周相男，胡凱文，李志明，高 磊，周 天

（1.北京中醫(yī)藥大學(xué)，北京 100029；2.北京中醫(yī)藥大學(xué)東方醫(yī)院腫瘤科，北京 100078）

肺癌是全球最常見(jiàn)的癌癥和死亡率最高的惡性腫瘤，2018 年GLOBOCAN 估算，肺癌新增209萬(wàn)病例，占癌癥病例總數(shù)的11.6%，死亡病例新增176 萬(wàn)，占比18.4%。中國(guó)肺癌發(fā)病比例和死亡比例分別占全球病例的36.98%和39.21%，發(fā)病率和死亡率呈逐年上升趨勢(shì)，總體5 年生存率約為19.7%，中位生存時(shí)間不超過(guò)2 年，嚴(yán)重危害人類健康［1，2］。肺癌傳統(tǒng)治療模式主要有手術(shù)、放療或化療等，但由于確診時(shí)70%處于晚期［3］，加之放化療不良反應(yīng)等不足，使很多病人失去治療機(jī)會(huì)，因此，亟需為年老體弱、中晚期及常規(guī)療法失敗的患者提供新的治療策略。

惡性腫瘤是一種以局部病變?yōu)樘卣鞯娜砑膊?，腫瘤“體為陰，用為陽(yáng)”，具有生命屬性，易耗血奪氣，使機(jī)體全身與局部不平衡，出現(xiàn)整體多虛多寒、局部多實(shí)多熱的表現(xiàn)［4］。醒消丸出自清代王維德《外科證治全生集》，全方由雄黃、麝香、乳香、沒(méi)藥組成，功擅消腫散結(jié)、活血止痛，具有促進(jìn)機(jī)體代謝、調(diào)和機(jī)體氣血陰陽(yáng)功效，與綠色治療模式中第三階段“帝道”的調(diào)整體質(zhì)理念相契合［5］。臨床研究表明，雄黃敗毒抗癌，配伍干漆有效治療肺部之癌瘤積聚［6］，六神丸（含麝香與雄黃）有效改善惡性腫瘤患者臨床癥狀［7］，西黃丸（含麝香、乳香、沒(méi)藥）可顯著提高臨床獲益率，穩(wěn)定病情，提高生活質(zhì)量［8］。

臨床中發(fā)現(xiàn)，醒消丸憑借雄黃溫?zé)嶂?，有助于改善肺癌患者怕冷、便秘等癥狀，提高患者生活質(zhì)量。然而，目前尚缺乏醫(yī)學(xué)證據(jù)支持，因此本文擬通過(guò)網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)和分子對(duì)接，預(yù)測(cè)醒消丸治療肺癌的靶點(diǎn)及通路，填補(bǔ)其分子機(jī)制層面的研究，從而為后續(xù)基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)研究提供參考。

1 材料與方法

1.1 醒消丸有效成分收集及潛在靶點(diǎn)篩選

雄黃屬于礦石藥，查閱中醫(yī)數(shù)據(jù)庫(kù)平臺(tái)，尚無(wú)雄黃的有效成分及靶點(diǎn)，查閱文獻(xiàn)其有效成分為As2S2和As4S4［9，10］，根 據(jù)SwissADME 和SwissTar‐getPrediction 預(yù)測(cè)無(wú)法得到有效靶點(diǎn)，靶點(diǎn)預(yù)測(cè)工具或平臺(tái)尚待開(kāi)發(fā)，因此，本文擬進(jìn)行麝香、乳香和沒(méi)藥的相關(guān)研究，初步對(duì)醒消丸治療肺癌的靶點(diǎn)進(jìn)行 預(yù) 測(cè) 和 分 析。BATMAN‐TCM（http：//bionet.ncpsb.org/batman‐tcm）［11］是中藥分子機(jī)制的在線分析平臺(tái)，本文通過(guò)BATMAN‐TCM 平臺(tái)獲得醒消丸 化 合 物 成 分。 PubChem 數(shù) 據(jù) 庫(kù)（https：//pub‐chem.ncbi.nlm.nih.gov/）是NCBI 旗下有機(jī)小分子生物活性數(shù)據(jù)庫(kù)，包括結(jié)構(gòu)、活性、來(lái)源及實(shí)驗(yàn)等多種數(shù)據(jù)［12］，通過(guò)PubChem 分別查找麝香、乳香、沒(méi)藥各成分的化學(xué)結(jié)構(gòu)式，并經(jīng)SwissADME（www.SwissADME.ch）［13］篩選獲取有效成分，運(yùn)用SwissTar‐getPrediction（www.SwissTargetPrediction.ch）［14］預(yù)測(cè)各有效成分的靶點(diǎn)，整合為EXCEL 文件。篩選結(jié)束后，以“reviewed”“homo sapiens”為條件，運(yùn)用Uni‐prot 蛋 白 質(zhì) 數(shù) 據(jù) 庫(kù)（https：//www.uniprot.org）［15，16］對(duì)潛在靶點(diǎn)進(jìn)行篩選，并統(tǒng)一將蛋白質(zhì)靶點(diǎn)信息標(biāo)準(zhǔn)化，命名為gene symbol。

