韋 錚，賀 燕，黃先智，沈以紅，丁曉雯,*

（1.西南大學(xué)食品科學(xué)學(xué)院，重慶 400700；2.西南大學(xué)科技處，重慶 400700）

不良飲食、環(huán)境等多方面因素的影響會(huì)導(dǎo)致機(jī)體內(nèi)氧化還原系統(tǒng)失衡。-半乳糖是經(jīng)典的氧化應(yīng)激造模劑，該物質(zhì)經(jīng)醛糖還原酶作用形成半乳糖醇，在體內(nèi)堆積而導(dǎo)致機(jī)體產(chǎn)生過多的活性氧（reactive oxygen species，ROS），從而引起機(jī)體出現(xiàn)氧化應(yīng)激反應(yīng)，過量的ROS不僅會(huì)誘導(dǎo)機(jī)體內(nèi)生物大分子損傷，而且會(huì)引起糖尿病、白內(nèi)障等并發(fā)癥的發(fā)生。Toll樣受體4（toll-like receptors，TLR4）/p38絲裂原活化蛋白激酶（p38 mitogen-activated protein kinase，p38 MAPK）/核因子-E2相關(guān)因子（nuclear factor-erythroid 2-related factor 2，Nrf2）通路是機(jī)體內(nèi)主要的抗氧化信號(hào)通路，TLR4是微生物成分引起樹突細(xì)胞活化的橋梁，p38 MAPK是MAPK的亞類之一，p38 MAPK通路在ROS的作用下被激活，磷酸化形成p-p38，進(jìn)一步刺激Nrf2與Kelch樣ECH相關(guān)蛋白1（Keap1）分離，Nrf2進(jìn)入細(xì)胞核后與抗氧化反應(yīng)元件（antioxidant response element，ARE）相結(jié)合，激活抗氧化酶系統(tǒng)和谷胱甘肽氧化還原系統(tǒng)。這兩個(gè)系統(tǒng)的存在能夠清除機(jī)體產(chǎn)生的ROS，以防止ROS對(duì)機(jī)體細(xì)胞產(chǎn)生損傷，保持機(jī)體氧化還原平衡，免受氧化應(yīng)激損害。

茶是我國(guó)最普遍的飲品之一，其含有的活性成分茶多酚具有降血糖、調(diào)節(jié)免疫、抗氧化等功能，該物質(zhì)是茶葉中研究最多的成分。茶多糖是茶葉的另一活性成分，是一種與蛋白質(zhì)、大量礦質(zhì)元素結(jié)合的酸性糖蛋白?，F(xiàn)有研究證明茶多糖也具有類似茶多酚的功效，本實(shí)驗(yàn)室前期已通過體外實(shí)驗(yàn)證明，本實(shí)驗(yàn)所用茶多糖-茶多酚混合功能成分（tea extract rich in polysaccharides and polyphenols，TEPP）具有抗氧化作用，但是該物質(zhì)對(duì)腸道氧化應(yīng)激損傷是否具有改善作用與機(jī)制的研究相對(duì)較少。本實(shí)驗(yàn)主要通過給小鼠腹腔注射-半乳糖以建立腸道氧化應(yīng)激損傷模型，然后灌胃不同劑量的TEPP，從TLR4/p38 MAPK/Nrf2信號(hào)通路（圖1）角度探究TEPP對(duì)-半乳糖誘導(dǎo)的小鼠腸道氧化應(yīng)激的改善作用與機(jī)制。如今，消費(fèi)者對(duì)于天然抗氧化劑的需求逐漸提高，茶多糖-茶多酚作為天然成分，對(duì)其相關(guān)功能的研究將為產(chǎn)品的開發(fā)以及機(jī)體抗氧化機(jī)理等提供理論依據(jù)。

圖1 TLR4/p38 MAPK/Nrf2通路[13-15]Fig.1 TLR4/p38 MAPK/Nrf2 pathway[13-15]

1 材料與方法

1.1 動(dòng)物、材料與試劑

基礎(chǔ)飼料，SPF級(jí)昆明種小鼠（雄）84只，4 周齡，平均體質(zhì)量為20 g左右，由重慶醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心（生產(chǎn)許可證號(hào)：SCXK（渝）2018 0003）提供。TEPP購(gòu)自湖南華城生物資源股份有限公司，經(jīng)測(cè)定含56.9%（質(zhì)量分?jǐn)?shù)，下同）茶多糖、19.4%茶多酚、13.2%灰分、9.6%水分、0.1%蛋白質(zhì)。

