武英茹 李媛媛 李寧 郭丁丁 郭福貴 蘭子君 趙琳儒 倪艷
關(guān)鍵詞白子菜葉;干燥方式;采收時(shí)間;水溶性浸出物;總黃酮;多糖;紫云英苷;含量測定
白子菜Gynura divaricata(L.)DC.為菊科菊三七屬多年生草本植物,又名雞菜、白東楓、大肥牛、白背三七、白子草,主要分布于我國浙江、廣東、廣西、四川、福建及云南等地。其葉味咸、微辛,性寒[1],于夏、秋兩季采收,曬干或晾干?!吨兴幋筠o典(上冊)》記載,白子菜能清熱、舒筋、止血、祛瘀,可治百日咳、風(fēng)濕痛、骨折、創(chuàng)傷出血、癰腫瘡癤等[1]?,F(xiàn)代研究表明,白子菜中主要含有黃酮及黃酮苷類、多糖類、生物堿類、揮發(fā)油等化學(xué)成分[2],其中黃酮類和多糖類成分具有降血糖、降尿酸、降血脂、抗氧化等藥理作用,是其主要活性成分[3-4]。白子菜現(xiàn)被《福建省中藥材標(biāo)準(zhǔn)(2006 年版)》收錄,但其標(biāo)準(zhǔn)僅有白子菜水分、灰分及總黃酮含量測定項(xiàng)[5],未見白子菜產(chǎn)地加工的相關(guān)描述。產(chǎn)地加工是中藥材生產(chǎn)過程中不可缺少的重要環(huán)節(jié),可以保障中藥材的品質(zhì)[6],其相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)的缺失可能會(huì)造成生產(chǎn)過程中有效成分的損失,從而影響藥材質(zhì)量和療效。
新鮮白子菜葉中水分含量較高(80%~90%),采摘后若不及時(shí)干燥或干燥方法不當(dāng),則易發(fā)生變色或腐爛,從而影響其藥用價(jià)值和經(jīng)濟(jì)價(jià)值;此外,對(duì)于人工栽培的白子菜,不同的采收時(shí)間也可能會(huì)影響其質(zhì)量[7-8]。因此,科學(xué)規(guī)范的采收應(yīng)充分考慮藥材中有效成分的積累及藥材的生長規(guī)律。目前,關(guān)于白子菜采收時(shí)間和干燥方式的研究較少,雖有學(xué)者以總黃酮含量為指標(biāo)對(duì)白子菜的采收時(shí)間進(jìn)行了探討[7],但除含有黃酮類成分外,多糖類成分也是白子菜的主要活性成分[9],加之本課題組前期從白子菜50%乙醇提取物中分離得到了紫云英苷,并證實(shí)了該成分具有調(diào)節(jié)血糖、增強(qiáng)免疫力、抗炎、抗氧化等作用[10-12],故僅以總黃酮為指標(biāo)進(jìn)行研究尚不夠全面。基于此,本研究采用2020 年版《中國藥典》(四部)通則“熱浸法”測定白子菜葉中的水溶性浸出物,采用紫外-可見分光光度法測定其中總黃酮及多糖的含量,采用高效液相色譜(high performance liquid chromatography,HPLC)法測定其中紫云英苷的含量,并以這些主要活性成分含量為指標(biāo),篩選白子菜葉的最優(yōu)干燥方式及采收時(shí)間,旨在為規(guī)范其產(chǎn)地加工及控制其質(zhì)量提供依據(jù)。
1 材料
1.1 主要儀器
