量瓶中的水量.

2) 總固體含量(TS)[8]：將樣品在(105±5) ℃下烘至恒重后進(jìn)行計(jì)算，公式為

TS

3) 揮發(fā)性固體含量(VS)[8]：將TS測(cè)定的總固體的恒重樣品置于(550±20) ℃的條件下灼燒至恒重,得到灰分質(zhì)量,進(jìn)行計(jì)算，公式為

VS

4) 發(fā)酵物料的酸堿度(pH)：用5.7～8.5精密pH試紙測(cè)定.

5) 甲烷含量：氣相色譜儀(GC9700II)測(cè)定.

6) 木質(zhì)纖維素含量：木質(zhì)纖維素的測(cè)定主要包括中性洗滌劑纖維(NDF)、酸性洗滌劑纖維(ADF)和酸性洗滌劑木質(zhì)素(ADL)3個(gè)部分,使用F800粗纖維測(cè)試儀進(jìn)行測(cè)量和計(jì)算[9].

7) 粗脂肪含量：采用索氏提取法進(jìn)行測(cè)定.

8) 粗蛋白含量：先用全自動(dòng)凱氏定氮儀對(duì)樣品中的總氮進(jìn)行測(cè)定,得到總氮的含量后乘于6.25.

9) 總糖：碘顯色法測(cè)定.

10) 還原糖：采用3,5-二硝基水楊酸(DNS)比色法進(jìn)行測(cè)定.

11) 低聚糖：采用3,5-二硝基水楊酸(DNS)比色法進(jìn)行測(cè)定.

12) 淀粉[10]：淀粉質(zhì)量分?jǐn)?shù)(mg/g)=總糖質(zhì)量分?jǐn)?shù)(mg/g)-低聚糖質(zhì)量分?jǐn)?shù)(mg/g)-還原糖質(zhì)量分?jǐn)?shù)(mg/g).

1.3.3數(shù)據(jù)分析 1) 累積產(chǎn)氣量：各試驗(yàn)組累積產(chǎn)氣量-對(duì)照組累積產(chǎn)氣量.

2) TS產(chǎn)氣率=(總累積產(chǎn)氣量-對(duì)照組累積產(chǎn)氣量)/(W×TS),其中,W為原料質(zhì)量(g),TS為原料總固體含量(%).

3) VS產(chǎn)氣率=TS產(chǎn)氣率/VS,其中VS為揮發(fā)性固體含量(%).

4) 原料產(chǎn)氣率=總產(chǎn)氣量/原料質(zhì)量,其中,總產(chǎn)氣量(mL),原料質(zhì)量(g).

西方國(guó)家企業(yè)早已將財(cái)務(wù)管理提高到戰(zhàn)略地位。同時(shí)，他們還開發(fā)了平衡計(jì)分卡、戰(zhàn)略地圖等輔助財(cái)務(wù)分析工具。雖然近年來(lái)，我國(guó)經(jīng)濟(jì)的快速發(fā)展，無(wú)論是管理能力和管理要求都有了很大的提高，我國(guó)的企業(yè)也采用了平衡計(jì)分卡的財(cái)務(wù)分析工具不斷提升內(nèi)部管理水平和管理效率，逐步實(shí)現(xiàn)精細(xì)化管理模式。但大多數(shù)企業(yè)仍然停留在基層財(cái)務(wù)管理，以企業(yè)內(nèi)部業(yè)務(wù)為中心，整體管理水平還比較低。在“互聯(lián)網(wǎng)+”發(fā)展背景下，社會(huì)經(jīng)濟(jì)呈現(xiàn)信息的復(fù)雜局而，因此，企業(yè)需要不斷加強(qiáng)財(cái)務(wù)理念的組織創(chuàng)新和管理。

2 結(jié)果與分析

2.1 日產(chǎn)氣量的變化分析平菇菌渣厭氧消化的日產(chǎn)氣結(jié)果如圖2所示.試驗(yàn)啟動(dòng)后,每天定時(shí)記錄產(chǎn)氣量,本次試驗(yàn)一共運(yùn)行了36 d.

圖2 日產(chǎn)氣量曲線

從圖2可知,試驗(yàn)啟動(dòng)較快,隨著產(chǎn)氣過程的進(jìn)行,日產(chǎn)氣量在第3天達(dá)到了整個(gè)發(fā)酵周期的最高峰,為222 mL.

