■楊小軍 雷新建 王佳堃 孔祥峰 蘇 勇 曾祥芳 劉作華 姚軍虎*

（1.西北農(nóng)林科技大學(xué)動(dòng)物科技學(xué)院，陜西 楊凌 712100；2.浙江大學(xué)動(dòng)物科學(xué)學(xué)院，浙江 杭州 310058；3.中國(guó)科學(xué)院亞熱帶農(nóng)業(yè)生態(tài)研究所，湖南 長(zhǎng)沙 410125；4.南京農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科技學(xué)院，江蘇 南京 210095；5.中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科學(xué)技術(shù)學(xué)院，北京 100193；6.重慶市畜牧科學(xué)院，重慶 402460）

消化道是動(dòng)物機(jī)體消化吸收營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的主要場(chǎng) 所，其形態(tài)結(jié)構(gòu)的完整性是保證營(yíng)養(yǎng)正常吸收的基礎(chǔ)。消化道上皮細(xì)胞按照單層有序排列，對(duì)腸腔內(nèi)的物質(zhì)進(jìn)行選擇性透過，實(shí)現(xiàn)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的流動(dòng)過程。伴隨食物進(jìn)入消化道內(nèi)的雜質(zhì)和致病原直接與消化道接觸，物理屏障在保證消化道對(duì)食物中營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)消化吸收的同時(shí)，維持消化道通透性，阻隔有害物質(zhì)或病原微生物進(jìn)入機(jī)體內(nèi)部。消化道物理屏障受損可能導(dǎo)致有害物質(zhì)和微生物進(jìn)入動(dòng)物血液，危害機(jī)體健康。因此，完整的物理屏障對(duì)養(yǎng)分?jǐn)z入和機(jī)體健康有重要作用。消化道物理屏障分為增加營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)吸收面積的乳頭、絨毛與隱窩等組織形態(tài)學(xué)結(jié)構(gòu)，維持消化道通透性的細(xì)胞緊密連接，以及緩沖隔離食糜、覆蓋上皮細(xì)胞的黏液層。文章對(duì)畜禽消化道物理屏障的功能與影響因素展開綜述，結(jié)合Meta 分析探究評(píng)價(jià)畜禽胃腸道物理屏障的測(cè)定指標(biāo)，并提供相關(guān)指標(biāo)的健康范圍，以期為畜禽消化道健康的物理屏障評(píng)估提供指標(biāo)和參數(shù)支撐。

1 消化道物理屏障及其影響因素

1.1 瘤胃乳頭

瘤胃是高效降解碳水化合物的天然生物反應(yīng)器，含有多種細(xì)菌、真菌、古細(xì)菌、原生動(dòng)物，是保障養(yǎng)分利用和機(jī)體健康的基礎(chǔ)。幼齡反芻動(dòng)物的瘤胃體積小，發(fā)育不完全，且不具備纖維消化功能，瘤胃乳頭高度和上皮固有層厚度均隨日齡的增加而逐步提高。瘤胃形態(tài)和功能的完善是幼齡反芻動(dòng)物發(fā)育成熟的重要標(biāo)志之一。成年反芻動(dòng)物瘤胃內(nèi)壁出現(xiàn)大量乳頭狀突起，既可增加瘤胃內(nèi)壁表面積，增強(qiáng)瘤胃對(duì)揮發(fā)性脂肪酸（volatile fatty acids，VFA）等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的吸收能力；又能增加代謝產(chǎn)物從瘤胃上皮進(jìn)入毛細(xì)血管的速率來促進(jìn)代謝活動(dòng)；此外還具有一定的免疫保護(hù)功能。瘤胃乳頭最外層是由完全角質(zhì)化的細(xì)胞構(gòu)成的角質(zhì)層，可保護(hù)乳頭免受瘤胃食糜的磨損侵蝕，同時(shí)角質(zhì)化程度也直接影響瘤胃乳頭對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的吸收。