本研究所用主要儀器有UltiMate 3000 型HPLC 儀(美國Thermo Fisher Scientific 公司),1100 型HPLC 儀(美國Agilent 公司),SE402F 型十萬分之一電子分析天平[奧豪斯儀器(上海)有限公司],F(xiàn)W-100 型高速萬能粉碎機(jī)、HH-1 型電熱恒溫水浴鍋(北京科偉永興儀器有限公司),DZF-6050 型真空干燥箱(南京沃環(huán)科技實(shí)業(yè)有限公司),U-1901 型雙光束紫外-可見分光光度計(jì)(北京普析通用儀器有限責(zé)任公司),LC-300B 型數(shù)控超聲波清洗儀( 山東濟(jì)寧魯超超聲設(shè)備有限公司),EG720KG4-NA 型微波爐(廣東美的微波電器制造有限公司),LGJ-S20 型冷凍干燥機(jī)(北京四環(huán)起航科技有限公司)等。
1.2 主要藥品與試劑
D-無水葡萄糖對(duì)照品(批號(hào)110833-201506,純度≥99.5%)購自國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司;蘆丁對(duì)照品(批號(hào)100080-202012,純度≥91.6%)購自中國食品藥品檢定研究院;紫云英苷對(duì)照品(批號(hào)PS011379,純度≥98.0%)購自成都普思生物科技股份有限公司;硫酸、苯酚、硝酸鋁、氫氧化鈉、乙腈均為色譜純,無水乙醇、磷酸均為分析純,水為超純水。
8 批白子菜葉(高15~20 cm的地上部分,取白子菜葉)分別于不同時(shí)間采自山西省運(yùn)城市稷山縣清河鎮(zhèn)稷王農(nóng)業(yè)示范園,經(jīng)山西省中醫(yī)藥研究院倪艷教授鑒定均為菊科菊三七屬多年生草本植物白子菜G. divaricata(L.)DC.的葉。8批白子菜樣品的來源信息見表1。
2 方法與結(jié)果
2.1 不同干燥方式樣品的制備
取白子菜葉樣品(編號(hào)S1),共7 份,每份50 g,洗凈、攤晾8 h 后,分別經(jīng)陰干、曬干、烘箱干燥(60、70、80 ℃)、微波干燥及冷凍干燥,均干燥至葉質(zhì)硬而脆且質(zhì)量恒定。將干燥后的樣品粉碎,過40 目篩,備用。不同干燥方式及干燥條件見表2。
2.2 不同采收時(shí)間樣品的制備
取8 批白子菜葉樣品,每份50 g,洗凈、攤晾8 h 后,于60 ℃干燥至質(zhì)量恒定,將干燥后的樣品粉碎,過40 目篩,備用。
2.3 水溶性浸出物的測定
參考2020 年版《中國藥典》(四部)通則“2201 浸出物測定法”項(xiàng)下“熱浸法”測定白子菜葉中的水溶性浸出物[13]:取樣品粉末(過50 目篩)2 g,精密稱定,置于250mL錐形瓶中,加水50 mL,密塞,稱定質(zhì)量,靜置1 h 后,連接冷凝回流管,加熱至沸騰,并保持微沸1 h 后放冷,再次稱定質(zhì)量,用水補(bǔ)足減失的質(zhì)量,搖勻,濾過,精密量取濾液25 mL,置于干燥至恒定質(zhì)量的蒸發(fā)皿中,水浴蒸干,于105 ℃干燥3 h 后,置于干燥器中冷卻30 min,迅速精密稱定質(zhì)量,并按下式計(jì)算水溶性浸出物含量(%):水溶性浸出物含量(%)=[(m2-m0)×50]/(25×m1)×100%(式中,m0為蒸發(fā)皿質(zhì)量,m1為供試品質(zhì)量,m2為干燥后蒸發(fā)皿+供試品質(zhì)量)。每個(gè)樣品平行測定3次。
2.4 總黃酮含量的測定
采用紫外-可見分光光度法測定白子菜葉中總黃酮(以蘆丁計(jì))的含量。
