李嬌，鄧麗君，鄉(xiāng)世健，何滔，蔡慧敏，劉光明，楊慧齡，周本杰△

（1.廣東醫(yī)科大學(xué)，廣東 東莞 523000；2.中山大學(xué)附屬第七醫(yī)院，廣東 深圳 518000）

卵巢早衰是指女性在40歲以前出現(xiàn)卵巢功能衰竭，以血清促卵泡激素和黃體生成素水平升高，以及雌二醇水平下降為特征的一類婦科疾?。?］。多數(shù)患者可見面部潮紅、性欲下降、潮熱多汗、不孕等低雌激素癥狀，可發(fā)生月經(jīng)周期延長甚至閉經(jīng)，生殖機(jī)能下降導(dǎo)致不孕。隨著病情的發(fā)展還可能引發(fā)心臟病、骨質(zhì)疏松等多種嚴(yán)重并發(fā)癥［2］，危害患者的正常生活及健康。近年來，卵巢早衰發(fā)病率逐漸升高且存在年輕化趨勢，40歲以下女性發(fā)病率為1%～3%，30歲以下女性發(fā)病率為0.1%［3］。卵巢早衰是氧化應(yīng)激、自身免疫性疾病、端粒長度及端粒酶活性改變，神經(jīng)-內(nèi)分泌系統(tǒng)失調(diào)等多因素、多途徑共同作用的結(jié)果［4-5］，常采用激素替代療法，雖有一定療效，但長期大劑量使用雌激素會引發(fā)子宮出血、子宮內(nèi)膜癌、乳腺癌等嚴(yán)重并發(fā)癥［5-6］。近年來，中醫(yī)通過經(jīng)方、驗方、針灸、中西醫(yī)結(jié)合等方式治療卵巢早衰［7-11］，其中通過經(jīng)驗方加減以開發(fā)治療卵巢早衰的中藥方劑是中藥新藥研發(fā)的一般途徑，但中醫(yī)具有辨證施治的特點(diǎn)，復(fù)方配伍靈活，尋找更優(yōu)的開發(fā)途徑成為亟待解決的重要問題。中醫(yī)傳承輔助平臺V 2.5軟件由中國科學(xué)院自動化研究所聯(lián)合中國中醫(yī)科學(xué)院中藥研究所共同開發(fā)［12］，其集成的數(shù)據(jù)挖掘方法可分析中藥方劑組方規(guī)律，挖掘核心藥物組合，并基于熵層次聚類挖掘新處方，已成為中藥新藥研發(fā)的新方法［13-14］。本研究中通過收集2010年至2020年臨床中醫(yī)藥治療卵巢早衰的文獻(xiàn)，運(yùn)用中醫(yī)傳承輔助平臺數(shù)據(jù)集成系統(tǒng)進(jìn)行大數(shù)據(jù)分析，整理了高頻用藥、藥物性味歸經(jīng)分布、核心藥物、配伍規(guī)律、藥物間關(guān)聯(lián)性等信息，闡明中醫(yī)藥治療卵巢早衰的組方規(guī)律，進(jìn)而挖掘用于卵巢早衰的新組方，為其后續(xù)藥效驗證及新藥開發(fā)提供參考?，F(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 文獻(xiàn)納入與排除標(biāo)準(zhǔn)

納入標(biāo)準(zhǔn)：診斷為卵巢早衰；處方中藥組成明確且療效確切；研究方法為隨機(jī)對照試驗、隊列研究、病例對照研究等；名老中醫(yī)經(jīng)驗總結(jié)、專家經(jīng)驗介紹、病例回顧等。

排除標(biāo)準(zhǔn)：綜述；動物實驗研究；個案報道；主要采用西藥和針灸療法；重復(fù)引用的文獻(xiàn)（僅提取1次數(shù)據(jù)）。

1.2 文獻(xiàn)檢索

采用計算機(jī)檢索中國知網(wǎng)及萬方數(shù)據(jù)庫中關(guān)于卵巢早衰的文獻(xiàn)，以“卵巢早衰”為檢索關(guān)鍵詞，檢索時間為2010年1月1日至2020年12月31日。