瘤胃乳頭是反映瘤胃健康的形態(tài)學(xué)基礎(chǔ)，而營(yíng)養(yǎng)素是調(diào)節(jié)瘤胃乳頭發(fā)育的主要因素之一。高精料水平的飼糧可顯著降低瘤胃乳頭的上皮總厚度，但過量的淀粉精料反而對(duì)瘤胃乳頭的發(fā)育不利。VFA 為瘤胃乳頭發(fā)育提供必需的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，丁酸可調(diào)控上皮細(xì)胞增殖和凋亡，增加瘤胃乳頭的生長(zhǎng)速度。丙酸和乙酸也能促進(jìn)乳頭發(fā)育，但效果弱于丁酸。熱應(yīng)激會(huì)增加反芻動(dòng)物精飼料的采食量，其中淀粉攝入量的加大使得動(dòng)物的瘤胃乳頭高度有所增加，并對(duì)瘤胃乳頭上皮的角質(zhì)層有一定程度的損傷。瘤胃上皮對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的吸收轉(zhuǎn)運(yùn)很大程度上依賴于角質(zhì)層細(xì)胞的角質(zhì)化程度。高濃度營(yíng)養(yǎng)飼糧水平能增加瘤胃上皮基底層細(xì)胞數(shù)量，基底層細(xì)胞分化向上遷移，引起顆粒層和棘層細(xì)胞數(shù)量增加，從而促進(jìn)瘤胃上皮乳頭的發(fā)育。但當(dāng)反芻動(dòng)物發(fā)生亞急性瘤胃酸中毒時(shí)，瘤胃pH 快速下降導(dǎo)致內(nèi)毒素和組胺的形成，刺激瘤胃上皮出現(xiàn)炎癥，加重瘤胃上皮細(xì)胞的損傷。高精料日糧山羊瘤胃角質(zhì)層脫落明顯，角質(zhì)層細(xì)胞和顆粒層之間的黏附受到損害，破壞瘤胃上皮的形態(tài)結(jié)構(gòu)，進(jìn)而影響其屏障功能。

1.2 腸道絨毛與隱窩

腸上皮細(xì)胞有序內(nèi)陷形成隱窩，上有指狀細(xì)小突起為腸道絨毛，形成了小腸的主要形態(tài)結(jié)構(gòu)，極大增加了營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)消化吸收的面積。腸道絨毛高度（vil?lus height，VH）是反映小腸消化和吸收能力的主要指標(biāo)，VH 增加，腸道的吸收面積增大。隱窩深度（crypt depth，CD）體現(xiàn)腸道細(xì)胞的生成速度，通常較淺的CD意味著更快的細(xì)胞成熟率和更強(qiáng)的營(yíng)養(yǎng)吸收功能。腸道絨毛高度/隱窩深度（VH/CD）是評(píng)估小腸吸收能力的重要參數(shù)，VH/CD降低則預(yù)示著黏膜損傷和營(yíng)養(yǎng)吸收能力下降。

研究表明多種添加劑可通過促進(jìn)腸道發(fā)育和完善消化道屏障進(jìn)而促進(jìn)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的吸收利用，改善生長(zhǎng)性能。日糧中補(bǔ)充蘇氨酸可提高肉仔雞腸道VH，進(jìn)而減輕注射脂多糖誘導(dǎo)的炎癥反應(yīng)。在肉雞日糧中添加谷氨酰胺可增加十二指腸和空腸的VH和表面積。Hamid 等（2018）研究發(fā)現(xiàn)，酸化飲水可顯著提高肉雞空腸VH，并改善肉雞生產(chǎn)性能。胡貴麗等（2018）研究發(fā)現(xiàn)，飼糧中添加博落回生物堿顯著提高黃羽肉雞空腸VH 和VH/CD。腸上皮細(xì)胞在發(fā)揮營(yíng)養(yǎng)吸收功能的同時(shí)，自身細(xì)胞代謝也相對(duì)旺盛，對(duì)能量需求較大。食糜中結(jié)構(gòu)性多糖（包括可溶性膳食纖維、低聚糖、抗性淀粉等）可在腸道微生物的發(fā)酵下生成短鏈脂肪酸，直接被腸上皮細(xì)胞作為營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)吸收，促進(jìn)腸道發(fā)育，保障物理屏障功能正常。Tian 等（2018）發(fā)現(xiàn)日糧補(bǔ)充低聚半乳糖能顯著降低21日齡仔豬空腸CD。田時(shí)祎等（2018）研究發(fā)現(xiàn)，早期灌喂低聚半乳糖顯著提高仔豬回腸VH/CD。消化道疾病的發(fā)生往往伴隨著腸道形態(tài)學(xué)結(jié)構(gòu)的病變，隱窩細(xì)胞增殖和上皮細(xì)胞凋亡之間的平衡改變導(dǎo)致腸絨毛萎縮和隱窩增生，從而導(dǎo)致營(yíng)養(yǎng)吸收表面的損失。感染球蟲病肉雞的腸道炎癥導(dǎo)致絨毛壞死，其特征是VH/CD 降低、隱窩擴(kuò)張和杯狀細(xì)胞減少。在熱應(yīng)激狀態(tài)下，肉雞空腸VH 下降，CD 增加，VH/CD 降低。Ma 等（2020）研究發(fā)現(xiàn)日糧補(bǔ)充酵母細(xì)胞壁顯著提高犢?；啬c的VH 和VH/CD。Zhang 等（2020）發(fā)現(xiàn)用淀粉芽孢桿菌或短小芽孢桿菌喂養(yǎng)斷奶山羊可促進(jìn)瘤胃乳頭和小腸絨毛的生長(zhǎng)。Costa 等（2019）發(fā)現(xiàn)日糧添加甘露聚糖顯著提高犢牛空腸VH。