總抗氧化能力（total antioxidant capacity，T-AOC）、ROS、GR、HO-1酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（enzyme linked immunosorbent assay，ELISA）試劑盒 上海優(yōu)選生物科技有限公司。DNA ladder抽提試劑盒 上海碧云天生物科技有限公司；高純總RNA快速提取試劑盒北京百泰克生物技術(shù)有限公司；反轉(zhuǎn)錄試劑盒、SYBR Premix ExTMII（Til RNaseH Plus）試劑盒 寶生物工程（大連）有限公司；其他試劑均為國(guó)產(chǎn)分析純。

1.2 儀器與設(shè)備

Synergy H1型酶標(biāo)儀 美國(guó)基因有限公司；T100T型聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（polymerase chain reaction，PCR）儀美國(guó)Bio-Rad公司；qTOWER3G型實(shí)時(shí)熒光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）儀 德國(guó)耶拿公司；ALPAAI-4LSC型高速離心機(jī) 德國(guó)Christ公司；DHP-9082型恒溫培養(yǎng)箱 上海齊欣科學(xué)儀器有限公司；5880 R型冷凍離心機(jī) 德國(guó)Eppendorf公司；DW-HL438型超低溫冰箱 合肥美菱股份有限公司。

1.3 方法

1.3.1 小鼠的造模與分組

將84只昆明種雄性小鼠（體質(zhì)量18～22 g）隨機(jī)分籠（每籠3～4只）適應(yīng)性飼養(yǎng)1 周，飼養(yǎng)條件：室溫（溫度（23f2）℃、相對(duì)濕度40%～60%），12 h光照（9∶00～21∶00）/12 h黑夜（21∶00～9∶00）晝夜交替，基礎(chǔ)飼料，自由進(jìn)食飲水。適應(yīng)性飼養(yǎng)1 周后，用苦味酸標(biāo)記小鼠，分出12只作為正常組，腹腔注射0.1 mL/10 g生理鹽水；剩余的小鼠每天同一時(shí)間段腹腔注射0.1 mL/10 g的質(zhì)量分?jǐn)?shù)10%-半乳糖（用0.9%滅菌生理鹽水配制）進(jìn)行造模，自由進(jìn)食飲水。連續(xù)注射45 d后頜下取血，測(cè)定造模組和正常組小鼠血清的丙二醛（malondialdehyde，MDA）、二胺氧化酶（diamine oxidase，DAO）、-乳酸（-lactic acid，-LAC）含量是否存在顯著性差異，如果存在，表示造模成功，不然繼續(xù)注射直到造模成功，以一周為周期進(jìn)行造模判斷，然后進(jìn)行后續(xù)實(shí)驗(yàn)。

將小鼠分成未經(jīng)過造模的正常組（灌胃生理鹽水）和造模成功的模型組（灌胃生理鹽水）、陽性對(duì)照組（灌胃200 mg/kg還原型谷胱甘肽）、茶多酚組（灌胃50 mg/kg茶多酚，該劑量與高劑量組的茶多酚含量相同）、低劑量組（灌胃40 mg/kgTEPP）、中劑量組（灌胃100 mg/kgTEPP）、高劑量組（灌胃250 mg/kgTEPP）。對(duì)所有小鼠進(jìn)行為期45 d的灌胃，每天同一時(shí)間段灌胃1 次，灌胃體積為0.1 mL/10 g。

1.3.2 實(shí)驗(yàn)樣本的采集與制備

灌胃45 d后，小鼠禁食不禁水12 h，摘眼球取血，取血后的小鼠頸椎脫位處死，打開腹腔，取腸道，用冰冷的生理鹽水沖洗去除其表面血水，取出結(jié)腸的腸道內(nèi)容物，液氮速凍，于－80 ℃冰箱中保存?zhèn)溆?。切取空腸用錫箔紙包好放在－80 ℃的冰箱中保存，以上操作均于無菌操作臺(tái)中進(jìn)行。

腸組織按照試劑盒說明書上的方法，以（臟器）∶（生理鹽水）=1∶9的比例加入生理鹽水用勻漿機(jī)均漿，－4 ℃、3 000 r/min離心20 min，取上清液于－80 ℃保存?zhèn)溆谩?/p>

