魏立民，劉圈煒，晁 哲，黃麗麗，邢漫萍，王 峰，鄭心力，孫瑞萍

（1.海南省農(nóng)業(yè)科學(xué)院畜牧獸醫(yī)研究所，海南 ?？?571100；2.海南省熱帶動(dòng)物繁育與疫病研究重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，海南 海口 571100）

中國(guó)是世界上重要的養(yǎng)豬大國(guó)，如何通過(guò)經(jīng)濟(jì)、高效、環(huán)保的手段提高仔豬的成活率和獲得高品質(zhì)的豬肉是企業(yè)和科研機(jī)構(gòu)共同努力的方向。使用低蛋白質(zhì)飼糧飼喂斷奶仔豬可減少氮排放污染、降低仔豬發(fā)生營(yíng)養(yǎng)性腹瀉的概率[1]。近年來(lái)，隨著國(guó)內(nèi)非洲豬瘟疫情的暴發(fā)及新冠肺炎疫情的影響，國(guó)內(nèi)飼料原料價(jià)格上漲很快，給國(guó)內(nèi)外養(yǎng)豬企業(yè)帶來(lái)了很大壓力。支鏈氨基酸（Branched-chain amino acids, BCAAs）包括亮氨酸、異亮氨酸和纈氨酸，人類(lèi)和多種動(dòng)物體均無(wú)法合成BCAAs，所以也將其視為必需營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。有研究表明，在低蛋白質(zhì)飼糧中額外添加支鏈氨基酸可顯著改善仔豬的生長(zhǎng)性能[2]。海南豬是海南省特有的地方豬品種，具有繁殖力高、適應(yīng)性好、抗病力強(qiáng)、耐粗飼和肉質(zhì)好等優(yōu)點(diǎn)[3]。如何在不降低海南豬生長(zhǎng)性能和經(jīng)濟(jì)效益的情況下，開(kāi)發(fā)海南豬低蛋白質(zhì)配合飼糧，是海南科技工作者努力的方向。本研究以生長(zhǎng)前期海南豬為試驗(yàn)動(dòng)物，研究支鏈氨基酸平衡低蛋白質(zhì)飼糧對(duì)生長(zhǎng)前期海南豬體尺指標(biāo)和免疫指標(biāo)的影響，為支鏈氨基酸在海南豬飼糧中合理利用提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)動(dòng)物與試驗(yàn)設(shè)計(jì)

選擇海南省農(nóng)業(yè)科學(xué)院畜牧獸醫(yī)研究所永發(fā)科研基地提供的健康、體重為（18.1±0.67） kg的閹割海南豬公豬144頭，按體重隨機(jī)分為4個(gè)處理組，每組6個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)6頭豬，其中1個(gè)處理組為對(duì)照組，飼喂正常飼糧[21% CP（粗蛋白質(zhì)）]，其余3個(gè)為試驗(yàn)組，其中試驗(yàn)Ⅰ組粗蛋白質(zhì)水平為18%，試驗(yàn)Ⅱ組為18% CP+支鏈氨基酸，試驗(yàn)Ⅲ組為18% CP+2倍支鏈氨基酸，同時(shí)補(bǔ)充賴(lài)氨酸、蛋氨酸、色氨酸和蘇氨酸4種氨基酸，使4個(gè)處理組含量相同。預(yù)試期為7 d，正式試驗(yàn)為2020年3月1日至4月9日，共計(jì)40 d。整個(gè)試驗(yàn)期間試驗(yàn)豬飼喂粉料。

1.2 飼料配方及營(yíng)養(yǎng)水平

試驗(yàn)采用玉米-豆粕型基礎(chǔ)飼糧，對(duì)照組飼喂正常營(yíng)養(yǎng)水平飼糧，試驗(yàn)組蛋白質(zhì)水平降低3個(gè)百分點(diǎn)，其它營(yíng)養(yǎng)成分除支鏈氨基酸水平外均相同，飼糧配比和營(yíng)養(yǎng)水平參照中國(guó)豬飼養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)（2004）[4]，飼料配方及營(yíng)養(yǎng)水平見(jiàn)表1。

表1 試驗(yàn)飼糧配方及營(yíng)養(yǎng)水平（風(fēng)干基礎(chǔ)）

1.3 飼養(yǎng)管理

采用四周開(kāi)放式欄舍，自由采食和飲水，豬舍通風(fēng)良好，其它飼養(yǎng)程序按照海南省農(nóng)業(yè)科學(xué)院畜牧獸醫(yī)研究所制定的海南豬飼養(yǎng)管理手冊(cè)執(zhí)行。