2.4.1 線性關(guān)系考察精密稱取蘆丁對(duì)照品10 mg,加80%乙醇,超聲(功率300 W,頻率25 kHz,下同)溶解并定容至10 mL,搖勻,即得蘆丁質(zhì)量濃度為1.0 mg/mL的對(duì)照品溶液。分別吸取上述對(duì)照品溶液0.2、0.4、0.6、0.8、1.0、1.2 mL,置于25 mL量瓶中,加水至6 mL,加5%亞硝酸鈉溶液1 mL,搖勻,靜置6 min,加10%硝酸鋁溶液1 mL,搖勻,靜置6 min,加4%氫氧化鈉溶液10 mL,以80%乙醇定容,靜置15 min。以80%乙醇為空白對(duì)照,使用紫外-可見分光光度計(jì)于510 nm波長處測定吸光度[14]。以蘆丁對(duì)照品的質(zhì)量濃度為橫坐標(biāo)(X)、吸光度為縱坐標(biāo)(Y)進(jìn)行線性回歸,得蘆丁的回歸方程為Y=0.478 5X-0.008 5(R 2=0.999 9),表明蘆丁檢測質(zhì)量濃度的線性范圍為0.008~0.048 mg/mL。
2.4.2 方法學(xué)考察(1)取上述蘆丁對(duì)照品溶液0.5mL,按“2.4.1”項(xiàng)下方法顯色后于510 nm 波長處連續(xù)測定吸光度6 次。結(jié)果顯示,蘆丁吸光度的RSD為0.02%(n=6),表明儀器精密度良好。(2)取白子菜葉(編號(hào)S1)粉末0.5 g,置于具塞錐形瓶中,加石油醚150 mL,超聲30 min,濾過,揮干石油醚,殘?jiān)?0%乙醇45 mL,超聲30 min,濾過,濾液用80%乙醇定容至50 mL,即得供試品溶液。取上述供試品溶液5.0 mL,置于25 mL 量瓶中,按“2.4.1”項(xiàng)下方法顯色后,分別在室溫下放置0、10、20、30、40、50、60 min 時(shí)于510 nm 波長處測定吸光度。結(jié)果顯示,蘆丁吸光度的RSD 為2.41%(n=7),表明供試品溶液于室溫下放置60 min 內(nèi)穩(wěn)定性良好。(3)取上述供試品溶液(編號(hào)S1)5.0 mL,共6 份,按“2.4.1”項(xiàng)下方法顯色后于510 nm波長處測定吸光度并按標(biāo)準(zhǔn)曲線法計(jì)算樣品含量。結(jié)果顯示,蘆丁含量的RSD為2.83%(n=6),表明方法重復(fù)性良好。(4)精密稱取白子菜葉(編號(hào)S1)0.5 g,共9 份,分別精密加入一定量的蘆丁對(duì)照品溶液,按上述方法制備供試品溶液,再按“2.4.1”項(xiàng)下方法顯色后于510 nm波長處測定吸光度并計(jì)算加樣回收率,結(jié)果顯示,蘆丁的平均加樣回收率為103.60%(RSD=2.56%,n=9)。
2.4.3 總黃酮含量測定精密稱取待測白子菜葉粉末0.5 g,按“2.4.2(2)”項(xiàng)下方法制備供試品溶液,再按“2.4.1”項(xiàng)下方法顯色后于510 nm波長處測定吸光度并按標(biāo)準(zhǔn)曲線法計(jì)算樣品含量。每個(gè)樣品平行測定3 次。
2.5 多糖含量的測定
采用紫外-可見分光光度法測定白子菜葉中多糖(以D-無水葡萄糖計(jì))的含量。