在第1天至第6天,產(chǎn)氣量均在100 mL以上;分析認(rèn)為試驗(yàn)初期,產(chǎn)甲烷菌利用發(fā)酵液中的小分子物質(zhì)產(chǎn)氣[11].

第7天至第17天,產(chǎn)氣量上下波動(dòng)不大.

第18天在水解酸化菌的作用下,平菇菌渣作為發(fā)酵底物繼續(xù)被降解利用,出現(xiàn)了第2個(gè)產(chǎn)氣高峰,但是相比第1個(gè)產(chǎn)氣高峰下降了102 mL;主要原因是底物中有機(jī)酸含量的升高會(huì)不同程度的抑制產(chǎn)氣量,導(dǎo)致2個(gè)產(chǎn)氣峰值存在差異,并對(duì)產(chǎn)氣結(jié)果造成影響.

第21天產(chǎn)氣量急劇下降,下降到12 mL,出現(xiàn)上述現(xiàn)象可能是產(chǎn)甲烷階段中,產(chǎn)甲烷菌不能將發(fā)酵液中的有機(jī)酸完全利用,導(dǎo)致體系中有機(jī)酸含量過高,pH值下降,pH的波動(dòng)對(duì)厭氧消化體系中發(fā)酵液產(chǎn)氣具有抑制作用,是影響產(chǎn)氣量的主要因素之一[12].

在發(fā)酵后期,隨著平菇菌渣原料的消耗和厭氧體系的穩(wěn)定,日產(chǎn)氣量在上下波動(dòng)中緩慢下降,直至試驗(yàn)結(jié)束.

從整個(gè)厭氧消化過程的產(chǎn)氣規(guī)律來(lái)看,菌渣在發(fā)酵的中前期表現(xiàn)出較高的日產(chǎn)氣量,產(chǎn)氣盛期為18 d,后陸續(xù)進(jìn)入穩(wěn)定發(fā)酵期,發(fā)酵時(shí)間為第18～36天,隨后系統(tǒng)發(fā)酵結(jié)束.

2.2 累積產(chǎn)氣量的變化分析累積產(chǎn)氣量是指發(fā)酵系統(tǒng)在發(fā)酵周期內(nèi)日產(chǎn)氣量的總和.根據(jù)日產(chǎn)氣量數(shù)據(jù)計(jì)算出實(shí)驗(yàn)組36 d的累積產(chǎn)氣量為2 784 mL,如圖3所示.

圖3 累積產(chǎn)氣量曲線圖

可以看出,隨著發(fā)酵天數(shù)的增加,累積產(chǎn)氣量呈現(xiàn)出穩(wěn)定上升后趨于平緩的趨勢(shì),說(shuō)明整個(gè)厭氧消化過程處于正常進(jìn)行.在發(fā)酵前期,實(shí)驗(yàn)組的產(chǎn)氣速率較高,可能是因?yàn)樵囼?yàn)初期,大量糖類、纖維素、脂肪等物質(zhì)被分解,微生物代謝速率加快,水解酸化階段的氣體產(chǎn)量較高,導(dǎo)致發(fā)酵前期沼氣的累積產(chǎn)氣量快速增加[13].厭氧發(fā)酵后期,主要依賴發(fā)酵料液的產(chǎn)甲烷菌進(jìn)行產(chǎn)氣量的累積[14],但是發(fā)酵過程中出現(xiàn)了揮發(fā)性有機(jī)酸(VFA)的積累,導(dǎo)致產(chǎn)甲烷菌的活性降低,使得實(shí)驗(yàn)組的累積產(chǎn)氣量在27 d后產(chǎn)氣速率下降.批量式厭氧消化產(chǎn)生的累積產(chǎn)氣量達(dá)到80%,累積產(chǎn)氣量所需要的時(shí)間為發(fā)酵時(shí)間[15],本試驗(yàn)整個(gè)發(fā)酵周期為36 d,通過計(jì)算得出累積產(chǎn)氣量在前24 d,產(chǎn)氣速率就達(dá)到了81%,即累積產(chǎn)氣量達(dá)到總產(chǎn)氣量的81%,說(shuō)明發(fā)酵體系中主要有機(jī)質(zhì)已經(jīng)被微生物分解利用,為了提高試驗(yàn)效率,后續(xù)菌渣厭氧消化試驗(yàn)發(fā)酵時(shí)間可以調(diào)整為24 d.

2.3 甲烷含量的變化分析在厭氧消化系統(tǒng)運(yùn)行期間,每4 d定期測(cè)量其中產(chǎn)沼氣的甲烷質(zhì)量分?jǐn)?shù),實(shí)驗(yàn)組甲烷含量隨著時(shí)間變化的曲線如圖4所示.