1.2 肺癌相關(guān)靶點(diǎn)篩選

以“l(fā)ung cancer”為關(guān)鍵詞，尋找OMIM 數(shù)據(jù)庫(kù)（OMIM‐Gene‐Map‐Retrieval）（https：//www.omim.org）［17］、TTD 數(shù) 據(jù) 庫(kù)（http：//bidd. nus. edu. sg/group/cjttd）［18］、DRUGBANK 數(shù) 據(jù) 庫(kù)（https：//www. drugbank.ca）［19］中 肺 癌 的 潛 在 靶 點(diǎn)，并 挖 掘GeneCards 數(shù)據(jù)庫(kù)（https：//www.genecards.org）相關(guān)靶點(diǎn)，合并4 個(gè)疾病數(shù)據(jù)庫(kù)靶點(diǎn)后，刪除重復(fù)值得到肺癌蛋白質(zhì)靶點(diǎn)。

1.3 醒消丸‐肺癌交集靶點(diǎn)PPI 網(wǎng)絡(luò)構(gòu)建及核心靶點(diǎn)篩選

利用Venn 工具將麝香、乳香、沒(méi)藥3 藥與肺癌靶點(diǎn)取交集并繪制韋恩圖。進(jìn)而將交集靶點(diǎn)提交至Sting 平臺(tái)，構(gòu)建交集靶點(diǎn)PPI 網(wǎng)絡(luò)。運(yùn)用Biso‐Genet3.0 插件，分別構(gòu)建醒消丸與肺癌靶點(diǎn)PPI 網(wǎng)絡(luò)的Merged 網(wǎng)絡(luò)，根據(jù)連接度（Degree）、介度（Be‐tweenness Centrality，BC）、緊密度（Closeness Cen‐trality，CC）、平均連接度（Local Average Connectivi‐ty，LAC）［20］4 個(gè)屬性值進(jìn)行中位數(shù)篩選，得到核心靶點(diǎn)。

1.4 醒消丸‐肺癌靶點(diǎn)功能與通路的富集分析

Metascape 數(shù)據(jù)庫(kù)（http：//metascape.org/）［21］是一個(gè)生物信息數(shù)據(jù)庫(kù)，提供全面的基因列表注釋及分析資源，主要用于差異基因的功能和通路富集分析。在線登錄Metascape 平臺(tái)，導(dǎo)入交集靶點(diǎn)，對(duì)其主要的生物學(xué)過(guò)程與代謝通路進(jìn)行富集分析，并用Hiplot 在線網(wǎng)站繪制靶點(diǎn)生物過(guò)程（GO Biological Processes，GO BP）、靶點(diǎn)所在細(xì)胞組分（GO Cellu‐lar Components，GO CC）、靶點(diǎn)分子功能（GO Mo‐lecular Functions，GO MF）及靶點(diǎn)信號(hào)通路（KEGG Pathway）圖［22］。

1.5 醒消丸有效成分‐靶點(diǎn)‐通路網(wǎng)絡(luò)圖構(gòu)建

Cytoscape3.7.2 是一款圖形化顯示網(wǎng)絡(luò)并進(jìn)行分析和編輯的軟件，通過(guò)將麝香、乳香、沒(méi)藥的活性成分及其治療肺癌靶點(diǎn)、信號(hào)通路等數(shù)據(jù)整合，導(dǎo)入軟件，構(gòu)建網(wǎng)絡(luò)圖，進(jìn)行可視化分析。

