張成勇 李玥 楊穎 朱日然

關(guān)鍵詞多腺苷二磷酸核糖聚合酶抑制劑;藥物聯(lián)用;抗腫瘤;臨床前研究

多腺苷二磷酸核糖聚合酶[poly（ADP-ribose）polymerase，PARP]在細(xì)胞DNA損傷修復(fù)中具有重要作用，即當(dāng)細(xì)胞DNA發(fā)生斷裂時(shí)，PARP 可結(jié)合到斷裂處，寡集包括組蛋白在內(nèi)的煙酰胺腺嘌呤二核苷酸依賴的腺苷二磷酸核糖聚合酶以及其他DNA修復(fù)酶，完成受損DNA的修復(fù)[1]。2005 年，科學(xué)家首次發(fā)現(xiàn)了一種可抑制PARP 功能的小分子化合物，并將其命名為PARP 抑制劑[2]。有研究表明，該化合物可與突變的乳腺癌易感基因BRCA相互影響，從而導(dǎo)致腫瘤細(xì)胞死亡，最終首次實(shí)現(xiàn)了PARP抑制劑介導(dǎo)的合成致死[2]。作為具有革新意義的新型抗腫瘤藥，目前已上市的常用PARP抑制劑包括奧拉帕利（AZD2281）、尼拉帕利（MK-4827）、Rucaparib、Veliparib（ABT-888）、Fluzoparib 和Talazoparib（BMN-673）等，主要適應(yīng)證包括乳腺癌、卵巢癌和原發(fā)性腹膜癌等，且上述藥物針對(duì)前列腺癌、胃癌、肺癌的研究也正在進(jìn)行中[3]。

早期關(guān)于PARP抑制劑的研究主要集中在單藥治療領(lǐng)域，但有研究指出，PARP 抑制劑單獨(dú)使用具有毒性高、易產(chǎn)生耐藥等問題，同時(shí)其適應(yīng)證較為狹窄，臨床應(yīng)用受限[4];PARP抑制劑對(duì)具有同源重組修復(fù)缺陷的腫瘤細(xì)胞具有較強(qiáng)的殺傷作用，但對(duì)DNA損傷修復(fù)功能完好的腫瘤細(xì)胞殺傷力弱。2010 年以來，PARP抑制劑聯(lián)合應(yīng)用受到學(xué)界越來越多的關(guān)注。為了解PARP抑制劑與放療或其他藥物聯(lián)合應(yīng)用抗腫瘤的研究進(jìn)展，筆者綜述了PARP抑制劑聯(lián)合應(yīng)用的臨床前研究現(xiàn)狀，以期為該藥在惡性腫瘤治療領(lǐng)域中的應(yīng)用提供參考。

1 PARP抑制劑聯(lián)合放療

放療是惡性腫瘤的主要治療手段之一，其作用靶點(diǎn)正是腫瘤細(xì)胞的DNA。大量研究表明，PARP抑制劑聯(lián)合放療具有良好的協(xié)同抗腫瘤效果。Zhan 等[4]研究發(fā)現(xiàn)，奧拉帕利聯(lián)合放療可誘導(dǎo)人食管腺鱗癌細(xì)胞的凋亡并抑制細(xì)胞的增殖，且這種抑制效果在乏氧狀態(tài)下更加顯著，其相關(guān)機(jī)制與乏氧狀態(tài)下細(xì)胞同源重組修復(fù)（homologousrecombination repair，HRR）功能受到抑制以及重組蛋白A（recombination protein A，Rad51）表達(dá)下調(diào)有關(guān);在裸鼠移植瘤模型實(shí)驗(yàn)中，奧拉帕利聯(lián)合放療同樣具有協(xié)同抗腫瘤作用。Park 等[5]在ARID1A 基因缺失的人子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞中發(fā)現(xiàn)，奧拉帕利聯(lián)合低劑量放療具有體內(nèi)外協(xié)同抗腫瘤作用。在人肺癌和人胰腺癌細(xì)胞中，Hastak 等[6]聯(lián)用PARP 抑制劑LT626 和放療后發(fā)現(xiàn)，細(xì)胞中γH2AX和P53 蛋白的表達(dá)上調(diào)，磷酸化毛細(xì)血管擴(kuò)張性共濟(jì)失調(diào)突變蛋白激酶（ataxia-telangiectasia mutatedkinase，ATM）、共濟(jì)失調(diào)性毛細(xì)血管擴(kuò)張和RAD3相關(guān)蛋白（recombinant ataxia telangiectasia and RAD3 relatedprotein，ATR）的表達(dá)增多，提示兩者發(fā)揮了協(xié)同抗腫瘤作用。Wang 等[7]建立了肺癌和乳腺癌小鼠移植瘤模型，發(fā)現(xiàn)相較于單純放療，尼拉帕利聯(lián)合放療可顯著抑制腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)。