圖4 甲烷含量的變化曲線圖

可以看出,試驗(yàn)進(jìn)行的第2天,甲烷含量較低,隨著消化底物被微生物的分解,甲烷含量迅速上升,在第6天達(dá)到52%,隨后甲烷含量緩慢上升至第18天達(dá)到64%,此時(shí)厭氧消化過程中的甲烷化反應(yīng)占優(yōu)勢(shì).產(chǎn)氣中甲烷的質(zhì)量分?jǐn)?shù)用來(lái)判斷整個(gè)厭氧消化過程中占優(yōu)勢(shì)的是酸化反應(yīng)還是甲烷化反應(yīng),當(dāng)甲烷在所產(chǎn)氣體中的含量高于或者等于50%時(shí),甲烷化反應(yīng)占優(yōu)勢(shì)[16].在厭氧消化周期中,試驗(yàn)組在第30天甲烷質(zhì)量分?jǐn)?shù)為66%以上,達(dá)到甲烷含量最大值,可能因?yàn)榫N植過平菇,其發(fā)酵原料有利于甲烷菌利用,從而導(dǎo)致甲烷含量的上升.在厭氧消化后期,雖然甲烷含量出現(xiàn)了小幅度上下波動(dòng),但均達(dá)到65%以上.實(shí)驗(yàn)組日產(chǎn)沼氣的平均甲烷質(zhì)量分?jǐn)?shù)為58.63%,說(shuō)明在此試驗(yàn)條件下平菇菌渣所產(chǎn)沼氣可以投入實(shí)際工程應(yīng)用.

2.4 與其他批量式厭氧消化處理菌渣的研究結(jié)果進(jìn)行對(duì)比分析通過原料的質(zhì)量、累積產(chǎn)氣量、總固體含量和甲烷含量,計(jì)算出實(shí)驗(yàn)組的累積產(chǎn)氣量、TS產(chǎn)氣率和平均甲烷含量對(duì)平菇菌渣的厭氧消化產(chǎn)沼氣潛力進(jìn)行分析,并且將本實(shí)驗(yàn)組與不同學(xué)者對(duì)不同食用菌菌渣的厭氧消化結(jié)果進(jìn)行了對(duì)比,見表3.可以看出,同為食用菌菌渣,不同菌渣的產(chǎn)氣率相差明顯,其中平菇菌渣的產(chǎn)氣潛力和產(chǎn)甲烷潛力要高于其他食用菌菌渣,而榆黃蘑菌渣的原料產(chǎn)氣率只有72 mL/g,相比其他食用菌菌渣,其不適宜作為厭氧消化原料進(jìn)行厭氧消化.探究其原因:一方面可能受菌渣原料的影響,食用菌菌渣在栽培食用菌時(shí),其有機(jī)質(zhì)和營(yíng)養(yǎng)成分被食用菌吸收利用,能被菌渣利用的有機(jī)物質(zhì)少之又少[17];另一方面可能是受食用菌種類的影響,具體原因和機(jī)制尚需做進(jìn)一步的探討.