1.3 數(shù)據(jù)庫錄入與核對

使用中醫(yī)傳承輔助平臺V 2.5軟件的平臺數(shù)據(jù)管理系統(tǒng)，錄入納入文獻(xiàn)中篩選出的方劑信息，中藥名稱按2020年版《中國藥典（一部）》予以統(tǒng)一，并對錄入數(shù)據(jù)進(jìn)行審核，以確保后續(xù)數(shù)據(jù)挖掘結(jié)果的可靠性和準(zhǔn)確性。

1.4 數(shù)據(jù)分析

在中醫(yī)傳承輔助平臺V 2.5軟件“方劑統(tǒng)計”模塊中提取錄入治療卵巢早衰的全部方劑，并分析方劑的“四氣統(tǒng)計”“五味統(tǒng)計”“歸經(jīng)統(tǒng)計”等，同時在“數(shù)據(jù)分析”模塊中分析“組方規(guī)律”“頻次統(tǒng)計”。

2 結(jié)果

2.1 用藥頻次

共檢索到文獻(xiàn)6 151篇，最終納入236篇，涉及238首方劑，包含155味中藥?？偸褂妙l次為2 827次，其中使用頻次不少于30次的中藥有29味，涉及使用頻次2 053次，占總使用頻次的72.62%。使用頻次不少于30次的中藥見表1，具體功效歸類及占比見表2。

表1 使用頻次不少于30次的中藥（次）Tab.1 Chinese medicinal materials with the frequency of no less than 30 times（time）

表2 使用頻次不少于30次中藥的功效歸類及占比（n=2 053）Tab.2 Efficacy classifications and proportions of Chinese medicinal materials with the frequency of no less than 30 times（n=2 053）

2.2 性味、歸經(jīng)

治療卵巢早衰的方劑中，藥性以溫、平、寒為主，涼、熱入藥較少。詳見圖1。藥味以甘味使用頻次最高，辛、苦二味其次，酸、咸、澀三味入藥較少。詳見圖2。藥物歸經(jīng)主要集中在肝、腎、脾三經(jīng)，其次為心、肺二經(jīng)，其余入胃、膽、大腸、膀胱經(jīng)等。詳見圖3。

圖1 卵巢早衰所用中藥藥性頻次統(tǒng)計（n=2 719）Fig.1 Frequency statistics of the properties of Chinese medicinal materials used in POF（n=2 719）

圖2 卵巢早衰所用中藥藥味頻次統(tǒng)計（n=4 425）Fig.2 Frequency statistics of taste of Chinese medicinal materials used in POF（n=4 425）

圖3 卵巢早衰所用中藥歸經(jīng)頻次統(tǒng)計（n=6 758）Fig.3 Frequency statistics of belonging to meridians of Chinese medicinal materials used in POF（n=6 758）

2.3 組方規(guī)律

用藥模式：設(shè)置支持度個數(shù)為60，置信度為0.85，得到常用藥物組合33組，包含8味中藥?；陉P(guān)聯(lián)規(guī)則的常用藥物組合及頻次（頻次大于60次）見表3。設(shè)置支持度個數(shù)為50，置信度為0.85，得到核心藥物分布網(wǎng)絡(luò)（圖4）。為避免遺漏重要藥物組合信息，設(shè)置支持度個數(shù)為20，置信度為0.90，得到常用藥物分布網(wǎng)絡(luò)（圖5）。

圖4 核心藥物分布網(wǎng)絡(luò)（支持度個數(shù)為50）Fig.4 Distribution network of core drugs（with the support of 50）

圖5 常用藥物分布網(wǎng)絡(luò)（支持度個數(shù)為20）Fig.5 Distribution network of common drugs（with the support of 20）