盡管PARP抑制劑聯(lián)合放療在惡性腫瘤治療領(lǐng)域已經(jīng)取得了一些進(jìn)展，但目前仍然存在許多問題，主要包括以下幾點(diǎn)：（1）PARP抑制劑作為放療增敏劑的合理劑量范圍仍有待確定。已有研究表明，PARP抑制劑結(jié)合放療雖可減少所需的射線劑量，但當(dāng)前二者的具體結(jié)合劑量仍在摸索中[3]。（2）在臨床實(shí)際中，是同時(shí)進(jìn)行PARP抑制劑+放療聯(lián)合治療還是經(jīng)PARP抑制劑治療后再進(jìn)行放療仍有待確定[4]。（3）迄今為止，用于PARP抑制劑聯(lián)合放療療效判定的生物標(biāo)志物仍需繼續(xù)挖掘[5]。

2 PARP抑制劑聯(lián)合其他藥物

2.1 PARP抑制劑聯(lián)合抗血管生成藥物

血管生成是腫瘤生長(zhǎng)和轉(zhuǎn)移過程中不可或缺的環(huán)節(jié)，抑制腫瘤血管生成，可使腫瘤細(xì)胞因缺乏生存所必需的氧氣和營(yíng)養(yǎng)而死亡，而缺氧本身與HRR 功能受損有關(guān)[8 - 10]。在使用PARP 抑制劑治療的過程中，由于BRCA基因的繼發(fā)性突變使得HRR功能恢復(fù)，從而導(dǎo)致腫瘤細(xì)胞對(duì)PARP抑制劑耐藥[11]。在BRCA2 基因繼發(fā)性耐藥突變的背景下，血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子受體3 抑制劑可通過抑制BRCA1 和BRCA2 基因的表達(dá)來恢復(fù)人卵巢癌細(xì)胞對(duì)PARP抑制劑的敏感性[11]。在鼠類肉瘤病毒癌基因突變型結(jié)直腸癌動(dòng)物模型中，研究者通過聯(lián)合使用血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子抑制劑貝伐珠單抗與奧拉帕利進(jìn)行干預(yù)后發(fā)現(xiàn)，聯(lián)合干預(yù)能夠有效地抑制腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)，其作用機(jī)制與貝伐珠單抗致腫瘤微環(huán)境內(nèi)乏氧水平升高和HRR功能受損有關(guān)[12]。Kaplan 等[13]在無BRCA基因缺失的人乳腺癌和人卵巢癌細(xì)胞中發(fā)現(xiàn)，一方面，抗血管生成藥物西地尼布可誘導(dǎo)缺氧，從而抑制BRCA 和Rad51 的表達(dá);另一方面，西地尼布可直接作用于HRR而不依賴腫瘤細(xì)胞的乏氧狀態(tài)，這種直接作用可能與抑制血小板源性生長(zhǎng)因子受體、激活蛋白磷酸酶2A、抑制E2F4轉(zhuǎn)錄因子介導(dǎo)的BRCA和Rad51表達(dá)有關(guān)。