2.5.1 線性關(guān)系考察精密稱取D-無水葡萄糖對(duì)照品10 mg,加80%乙醇,超聲溶解并定容至100 mL,搖勻,即得D-無水葡萄糖質(zhì)量濃度為0.1 mg/mL 的對(duì)照品溶液。分別吸取上述對(duì)照品溶液0.2、0.4、0.6、0.8、1.0 mL,置于10 mL試管中,加水至2 mL,加5%苯酚溶液1 mL,搖勻,迅速精密加入濃硫酸5 mL,搖勻,避光靜置15min,取出。以水為空白對(duì)照,使用紫外-可見分光光度計(jì)于490 nm波長處測定吸光度[14]。以D-無水葡萄糖對(duì)照品的質(zhì)量濃度為橫坐標(biāo)(X)、吸光度為縱坐標(biāo)(Y)進(jìn)行線性回歸,得D-無水葡萄糖的回歸方程為Y=11.458X+0.003(R 2=0.999 6),表明D-無水葡萄糖檢測質(zhì)量濃度的線性范圍為0.01~0.05 mg/mL。
2.5.2 方法學(xué)考察(1)取上述D-無水葡萄糖對(duì)照品溶液0.4 mL,按“2.5.1”項(xiàng)下方法顯色后于490 nm波長處連續(xù)測定吸光度6 次。結(jié)果顯示,D-無水葡萄糖吸光度的RSD為0.02%(n=6),表明儀器精密度良好。(2)取白子菜葉(編號(hào)S1)粉末0.5 g,置于錐形瓶中,加80%乙醇100 mL,加熱回流1 h,趁熱濾過,濾渣和濾器經(jīng)80%乙醇30 mL分3 次洗滌后移至燒瓶中,加水150 mL,加熱回流2 h,趁熱濾過,用少量熱水洗滌濾器,合并濾液及洗液,放冷,用水定容至250 mL,即得供試品溶液。取上述供試品溶液0.5 mL,置于具塞試管中,按“2.5.1”項(xiàng)下方法顯色后,分別在室溫下放置0、10、20、30、40、50、60min 時(shí)于490 nm波長處測定吸光度。結(jié)果顯示,D-無水葡萄糖吸光度的RSD為2.98%(n=7),表明供試品溶液于室溫下放置60 min 內(nèi)穩(wěn)定性良好。(3)取上述供試品溶液(編號(hào)S1)0.5 mL,共6 份,按“2.5.1”項(xiàng)下方法顯色后于490 nm波長處測定吸光度并按標(biāo)準(zhǔn)曲線法計(jì)算樣品含量。結(jié)果顯示,D-無水葡萄糖含量的RSD為3.59%(n=6),表明方法重復(fù)性良好。(4)精密稱取白子菜葉(編號(hào)S1)0.5 g,共9 份,分別精密加入一定量的D-無水葡萄糖對(duì)照品溶液,按上述方法制備供試品溶液,再按“2.5.1”項(xiàng)下方法顯色后于490 nm波長處測定吸光度并計(jì)算加樣回收率。結(jié)果顯示,D-無水葡萄糖的平均加樣回收率為98.57%(RSD=1.66%,n=9)。
2.5.3 多糖含量測定精密稱取待測白子菜葉粉末0.5g,按“2.5.2(2)”項(xiàng)下方法制備供試品溶液,再按“2.5.1”項(xiàng)下方法顯色后于490 nm波長處測定吸光度并按標(biāo)準(zhǔn)曲線法計(jì)算樣品含量。每個(gè)樣品平行測定3次。
2.6 紫云英苷含量的測定
采用HPLC法測定白子菜葉中紫云英苷的含量。
2.6.1 色譜條件以Diamonsil C18(2)(4.6 mm× 250mm,5 μm)為色譜柱,以乙腈-0.1%磷酸溶液為流動(dòng)相進(jìn)行梯度洗脫(0~6.0 min,10%A→17%A;6.0~7.5 min,17%A→27%A;7.5~11.0 min,27%A→90%A;11.0~15.0 min,90%A→17%A);流速為1.0 mL/min;檢測波長為348 nm;柱溫為35 ℃;進(jìn)樣量為10 μL。
