陳永林，余 騰，呂志凱，孫秀秀，胡薛英，谷長勤，劉曉麗，張萬坡，錢 平，程國富*

(1.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 動物醫(yī)學(xué)學(xué)院，湖北 武漢 430070；2.廣西揚翔股份有限公司，廣西 貴港 537100)

豬瘟是由黃病毒科、瘟病毒屬的豬瘟病毒引起豬的一種急性熱性全身敗血性傳染病[1-2]，該病致死性較強，是世界范圍內(nèi)危害最大的豬病之一[3-4]。高致病性藍耳病是由于豬繁殖與呼吸綜合征病毒的變異株引起的一種高致死性急性傳染病[5-6]，感染后，發(fā)病率和病死率分別在50%和30%以上[6-7]，是造成我國規(guī)?；i場嚴(yán)重經(jīng)濟損失的主要傳染病之一[8]。

動物疫病凈化是提高我國畜牧業(yè)整體競爭力的重要手段，隨著近年來免疫、監(jiān)測、檢疫、消毒等疫病防控手段的施行，豬瘟、高致病性藍耳病等多種動物疫病在我國已得到有效控制，流行率顯著降低。為了適應(yīng)我國經(jīng)濟社會發(fā)展和動物疫病防控新形勢的需要，我國開始分步推進豬瘟、高致病性藍耳病等部分動物疫病的凈化[9]。本試驗以廣西貴港動物疫病凈化示范區(qū)內(nèi)的部分規(guī)?；i場為研究對象，建立豬瘟免疫凈化、高致病性藍耳病非免疫凈化評估體系，從不同方面對其區(qū)域凈化效果進行評估，探索形成“連點成線或成片”的區(qū)域凈化模式，形成可復(fù)制推廣的凈化方案，為我國進一步開展豬瘟、高致病性藍耳病區(qū)域凈化工作提供一定的依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 樣品來源樣品來源于廣西貴港動物疫病凈化示范區(qū)內(nèi)的部分規(guī)模化豬場。該凈化示范區(qū)位于廣西壯族自治區(qū)貴港市，涉及貴港市港南、港北、覃塘、桂平和平南5個區(qū)、縣1萬余km2面積。

1.2 樣品類型與采集采集廣西貴港動物疫病凈化示范區(qū)內(nèi)部分規(guī)模化豬場的組織病料(腦、肺臟、扁桃體、淋巴結(jié)等)、血清、公豬精液、去勢液、豬場環(huán)境拭子、豬場及其周圍的蒼蠅、蚊子、飛蟲、豬場周圍野生老鼠皮毛拭子、病料和血清、部分豬場的空氣樣本。另外還有在廣西揚翔股份有限公司總部洗消中心和返場人員隔離中心采集的運輸車輛拭子和工作人員手拭子。血樣按照《動物疫病凈化示范區(qū)評估標(biāo)準(zhǔn)(試行)(2019版)》中抽樣方法隨機采集，分離血清后，-20℃保存，豬精、去勢液和拭子樣品等隨機抽檢。

1.3 主要試劑病毒核酸RNA抽提試劑盒，蛋白酶K等購自于天根生化科技有限公司；豬瘟病毒抗體檢測試劑盒、豬繁殖與呼吸綜合征病毒抗體檢測試劑盒購自于美國愛德士公司；豬瘟兔化弱毒疫苗與豬瘟病毒野毒株雙重實時熒光RT-PCR檢測試劑盒、豬繁殖與呼吸綜合征病毒美洲型經(jīng)典株和高致病性變異株雙重實時熒光RT-PCR檢測試劑盒購自于哈爾濱元亨生物藥業(yè)有限公司。

1.4 豬瘟、高致病性藍耳病凈化檢測技術(shù)采用豬瘟抗體ELISA(GB/T 34729-2017)、藍耳病抗體ELISA(GB/T 18090-2008)對血清樣品進行血清學(xué)檢測；采用豬瘟病毒熒光RT-PCR(GB/T 27540-2011)、藍耳病病毒熒光RT-PCR(GB/T 35912-2018)對組織病料、精液、環(huán)境拭子、空氣樣本等進行病原學(xué)檢測。

2 結(jié)果

2.1 病原學(xué)檢測采集豬抗凝血、豬精液、豬場環(huán)境拭子(含工作人員手拭子)、車輛拭子、去勢液、組織病料、蒼蠅、蚊子、其他飛蟲、野生老鼠病料、野生老鼠皮毛拭子、空氣樣本，檢測結(jié)果如下(表1)。從結(jié)果可以看出，本試驗豬群實現(xiàn)了豬瘟的免疫無疫、高致病性藍耳病的非免疫無疫，豬場內(nèi)無病毒傳播。