2.2 PARP抑制劑聯(lián)合熱休克蛋白90 抑制劑

熱休克蛋白90（heat shock protein 90，HSP90）是一種腺苷三磷酸（adenosine triphosphate，ATP）依賴性分子，可以與BRCA1、BRCA2 基因和細(xì)胞周期檢查點(diǎn)激酶1（checkpoint kinase 1，CHK1）、Rad51、減數(shù)分裂重組11蛋白等相互作用，進(jìn)而影響細(xì)胞DNA損傷的修復(fù)和細(xì)胞周期的調(diào)節(jié)[14 - 15]。可見，HSP90 抑制劑可通過影響HRR和非同源末端連接功能來抑制DNA雙鏈的損傷修復(fù)，聯(lián)合PARP抑制劑可對(duì)惡性腫瘤細(xì)胞產(chǎn)生合成致死作用[14]。Lin 等[16]合成了一系列可抑制HSP90 的新化合物，發(fā)現(xiàn)這些新化合物可抑制人乳腺癌和人胰腺癌細(xì)胞的增殖，且聯(lián)合PARP 抑制劑具有更強(qiáng)的細(xì)胞毒性作用。Gabbasov 等[17]發(fā)現(xiàn)，HSP90 抑制劑Ganetespib 可增強(qiáng)非BRCA 基因突變的人卵巢癌細(xì)胞對(duì)PARP 抑制劑Talazoparib 的敏感性，且Ganetespib 對(duì)DNA修復(fù)和細(xì)胞周期檢查點(diǎn)相關(guān)蛋白表達(dá)的抑制作用呈劑量和時(shí)間依賴性。

2.3 PARP抑制劑聯(lián)合磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B/哺乳動(dòng)物雷帕霉素靶蛋白抑制劑

磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B/哺乳動(dòng)物雷帕毒素靶蛋白（phosphoinositide 3-kinase/protein kinase B/mammaliantarget of rapamycin，PI3K/AKT/mTOR）是細(xì)胞內(nèi)的重要信號(hào)通路之一，可參與細(xì)胞周期調(diào)控、增殖、凋亡和糖原代謝等[18]。據(jù)報(bào)道，在人子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞中，抑制PI3K的表達(dá)可下調(diào)BRCA1、BRCA2 基因的表達(dá)，誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞HRR 功能受損，從而增強(qiáng)子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞對(duì)PARP 抑制劑奧拉帕利的敏感性[19]。研究表明，聯(lián)合使用PI3K抑制劑BKM120 和奧拉帕利能夠顯著抑制人胃癌細(xì)胞增殖，誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡和DNA損傷，其作用可能與胃癌細(xì)胞中缺乏的染色質(zhì)重塑基因ARID1A 有關(guān)[20]。Bian 等[21]發(fā)現(xiàn)，PTEN 基因缺失的子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞對(duì)奧拉帕利并不敏感，而當(dāng)奧拉帕利與BKM120 聯(lián)用后，前者對(duì)腫瘤細(xì)胞的敏感性有所增加，其相關(guān)機(jī)制為BKM120 可下調(diào)Rad51 和BRCA1 的表達(dá)，抑制HRR 功能并誘導(dǎo)DNA損傷累積。De 等[22]發(fā)現(xiàn)，PI3K與mTOR雙重抑制劑GDC-0980 可抑制人三陰性乳腺癌細(xì)胞DNA損傷的修復(fù)，GDC-0980 聯(lián)合Veliparib、卡鉑可抑制裸鼠體內(nèi)移植瘤的生長(zhǎng)，其作用機(jī)制與Ki67、CD31、磷酸化的血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子受體表達(dá)降低有關(guān)。