2.6.2 溶液的制備(1)精密稱取紫云英苷對(duì)照品5mg,置于5 mL量瓶中,加甲醇溶解并定容,搖勻,精密移取0.8 mL,用甲醇定容至10 mL,制成紫云英苷質(zhì)量濃度為0.08 mg/mL 的對(duì)照品溶液。(2)取白子菜葉粉末1.0g,精密稱定,置于錐形瓶中,加50%乙醇20 mL,稱定質(zhì)量,超聲提取30 min,冷卻至室溫,再次稱定質(zhì)量,用50%乙醇補(bǔ)足減失的質(zhì)量,經(jīng)0.45 μm濾膜濾過,取濾液,即得供試品溶液。(3)以50%乙醇為空白對(duì)照溶液。
2.6.3 系統(tǒng)適用性試驗(yàn)精密吸取上述對(duì)照品溶液、供試品溶液和空白對(duì)照溶液,按“2.6.1”項(xiàng)下色譜條件進(jìn)樣測定,記錄色譜圖,詳見圖1。由圖1 可知,紫云英苷的分離度大于1.5,理論板數(shù)按紫云英苷峰計(jì)均大于2 500,空白對(duì)照溶液對(duì)測定無干擾。
2.6.4 線性關(guān)系考察精密吸取“2.6.2(1)”項(xiàng)下對(duì)照品溶液1、2、5、10、15、20 μL,按“2.6.1”項(xiàng)下色譜條件進(jìn)樣測定,記錄峰面積。以紫云英苷對(duì)照品的進(jìn)樣量為橫坐標(biāo)(X)、峰面積為縱坐標(biāo)(Y)進(jìn)行線性回歸,得紫云英苷的回歸方程為Y=35.266X-0.087(R2=0.999 8),表明紫云英苷檢測進(jìn)樣量的線性范圍為0.08~1.60 μg。
2.6.5 方法學(xué)考察(1)精密吸取“2.6.2(1)”項(xiàng)下對(duì)照品溶液10 μL,按“2.6.1”項(xiàng)下色譜條件連續(xù)進(jìn)樣測定6次,記錄峰面積。結(jié)果顯示,紫云英苷峰面積的RSD為0.59%(n=6),表明儀器精密度良好。(2)精密吸取“2.6.2(2)”項(xiàng)下供試品溶液(編號(hào)S1),分別于室溫下放置0、2、4、6、8、12、24 h 時(shí)按“2.6.1”項(xiàng)下色譜條件進(jìn)樣測定,記錄峰面積。結(jié)果顯示,紫云英苷峰面積的RSD 為1.76%(n=7),表明供試品溶液于室溫下放置24 h 內(nèi)穩(wěn)定性良好。(3)精密稱取白子菜葉(編號(hào)S1)1.0 g,共6份,按“2.6.2(2)”項(xiàng)下方法制備供試品溶液,再按“2.6.1”項(xiàng)下色譜條件進(jìn)樣測定,記錄峰面積并按標(biāo)準(zhǔn)曲線法計(jì)算樣品含量。結(jié)果顯示,紫云英苷含量的RSD為3.60%(n=6),表明方法重復(fù)性良好。(4)精密稱取白子菜葉(編號(hào)S1)1.0 g,共9 份,分別精密加入一定量的紫云英苷對(duì)照品溶液,按“2.6.2(2)”項(xiàng)下方法制備供試品溶液,再按“2.6.1”項(xiàng)下色譜條件進(jìn)樣測定,記錄峰面積并計(jì)算加樣回收率。結(jié)果顯示,紫云英苷的平均加樣回收率為104.65%(RSD=6.91%,n=9)。
2.6.6 紫云英苷含量測定精密稱取待測白子菜葉樣品粉末1.0 g,按“2.6.2(2)”項(xiàng)下方法制備供試品溶液,再按“2.6.1”項(xiàng)下色譜條件進(jìn)樣測定,記錄峰面積并按標(biāo)準(zhǔn)曲線法計(jì)算樣品含量。每個(gè)樣品平行測定3次。
2.7 綜合評(píng)分的計(jì)算