1.6 分子對(duì)接驗(yàn)證

PDB 蛋 白 數(shù) 據(jù) 庫(kù)（https：//www.rcsb.org/）［23］是一種蛋白質(zhì)晶體結(jié)構(gòu)數(shù)據(jù)庫(kù)，提供蛋白靶點(diǎn)的晶體復(fù)合物結(jié)構(gòu)信息。PyMOL 軟件是一款分子可視化軟件，用于查看蛋白三維結(jié)構(gòu)，分離蛋白和小分子。 Open Babel GUI 軟件用來(lái)轉(zhuǎn)換格式。AutoDock4.2.6 用于預(yù)測(cè)配體和生物大分子靶標(biāo)之間相互作用，包含AutoGrid 和AutoDock 兩個(gè)程序，AutoDock Tools1.5.6 是將分子在結(jié)構(gòu)圖形化、可視化對(duì)接的輔助軟件。通過(guò)Autodock Tools 將麝香、乳香、沒(méi)藥的核心成分和靶點(diǎn)進(jìn)行對(duì)接并驗(yàn)證。

2 結(jié)果

2.1 獲取麝香、乳香、沒(méi)藥活性成分及潛在靶點(diǎn)

在BATMAN‐TCM 平臺(tái)“ Cluster name”中，分別 輸 入“ SHE XIANG”、“RU XIANG”和“MO YAO”，并將“ Score cutoff”值設(shè)置為20，P值調(diào)整為0.05 以獲得麝香、乳香、沒(méi)藥的化合物成分，其中，麝香、乳香和沒(méi)藥的成分分別有30、19、15 種，統(tǒng)一以“SX1～SX30，RX1～RX19，MY1～MY15”簡(jiǎn)稱，如表1 所示，其中，部分化合物尚無(wú)統(tǒng)一標(biāo)準(zhǔn)名稱及屬性值，故未標(biāo)注。通過(guò)PubChem 獲得麝香、乳香、沒(méi)藥化合物的化學(xué)結(jié)構(gòu)式，導(dǎo)入SwissADME 平臺(tái)篩選，符合“胃腸吸收度”為“high”，以及“類藥性”的五個(gè)過(guò)濾器屬性值中有兩項(xiàng)或以上為“yes”的通過(guò)篩選，結(jié)果獲取麝香有效化學(xué)成分20 種、乳香有效化學(xué)成分8 種、沒(méi)藥有效化學(xué)成分13 種，見(jiàn)表1。通過(guò)SwissTargetPrediction 預(yù)測(cè)各有效成分的靶點(diǎn)，設(shè)置“probability>0”的為有效靶點(diǎn)，并整合為EXCEL文件。其中，麝香有效成分作用靶點(diǎn)769 個(gè)、乳香273 個(gè)、沒(méi)藥469 個(gè)，合并成分靶點(diǎn)，刪除重復(fù)值，并經(jīng)UniProt 篩選后得到121 個(gè)靶點(diǎn)。

表1 醒消丸有效成分及SwissADME 屬性值Tab 1 Active ingredients and SwissADME attribute values of Xingxiao Pill

2.2 篩選肺癌相關(guān)靶點(diǎn)

從GeneCards 篩選疾病相關(guān)靶點(diǎn)，并設(shè)定Score大于中位數(shù)的目標(biāo)靶點(diǎn)為疾病潛在靶點(diǎn)，根據(jù)肺癌相關(guān)靶點(diǎn)，取中位數(shù)為16.855，得到1 449 個(gè)靶點(diǎn)，并結(jié)合OMIM（OMIM‐Gene‐Map‐Retrieval）、DRUG‐BANK、TTD 數(shù)據(jù)庫(kù)，合并所有肺癌靶點(diǎn)后刪除重復(fù)值得到1 914 個(gè)相關(guān)靶點(diǎn)。

2.3 構(gòu)建醒消丸‐肺癌交集靶點(diǎn)PPI 網(wǎng)絡(luò)并篩選核心靶點(diǎn)

運(yùn)用Venn 為肺癌相關(guān)靶點(diǎn)與醒消丸的活性成分靶點(diǎn)取交集，得到交集靶點(diǎn)50 個(gè)，見(jiàn)圖1。String平臺(tái)構(gòu)建交集靶點(diǎn)PPI 網(wǎng)絡(luò)，見(jiàn)圖2，圖中節(jié)點(diǎn)大小和顏色、連線粗細(xì)和顏色反映了靶點(diǎn)之間相互關(guān)聯(lián)，節(jié)點(diǎn)越大，顏色越亮，節(jié)點(diǎn)之間連線越粗、顏色越暗，代表此靶點(diǎn)連接越關(guān)鍵。交集靶點(diǎn)及所屬成分見(jiàn)表2。應(yīng)用BisoGne3.0 分別得到醒消丸成分靶點(diǎn)與肺癌靶點(diǎn)的PPI 網(wǎng)絡(luò)，二者融合得到Merged 網(wǎng)絡(luò)，根據(jù)Degree 篩選2 倍中位數(shù)后，提取Hithubs 核心網(wǎng)絡(luò)，并根據(jù)Degree、BC、CC、LAC 等參數(shù)進(jìn)行中位數(shù)篩選，得到核心網(wǎng)絡(luò)，見(jiàn)圖3，獲取核心靶點(diǎn)18 個(gè)，選取與肺癌機(jī)制相關(guān)且有較多文獻(xiàn)支持的8個(gè)靶點(diǎn)用來(lái)后續(xù)預(yù)測(cè)與研究，具體見(jiàn)表3。