2.4 PARP 抑制劑聯(lián)合絲裂原活化的細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)蛋白激酶抑制劑

絲裂原活化的細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)蛋白激酶（mitogenactivatedextracellular signal-regulated kinase，MEK）屬于有絲分裂原激活的蛋白激酶信號(hào)通路的一部分，對(duì)細(xì)胞凋亡、細(xì)胞周期調(diào)控、細(xì)胞增殖和遷移等具有重要作用[23]。Sun 等[24]研究發(fā)現(xiàn)，與單用藥相比，PARP 抑制劑與MEK抑制劑聯(lián)用對(duì)RAS基因突變相關(guān)腫瘤具有更強(qiáng)的抑制作用，其作用機(jī)制主要包括以下幾點(diǎn)：（1）可通過下調(diào)B 細(xì)胞淋巴瘤2（B cell lymphoma 2，Bcl-2）的表達(dá)來促進(jìn)細(xì)胞凋亡;（2）可抑制HRR功能，從而誘導(dǎo)DNA損傷累積;（3）可抑制DNA 損傷檢查點(diǎn)相關(guān)蛋白的表達(dá);（4）可通過誘導(dǎo)缺氧來降低血管密度，從而增強(qiáng)腫瘤細(xì)胞對(duì)PARP抑制劑的敏感性。Ethier 等[23]發(fā)現(xiàn)，在人宮頸癌HeLa 細(xì)胞中，PARP 抑制劑PJ34 聯(lián)合MEK抑制劑U0126 可增強(qiáng)甲基硝基亞硝基胍的細(xì)胞毒性作用，其機(jī)制可能與抑制MEK/細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶（extracellular-signal regulated protein kinase，ERK）通路誘導(dǎo)的細(xì)胞凋亡有關(guān)。

2.5 PARP抑制劑與ATR、CHK1 和WEE1抑制劑聯(lián)用

抑制ATR/CHK1/WEE1 信號(hào)軸可影響HRR功能，破壞復(fù)制叉的穩(wěn)定性[25]。ATR抑制劑可在DNA修復(fù)時(shí)干擾BRCA2 和Rad51 的寡集，重構(gòu)同源重組缺陷狀態(tài)，增強(qiáng)DNA 損傷類藥物對(duì)腫瘤細(xì)胞的殺傷性[25 - 26]。Kim等[27]對(duì)PARP抑制劑和鉑類雙重耐藥型人卵巢癌細(xì)胞進(jìn)行研究發(fā)現(xiàn)，奧拉帕利聯(lián)合ATR 抑制劑AZD6738 具有協(xié)同抗腫瘤作用，且與復(fù)制叉堆積、DNA雙鏈損傷和細(xì)胞凋亡有關(guān)。Southgate 等[28]以ATR抑制劑VE-821 和奧拉帕利聯(lián)合處理人高危神經(jīng)母細(xì)胞瘤，發(fā)現(xiàn)兩者聯(lián)合增強(qiáng)了H2AXS129的表達(dá)，抑制了奧拉帕利致Rad51 焦點(diǎn)的形成，從而增強(qiáng)了高危神經(jīng)母細(xì)胞瘤對(duì)奧拉帕利的敏感性。Burgess 等[29]對(duì)PARP 抑制劑敏感型和耐藥型胚系BRCA1 基因突變?nèi)寺殉舶┘?xì)胞進(jìn)行研究發(fā)現(xiàn)，奧拉帕利聯(lián)合VE-821 對(duì)兩種人卵巢癌細(xì)胞均表現(xiàn)出協(xié)同抗腫瘤作用，其協(xié)同評(píng)分高于奧拉帕利與CHK1 抑制劑MK-8776 聯(lián)用。在ATM缺失型人肺癌細(xì)胞中，奧拉帕利單用對(duì)細(xì)胞活性并無明顯影響，而聯(lián)用VE-821 會(huì)產(chǎn)生細(xì)胞毒性作用，這種作用與兩者將細(xì)胞周期阻滯在G2期有關(guān)[30]。在人黑色素瘤細(xì)胞中，奧拉帕利聯(lián)合ATR抑制劑AZD6738 同樣具有協(xié)同抗腫瘤效果[31]。Schoonen等[32]在基于BRCA2 基因缺失的人宮頸癌HeLa細(xì)胞的研究中發(fā)現(xiàn)，ATR 抑制劑可誘導(dǎo)細(xì)胞過早地進(jìn)行有絲分裂，導(dǎo)致染色質(zhì)橋形成和染色體滯后，從而增強(qiáng)腫瘤細(xì)胞對(duì)奧拉帕利的敏感性，其協(xié)同作用與基因組不穩(wěn)定性、環(huán)狀鳥苷一磷酸-腺苷一磷酸合成酶/干擾素基因刺激因子（cyclic GMP-AMP synthase/stimulator of interferongenes，cGAS/STING）介導(dǎo)的炎癥信號(hào)通路有關(guān)。