1.3 緊密連接與通透性

腸上皮的一個(gè)重要作用是將管腔內(nèi)容物與間質(zhì)分開，這一功能的發(fā)揮主要依賴腸上皮的完整性和細(xì)胞旁空間的緊密連接。腸上皮細(xì)胞間的連接方式包括橋粒（desmosome）、半橋粒（hemidesmosome）、黏附連接（adherence junction）、間隙連接（gap junction）和緊密連接（tight junction）等多種形式。其中緊密連接是腸道上皮細(xì)胞之間的主要連接方式，也是調(diào)節(jié)腸道黏膜通透性和屏障功能的關(guān)鍵結(jié)構(gòu)。緊密連接通過連接復(fù)合體中的閉合蛋白（Claudins）和其他蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)調(diào)節(jié)水、離子和小分子的流動(dòng)。緊密連接復(fù)合體由膜內(nèi)蛋白、封閉蛋白和閉合蛋白家族的不同成員組成。與緊密連接相關(guān)的蛋白質(zhì)包括跨膜蛋白和細(xì)胞骨架蛋白?？缒さ鞍装艘Ш系鞍祝∣ccludin，OCLN）家族、閉合蛋白（Claudin，CLDN）家族和連接黏附分子（Junction adhesive molecule，JAM）家族，細(xì)胞骨架蛋白僅包含閉合小環(huán)蛋白（Zonula occludens，ZO）家族。OCLN家族是經(jīng)典的腸上皮細(xì)胞緊密連接蛋白，可封閉細(xì)胞間隙，過濾小分子和大分子物質(zhì)。CLDN 家族包含24 種蛋白，有4 個(gè)跨膜區(qū)和2 個(gè)胞外環(huán)狀結(jié)構(gòu)，作為緊密連接的整合蛋白參與屏障大小選擇性地調(diào)節(jié)。JAM家族共有4種蛋白，在內(nèi)皮和上皮中均有緊密連接作用。JAM-2特異性定位于細(xì)胞-細(xì)胞連接處并在同型緊密連接處富集表達(dá)，具有調(diào)節(jié)內(nèi)皮和上皮細(xì)胞通透性、白細(xì)胞募集、細(xì)胞增殖等多種功能。ZO 家族在維持上皮細(xì)胞屏障功能的基礎(chǔ)上，還在維持上皮極性和細(xì)胞物質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)中發(fā)揮重要功能。

早期移植母豬的糞菌可降低仔豬血漿中內(nèi)毒素和二胺氧化酶（diamineoxidase，DAO）的濃度，降低腸道通透性。低聚半乳糖可提高哺乳仔豬空腸ZO-1和Claudin-1 的基因表達(dá)，提高新生哺乳仔豬空腸組織中ZO-1 的蛋白表達(dá)，改善腸道屏障功能。凝結(jié)芽孢桿菌可降低仔豬血漿中DAO 濃度。添加糞腸球菌NCIMB 11181 可提高肉雞緊密連接蛋白CLDN-1 的基因表達(dá)量，同時(shí)提高空腸中Claudin-1 蛋白的表達(dá)。補(bǔ)飼紫丁香苷顯著增加了豬空腸上皮細(xì)胞CLDN-3、OCLN 和ZO-1 的mRNA 和蛋白表達(dá)。另一方面，色氨酸可增加斷奶仔豬血清DAO 活性和內(nèi)毒素濃度，降低斷奶仔豬回腸中OCLN、ZO-1 和CLDN-1 的豐度，并降低斷奶仔豬回腸中OCLN、ZO-1 和CLDN-1的mRNA表達(dá)。大豆凝集素顯著降低仔豬小腸上皮細(xì)胞跨上皮電阻值，提高堿性磷酸酶活性，增加通透性，并降低OCLN 和CLDN-3 的蛋白表達(dá)水平。當(dāng)動(dòng)物處于應(yīng)激狀態(tài)或患有腸道炎癥時(shí)，少量的腸腔內(nèi)毒素、共生微生物和病原體可能穿過上皮并通過緊密連接進(jìn)入循環(huán)，病原體還可以刺激免疫和腸上皮細(xì)胞局部分泌促炎細(xì)胞因子。這些炎癥和應(yīng)激反應(yīng)可能通過肌球蛋白輕鏈激酶誘導(dǎo)肌球蛋白輕鏈磷酸化，導(dǎo)致腸上皮緊密連接的收縮和開放以及腸通透性增加。

