高效液相色譜法同時(shí)測(cè)定食品中5種添加劑

唐 奕

（邵陽市食品藥品檢驗(yàn)所，湖南邵陽 422000）

摘 要：采用高效液相色譜法同時(shí)測(cè)定食品中安賽蜜、苯甲酸、山梨酸、糖精鈉和脫氫乙酸等5種添加劑。樣品經(jīng)前處理，使用C18柱，以甲醇∶0.02 mol/L乙酸銨溶液（7∶93）為流動(dòng)相，在波長(zhǎng)230 nm，流速

1 mL/min，柱溫40 ℃的條件下測(cè)定。經(jīng)多次試驗(yàn)，該方法線性關(guān)系好，相關(guān)系數(shù)均在0.999 9以上，平均回收率為82.6%～104.4%，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為1.3%～4.6%。該方法簡(jiǎn)單、快速、回收率高及精密度好，適用于食品中5種添加劑的同時(shí)檢測(cè)。

關(guān)鍵詞：高效液相色譜法;同時(shí)測(cè)定;食品添加劑

Simultaneous Determination of Five Additives in Food by High Performance Liquid Chromatography

TANG Yi

（Shaoyang Food and Drug Inspection Institute， Shaoyang 422000， China）

Abstract： Five additives including acesulfame potassium， benzoic acid， sorbic acid， sodium saccharin and dehydroacetic acid in food were simultaneously determined by high performance liquid chromatography. The sample was pretreated， using a C18 column， methanol∶0.02 mol/L ammonium acetate solution （7∶93） as the mobile phase， and the wavelength was 230 nm， the flow rate was 1 mL/min， and the column temperature was 40 ℃. After many experiments， the method has a good linear relationship， the correlation coefficient is above 0.999 9， the average recovery rate is 82.6%～104.4%， and the relative standard deviation is 1.3%～4.6%. The method is simple， fast， high in recovery rate and good in precision， and is suitable for the simultaneous detection of five kinds of additives in food.

Keywords： high performance liquid chromatography; simultaneous determination; food additives

食品企業(yè)在產(chǎn)品中添加甜味劑（安賽蜜、糖精鈉）和防腐劑（苯甲酸、山梨酸、脫氫乙酸），以改善食品的口感、延長(zhǎng)保質(zhì)期[1]。《食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 食品添加劑使用標(biāo)準(zhǔn)》（GB 2760—2014）對(duì)適用范圍和限量要求都作出了明確規(guī)定[2]。目前這5種食品添加劑使用多個(gè)方法標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行檢測(cè)，同時(shí)測(cè)定的報(bào)道甚少，造成檢驗(yàn)效率低，實(shí)驗(yàn)成本高[3]。本試驗(yàn)在GB 5009.28—2016[4]、GB 5009.121—2016[5]、GB/T 5009.140—2003[6]的基礎(chǔ)上，優(yōu)化試驗(yàn)條件，同時(shí)測(cè)定以上5種食品添加劑，以科學(xué)高效保障食品質(zhì)量安全。

1 材料與方法

1.1 儀器和試劑

Agilent 1260高效液相色譜儀（二極管陣列檢測(cè)器、配自動(dòng)進(jìn)樣器）;mini UV超純水機(jī)。

安賽蜜、苯甲酸、山梨酸、糖精鈉和脫氫乙酸，國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，1 000 μg/mL，北京海岸鴻蒙標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)技術(shù)有限公司;甲醇，色譜純;乙酸銨、亞鐵氰化鉀、乙酸鋅、硫酸鋅和氫氧化鈉，分析純。

試驗(yàn)樣品為碳酸飲料、含乳飲料、辣椒醬，市售。

1.2 試驗(yàn)方法

1.2.1 色譜條件

色譜柱：C18柱（250 mm×4.6 mm，5μm）;流動(dòng)相：甲醇∶0.02 mol/L乙酸銨溶液（7∶93）;流速：1 mL/min;檢測(cè)波長(zhǎng)：230 nm;柱溫：40 ℃;進(jìn)樣量：10 μL。