1.4 測(cè)定指標(biāo)

1.4.1 體尺指標(biāo) 在試驗(yàn)結(jié)束后的第2天早上每個(gè)處理組隨機(jī)挑選體重與平均重接近的6頭豬，進(jìn)行稱(chēng)重和體長(zhǎng)、體高和胸圍的測(cè)定。具體方法參考《種豬測(cè)定原理與方法》[5]。

1.4.2 屠宰性能指標(biāo) 試驗(yàn)結(jié)束時(shí)，每個(gè)處理組6頭（每個(gè)重復(fù)挑選1頭，共6頭）體重接近平均體重的試驗(yàn)豬共24頭進(jìn)行屠宰，記錄和統(tǒng)計(jì)分析胴體重、眼肌面積、頭重、蹄重和尾重。胴體品質(zhì)指標(biāo)的測(cè)量及屠宰率、眼肌面積的計(jì)算方法參照《種豬生產(chǎn)性能測(cè)定規(guī)程》（NY/T 822—2004）[6]。

1.4.3 肉品質(zhì)測(cè)定 試驗(yàn)結(jié)束時(shí)，每個(gè)重復(fù)挑選1頭共6頭體重接近平均體重的海南豬進(jìn)行屠宰試驗(yàn)。測(cè)定試驗(yàn)豬肌肉的滴水損失和pH（45 min，24 h）。

1.4.4 血液指標(biāo)測(cè)定 每個(gè)處理組挑選12頭（每個(gè)重復(fù)2頭）進(jìn)行空腹前腔靜脈采血10 mL，3 500 r/min離心10 min取血清，-30 ℃冰箱保存，用于血清中超氧化物歧化酶、谷胱甘肽過(guò)氧化物酶、丙二醛、免疫球蛋白A、免疫球蛋白G和免疫球蛋白M等指標(biāo)含量的測(cè)定。所測(cè)指標(biāo)均采用多功能酶標(biāo)儀（BioRad，美國(guó)伯樂(lè)公司）進(jìn)行測(cè)定。試劑盒購(gòu)自南京建成生物工程研究所。

1.5 數(shù)據(jù)處理

采用SAS 9.0統(tǒng)計(jì)軟件對(duì)各處理數(shù)據(jù)進(jìn)行分析，運(yùn)用Duncan's法進(jìn)行多重比較。所有數(shù)據(jù)以平均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示。

2 結(jié)果與討論

2.1 低蛋白質(zhì)飼糧添加支鏈氨基酸對(duì)生長(zhǎng)前期海南豬體尺指標(biāo)的影響

由表2可知，在測(cè)定豬的平均個(gè)體重差異不顯著的情況下，經(jīng)過(guò)40 d的試驗(yàn)，低蛋白質(zhì)飼糧添加支鏈氨基酸對(duì)生長(zhǎng)前期海南豬的體高、體長(zhǎng)和胸圍的影響差異均不顯著（P＞0.05）；從結(jié)果可以看出，低蛋白質(zhì)飼糧補(bǔ)充支鏈氨基酸后，生長(zhǎng)前期海南豬的體高、體長(zhǎng)和胸圍均有增加趨勢(shì)。

表2 低蛋白質(zhì)飼糧添加支鏈氨基酸對(duì)生長(zhǎng)前期海南豬體尺指標(biāo)的影響

2.2 低蛋白質(zhì)飼糧添加支鏈氨基酸對(duì)生長(zhǎng)前期海南豬屠宰指標(biāo)的影響

由表3可知，經(jīng)過(guò)40 d的試驗(yàn)，低蛋白質(zhì)飼糧時(shí)，支鏈氨基酸添加與否均對(duì)生長(zhǎng)前期海南豬的頭重和尾重的影響差異不顯著（P＞0.05）；當(dāng)降低飼糧粗蛋白質(zhì)水平，不添加支鏈氨基酸時(shí)，對(duì)試驗(yàn)豬胴體重和眼肌面積的影響達(dá)到了顯著水平（P＜0.05），飼糧粗蛋白質(zhì)水平由21%降低至18%，試驗(yàn)豬的胴體重顯著降低，眼肌面積顯著減小（P＜0.05）；當(dāng)?shù)偷鞍踪|(zhì)飼糧中補(bǔ)充添加支鏈氨基酸時(shí)，試驗(yàn)豬的胴體重和眼肌面積逐漸升高，并且當(dāng)支鏈氨基酸添加到對(duì)照組的2倍時(shí)，試驗(yàn)豬的胴體重和眼肌面積已經(jīng)恢復(fù)到正常飼糧（對(duì)照組）的水平。