表3 基于關(guān)聯(lián)規(guī)則的常用藥物組合及頻次（頻次大于60次）Tab.3 Combinations and frequencies of common drugs based on association rules（frequency＞60 times）

用藥規(guī)則：支持度個數(shù)設(shè)置為50，置信度設(shè)置為0.90，通過中藥傳承輔助平臺V 2.5軟件進(jìn)行規(guī)則分析，得到12條用藥規(guī)則。詳見表4。

表4 藥物組合關(guān)聯(lián)規(guī)則分析結(jié)果（置信度大于0.90）Tab.4 Analysis results of the association rule of drug combination（confidence＞0.90）

3 討論

3.1 性味、歸經(jīng)分析

中醫(yī)古籍中并無“卵巢早衰”之名，根據(jù)其現(xiàn)代疾病特點(diǎn)，可歸屬于中醫(yī)學(xué)“月水先閉”“經(jīng)水早斷”“血枯”“經(jīng)斷前后諸癥”“不孕癥”等范疇［15］。中醫(yī)認(rèn)為，卵巢早衰由先天不足、氣血虧虛、邪氣外侵、情志失調(diào)等多種原因?qū)е拢C(jī)復(fù)雜，虛實夾雜［16］。由表2可知，卵巢早衰用藥以滋陰藥和溫陽藥為主，其次為健脾益氣藥與活血化瘀藥，在此基礎(chǔ)上會加用疏肝解郁藥、祛濕化濁藥、清熱涼血藥等輔助治療。由于滋陰藥和溫陽藥大多性溫，健脾益氣藥亦多性平偏溫，卵巢早衰用藥多性溫、平，分別占46.27%和29.39%。由圖2可知，卵巢早衰用藥多味甘、辛、苦，分別占44.95%，21.22%，19.37%。甘能補(bǔ)、能和、能緩，辛能散、能行，苦能燥、能泄、能堅，亦補(bǔ)亦瀉，側(cè)面印證了卵巢早衰虛實夾雜的病機(jī)。

中醫(yī)認(rèn)為，腎虛是卵巢早衰的首要因素，其次是肝脾失和，故多從腎論治，兼治肝脾［17］。由圖3可知，卵巢早衰用藥主要?dú)w肝、腎、脾三經(jīng)。由于滋陰藥、溫陽藥多歸肝、腎二經(jīng)，疏肝解郁藥多歸肝經(jīng)，故入肝經(jīng)藥多于入腎經(jīng)藥。《素問·上古天真論》云：“女子二七，天癸至，任脈通，月事以時下，故有子……七七任脈虛，太沖脈衰少，天癸竭，地道不通，故形壞而無子也。”沖脈為血海，月經(jīng)之本，聚臟腑之血，使子宮滿盈，月事時下；任脈為陰脈之海，對人身的陰經(jīng)有調(diào)節(jié)作用，任脈不通則沖脈衰弱。沖任通盛才有正常的月經(jīng)和妊娠，沖任受損必然導(dǎo)致婦科諸疾［18］。腎為氣血之根，沖任之本，沖任的通盛以腎氣盛為前提。腎藏精，主生殖；腎精充，腎氣足；腎氣虛，其激化作用減退，可致生殖之精無法化生導(dǎo)致精虧，人體生殖機(jī)能發(fā)生衰退，導(dǎo)致月經(jīng)失調(diào)、不孕及絕經(jīng)前后諸證，卵巢早衰亦可歸結(jié)于腎虛精虧。女子以肝為先天之本，腎藏經(jīng)，肝藏血，精血互生，同為月經(jīng)提供物質(zhì)基礎(chǔ)。肝血下注沖脈，司血海之定期蓄溢，參與月經(jīng)周期、經(jīng)期及經(jīng)量的調(diào)節(jié)；肝主疏泄，喜條達(dá)，惡抑郁，肝氣不舒，氣機(jī)阻滯，血不歸經(jīng)，則見月經(jīng)失調(diào)、閉經(jīng)、絕經(jīng)等前后諸證。脾乃后天之本，氣血生化之源，脾虛失運(yùn)，氣血生化無源，后天失養(yǎng)，則可見崩漏、月經(jīng)過少、月經(jīng)后期等證。故補(bǔ)腎、益氣、活血為卵巢早衰的治療法則。