1.3.3 空腸組織中T-AOC、ROS濃度、GR活力、HO-1活力的測(cè)定

均按ELISA試劑盒說明書的方法進(jìn)行測(cè)定。

1.3.4 空腸組織中、、、、mRNA表達(dá)量的測(cè)定

按照RNA提取試劑盒提供的方法提取空腸組織總RNA，再根據(jù)反轉(zhuǎn)錄試劑盒說明書提供的方法將RNA反轉(zhuǎn)為cDNA，再進(jìn)行PCR擴(kuò)增。取上述反轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物1 μL作為反應(yīng)模板、SYBR Green 5 μL、HO 5 μL、上游引物0.3 μL、下游引物0.3 μL，總體系11.6 μL，進(jìn)行qPCR。引物由北京六合華大基因科技有限公司合成，如表1所示。

表1 qPCR引物序列Table 1 Primer sequences used for qPCR

qPCR反應(yīng)條件：95 ℃、4 min預(yù)變性；95 ℃、15 s變性，60 ℃、30 s退火，共39個(gè)循環(huán)。以-actin作內(nèi)參基因，分別測(cè)定空腸組織中、、、、mRNA的相對(duì)表達(dá)量，結(jié)果以2表示。

1.4 數(shù)據(jù)處理與分析

實(shí)驗(yàn)結(jié)果用平均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示，采用SPSS 25.0軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，數(shù)據(jù)采用單因素方差分析和鄧肯檢驗(yàn)進(jìn)行差異顯著性分析（＜0.05為差異顯著），使用Prism 8軟件作圖。

2 結(jié)果與分析

2.1 TEPP對(duì)實(shí)驗(yàn)小鼠空腸組織T-AOC、ROS濃度的影響

T-AOC用于判斷機(jī)體總抗氧化能力，同時(shí)也是全面反映酶和非酶抗氧化物的抗氧化能力的一個(gè)指標(biāo)。高濃度的ROS會(huì)引起氧化應(yīng)激反應(yīng)，影響細(xì)胞核的形態(tài)和大小，損傷DNA堿基片段，導(dǎo)致細(xì)胞死亡。不同劑量的TEPP對(duì)實(shí)驗(yàn)小鼠腸道T-AOC、ROS濃度的影響見圖2。

圖2 TEPP對(duì)小鼠腸道T-AOC（A）、ROS濃度（B）的影響Fig.2 Effect of TEPP on T-AOC (A) and ROS content (B) in the intestine of mice

由圖2可知，相比正常組，模型組小鼠腸道T-AOC下降了43.1%（＜0.05），ROS濃度升高了96.9%（＜0.05），說明模型組小鼠體內(nèi)氧化還原平衡受到破壞，造模是成功的；陽性組T-AOC、ROS濃度恢復(fù)到了正常水平（＞0.05）；與模型組相比，茶多酚組的T-AOC上升了54.6%，ROS濃度降低了56.6%；高劑量組的T-AOC質(zhì)量濃度上升了約2.2 倍，ROS濃度降低了72.8%，其余各劑量的TEPP也均使T-AOC有所上升而使ROS濃度降低，有明顯的改善氧化應(yīng)激損傷的作用。與茶多酚組相比，高劑量組的T-AOC上升了47.1%，ROS濃度降低了37.3%，低、中、高劑量組之間的T-AOC和ROS濃度均存在顯著性差異（＜0.05），說明TEPP能夠提高小鼠腸道總抗氧化能力，降低ROS濃度，緩解氧化應(yīng)激反應(yīng)。

2.2 TEPP對(duì)實(shí)驗(yàn)小鼠空腸組織中GR、HO-1活力的影響

Nrf2/ARE是重要的內(nèi)源性抗氧化信號(hào)傳導(dǎo)通路，其下游信號(hào)包括兩個(gè)氧化還原系統(tǒng)。HO-1是抗氧化酶系統(tǒng)中的一員，是機(jī)體內(nèi)抗氧化防御和調(diào)節(jié)鐵平衡的關(guān)鍵物質(zhì)；GR是谷胱甘肽氧化還原系統(tǒng)的一員，通過將氧化型谷胱甘肽轉(zhuǎn)變成還原型谷胱甘肽而參與機(jī)體氧化應(yīng)激損傷的調(diào)節(jié)。不同劑量的TEPP對(duì)實(shí)驗(yàn)小鼠腸組織GR、HO-1活力的影響結(jié)果見圖3。

圖3 TEPP對(duì)小鼠腸道GR、HO-1活力的影響Fig.3 Effect of TEPP on GR and HO-1 activity in the intestine of mice