在BRCA 突變型和野生型人卵巢癌細(xì)胞中，抑制ATR下游效應(yīng)蛋白CHK1 的表達(dá)已被證實(shí)可協(xié)同PARP抑制劑發(fā)揮抗腫瘤作用[33-34]。Kim等[33]以人源性卵巢癌異種移植瘤為模型進(jìn)行研究，發(fā)現(xiàn)PARP抑制劑單用可抑制腫瘤細(xì)胞增殖，但最大可耐受劑量卻不能抑制裸鼠移植瘤的生長(zhǎng)，其原因可能與PARP抑制劑通過上調(diào)磷酸化ATR 和CHK1 的表達(dá)來破壞基因組穩(wěn)定性有關(guān)。該研究分別將ATR 抑制劑、CHK1 抑制劑與PARP 抑制劑聯(lián)合使用，發(fā)現(xiàn)聯(lián)用可將腫瘤細(xì)胞從G2期釋放出來，使其提前進(jìn)入有絲分裂進(jìn)而導(dǎo)致染色體畸變和細(xì)胞凋亡增加，從而使腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)受到明顯抑制。Brill等[34]以奧拉帕利和CHK1 抑制劑Prexasertib 聯(lián)合處理人高級(jí)別漿液性卵巢癌細(xì)胞系，發(fā)現(xiàn)與對(duì)照組或單藥組相比，兩藥聯(lián)用具有更強(qiáng)的抑癌活性，其作用可能與Prexasertib可消除奧拉帕利所導(dǎo)致的Rad51 表達(dá)上調(diào)有關(guān)。Smith 等[35]通過對(duì)BRCA2 突變型V-C8 細(xì)胞和BRCA2 野生型V-C8.B2 細(xì)胞進(jìn)行研究發(fā)現(xiàn)，V-C8 細(xì)胞對(duì)PARP抑制劑Rucaparib 具有更強(qiáng)的敏感性;而對(duì)于本不敏感的V-C8.B2 細(xì)胞，聯(lián)用CHK1 抑制劑PF-477736 可增強(qiáng)V-C8.B2 細(xì)胞對(duì)Rucaparib的敏感性。

Jin 等[36]對(duì)人三陰性乳腺癌細(xì)胞進(jìn)行研究發(fā)現(xiàn)，WEE1 抑制劑AZD1775 聯(lián)合ATR抑制劑AZD6738 具有更強(qiáng)的抗腫瘤活性，其協(xié)同作用機(jī)制與DNA損傷累積有關(guān);此外，WEE1 與ATR 的雙重抑制使Rad51 表達(dá)下調(diào)，增強(qiáng)了腫瘤細(xì)胞對(duì)順鉑和PARP抑制劑的敏感性。