3.2 治療藥物分析

《圣濟(jì)總錄》指出，“婦人純陰，以血為本，以氣為用”，女子經(jīng)、孕、產(chǎn)、乳均以氣血為用。由表2可知，滋陰藥在卵巢早衰中使用占比最大，達(dá)39.99%，其中大多為滋陰養(yǎng)血之品?？梢姡嗅t(yī)藥治療卵巢早衰多從“血枯”入手，大補(bǔ)陰血，緩解卵巢早衰陰血虧虛之癥?！毒霸廊珪吩唬骸把a(bǔ)血以熟地為主，而芎、歸但可為之佐……諸經(jīng)之陰血虛者，非熟地不可?！庇杀?可知，熟地黃在卵巢早衰用藥中使用頻次最高，為200次，且常作為主藥使用?！墩渲槟摇分^其“大補(bǔ)血虛不足，通血脈，益氣力”，主治“血虛萎黃，心悸怔忡，月經(jīng)不調(diào)，崩漏下血，肝腎陰虛，腰膝酸軟，骨蒸潮熱，盜汗遺精，眩暈耳鳴，內(nèi)熱消渴，須發(fā)早白”等更年期癥狀。由表3可知，熟地黃-當(dāng)歸為治療卵巢早衰最常用的藥對，當(dāng)歸“入血分，專能補(bǔ)血，其氣輕而辛，故又能行血”，誠乃血中之氣藥，與熟地黃配伍使用，符合“補(bǔ)血行血，補(bǔ)而不滯”的用藥原則。臨床卵巢早衰證候類型中，肝腎陰虛型最常見［19］。枸杞子性平、質(zhì)潤，常作為平補(bǔ)腎精肝血之品使用?！侗静萁?jīng)集注》謂其“補(bǔ)益精氣，強(qiáng)盛陰道”，長于滋補(bǔ)肝腎之陰。陰血同源而互生，與熟地黃、當(dāng)歸同作為滋陰藥使用，共達(dá)補(bǔ)血、活血、滋陰之功，使卵巢早衰患者卵巢得以滋養(yǎng)、血海得以充盈。由表4可知，“川芎→當(dāng)歸”關(guān)聯(lián)度最高，為0.98?！侗静菥V目》中描述川芎“行氣開郁，活血止痛”。川芎具有辛溫升散之性，上行巔頂，下入血海，與滋陰藥合用，可引滋陰養(yǎng)血之品下達(dá)血海，改善卵巢早衰患者卵巢營養(yǎng)匱乏狀態(tài)。

由表2可知，溫陽藥的使用占比僅次于滋陰藥，占25.62%。卵巢早衰多以滋陰養(yǎng)血之品為用，然陰陽互根互生，佐以助陽之品，有助于陰血化生，卵子育養(yǎng)。由表1可知，菟絲子、淫羊藿、巴戟天同作為溫陽藥使用，用藥頻次分別為168次、92次、57次。由圖4和圖5可知，上述3味中藥亦是卵巢早衰的核心用藥。由表3可知，上述3味中藥常與其他滋陰藥組合成常用藥對，其中熟地黃-菟絲子-當(dāng)歸-枸杞子為最常用的4味藥物組合，且其關(guān)聯(lián)性強(qiáng)（置信度為0.93）。菟絲子性溫、味甘，入腎經(jīng)，可助陽，溫而不燥，補(bǔ)而不滯，可補(bǔ)益肝腎、固精縮尿?！睹t(yī)別錄》謂：“若夫口苦燥渴，明為陰液之枯涸，寒血成積，亦為陽氣之不宣，惟此善滋陰液而又敷布陽和，流通百脈，所以治之。”淫羊藿和巴戟天均有“補(bǔ)腎陽，強(qiáng)筋骨，祛風(fēng)濕”功效。淫羊藿溫補(bǔ)腎陽，固精益氣，《日華子諸家本草》謂其“治一切冷風(fēng)勞氣，補(bǔ)腰膝，強(qiáng)心力，丈夫絕陽不起，女子絕陰無子，筋骨攣急……”巴戟天善走腎經(jīng)，補(bǔ)腎助陽，強(qiáng)陰固精，《得宜本草》謂其“功專溫補(bǔ)元陽”。3味溫陽藥合用，可用于治療卵巢早衰患者腰膝酸軟、小便不禁等腎精不足之癥，與滋陰藥合用，使陰液得到陽氣的推動而綿綿不絕，有助于陰血化生，血海填充，符合“陰陽互根，陽中求陰，陰陽互用”的用藥原則。