表1 病原檢測結(jié)果

2.2 血清學(xué)檢測對43 834份血清同步進行了豬瘟和藍耳病抗體ELISA檢測，檢測結(jié)果為豬瘟免疫抗體陽性率為91.65%，藍耳病抗體陽性率為0.00%，不同豬群抗體陽性率見表2。對對35份野生老鼠血清進行豬瘟抗體、藍耳病抗體、偽狂犬gI抗體檢測，結(jié)果為豬瘟抗體陰性，藍耳病抗體陰性，1份PRV-gI抗體陽性。野生老鼠血清的檢測結(jié)果見表3。

表2 豬瘟、藍耳病抗體ELISA檢測結(jié)果 只

表3 野生老鼠血清的豬瘟、藍耳病 抗體ELISA檢測結(jié)果(n=35)

以上結(jié)果表明貴港動物疫病凈化示范區(qū)內(nèi)豬群豬瘟的免疫效果良好，抗體陽性率高，免疫程序及免疫劑量科學(xué)合理，對豬群具有很高的保護率；藍耳病抗體在非免疫狀態(tài)下未檢出；野生老鼠的血清中檢出偽狂犬野毒抗體，在今后的養(yǎng)殖中要注意防鼠滅鼠。綜上所述，廣西貴港動物疫病凈化示范區(qū)內(nèi)豬瘟、高致病性藍耳病凈化效果顯著。

3 討論

3.1 豬瘟、高致病性藍耳病凈化對非洲豬瘟防控工作的影響2018年8月以來，非洲豬瘟在全國31個省市(區(qū))迅速傳播蔓延，大量生豬被撲殺，給我國養(yǎng)豬業(yè)造成了巨大的打擊，嚴(yán)重干擾了生豬生產(chǎn)和市場肉品供應(yīng)[10]。由于非洲豬瘟病毒抵抗力強，能在外界環(huán)境中存活較長時間，一旦附著于傳播媒介，能通過多種途徑傳播[11-12]。而非洲豬瘟和豬瘟在臨床癥狀和病理變化上有諸多相似之處，對彼此的診斷會形成干擾，所以做好豬瘟的凈化有利于非洲豬瘟的防控與診斷。同時高致病性藍耳病為免疫抑制性疾病，做好高致病性藍耳病的凈化有利于提升豬群的抵抗力和健康水平，對非洲豬瘟的防控大有益處。

當(dāng)前，非洲豬瘟尚無有效疫苗和治療措施，提升豬場生物安全水平是防控非洲豬瘟的關(guān)鍵。廣西揚翔股份有限公司在豬瘟、高致病性藍耳病凈化上制訂并嚴(yán)格落實的生物安全管理措施用于非洲豬瘟防控上依然有效，在非洲豬瘟頻發(fā)的當(dāng)下廣西揚翔股份有限公司頂住了非洲豬瘟防控的壓力，于2020年11月順利通過農(nóng)業(yè)農(nóng)村部的“非洲豬瘟無疫小區(qū)”驗收。他的成功實踐再次證明了生物安全的重要性。

3.2 豬瘟、高致病性藍耳病凈化產(chǎn)生的效益廣西揚翔股份有限公司通過實施豬瘟、高致病性藍耳病凈化以來，生產(chǎn)效益穩(wěn)步提升，肉豬年出欄從約150萬頭穩(wěn)步提升至200萬頭左右，哺乳仔豬成活率和后備豬培育成活率達到96%以上，經(jīng)濟效益十分明顯。

在社會效益方面，通過實施凈化收獲了良好的業(yè)界口碑，成為廣大科研院所的首選合作企業(yè)，一大批優(yōu)質(zhì)科研攻關(guān)在此落地，同時也吸引了大量人才。此外廣西揚翔股份有限公司也不忘自己的社會責(zé)任，發(fā)揮自身專長，積極發(fā)展公司加農(nóng)戶的養(yǎng)殖模式，帶動周邊居民脫貧創(chuàng)業(yè)增收。

3.3 動物疫病凈化及凈化維持的難點動物疫病凈化在我國還處于摸索階段，政府相關(guān)部門作技術(shù)指導(dǎo)，企業(yè)為實施主體，凈化及凈化維持的監(jiān)督管理、經(jīng)費保障、激勵獎勵、輿論宣傳等配套政策還相對滯后，導(dǎo)致凈化工作推進緩慢、凈化效果維持不佳。如在凈化過程中陽性動物的淘汰撲殺，由于基層經(jīng)費有限，撲殺補償不足，導(dǎo)致?lián)錃⑻蕴ぷ麟y以施行。

此外，構(gòu)筑科學(xué)有效的生物安全屏障是動物疫病凈化的核心。而當(dāng)前我國畜牧養(yǎng)殖業(yè)正處于只重視疫苗預(yù)防到疫苗防控加生物安全預(yù)防的升級期，各養(yǎng)殖場點的生物安全管理水平參差不齊，且執(zhí)行情況缺乏有效監(jiān)督，這就致使凈化成功率低、凈化效果難以維持。

綜上所述，本試驗所評估豬場的豬瘟、高致病性藍耳病凈化效果顯著且具有穩(wěn)定性，為我國開展豬瘟、高致病性藍耳病區(qū)域凈化提供一定的經(jīng)驗分享。