2 益生與應(yīng)激處理對(duì)腸道物理屏障影響的Meta分析

2.1 文獻(xiàn)檢索與篩選

此次Meta 分析的文章采用網(wǎng)絡(luò)數(shù)據(jù)庫(kù)進(jìn)行電子檢索，共包含CNKI、Science Direct、Pub Med、Web of Science 四個(gè)數(shù)據(jù)庫(kù)來源。目標(biāo)文獻(xiàn)的研究類型為探究益生或應(yīng)激處理對(duì)動(dòng)物消化道物理屏障影響的試驗(yàn)性論文。檢索與納入文章的篩選條件包括：試驗(yàn)對(duì)象為豬、蛋雞、肉雞、牛或羊；試驗(yàn)處理為飼料改良、益生菌添加等益生處理或熱應(yīng)激、饑餓、添加致病菌等應(yīng)激處理；試驗(yàn)設(shè)計(jì)中須包含健康動(dòng)物正常飼喂的空白對(duì)照組；試驗(yàn)結(jié)果包含瘤胃乳頭長(zhǎng)度、寬度、表面積和肌層厚度，腸道VH、CD 或VH/CD，血液內(nèi)毒素、D-乳酸、異硫氰酸熒光素（FITC-d）或DAO含量；胃腸道上皮OCLN、CLDN、JAM、ZO 或黏蛋白（MUC）蛋白家族的基因表達(dá)量等指標(biāo)。

2.2 數(shù)據(jù)提取

從納入文章中獲得試驗(yàn)動(dòng)物、試驗(yàn)處理、樣本類型、檢測(cè)值等原始數(shù)據(jù)。按照不同動(dòng)物的應(yīng)激或益生處理分組進(jìn)行Meta分析，組內(nèi)包含文獻(xiàn)少于3篇時(shí)舍棄分組。緊密連接蛋白同基因家族中選納入文章數(shù)量最多的基因進(jìn)行Meta 分析。檢測(cè)值包括平均值（mean）、標(biāo)準(zhǔn)差（SD）和樣本量（n），當(dāng)文章誤差以標(biāo)準(zhǔn)誤（SE）呈現(xiàn)時(shí)可按公式換算為SD值。

SD=SE×n

按消化道不同部位劃分亞組，同一亞組中有多個(gè)處理的按公式合并。

式中：k——處理數(shù)；

mi、SDi和ni——分別為第i個(gè)處理的平均數(shù)、標(biāo)準(zhǔn)差和樣本量。

2.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

計(jì)算瘤胃乳頭和腸道絨毛的健康范圍時(shí)，將對(duì)照和益生組的平均值錄入SPSS 24.0 軟件，按n值進(jìn)行個(gè)案加權(quán)后進(jìn)行數(shù)據(jù)的正態(tài)性檢驗(yàn)和描述性統(tǒng)計(jì)：當(dāng)數(shù)據(jù)符合正態(tài)分布時(shí)，取95%置信區(qū)間（CI），當(dāng)數(shù)據(jù)不符合正態(tài)分布時(shí)，取上下四分位數(shù)作為健康范圍的參考值。

Meta 分析使用Stata 15.1 軟件，所有結(jié)果指標(biāo)為連續(xù)型變量，使用隨機(jī)效應(yīng)模型（random effect，RE）和標(biāo)準(zhǔn)均值差（standard mean difference，SMD）算法進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)化處理后計(jì)算合并效應(yīng)值和95%CI，采用U檢驗(yàn)，當(dāng)P≤0.05 時(shí)認(rèn)為益生或應(yīng)激處理顯著影響該指標(biāo)。