由圖3可見，與正常組比，模型組的GR、HO-1活力分別降低了48.3%、43.1%（＜0.05），說明氧化應(yīng)激損傷了小鼠空腸組織的氧化還原調(diào)節(jié)系統(tǒng)；陽性組的上述指標(biāo)恢復(fù)至正常水平（＞0.05）。與陽性組相比，茶多酚組的GR、HO-1活力分別升高了24.0%、9.6%（＜0.05）；高劑量組的GR、HO-1活力分別約為正常組的2 倍和1.5 倍（＜0.05），Zhao Yi等探究了鐵皮石斛多糖（dendrobium officinale polysaccharides，DOP）的抗氧化和胃癌預(yù)防作用，結(jié)果顯示與正常組比，9.6 g/kg高劑量的DOP使機(jī)體Nrf2、HO-1蛋白表達(dá)量增加了約2 倍，證明了DOP能夠通過激活Nrf2途徑和HO-1起到抗氧化作用，與本實(shí)驗(yàn)結(jié)果一致。

與模型組相比，茶多酚組的GR、HO-1活力分別上升了約1.5、0.9 倍（＜0.05）；高劑量組的上述指標(biāo)分別上升了約2.8、1.7 倍（＜0.05），相較于茶多酚組分別升高了51.4%、39.5%（＜0.05），表明實(shí)驗(yàn)劑量范圍內(nèi)，TEPP更能提升腸道抗氧化酶系統(tǒng)的活力。

2.3 TEPP對(duì)空腸組織TLR4、p38 mRNA表達(dá)量的影響

TLR4與炎性細(xì)胞因子和氧化應(yīng)激密切相關(guān)，它通過MyD88和含Toll-白細(xì)胞介素1受體域的銜接子誘導(dǎo)干擾素-β啟動(dòng)細(xì)胞內(nèi)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)，并被認(rèn)為是多種疾病的調(diào)節(jié)劑。p38為MAPK的亞單位，磷酸化產(chǎn)物可激活Nrf2-keap1的解離，進(jìn)一步激活Nrf2/ARE通路及其下游信號(hào)。不同劑量的TEPP對(duì)實(shí)驗(yàn)小鼠空腸組織、mRNA表達(dá)量的影響結(jié)果見圖4。

圖4 TEPP對(duì)小鼠腸道中TLR4（A）、p38（B）mRNA表達(dá)量的影響Fig.4 Effect of TEPP on the mRNA expression of TLR4 (A) and p38 (B)in the intestine of mice

由圖4可知，與正常組相比，模型組的mRNA表達(dá)量升高了26.0%，mRNA表達(dá)量升高了約1.5 倍（＜0.05），說明氧化應(yīng)激反應(yīng)激活了TLR4/p38通路；陽性組使、的mRNA表達(dá)量恢復(fù)到正常水平（＞0.05）；與正常組相比，高劑量組、的mRNA表達(dá)量分別降低了17.8%、51.2%（＜0.05）。Fan Jingjing等研究顯示2 mg/mL的發(fā)酵人參以390 mg/（kggd）的劑量進(jìn)行灌胃后，使小鼠肝臟組織中、mRNA表達(dá)量下降至正常組以下，表明發(fā)酵人參能夠調(diào)控TLR4相關(guān)信號(hào)通路。本實(shí)驗(yàn)的研究結(jié)果顯示，TEPP能減弱氧化應(yīng)激導(dǎo)致的mRNA的高表達(dá)，抑制MAPK磷酸化，證明其能夠通過TLR4/p38通路對(duì)氧化應(yīng)激反應(yīng)進(jìn)行調(diào)節(jié)。

與模型組相比，茶多酚組、mRNA表達(dá)量分別降低了6.9%、28.8%（＜0.05），但未恢復(fù)到正常水平；高劑量TEPP可使、mRNA表達(dá)量分別降低39.1%、82.4%（＜0.05），低劑量TEPP對(duì)、mRNA表達(dá)量的影響與茶多酚組之間無顯著性差異（＞0.05）；中劑量、高劑量組、mRNA表達(dá)量無顯著性差異（＞0.05），說明在實(shí)驗(yàn)劑量范圍內(nèi)，TEPP對(duì)、mRNA表達(dá)量的抑制存在量-效關(guān)系，且劑量在100 mg/kg時(shí)，對(duì)、mRNA表達(dá)的抑制作用達(dá)到飽和。與茶多酚組相比，高劑量組、mRNA表達(dá)量分別降低了34.6%、75.3%（＜0.05），說明TEPP更能對(duì)TLR4/p38通路有抑制作用。