表2 交集靶點(diǎn)對(duì)應(yīng)醒消丸成分Tab 2 The intersection targets corresponding to the composition of Xingxiao Pill

表3 醒消丸治療肺癌的核心靶點(diǎn)Tab 3 Core targets of Xingxiao Pill in the treatment of lung cancer

圖1 醒消丸治療肺癌交集靶點(diǎn)韋恩圖Fig 1 Venn diagram of intersection targets of Xingxiao Pill in the treatment of lung cancer

圖2 醒消丸治療肺癌交集靶點(diǎn)PPI 網(wǎng)絡(luò)圖Fig 2 PPI network diagram of intersection targets of Xingxiao Pill in the treatment of lung cancer

圖3 醒消丸治療肺癌核心靶點(diǎn)的篩選流程圖Fig 3 Screening flowchart of core targets of Xingxiao Pill in the treatment of lung cancer

2.4 靶點(diǎn)生物學(xué)功能與通路的富集分析

將麝香、乳香、沒(méi)藥與肺癌交集靶點(diǎn)提交至Metascape 平臺(tái)，進(jìn)行富集、聚類分析，并對(duì)結(jié)果進(jìn)行可視化。靶點(diǎn)信號(hào)通路結(jié)果顯示醒消丸治療肺癌的核心靶點(diǎn)在細(xì)胞中主要涉及EGFR 酪氨酸激酶抑制劑耐藥、PI3K‐Akt、蛋白聚糖、MAPK、細(xì)胞周期、Th17 細(xì)胞分化、轉(zhuǎn)錄失調(diào)、MicroRNA、MTOR、非小細(xì)胞肺癌、中心碳代謝等信號(hào)通路，見(jiàn)表4 和圖4。GO 功能注釋顯示其主要參與的生物過(guò)程為RNA 聚合酶Ⅱ啟動(dòng)子的轉(zhuǎn)錄、上皮細(xì)胞發(fā)育、細(xì)胞對(duì)氮化合物的反應(yīng)、細(xì)胞分化的負(fù)調(diào)控、神經(jīng)過(guò)程正向調(diào)節(jié)、細(xì)胞成熟、細(xì)胞黏附調(diào)節(jié)、神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞分化、自噬調(diào)節(jié)、細(xì)胞分解代謝正向調(diào)控、激素水平調(diào)節(jié)等；主要細(xì)胞組分即靶點(diǎn)所在的細(xì)胞位置為微管組織中心、中心體、染色體區(qū)域、樹(shù)突、細(xì)胞膜區(qū)域、細(xì)胞質(zhì)囊腔、紡錘軸等；主要靶點(diǎn)分子功能為調(diào)控蛋白激酶、磷酸轉(zhuǎn)移酶、絲氨酸/蘇氨酸激酶、酪氨酸激酶、跨膜受體蛋白激酶、細(xì)胞周期依賴性蛋白、組蛋白激酶、氧化還原酶等的活性，轉(zhuǎn)錄因子、RNA 聚合酶II 轉(zhuǎn)錄因子、生長(zhǎng)因子、激素等，見(jiàn)圖5。

圖4 醒消丸治療肺癌靶點(diǎn)信號(hào)通路富集分析Fig 4 Enrichment analysis of the signal pathways of the targets of Xingxiao Pill in the treatment of lung cancer

圖5 醒消丸治療肺癌靶點(diǎn)生物過(guò)程、細(xì)胞組分、分子功能富集分析Fig 5 Enrichment analysis of biological process，cell com?ponent and molecular function of the targets of Xingxiao Pill in treatment of lung cancer

表4 醒消丸與肺癌交集靶點(diǎn)的信號(hào)通路Tab 4 signaling pathways of targets of Xingxiao pill in treatment of lung cancer