滋陰養(yǎng)血之品多質(zhì)重滋膩，長期服用有礙脾胃，導(dǎo)致脾虛濕重、脾虛運(yùn)化失常、氣血失調(diào)，故卵巢早衰治療方劑中常配伍健脾益氣、祛濕化濁之品。由表2可知，健脾益氣藥在卵巢早衰中使用占比為16.51%，祛濕化濁藥使用占比為3.51%。由表1可知，健脾益氣藥山藥和祛濕化濁藥茯苓用藥頻次分別為113次和72次。由圖4可知，兩者為治療卵巢早衰的核心用藥。由表3和表4可知，山藥常與其他藥物搭配使用，組成各種常用藥對。山藥益腎氣，健脾胃?！夺t(yī)經(jīng)溯洄集》記載：“干山藥，雖獨(dú)入手太陰經(jīng)，然其功亦能強(qiáng)陰，且手太陰為足少陰之上原，原既有滋，流豈無益?！鄙剿幦胧痔幏谓?jīng)，可滋養(yǎng)足少陰腎經(jīng)，益腎氣，強(qiáng)盛陰道，使陰液得以滋養(yǎng)，氣血生化有源；健脾胃，脾氣健運(yùn)，血循常道，則血旺而經(jīng)調(diào)?！侗静菡分^：“茯苓，能利竅去濕，利竅則開心益智，導(dǎo)濁生津；去濕則逐水燥脾，補(bǔ)中健胃……”茯苓與山藥配伍使用，共達(dá)健脾之功，可利濕，以防滋補(bǔ)之品生濕，寧心安神，對改善卵巢早衰患者煩躁不安情緒亦有益處。