表3 低蛋白質(zhì)飼糧添加支鏈氨基酸對(duì)生長(zhǎng)前期海南豬屠宰指標(biāo)的影響

2.3 低蛋白質(zhì)飼糧添加支鏈氨基酸對(duì)生長(zhǎng)前期海南豬肌肉品質(zhì)的影響

由表4可知，經(jīng)過(guò)40 d的試驗(yàn)，低蛋白質(zhì)飼糧添加支鏈氨基酸對(duì)生長(zhǎng)前期海南豬的滴水損失、屠宰后45 min和24 h pH的影響差異均不顯著（P＞0.05）。

表4 低蛋白質(zhì)飼糧添加支鏈氨基酸對(duì)生長(zhǎng)前期海南豬肌肉品質(zhì)的影響

2.4 低蛋白質(zhì)飼糧添加支鏈氨基酸對(duì)生長(zhǎng)前期海南豬血液抗氧化及免疫指標(biāo)的影響

由表5可知，低蛋白質(zhì)飼糧添加支鏈氨基酸對(duì)生長(zhǎng)前期海南豬的谷胱甘肽過(guò)氧化物酶、免疫球蛋白A、免疫球蛋白G、免疫球蛋白M的影響差異均不顯著（P＞0.05）。對(duì)試驗(yàn)豬血清中超氧化物歧化酶和丙二醛含量的影響達(dá)到了顯著水平（P＜0.05）。

表5 低蛋白質(zhì)飼糧添加支鏈氨基酸對(duì)生長(zhǎng)前期海南豬血液抗氧化及免疫指標(biāo)的影響

3 討論

3.1 低蛋白質(zhì)飼糧添加支鏈氨基酸對(duì)生長(zhǎng)前期海南豬體尺指標(biāo)的影響

豬的體尺指標(biāo)是重要的特征指標(biāo)之一，不僅影響豬的外貌特征，對(duì)經(jīng)濟(jì)效益的影響也比較大。我國(guó)地方豬品種較多，不同品種之間體型和體重差別均較大，品種和年齡是影響豬體尺指標(biāo)的主要指標(biāo)。本研究結(jié)果表明，低蛋白質(zhì)飼糧添加支鏈氨基酸對(duì)生長(zhǎng)前期海南豬的體高、體長(zhǎng)和胸圍的影響差異均不顯著（P＞0.05）；但低蛋白質(zhì)飼糧補(bǔ)充支鏈氨基酸后，生長(zhǎng)前期海南豬的體高、體長(zhǎng)和胸圍均有增加趨勢(shì)，分析原因后認(rèn)為，這主要是由于降低飼糧中粗蛋白質(zhì)水平后，會(huì)造成飼糧中某些氨基酸含量的缺乏，影響海南豬的生長(zhǎng)速度，當(dāng)補(bǔ)充支鏈氨基酸后，海南豬的生長(zhǎng)速度加快，從而對(duì)體長(zhǎng)、體高和胸圍造成了影響。

3.2 低蛋白質(zhì)飼糧添加支鏈氨基酸對(duì)生長(zhǎng)前期海南豬屠宰指標(biāo)的影響

通過(guò)飼糧營(yíng)養(yǎng)水平可以調(diào)控豬的屠宰性能指標(biāo)和肌肉品質(zhì)[7]。有研究表明，單純降低豬飼糧的粗蛋白質(zhì)水平，對(duì)豬的生長(zhǎng)性能影響不明顯，但可以顯著影響豬的胴體性狀[8]，但是當(dāng)?shù)偷鞍踪|(zhì)飼糧補(bǔ)充氨基酸后，又不會(huì)對(duì)豬的胴體重和眼肌面積產(chǎn)生影響[9]。本試驗(yàn)中，低蛋白質(zhì)飼糧添加支鏈氨基酸對(duì)試驗(yàn)豬胴體重、蹄重和眼肌面積的影響達(dá)到了顯著水平（P＜0.05），當(dāng)試驗(yàn)豬飼糧的粗蛋白質(zhì)水平由21%降低至18%時(shí)，試驗(yàn)豬的胴體重和眼肌面積均顯著降低（P＜0.05），當(dāng)?shù)偷鞍踪|(zhì)飼糧中補(bǔ)充添加支鏈氨基酸后，試驗(yàn)豬的胴體重和眼肌面積逐漸升高，并且試驗(yàn)Ⅲ組試驗(yàn)豬的胴體重和眼肌面積已經(jīng)恢復(fù)到對(duì)照組的水平。這與前人的研究結(jié)果相同。