2.4 TEPP對(duì)空腸組織Nrf2、GR、HO-1 mRNA表達(dá)量的影響

通過觸發(fā)其下游靶基因，激活下游氧化還原系統(tǒng)相關(guān)基因的表達(dá)，是各種抗氧化劑和抗炎細(xì)胞因子的主要調(diào)節(jié)劑基因。不同劑量的TEPP對(duì)實(shí)驗(yàn)小鼠空腸組織、、mRNA表達(dá)量的影響結(jié)果見圖5。

圖5 TEPP對(duì)小鼠腸道中Nrf2（A）、GR（B）、HO-1（C）mRNA表達(dá)的影響Fig.5 Effect of TEPP on the mRNA expression of Nrf2 (A), GR (B)and HO-1 (C) in the intestine of mice

由圖5可見，與正常組對(duì)比，模型組、、的mRNA表達(dá)量分別降低了32.8%、77.1%、31.1%（＜0.05），說明氧化應(yīng)激反應(yīng)破壞了Nrf2及其下游氧化還原系統(tǒng)的平衡。陽性組使上述損傷恢復(fù)到了正常水平（＞0.05）；TEPP高劑量組的上述指標(biāo)均高于正常組。Huang Qincheng等實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，95 mg/kg VE使機(jī)體腸組織中、mRNA表達(dá)量上升且超過正常組，證明VE是通過調(diào)節(jié)Nrf2途徑來調(diào)節(jié)生物體氧化作用的，與本實(shí)驗(yàn)結(jié)果類似。

與模型組相比，茶多酚組、、的mRNA表達(dá)量分別升高了21.9%、1.2 倍、16.2%（＜0.05）；高劑量組的上述指標(biāo)分別升高了83.6%、8.3 倍、96.3%（＜0.05）。與茶多酚組相比，高劑量組的、、mRNA表達(dá)量分別升高了50.6%、3.2 倍、69.0%（＜0.05），低劑量組與茶多酚組上述指標(biāo)間無顯著性差異（＞0.05），說明TEPP對(duì)腸道氧化應(yīng)激反應(yīng)的改善作用具有量-效關(guān)系，能通過調(diào)節(jié)Nrf2通路對(duì)-半乳糖引起的腸道氧化應(yīng)激作用進(jìn)行改善與修復(fù)。

3 討 論

TLRs是模式識(shí)別受體之一，能夠特異性識(shí)別信號(hào)分子，TLR4主要是內(nèi)毒素的識(shí)別受體，兩者相結(jié)合可啟動(dòng)下游信號(hào)，激活MAPK相關(guān)亞基的磷酸化，例如p38 MAPK的磷酸化能夠在某種程度上反映機(jī)體氧化應(yīng)激狀態(tài)。Dong Na等研究顯示黃氏多糖能夠通過抑制內(nèi)毒素刺激引起的p38 MAPK、ERK1/2 MAPK磷酸化來抑制趨化因子的產(chǎn)生，而改善空腸絨毛形態(tài)。氧化應(yīng)激反應(yīng)會(huì)引起腸道屏障損傷，導(dǎo)致大量腸道細(xì)菌和內(nèi)毒素侵入組織和循環(huán)，促發(fā)各種腸道疾病。本實(shí)驗(yàn)研究結(jié)果同樣證明，TEPP能夠通過減弱mRNA的表達(dá)，抑制MAPK磷酸化來起到抗氧化作用。