2.6 PARP抑制劑聯(lián)合溴結(jié)構(gòu)域和超末端結(jié)構(gòu)域/溴結(jié)構(gòu)域蛋白4抑制劑

溴結(jié)構(gòu)域和超末端結(jié)構(gòu)域（bromodomain and extra-terminal，BET）蛋白家族對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)和細(xì)胞周期具有重要的調(diào)控作用，溴結(jié)構(gòu)域蛋白4（bromodomain-containingprotein 4，BRD4）屬于BET 蛋白家族成員之一，可通過調(diào)控MYC、CDK、BCL2 等下游基因來影響腫瘤的發(fā)生與發(fā)展[37]。Miller 等[38]研究發(fā)現(xiàn)，BET 抑制劑JQ-1可誘導(dǎo)DNA 損傷標(biāo)志物γH2AX 的高表達(dá)，同時(shí)抑制DNA損傷修復(fù)蛋白Ku80 和Rad51 的表達(dá);與單用藥相比，JQ-1 聯(lián)合PARP抑制劑奧拉帕利對(duì)胰腺癌小鼠移植瘤表現(xiàn)出更強(qiáng)的抑癌作用，其作用與Ku80、Rad51 表達(dá)受到抑制有關(guān)，而Ku80、Rad51 的表達(dá)受BRD4、BRD2調(diào)控。在去勢(shì)耐藥性前列腺癌動(dòng)物模型中，BET抑制劑聯(lián)合PARP 抑制劑也表現(xiàn)出了協(xié)同抗腫瘤作用[39]。在BRCA野生型人卵巢癌細(xì)胞中，BET抑制劑JQ-1 可以下調(diào)G2/M期細(xì)胞周期檢查點(diǎn)調(diào)節(jié)因子WEE1 和DNA損傷反應(yīng)因子TOPBP1 的表達(dá);當(dāng)JQ-1 與奧拉帕利聯(lián)用時(shí)，可使腫瘤細(xì)胞在DNA 損傷累積的情況下進(jìn)入有絲分裂，從而導(dǎo)致有絲分裂障礙和細(xì)胞死亡，該協(xié)同作用效果在動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中得到了驗(yàn)證[40]。在小細(xì)胞肺癌動(dòng)物模型中，PARP 抑制劑聯(lián)合BET 抑制劑可通過靶向MYC/PARP1軸發(fā)揮抗癌作用[41]。

2.7 PARP抑制劑聯(lián)合細(xì)胞周期蛋白依賴性激酶12 抑制劑

細(xì)胞周期蛋白依賴性激酶12（cyclin-dependent kinase12，CDK12）屬于絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶家族，可調(diào)節(jié)基因轉(zhuǎn)錄、DNA 損傷反應(yīng)以及細(xì)胞增殖和分化等[42]。盡管PARP抑制劑對(duì)于HRR功能缺失的腫瘤細(xì)胞是有效的，但該功能恢復(fù)所導(dǎo)致的獲得性耐藥極大限制了PARP 抑制劑的使用[43]。Johnson 等[43]發(fā)現(xiàn)，在BRCA突變型人三陰性乳腺癌細(xì)胞和人源異種移植瘤中，CDK12 抑制劑Dinaciclib 可呈時(shí)間和劑量依賴性地抑制BRCA1 和Rad51 的表達(dá)，與Veliparib 聯(lián)用后可協(xié)同抑制乳腺癌細(xì)胞和裸鼠移植瘤的生長(zhǎng)。Joshi 等[44]發(fā)現(xiàn)，在卵巢癌細(xì)胞中，敲除CDK12 基因可以抑制BRCA1 基因的表達(dá)，導(dǎo)致HRR功能喪失，從而增強(qiáng)卵巢癌細(xì)胞對(duì)Veliparib和順鉑的敏感性。

2.8 PARP抑制劑聯(lián)合免疫檢查點(diǎn)抑制劑

腫瘤的發(fā)生發(fā)展與人體免疫功能失常密切相關(guān)，免疫檢查點(diǎn)在正常情況下可抑制T細(xì)胞功能，但在腫瘤組織中卻可被利用而形成免疫逃逸[45]。目前，研究者發(fā)現(xiàn)的免疫檢查點(diǎn)包括程序性死亡蛋白-1（programmeddeathprotein-1，PD-1）、細(xì)胞毒性T 淋巴細(xì)胞相關(guān)抗原4和程序性死亡蛋白配體-1（programmed death ligand-1，PD-L1）[45]。通過免疫檢查點(diǎn)抑制劑可抑制上述分子的活性，激活T 細(xì)胞對(duì)腫瘤的免疫應(yīng)答反應(yīng)，從而發(fā)揮抗腫瘤作用。在人結(jié)腸癌、人肺鱗狀細(xì)胞癌、人乳腺癌、人肉瘤和人膀胱癌細(xì)胞中，Wang 等[46]發(fā)現(xiàn)，尼拉帕利聯(lián)合PD-1 抑制劑可增加免疫細(xì)胞的浸潤(rùn)并延緩腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)，這種聯(lián)用效果與BRCA 的基因分型無關(guān)。Ding等[47]發(fā)現(xiàn)，在BRCA1 缺失卵巢癌小鼠中，奧拉帕利可觸發(fā)其局部和全身的抗腫瘤免疫反應(yīng)，激活STING通路并上調(diào)PD-L1 的表達(dá);而當(dāng)奧拉帕利與PD-1 抑制劑聯(lián)用時(shí)，這種免疫觸發(fā)效果進(jìn)一步增強(qiáng)，使裸鼠體內(nèi)腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)受到更強(qiáng)的抑制，小鼠生存期得以明顯延長(zhǎng)。