采用層次分析法進(jìn)行綜合評(píng)價(jià)。本研究構(gòu)建的兩兩比較矩陣中,多糖、總黃酮、紫云英苷是發(fā)揮臨床作用的物質(zhì)基礎(chǔ),其重要性高于水溶性浸出物;多糖、黃酮類成分的抗氧化、抗炎、增強(qiáng)免疫等作用與白子菜具有的清熱涼血、活血止痛功效契合,且總黃酮的作用強(qiáng)于多糖;紫云英苷具有的降血糖、降血脂作用與白子菜的藥理作用相對(duì)應(yīng)[15]。故總黃酮、多糖、紫云英苷及水溶性浸出物含量的相對(duì)重要性分別記1、3、5、7 分,矩陣結(jié)果見表3。
首先,按上述層次分析法計(jì)算各指標(biāo)成分的權(quán)重系數(shù)及隨機(jī)一致性比率(consistency ratio,CR):CR=CI/RI[ 式中,CI(consistency index)為一致性指標(biāo),RI(random consistency index)為隨機(jī)一致性指標(biāo)]。若CR<0.1,表示矩陣具有滿意的一致性,且權(quán)重計(jì)算正確[15]。
2.8 不同干燥方式對(duì)白子菜葉質(zhì)量的影響
按“2.1”項(xiàng)下方法制備不同干燥方式的白子菜葉樣品,記錄干燥時(shí)間并觀察其外觀性狀,分別按“2.3”“2.4.3”“2.5.3”“2.6.6”項(xiàng)下方法測定樣品中水溶性浸出物、總黃酮、多糖、紫云英苷的含量,并按“2.7”項(xiàng)下方法進(jìn)行綜合評(píng)價(jià)。采用Excel 2010 軟件錄入數(shù)據(jù),利用SPSS 23.0 軟件進(jìn)行方差分析(下同)。
2.8.1 干燥時(shí)間及外觀性狀干燥時(shí)間以微波干燥最短,其次為80 ℃烘干,最長為陰干。陰干、微波干燥及冷凍干燥所得白子菜葉均呈深淺不同的綠色,而烘干所得白子菜葉的顏色較深;冷凍干燥所得白子菜葉的葉片平展,最接近鮮葉片,其余干燥方式所得白子菜葉的葉片均存在不同程度皺縮;80 ℃烘干及微波干燥所得白子菜葉有一定香氣且具咸味。結(jié)果見表4。
2.8.2 含量測定結(jié)果水溶性浸出物含量以曬干、微波干燥、冷凍干燥相對(duì)較高且3 種方式無明顯差異,80 ℃烘干最低;總黃酮含量以微波干燥最高,80 ℃烘干最低,且微波干燥明顯高于其他干燥方式;多糖含量以冷凍干燥最高,陰干最低,而冷凍干燥與其他5 種干燥方式(除陰干外)比較均無明顯差異;紫云英苷含量以陰干和微波干燥較高,80 ℃烘干最低,且陰干和微波干燥顯著高于其他干燥方式。結(jié)果見表5。
2.8.3 綜合評(píng)價(jià)按“2.7”項(xiàng)下方法計(jì)算得CR為0.043 8(<0.1),總黃酮、多糖、紫云英苷、水溶性浸出物含量的權(quán)重系數(shù)分別為0.563 8、0.263 4、0.117 8、0.055 0。陰干、曬干、60 ℃烘干、70 ℃烘干、80 ℃烘干、微波干燥、冷凍干燥的綜合評(píng)分分別為0.811 8、0.855 8、0.629 5、0.546 1、0.492 8、0.996 3、0.665 4 分,提示微波干燥所得白子菜葉的質(zhì)量較好。
2.9 不同采收時(shí)間對(duì)白子菜葉質(zhì)量的影響
按“2.2”項(xiàng)下方法制備不同采收時(shí)間的白子菜葉樣品,分別按“2.3”“2.4.3”“2.5.3”“2.6.6”項(xiàng)下方法測定樣品中水溶性浸出物、總黃酮、多糖、紫云英苷的含量,按“2.7”項(xiàng)下方法進(jìn)行綜合評(píng)價(jià)。