Nrf2/ARE通路是機(jī)體內(nèi)源性抗氧化防御機(jī)制之一，在穩(wěn)態(tài)條件下，Nrf2與其抑制劑蛋白Keap1相互結(jié)合保留在細(xì)胞質(zhì)中，當(dāng)細(xì)胞受到應(yīng)激反應(yīng)時(shí)，Nrf2與Keap1發(fā)生解離，進(jìn)入細(xì)胞核，與核內(nèi)Maf蛋白形成二聚體后與ARE結(jié)合，轉(zhuǎn)錄活化下游包括HO-1的抗氧化酶系統(tǒng)和包括GR的谷胱甘肽氧化還原系統(tǒng)，抗氧化劑的存在能夠上調(diào)下游信號(hào)物質(zhì)。谷胱甘肽是細(xì)胞自衛(wèi)過程中必不可少的一員，谷胱甘肽氧化還原系統(tǒng)對(duì)維持細(xì)胞氧化還原狀態(tài)平衡起著至關(guān)重要的作用，保持機(jī)體內(nèi)谷胱甘肽處于高水平，氧化型谷胱甘肽處于低水平，維持體內(nèi)適當(dāng)還原態(tài)環(huán)境。血紅素對(duì)真核生物血紅蛋白和肌紅蛋白的氧結(jié)合過程以及細(xì)胞代謝至關(guān)重要。HO-1可將血紅素代謝成膽綠素、一氧化碳和亞鐵離子，可以在病理生理?xiàng)l件下保持細(xì)胞和組織的體內(nèi)穩(wěn)態(tài)。膽綠素及其還原產(chǎn)物膽紅素對(duì)羥自由基、超氧陰離子自由基等自由基有一定的清除作用。Shan Yingying等研究表明五味子多糖能通過上調(diào)和下游基因表達(dá)，并下調(diào)表達(dá)，而抑制氧化應(yīng)激作用，證明了其機(jī)制與Nrf2/ARE和TLR4的調(diào)節(jié)密切相關(guān)，本實(shí)驗(yàn)結(jié)果與此一致。

-半乳糖是現(xiàn)今較為公認(rèn)的用于建立氧化應(yīng)激模型的藥物，本實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，實(shí)驗(yàn)所設(shè)計(jì)的劑量的TEPP能夠提高腸組織T-AOC和GR、HO-1活力，降低ROS質(zhì)量濃度，降低、mRNA的表達(dá)，提高、、mRNA的表達(dá)，證明了TEPP具有抗氧化作用，且對(duì)腸組織氧化應(yīng)激反應(yīng)具有改善作用，這種抗氧化作用主要是通過p38 MAPK/Nrf2途徑實(shí)現(xiàn)的。同時(shí)，高劑量組與茶多酚組對(duì)比結(jié)果表明，在實(shí)驗(yàn)劑量范圍內(nèi)，TEPP的抗氧化效果優(yōu)于茶多酚單獨(dú)效果。結(jié)果為功能性食品的開發(fā)、化妝品的研發(fā)等提供部分理論依據(jù)，但在化妝品應(yīng)用中需進(jìn)一步對(duì)皮膚耐受等因素進(jìn)行探究?，F(xiàn)有研究顯示茶多糖主要由葡萄糖、半乳糖、阿拉伯糖、木糖、巖藻糖等單糖構(gòu)成，茶多酚主要化學(xué)成分為兒茶素類、黃酮類、花青素類、酚酸類4大類物質(zhì)，茶葉種類、加工方式、提取工藝對(duì)茶多糖的組成結(jié)構(gòu)、茶多酚的組成均存在影響，同時(shí)不同品種地區(qū)的茶葉、不同比例的茶多糖及茶多酚產(chǎn)生的降血糖功效強(qiáng)弱各不相同，本實(shí)驗(yàn)所用TEPP中茶多酚及茶多糖的具體組成結(jié)構(gòu)及不同配比的茶多糖-茶多酚對(duì)腸氧化損傷改善效果仍需進(jìn)一步研究。茶多糖、茶多酚存在降血糖血脂、改善炎癥、調(diào)節(jié)腸道菌群、抗氧化等功效，本實(shí)驗(yàn)僅證明了在抗氧化方面，TEPP在實(shí)驗(yàn)劑量范圍內(nèi)略優(yōu)于茶多酚，對(duì)其他功效是否具有相同效果及其是否會(huì)產(chǎn)生副作用仍需考證。且本實(shí)驗(yàn)所采用的并非純品的茶多糖及茶多酚的混合物，因此，不同品種、不同加工方式、不同提取工藝、不同比例的混合物對(duì)于各功效的影響同樣需要更深入的研究。

4 結(jié) 論

本實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，與模型組相比，TEPP高劑量組的T-AOC上升了約2.2 倍，GR、HO-1活力分別上升了約2.8、1.7 倍，ROS濃度降低了72.8%，、的mRNA表達(dá)量分別降低了39.1%、82.4%，、、的mRNA表達(dá)量分別升高了83.6%、8.3 倍、96.3%，且都存在顯著差異（＜0.05），證明了在本實(shí)驗(yàn)劑量范圍內(nèi)，TEPP能夠通過TLR4/p38/Nrf2通路改善-半乳糖誘導(dǎo)的小鼠腸道的氧化應(yīng)激反應(yīng)。