2.4 瘤胃乳頭Meta分析結(jié)果（見表1、表2）

表1 瘤胃乳頭相關(guān)指標(biāo)的Meta分析

表2 瘤胃乳頭相關(guān)指標(biāo)的健康范圍

篩選到64 篇文獻(xiàn)符合Meta 分析要求：其中乳頭表面積10篇，肌層厚度16篇，乳頭寬度45篇，乳頭長(zhǎng)度52篇。由表1可見，瘤胃乳頭表面積不隨益生處理發(fā)生顯著變化（P>0.05），牛的瘤胃肌層厚度、乳頭寬度和乳頭長(zhǎng)度在益生處理后均顯著提高（P<0.05），而益生處理對(duì)羊的肌層厚度和乳頭寬度均無顯著影響（P>0.05），僅瘤胃乳頭長(zhǎng)度在益生處理后顯著提高（P<0.05）。瘤胃乳頭相關(guān)指標(biāo)的健康范圍見表2。綜合Meta 分析結(jié)果發(fā)現(xiàn)，在粗飼料、熱應(yīng)激、pH 的多重調(diào)控下，瘤胃乳頭表面積、肌層厚度、乳頭長(zhǎng)度和寬度，作為腸道物理屏障的重要評(píng)價(jià)指標(biāo)，其數(shù)值大小與腸道健康程度有重要的相關(guān)性，應(yīng)當(dāng)將其作為評(píng)估腸道健康的指標(biāo)，納入物理屏障的評(píng)價(jià)體系之中。

2.5 腸道絨毛與隱窩Meta分析結(jié)果

在四個(gè)數(shù)據(jù)庫(kù)共篩選出符合Meta 分析要求的文獻(xiàn)527篇：其中VH 527篇，CD 508篇，VH/CD 397篇。由表3 和圖1（a、c、e）可見，益生處理顯著增加豬、肉雞、蛋雞、羊、牛腸道VH（P<0.05），顯著降低豬、肉雞腸道CD（P<0.05），顯著增加豬、肉雞、蛋雞腸道VH/CD（P<0.05），對(duì)牛、羊腸道VH/CD 沒有顯著影響（P>0.05）。應(yīng)激處理顯著降低豬、肉雞、牛的腸道VH（P<0.05），顯著增加豬腸道CD（P<0.05），顯著降低豬、肉雞腸道VH/CD（P<0.05），但對(duì)蛋雞、牛、羊腸道CD 沒有顯著影響（P>0.05）。從漏斗圖（圖1b、d、f）可見益生處理后合并效應(yīng)值左右兩側(cè)文章分布對(duì)稱，表明Meta 分析結(jié)果穩(wěn)健。不同腸段的亞組分析結(jié)果見表4～表6。所用數(shù)據(jù)均不符合正態(tài)分布，因此選用四分位法Q25和Q75做指標(biāo)健康范圍，結(jié)果見表7。Me?ta 分析結(jié)果表明，腸道VH 是評(píng)價(jià)畜禽腸道物理屏障的重要指標(biāo)，而腸道CD 與VH/CD 是評(píng)估單胃動(dòng)物腸道物理屏障的重要指標(biāo)，應(yīng)當(dāng)將其作為評(píng)估腸道物理屏障的指標(biāo)。