2.9.1 含量測定結(jié)果水溶性浸出物含量由高到低依次為9 月>8 月>3 月>7 月>6 月>4 月>10 月>5 月,總黃酮含量為8 月>6 月>5 月>7 月>9 月>10 月>4月>3 月,多糖含量為8 月>7 月>9 月>6 月>5 月>4月>10 月>3 月,紫云英苷含量為6 月>5 月≈7 月≈9月>8月>4月≈10月>3 月。結(jié)果見表6。
2.9.2 綜合評(píng)價(jià)按“2.7”項(xiàng)下方法計(jì)算得CR為0.043 8(<0.1),總黃酮、多糖、紫云英苷、水溶性浸出物含量的權(quán)重系數(shù)分別為0.563 8、0.263 4、0.117 8、0.055 0。3~10 月樣品的綜合評(píng)分分別為0.658 0、0.752 1、0.937 0、0.962 9、0.965 8、0.988 6、0.929 2、0.808 4 分,提示5~9月采收的白子菜葉質(zhì)量較好。
3 討論
3.1 實(shí)驗(yàn)條件的優(yōu)化
本課題組前期參考2020 年版《中國藥典》(一部)[14],分別考察了甲醇、30%乙醇、40%乙醇、50%乙醇、60%乙醇、70%乙醇、80%乙醇等不同提取溶劑及超聲、回流提取對(duì)白子菜葉中總黃酮提取率的影響,結(jié)果顯示,當(dāng)以80%乙醇超聲提取時(shí),總黃酮的提取率較高。同時(shí),本課題組參考2020 年版《中國藥典》(一部)[14],對(duì)多糖的提取時(shí)間進(jìn)行了考察,結(jié)果顯示,回流3 h 的多糖提取率較高。此外,本課題組還分別考察了不同色譜柱[AgilentPoroshell SB-C18(100 mm×2.1 mm,2.7 μm)、DiamonsilC18(2)(4.6 mm× 250 mm,5 μm)] 及不同流動(dòng)相(乙腈-0.1%磷酸溶液、甲醇-0.1%磷酸溶液),結(jié)果顯示,以Diamonsil C18(2)為色譜柱、乙腈-0.1%磷酸溶液為流動(dòng)相進(jìn)行梯度洗脫時(shí),所得色譜峰峰形較好,且待測成分峰周圍無雜峰干擾。
3.2 含量測定結(jié)果分析
有研究發(fā)現(xiàn),白子菜的水提取物及乙醇提取物具有顯著的降血糖作用[3]??傸S酮及多糖是白子菜降血糖、降血脂的主要活性成分[3,17]。本研究結(jié)果顯示,微波干燥所得白子菜葉中水溶性浸出物、總黃酮、多糖及紫云英苷的含量均較高,且微波干燥的時(shí)間顯著短于其他干燥方式;80 ℃烘干所得各成分含量變化有所不同;綜合評(píng)價(jià)結(jié)果顯示,微波干燥所得白子菜葉的綜合評(píng)分(0.996 3分)最高,表明此法所得白子菜葉樣品質(zhì)量較好,這與微波干燥有利于保存多糖類、黃酮及黃酮苷類成分的結(jié)論一致[18]。8 月采收的白子菜葉中總黃酮、多糖及紫云英苷的含量均較高,3 月采收的白子菜葉中各成分含量均較低,提示不同采收時(shí)間樣品中各成分含量存在差異;綜合評(píng)價(jià)結(jié)果顯示,8 月采收白子菜葉的綜合評(píng)分(0.988 6 分)最高,除3、4、10 月外,其余采收時(shí)間白子菜葉的綜合評(píng)分均大于0.90 分,這與白子菜中總黃酮含量以5~9 月較高一致。
綜上所述,微波干燥所得白子菜葉的質(zhì)量較好,5~9 月采收較優(yōu)。