2.5 醒消丸有效成分‐靶點(diǎn)‐通路網(wǎng)絡(luò)圖的構(gòu)建

運(yùn)用Cytoscape3.7.2 構(gòu)建醒消丸有效成分‐靶點(diǎn)‐通路網(wǎng)絡(luò)，運(yùn)用Network Analysis 分析，依據(jù)De‐gree、BC、CC 篩選醒消丸調(diào)治肺癌的核心成分，預(yù)測(cè)核心成分為桑色素、沒(méi)藥萜醇、蛻皮激素、睪酮、乙酸辛酯、二苯基環(huán)丙烯酮、甲基丁香酚、α‐雌二醇、雌二醇、丁香酚、麝香酮等，見(jiàn)表5。有效成分‐靶點(diǎn)—通路網(wǎng)絡(luò)中，藍(lán)色方形代表靶點(diǎn)，紫色菱形代表通路，粉色、黃色、綠色六邊形分別代表麝香、乳香、沒(méi)藥核心成分，黃色方形代表乳香沒(méi)藥共有成分，藥物成分、通路與靶點(diǎn)之間的相互網(wǎng)絡(luò)見(jiàn)圖6。

表5 醒消丸治療肺癌的核心成分Tab 5 Core components of Xingxiao Pill in the treatment of lung cancer

圖6 醒消丸有效成分‐靶點(diǎn)‐通路網(wǎng)絡(luò)圖Fig 6 Active ingredients，targets and pathways network diagram of Xingxiao Pill in the treatment of lung cancer

2.6 醒消丸核心成分與靶點(diǎn)的分子對(duì)接結(jié)果

運(yùn)用Open Babel GUI 軟件將麝香、乳香、沒(méi)藥的核心成分的化合物結(jié)構(gòu)轉(zhuǎn)換為pdb 文件。應(yīng)用PyMOL 軟件對(duì)核心蛋白結(jié)構(gòu)修飾，選取可以查到結(jié)構(gòu)的核心成分與交集靶點(diǎn)及核心靶點(diǎn)（表6），運(yùn)用Autodock 進(jìn)行對(duì)接分析。分子對(duì)接結(jié)合能（Binding energy，BE）結(jié)果如表6 所示，以BE≤?5.5（kJ·mol‐1）為穩(wěn)定結(jié)合構(gòu)象，表6 中加粗部分為穩(wěn)定結(jié)合構(gòu)象，圖7 為部分構(gòu)象結(jié)合圖。運(yùn)用R 語(yǔ)言繪制熱圖（heatmap）以直觀反映藥物與靶點(diǎn)對(duì)接情況，見(jiàn)圖8，熱圖的顏色明暗反映了結(jié)合能的大小，顏色越暗，結(jié)合能越小，結(jié)合構(gòu)象越穩(wěn)定。因而得出睪酮分別與SIRT7、AKT1、VEGFA 和MDM2，以及雌二醇分別與AR、AKT1、SIRT7、MDM2 和XPO1 的結(jié)合構(gòu)象較穩(wěn)定。

圖8 醒消丸核心成分與靶點(diǎn)對(duì)接的熱圖Fig 8 Heatmap of core components of Xingxiao Pill dock?ing with targets

表6 醒消丸核心成分與靶點(diǎn)對(duì)接結(jié)合能表Tab 6 Docking and binding energy table between main components of Xingxiao Pill and the targets

圖7 醒消丸核心成分與靶點(diǎn)對(duì)接的結(jié)構(gòu)圖Fig 7 Docking structure diagram between main components of Xingxiao Pill and targets

3 討論

醒消丸原是治療外科癰疽腫毒效驗(yàn)方，現(xiàn)臨床發(fā)現(xiàn)其在肺癌治療中起到一定療效，具有打擊局部邪氣，維護(hù)全身正氣作用，遂擴(kuò)大其應(yīng)用范圍至肺癌，以求老藥新用，通過(guò)網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)整合大量數(shù)據(jù)庫(kù)資源［24］，研究其治療靶點(diǎn)及通路，具有傳承創(chuàng)新；在肺癌臨床應(yīng)用中，醒消丸君藥雄黃豁痰解毒，臣藥麝香活血通絡(luò)，佐以乳香、沒(méi)藥活血化瘀止痛，全方共奏活血化瘀、以通為補(bǔ)，進(jìn)而促進(jìn)機(jī)體代謝，調(diào)和陰陽(yáng)、平衡寒熱，符合“帝道”階段以調(diào)整體質(zhì)、調(diào)和氣血陰陽(yáng)為主的“綠色治療”理念，具有理論創(chuàng)新，值得進(jìn)一步研究。