表3 腸道絨毛相關(guān)指標(biāo)的Meta分析

表4 不同腸段VH的亞組分析

表5 不同腸段CD的亞組分析

表6 不同腸段VH/CD的亞組分析

表7 腸道絨毛相關(guān)指標(biāo)的健康范圍

圖1 益生處理對(duì)羊腸道絨毛相關(guān)指標(biāo)的影響

2.6 緊密連接與黏蛋白Meta分析結(jié)果

緊密連接蛋白與黏蛋白的相對(duì)表達(dá)量在四個(gè)數(shù)據(jù)庫(kù)中共篩選出400 篇文獻(xiàn)納入Meta 分析，其中包括：OCLN-1（273篇）、ZO-1（230篇）、CLDN-1（188篇）、MUC-2（121 篇）、ZO-2（30 篇）、CLDN-3（30 篇）、CLDN-2（25 篇）、CLDN-4（21 篇）、JAM-2（17 篇）、CLDN-5（8篇）、JAM-1（6篇）。選取各基因家族納入文章最多的基因進(jìn)行Meta 分析，由表8 和圖2 可知，所有緊密連接蛋白和黏蛋白基因的表達(dá)規(guī)律相同：應(yīng)激條件下基因表達(dá)下調(diào)，益生條件下基因表達(dá)上調(diào)。其中益生或應(yīng)激處理對(duì)豬、肉雞、牛、羊OCLN-1基因和ZO-1 基因的表達(dá)量有顯著影響（P<0.05）；處理僅對(duì)豬和肉雞CLDN-1 基因表達(dá)有顯著影響（P<0.05），而對(duì)蛋雞、牛、羊CLDN-1 基因表達(dá)沒有顯著影響（P>0.05）；處理對(duì)豬、蛋雞、肉雞MUC-2 基因表達(dá)有顯著影響（P<0.05）；JAM-2 納入文獻(xiàn)較少，處理對(duì)肉雞的JAM-2 表達(dá)沒有顯著影響（P>0.05）。漏斗圖中應(yīng)激處理對(duì)OCLN-1（圖2b）、ZO-1（圖2f）和CLDN-1（圖2j）表達(dá)量的合并效應(yīng)值兩側(cè)文章分布不對(duì)稱，可能是由于應(yīng)激處理的類型不同對(duì)相關(guān)蛋白的表達(dá)量影響不一；而益生處理下漏斗圖左右對(duì)稱（圖2d、h、l），可靠性強(qiáng)。不同處理下動(dòng)物在各腸段中緊密連接蛋白和黏蛋白表達(dá)量差異的亞組分析結(jié)果在表9～表13 中展示。結(jié)合Meta 分析結(jié)果，評(píng)估動(dòng)物腸道屏障功能時(shí)可將緊密連接蛋白相關(guān)基因，如OCLN-1、ZO-1、CLDN-1、MUC-2 等作為評(píng)估腸道物理屏障的指標(biāo)。

圖2 不同處理對(duì)羊胃腸道緊密連接蛋白的影響

表8 腸道緊密連接蛋白和黏蛋白基因表達(dá)量的Meta分析

表9 不同腸段OCLN-1基因表達(dá)量的亞組分析

表10 不同腸段ZO-1基因表達(dá)量的亞組分析

表10（續(xù)） 不同腸段ZO-1基因表達(dá)量的亞組分析

表11 不同腸段CLDN-1基因表達(dá)量的亞組分析

表12 不同腸段JAM-2基因表達(dá)量的亞組分析

表13 不同腸段MUC-2基因表達(dá)量的亞組分析

2.7 通透性的Meta分析結(jié)果

腸道通透性文獻(xiàn)篩選后共147 篇符合Meta 分析要求，其中包括：內(nèi)毒素（23 篇）、D-乳酸（53 篇）、FITC-d（19 篇）、DAO（52 篇）。由Meta 分析結(jié)果（表14）可見，應(yīng)激處理顯著提高肉雞血液內(nèi)毒素水平（P<0.05），益生處理不影響豬血液內(nèi)毒素水平（P=0.283）。益生處理顯著降低豬血液D-乳酸水平（P<0.05），應(yīng)激處理顯著提高肉雞血液D-乳酸水平（P<0.05）。應(yīng)激處理顯著提高肉雞血液FITC-d水平（P<0.05），但益生處理不影響肉雞血液FITC-d水平（P=0.136）。應(yīng)激處理顯著提高豬、肉雞血液DAO 水平（P<0.05），益生處理顯著降低豬、肉雞血液DAO 水平（P<0.05）。綜合Meta 分析結(jié)果發(fā)現(xiàn)，腸道通透性（內(nèi)毒素、D-乳酸、FITC-d或DAO 等）是評(píng)價(jià)消化道物理屏障的有效指標(biāo)。

表14 腸道通透性的Meta分析

3 結(jié)論

完整的物理屏障是消化道健康的重要標(biāo)志之一，用瘤胃乳頭長(zhǎng)度、腸道VH、CD、VH/CD和緊密連接蛋白與黏蛋白表達(dá)、腸道通透性等指標(biāo)評(píng)估畜禽胃腸道物理屏障功能具有可行性。其中，瘤胃乳頭長(zhǎng)度能夠反映反芻動(dòng)物消化道的健康狀態(tài)，腸道CD、VH/CD能夠反映豬和肉雞腸道的健康狀態(tài)，腸道VH、緊密連接蛋白與黏蛋白表達(dá)以及腸道通透性指標(biāo)能夠反映畜禽腸道的健康狀態(tài)。