由表2可知，活血化瘀藥在卵巢早衰中使用占比為8.13%，疏肝解郁藥使用占比為4.48%。情志失調(diào)、肝氣不舒是卵巢早衰的主要致病因素，亦是導(dǎo)致卵巢早衰患者閉經(jīng)的主要原因［20］，故卵巢早衰治療方劑常輔以疏肝解郁藥和活血化瘀藥治療，以調(diào)理肝氣不舒、卵巢經(jīng)閉之態(tài)。由表1可知，柴胡和香附為常用疏肝解郁藥，丹參為常用活血化瘀藥，用藥頻次分別為50次、42次、63次。柴胡輕清升散，芳香疏泄，《本草綱目》謂其“治陽氣下陷……婦人熱入血室，經(jīng)水不調(diào)”，《滇南本草》謂其“行肝經(jīng)逆結(jié)之氣，止左脅肝氣疼痛，治婦人血熱燒經(jīng)，能調(diào)月經(jīng)”，可升可散，除能疏肝解郁外，還可改善月經(jīng)不調(diào)，尤其適用于卵巢早衰虛實夾雜的病機(jī)。香附行氣解郁，調(diào)經(jīng)止痛，《神農(nóng)本草經(jīng)疏》謂其“莎草根，治婦人崩漏、帶下、月經(jīng)不調(diào)者，皆降氣、調(diào)氣、散結(jié)、理滯之所致也，蓋血不自行，隨氣而行，氣逆而郁，則血亦凝澀，氣順則血亦從之而和暢，此女人崩漏帶下，月事不調(diào)之病所以咸須之耳。然須輔之以益血涼血之藥，氣虛者兼入補(bǔ)氣藥乃可奏功也”。丹參作為常用活血化瘀之品，歷來為婦科要藥，《日華子諸家本草》謂其“破宿血，補(bǔ)新生血……調(diào)婦人經(jīng)脈不勻，血邪心煩”，性偏涼，可活血化瘀、涼血清熱、養(yǎng)血安神，善治月經(jīng)不調(diào)、痛經(jīng)、經(jīng)閉等。牡丹皮為清熱涼血藥，治熱入血分，善清血而活血，《本草綱目》謂其“和血，生血，涼血。治血中伏火，除煩熱”，可通關(guān)腠血脈，通月經(jīng)，治女子經(jīng)脈不通、血瀝腰疼，改善卵巢早衰患者面部潮紅、潮熱多汗等虛熱癥狀。牡丹皮為血中之氣藥，與滋陰補(bǔ)血之品同用，使血暢不留瘀，血熱不妄行。與柴胡、香附合用，助其行氣開郁、調(diào)暢血脈，血行通暢；與丹參合用，共達(dá)活血化瘀之功。由表1和圖4可知，甘草為卵巢早衰高頻用藥，亦為核心用藥?！侗静菡酚涊d：“甘草，味至甘，得中和之性，有調(diào)補(bǔ)之功，故毒藥得之解其毒，剛藥得之和其性，表藥得之助其外，下藥得之緩其速?！逼涑Ｓ糜谡{(diào)和諸藥藥性。滋陰養(yǎng)血、健脾益氣、活血化瘀等藥多具燥、熱之性，與甘草同用，可防燥熱傷陰?！睹t(yī)別錄》謂其“通經(jīng)脈，利血?dú)狻?，有改善卵巢早衰患者氣滯血瘀、倦怠乏力之效?/p>

3.3 小結(jié)

中醫(yī)藥治療卵巢早衰雖具多樣性，但亦具有集中性和規(guī)律性。本研究中運(yùn)用中醫(yī)傳承輔助平臺V2.5軟件對2010年至2020年中醫(yī)藥治療卵巢早衰文獻(xiàn)所用方劑進(jìn)行了規(guī)律性分析，從肝、腎、脾三臟出發(fā)，提出補(bǔ)腎、益氣、活血的卵巢早衰治療法則，輔以祛濕化濁、疏肝解郁、清熱涼血等中藥治療，擬組用于治療卵巢早衰的補(bǔ)腎健脾活血方。該方以熟地黃為君藥，“補(bǔ)血滋陰，益精填髓”，主治“血虛萎黃、心悸怔忡、月經(jīng)不調(diào)、崩漏下血、肝腎陰虛、腰膝酸軟、骨蒸潮熱、盜汗遺精、眩暈耳鳴、內(nèi)熱消渴、須發(fā)早白”等更年期癥狀。以菟絲子、淫羊藿、巴戟天、山藥為臣藥，溫腎陽、補(bǔ)腎精、健脾益氣、化生氣血。佐以當(dāng)歸、枸杞子調(diào)和氣血；川芎、丹參活血化瘀，改善盆腔微循環(huán)，增加子宮及卵巢供血；香附、柴胡疏肝理氣，活血調(diào)經(jīng)；茯苓增強(qiáng)健脾之功，同時防滋膩生濕；牡丹皮清熱涼血，活血化瘀。甘草為使，調(diào)和諸藥。全方補(bǔ)腎，兼調(diào)肝脾，共達(dá)補(bǔ)腎、健脾、活血之功，對卵巢早衰患者有著多系統(tǒng)、多環(huán)節(jié)的整體調(diào)節(jié)作用。