本研究初步篩選出醒消丸治療肺癌多種活性成分。其中，桑色素［25］和乙酸辛酯［26］具有調(diào)控癌細(xì)胞周期作用，雌二醇［27］、麝香酮［28，29］和丁香酚［30］與誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡、抑制血管生成相關(guān)，睪酮激素水平升高與肺癌風(fēng)險(xiǎn)增加呈正相關(guān)［31，32］。研究表明，醒消丸中雄黃具有誘導(dǎo)肺癌細(xì)胞凋亡及抑制腫瘤生長(zhǎng)效應(yīng)［33］，麝香通過(guò)調(diào)控IL‐24、TNF 家族基因、MAPK 通路等發(fā)揮抗癌效應(yīng)［34］，乳香與肺癌細(xì)胞凋亡、自噬、調(diào)控細(xì)胞周期相關(guān)［35］，沒(méi)藥或乳香沒(méi)藥配伍具有多種抗腫瘤活性，如抑制腫瘤細(xì)胞增殖、誘導(dǎo)細(xì)胞分化和凋亡、產(chǎn)生細(xì)胞毒性、抑制腫瘤血管生成等［35，36］，進(jìn)一步佐證了本文上述核心成分的抗瘤機(jī)制和功效。

本研究通過(guò)構(gòu)建交集靶點(diǎn)PPI 網(wǎng)絡(luò)發(fā)現(xiàn)，麝香有10 種成分映射于AR，有1 種與IL‐6 有關(guān)。乳香活性成分靶向HSP90AA1、STAT3 和AR，沒(méi)藥與VEGFA、IL‐6、MTOR 和AR 相關(guān)。AR 是一種雄激素受體，與癌癥風(fēng)險(xiǎn)顯著相關(guān)。HSP90AA1 與肺癌細(xì)胞增殖或凋亡、信號(hào)傳導(dǎo)相關(guān)［37］。STAT3［38，39］和VEGFA 在腫瘤血管生成、腫瘤轉(zhuǎn)移中扮演重要角色［40］。 IL‐6 調(diào) 控 腫 瘤 免 疫 和 炎 癥 微 環(huán) 境［41］。MTOR 可調(diào)節(jié)腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)、代謝、衰老和自噬等過(guò)程，已被作為治療靶標(biāo)用于免疫療法中［42］。通過(guò)BisoGenet3.0 插件篩選核心靶點(diǎn)，映射于醒消丸各成分發(fā)現(xiàn)AKT1 為核心要素，具有調(diào)控癌細(xì)胞存活、細(xì)胞周期、核糖體生物發(fā)生、蛋白質(zhì)合成等作用，目前已成為癌癥治療靶標(biāo)［43］。

KEGG 結(jié)果顯示，PI3K/Akt/mTOR［44，45］、蛋白聚 糖［46］、MAPK［47］、MicroRNA 和 中 心 碳 代 謝［48］在癌細(xì)胞生長(zhǎng)、代謝重編程中占有重要地位。蛋白聚糖、MAPK 信 號(hào) 通 路［49］具 有 調(diào) 控 腫 瘤 血 管 生 成 功能。EGFR［50］、PI3K/Akt［51］在克服多藥耐藥方面具有重要貢獻(xiàn)。MicroRNA［52］、細(xì)胞周期、Th17 細(xì)胞途徑在腫瘤細(xì)胞周期、凋亡、炎癥、衰老中發(fā)揮重要作用。

綜上，本文根據(jù)網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)初步挖掘了醒消丸治療肺癌的抗癌靶點(diǎn)和通路，綜合分子對(duì)接和文獻(xiàn)研究結(jié)果，初步預(yù)測(cè)醒消丸抗癌機(jī)制涉及調(diào)控肺癌細(xì)胞凋亡、周期、血管生成、代謝重編程等途徑，MTOR、AKT1、VEGFA、SIRT7 及PI3K/AKT/mTOR、MAPK 為可能的靶點(diǎn)和通路。基于此，后續(xù)將進(jìn)一步進(jìn)行實(shí)驗(yàn)研究，探究醒消丸調(diào)治肺癌的機(jī)制。

作者貢獻(xiàn)度說(shuō)明：

周相男：統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)、制作圖表并撰寫(xiě)；胡凱文：中醫(yī)理論指導(dǎo)；周天：全文審核與指導(dǎo)；李志明：指導(dǎo)并修改前言與討論部分；高磊：方法指導(dǎo)。