2.9 PARP抑制劑聯(lián)合組蛋白脫乙酰酶抑制劑

組蛋白脫乙酰酶（histone deacetylases，HDAC）在DNA雙鏈損傷修復(fù)中具有重要作用[48]。Wiegmans 等[48]分別研究了3 種HDAC抑制劑SAHA、VPA、ROMI對(duì)人三陰性乳腺癌細(xì)胞的抑制作用，發(fā)現(xiàn)SAHA和ROMI可抑制細(xì)胞的HRR 功能，使Rad51、BRAD1 和FANCD2 基因的表達(dá)顯著下調(diào)，從而與PARP 抑制劑Veliparib 產(chǎn)生合成致死作用。在人卵巢癌細(xì)胞中，奧拉帕利聯(lián)合HDAC抑制劑SAHA可通過靶向HRR功能來發(fā)揮協(xié)同抑癌作用[49]。Yin 等[50]以人前列腺癌細(xì)胞為對(duì)象，發(fā)現(xiàn)Veliparib 協(xié)同SAHA可抑制細(xì)胞增殖，誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡和DNA 損傷，而對(duì)正常前列腺上皮細(xì)胞RWPE-1 沒有影響，其協(xié)同作用可能與靶向泛素樣含PHD 和環(huán)指域1（ubiquitin-like PHD and ring finger domains 1，UHRF1）/BRCA1 蛋白復(fù)合物、抑制BRCA1 的表達(dá)有關(guān);此外，Rad51 基因沉默可增強(qiáng)前列腺癌細(xì)胞對(duì)SAHA和奧拉帕利聯(lián)用的敏感性。Liang 等[51]以人肝癌細(xì)胞為研究對(duì)象，發(fā)現(xiàn)PARP抑制劑PJ34 聯(lián)合SAHA可抑制細(xì)胞增殖，誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡，抑制裸鼠移植瘤的生長(zhǎng)。Baldan 等[52]對(duì)人間變性甲狀腺癌進(jìn)行的研究結(jié)果顯示，SAHA與PJ34 聯(lián)用可發(fā)揮協(xié)同抗腫瘤作用，其協(xié)同作用可能與上調(diào)TSHR基因的表達(dá)有關(guān)。Hegde等[53]研究了新型PARP抑制劑P10 聯(lián)合SAHA對(duì)白血病細(xì)胞的作用，發(fā)現(xiàn)P10 可協(xié)同SAHA誘發(fā)內(nèi)源性凋亡途徑，引起DNA損傷和S期細(xì)胞周期阻滯，從而發(fā)揮協(xié)同抗癌作用。