3.3 低蛋白質(zhì)飼糧添加支鏈氨基酸對(duì)生長(zhǎng)前期海南豬肌肉品質(zhì)的影響

近年來(lái)，關(guān)于低蛋白質(zhì)飼糧對(duì)豬肌肉品質(zhì)的影響研究報(bào)道較多。Figueroa等（2002）[10]研究表明，降低飼糧蛋白質(zhì)水平超過(guò)4個(gè)百分點(diǎn)，添加合成氨基酸會(huì)造成生長(zhǎng)豬的平均背膘厚顯著提高。Kerr等（2003）[11]的研究則發(fā)現(xiàn)飼糧蛋白質(zhì)水平降低4個(gè)百分點(diǎn)并不會(huì)引起豬胴體品質(zhì)的變化。張桂杰等（2012）[9]研究表明，降低飼糧中粗蛋白質(zhì)水平4個(gè)百分點(diǎn)，不會(huì)對(duì)試驗(yàn)豬肌肉的pH（屠宰后pH 45 min和pH 24 h）和滴水損失產(chǎn)生影響。本試驗(yàn)結(jié)果表明，低蛋白質(zhì)飼糧添加支鏈氨基酸與對(duì)照組相比，對(duì)生長(zhǎng)前期海南豬的滴水損失、屠宰后45 min和24 h pH的影響差異均不顯著（P＞0.05）。

3.4 低蛋白質(zhì)飼糧添加支鏈氨基酸對(duì)生長(zhǎng)前期海南豬血液指標(biāo)的影響

超氧化物歧化酶、谷胱甘肽過(guò)氧化物酶活性及丙二醛含量是用來(lái)衡量動(dòng)物機(jī)體抗氧化能力的重要指標(biāo)，當(dāng)機(jī)體的抗氧化能力增強(qiáng)時(shí)，血漿超氧化物歧化酶、谷胱甘肽過(guò)氧化物酶活性會(huì)隨之升高，血漿丙二醛含量則降低[12]。可以中和體內(nèi)氧自由基，保護(hù)細(xì)胞免受侵害[13]。雖然目前有關(guān)支鏈氨基酸與機(jī)體免疫功能的研究較少，但是支鏈氨基酸是維持機(jī)體免疫系統(tǒng)正常運(yùn)轉(zhuǎn)不可或缺的營(yíng)養(yǎng)素。本研究發(fā)現(xiàn)，低蛋白質(zhì)飼糧添加支鏈氨基酸對(duì)生長(zhǎng)前期海南豬血清中超氧化物歧化酶和丙二醛含量的影響達(dá)到了顯著水平（P＜0.05）。當(dāng)試驗(yàn)豬飼糧的粗蛋白質(zhì)水平由21%降低至18%時(shí)，試驗(yàn)豬血清中的超氧化物歧化酶活性顯著降低（P＜0.05），當(dāng)?shù)偷鞍踪|(zhì)飼糧中補(bǔ)充添加支鏈氨基酸后，試驗(yàn)豬血清中的超氧化物歧化酶活性逐漸升高，并且試驗(yàn)Ⅲ組試驗(yàn)豬血清中的超氧化物歧化酶活性已經(jīng)恢復(fù)到對(duì)照組的水平。而當(dāng)飼糧中粗蛋白質(zhì)降低時(shí)，無(wú)論是否補(bǔ)充添加支鏈氨基酸，生長(zhǎng)前期海南豬血清中丙二醛的含量均顯著降低（P＜0.05），表明降低飼糧蛋白質(zhì)水平可以有效降低海南豬血清中丙二醛的含量。

4 結(jié)論

生長(zhǎng)前期海南豬飼糧粗蛋白質(zhì)水平降低3個(gè)百分點(diǎn)，不會(huì)影響海南豬的體尺指標(biāo)；飼糧粗蛋白質(zhì)水平降低至18%時(shí)，補(bǔ)充添加支鏈氨基酸后，試驗(yàn)豬的胴體重和眼肌面積可以恢復(fù)到正常飼糧（對(duì)照組）水平；低蛋白質(zhì)飼糧補(bǔ)充支鏈氨基酸可以顯著提高試驗(yàn)豬血清中超氧化物歧化酶含量；低蛋白質(zhì)飼糧有助于降低試驗(yàn)豬機(jī)體血清中丙二醛的含量。