表 3 產(chǎn)氣潛力對(duì)比分析

2.5 發(fā)酵料液前后有機(jī)質(zhì)含量變化對(duì)比分析將以平菇菌渣為厭氧消化原料的前后發(fā)酵料液中有機(jī)質(zhì)的含量進(jìn)行測(cè)定,且通過有機(jī)質(zhì)前后含量的變化計(jì)算出變化率,見表4.平菇菌渣沼氣發(fā)酵前后料液的有機(jī)質(zhì)含量,主要測(cè)定了纖維素、半纖維素、木質(zhì)素、粗脂肪、粗蛋白、總糖、低聚糖、還原糖和淀粉.通過對(duì)比發(fā)現(xiàn),平菇菌渣發(fā)酵后的有機(jī)質(zhì)含量相比發(fā)酵前均有所下降,說(shuō)明有機(jī)質(zhì)含量在沼氣發(fā)酵過程中發(fā)生了降解,在微生物的作用下將降解的有機(jī)質(zhì)轉(zhuǎn)化為沼氣.其中木質(zhì)纖維素中,纖維素的降解率達(dá)到了99%,幾乎全部降解,相比其他發(fā)酵原料的纖維素降解的結(jié)果是較優(yōu)的;半纖維素和木質(zhì)素的降解率遠(yuǎn)低于纖維素,木質(zhì)素最低只有17.43%.原因可能是木質(zhì)纖維素原料中的纖維素和半纖維素均可被厭氧微生物分解利用,但木質(zhì)素結(jié)構(gòu)復(fù)雜,難以被分解利用[21],使得木質(zhì)素的降解率低于纖維素和半纖維素,由于其降解速度的緩慢,對(duì)平菇菌渣基質(zhì)化腐熟的進(jìn)程產(chǎn)生限制,在一定程度上制約著平菇菌渣的發(fā)酵周期,并對(duì)沼氣的品質(zhì)產(chǎn)生影響.粗脂肪和粗蛋白的有機(jī)變化率分別約為80.85%和11.65%,說(shuō)明二者均在厭氧消化過程中作出貢獻(xiàn),且粗脂肪的利用率高于粗蛋白.食用菌菌渣中含有的糖類主要來(lái)自于食用菌菌絲,大部分是多糖和總糖[22],但是由表4中可以看到發(fā)酵前平菇菌渣的糖類含量相比其他有機(jī)質(zhì)均較少,主要是因?yàn)槠浜橇吭诜N植平菇時(shí)被消耗,使其低聚糖、還原糖以及淀粉的質(zhì)量分?jǐn)?shù)只有0.1 mg/g左右,但是低聚糖的降解率高于總糖、還原糖和淀粉,約為90.10%.

表 4 有機(jī)質(zhì)降解的對(duì)比

2.6 能源回收率分析如表5所示,通過對(duì)整個(gè)厭氧消化過程中平菇菌渣的熱值和平均甲烷含量的測(cè)定,當(dāng)甲烷燃燒熱為35 822.6 kJ/m3[23]時(shí),平菇菌渣的能源回收率約為71.73%.相比一些發(fā)酵底物,平菇菌渣的能源回收率較高,原因可能是平菇菌渣在厭氧消化過程中其較高的纖維素降解率有利于能源的轉(zhuǎn)化.

表 5 能源回收率對(duì)比分析

3 結(jié)論

1) 在整個(gè)發(fā)酵周期中并沒有出現(xiàn)不產(chǎn)氣的現(xiàn)象,說(shuō)明將平菇菌渣作為發(fā)酵原料進(jìn)行厭氧消化產(chǎn)沼氣是可行的.在發(fā)酵體系正常運(yùn)行的條件下得出平菇菌渣的累積產(chǎn)氣量為2 784 mL、原料產(chǎn)氣率為464 mL/g、TS產(chǎn)氣率為619 mL/g、VS產(chǎn)氣率為720 mL/g、平均甲烷質(zhì)量分?jǐn)?shù)為59%.該結(jié)果表明,相比其他有機(jī)廢棄物,平菇菌渣是較為優(yōu)質(zhì)的發(fā)酵原料.試驗(yàn)在第24天時(shí),累積產(chǎn)氣量占總產(chǎn)氣量的81%,所以在工程應(yīng)用上,其水力滯留時(shí)間可設(shè)為24 d.

2) 將本試驗(yàn)中平菇菌渣厭氧消化前后有機(jī)質(zhì)的變化進(jìn)行對(duì)比分析得出,在整個(gè)發(fā)酵周期中,纖維素、半纖維素、木質(zhì)素、粗脂肪、粗蛋白、總糖、低聚糖、還原糖和淀粉均不同程度的發(fā)生降解,且纖維素和低聚糖的降解率與其他發(fā)酵原料相比,具有極高的利用率,達(dá)到90%以上,纖維素達(dá)到了99%.針對(duì)這一結(jié)果的原因,可以進(jìn)行深入研究,從而優(yōu)化厭氧消化過程中有機(jī)物的降解率.

3) 通過對(duì)熱值的測(cè)定,計(jì)算出平菇菌渣的能源回收率為71.73%,表明利用平菇菌渣產(chǎn)沼氣,可以通過生物降解有機(jī)物回收甲烷來(lái)實(shí)現(xiàn)能源的轉(zhuǎn)化利用,不僅具有極大的生物質(zhì)能源利用價(jià)值,而且為新的資源化發(fā)展提供途徑;同時(shí),對(duì)平菇菌渣的有效處理大大減少了因?qū)ζ洳缓侠硖幹枚斐傻沫h(huán)境污染.因此,利用平菇菌渣進(jìn)行厭氧消化具有大力推廣的深遠(yuǎn)意義.