2.10 PARP抑制劑與中藥單體聯(lián)用

近年來，天然產(chǎn)物由于毒性小、安全性高等優(yōu)勢(shì)，在治療惡性腫瘤領(lǐng)域受到了越來越多學(xué)者的關(guān)注。Hou等[54]以人卵巢癌細(xì)胞為研究對(duì)象，發(fā)現(xiàn)小檗堿可誘導(dǎo)DNA氧化損傷并抑制HRR功能，與尼拉帕利聯(lián)用可發(fā)揮協(xié)同抗腫瘤作用，這種作用與小檗堿抑制Rad51 表達(dá)和激活PARP，從而使卵巢癌細(xì)胞對(duì)尼拉帕利更加敏感有關(guān)。Wang 等[55] 在研究土木香內(nèi)酯（alantolactone，ATL）與PARP抑制劑的協(xié)同抗腫瘤作用時(shí)發(fā)現(xiàn)，人前列腺癌PC-3 細(xì)胞會(huì)對(duì)非細(xì)胞毒性劑量（10 μmol/L）的ATL產(chǎn)生耐藥性，這可能與激活DNA損傷修復(fù)蛋白PARP的表達(dá)有關(guān);而非細(xì)胞毒性劑量的ATL聯(lián)合非細(xì)胞毒性劑量（10 μmol/L）的奧拉帕利可對(duì)腫瘤細(xì)胞產(chǎn)生致死作用，對(duì)包括人前列腺癌、人肺癌和人結(jié)直腸癌等多種腫瘤細(xì)胞均展現(xiàn)出廣譜抗癌作用，這種作用與ATL 誘導(dǎo)的DNA 氧化損傷和PARP 抑制劑形成的PARP 捕獲直接相關(guān)。

除上述研究外，在人結(jié)腸癌細(xì)胞體內(nèi)外實(shí)驗(yàn)中，PARP抑制劑聯(lián)合糖原合成酶激酶3β（glycogen synthasekinase-3β，GSK3β）抑制劑具有明顯的協(xié)同作用，GSK3β抑制劑可通過下調(diào)BRCA1 的表達(dá)而抑制HRR功能，使結(jié)腸癌細(xì)胞對(duì)PARP抑制劑更加敏感[56]。

3 結(jié)語

PARP 抑制劑對(duì)于HRR 功能缺陷的腫瘤細(xì)胞具有獨(dú)特的細(xì)胞毒性作用。然而，并不是所有HRR 功能缺陷的腫瘤細(xì)胞均對(duì)PARP抑制劑敏感，部分腫瘤細(xì)胞還會(huì)產(chǎn)生獲得性耐藥[57]?？梢?，尋求具有增敏增效或克服耐藥效果的PARP抑制劑與其他藥物的聯(lián)合干預(yù)方案顯得尤為重要。近年來，越來越多的研究聚焦在PARP抑制劑與放療或者化療等藥物的聯(lián)合治療上，研究結(jié)果顯示，聯(lián)合干預(yù)既可以減輕藥物的不良反應(yīng)，又能提高藥物的干預(yù)效果。隨著研究的不斷深入，PARP抑制劑聯(lián)合其他藥物所產(chǎn)生的諸多問題和困惑也有待進(jìn)一步探索與理清。因此，筆者認(rèn)為后續(xù)研究方向可從以下幾個(gè)方面展開：（1）關(guān)于藥物長(zhǎng)期使用的安全性問題，盡管PARP抑制劑的主要作用基礎(chǔ)為腫瘤細(xì)胞DNA損傷，但在長(zhǎng)期使用的情況下，藥物是否會(huì)對(duì)人體正常組織和功能產(chǎn)生影響、其安全性能否得到保障還有待檢驗(yàn)。（2）關(guān)于PARP抑制劑聯(lián)合治療的使用劑量問題，一方面需要確定化療藥物的適宜劑量，確?；颊咴诳赡褪艿那闆r下獲得較好的療效;另一方面，作為放化療增敏劑的PARP抑制劑使用劑量也需要慎重考察。（3）關(guān)于PARP抑制劑治療的耐藥性問題，包括HRR 相關(guān)基因的二次突變、HRR與非同源末端連接的失衡以及復(fù)制叉的保護(hù)作用等[57-59]。通過上述聯(lián)合用藥研究結(jié)果來看，PARP 抑制劑與放療或其他藥物的結(jié)合或許可以克服這種局限。通過相關(guān)的臨床試驗(yàn)，比如定期進(jìn)行液體活檢取樣等，及時(shí)發(fā)現(xiàn)耐藥機(jī)制并優(yōu)化靶向藥物組合依然是十分必要的[59]。相信隨著研究的不斷深入，會(huì)有更多安全且有效的PARP抑制劑聯(lián)合干預(yù)方案得以應(yīng)用，從而使更多的患者獲益。