1.2.2 標(biāo)準(zhǔn)溶液配制

安賽蜜、苯甲酸、山梨酸、糖精鈉和脫氫乙酸混合標(biāo)準(zhǔn)中間溶液（250 μg/mL）：分別準(zhǔn)確吸取12.5 mL安賽蜜、苯甲酸、山梨酸、糖精鈉和脫氫乙酸標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液（均為1 000 μg/mL）于50 mL容量瓶中，用水稀釋至刻度。

安賽蜜、苯甲酸、山梨酸、糖精鈉和脫氫乙酸混合標(biāo)準(zhǔn)系列工作溶液：分別準(zhǔn)確吸取安賽蜜、苯甲酸、山梨酸、糖精鈉和脫氫乙酸混合標(biāo)準(zhǔn)中間溶液1.00 mL、2.00 mL、3.00 mL、4.00 mL和5.00 mL于10 mL容量瓶中，用水稀釋至刻度，配制成質(zhì)量濃度分別為25 μg/mL、50 μg/mL、75 μg/mL、100 μg/mL和125 μg/mL的混合標(biāo)準(zhǔn)系列工作溶液。

1.2.3 流動(dòng)相比例

試驗(yàn)選用甲醇∶0.02 mol/L乙酸銨溶液作為流動(dòng)相，分別采用5∶95、7∶93、10∶90這3種不同的比例進(jìn)行混合標(biāo)準(zhǔn)溶液的測(cè)定。

1.2.4 樣品預(yù)處理

稱取約2 g碳酸飲料于50 mL具塞離心管中，加水約25 mL，渦旋混勻，超聲20 min，加水定容至刻度，過0.22 μm濾膜，待測(cè)[3]。

稱取約2 g含乳飲料、辣椒醬于50 mL具塞離心管中，加水約25 mL，渦旋混勻，超聲20 min，冷卻至室溫，加沉淀劑以沉淀蛋白質(zhì)，混勻，加水定容至刻度，于8 000 r/min離心，取適量上清液過0.22 μm濾膜，待測(cè)。本次試驗(yàn)選用兩種沉淀劑進(jìn)行比較測(cè)定：沉淀劑1為亞鐵氰化鉀溶液（106 g/L）+乙酸鋅溶液（220 g/L）各2 mL;沉淀劑2為硫酸鋅（120 g/L）+氫氧化鈉（20g/L）各2 mL。

2 結(jié)果與分析

2.1 流動(dòng)相比例的確定

流動(dòng)相比例的變化直接影響分離效果、出峰時(shí)間和順序，結(jié)果顯示甲醇∶乙酸銨溶液比例為5∶95時(shí)30 min全部分離，分離效果好，具體情況見圖1;比例為7∶93時(shí)25 min全部分離，分離效果好，具體情況見圖2;比例為10∶90時(shí)20 min全部分離，分離效果欠佳，出峰順序略有改變，糖精鈉在山梨酸前面出峰，兩個(gè)峰略有重疊，當(dāng)樣品基質(zhì)復(fù)雜時(shí)，容易出現(xiàn)雜質(zhì)與目標(biāo)物質(zhì)分離不開，影響測(cè)定結(jié)果，具體情況見圖3。綜合考慮，本試驗(yàn)選擇甲醇與乙酸銨的比例7∶93進(jìn)行檢測(cè)。

2.2 混合標(biāo)準(zhǔn)曲線的線性關(guān)系

按1.2.1條件進(jìn)行混合標(biāo)準(zhǔn)系列工作溶液的測(cè)定，以保留時(shí)間和峰面積對(duì)濃度分別進(jìn)行線性回歸，5種添加劑在25～125 μg/mL范圍內(nèi)呈現(xiàn)良好的線性關(guān)系，安賽蜜、苯甲酸、山梨酸、糖精鈉和脫氫乙酸相關(guān)系數(shù)分別為0.999 9、1.000 0、1.000 0、0.999 9和0.999 9。

2.3 加標(biāo)回收率的測(cè)定結(jié)果

按本方法進(jìn)行樣品制備，分別在試樣中加入5.0 mL安賽蜜、苯甲酸、山梨酸、糖精鈉和脫氫乙酸（50 μg/mL）混合標(biāo)液（理論加標(biāo)量為0.25 mg），根據(jù)樣品類別分別預(yù)處理后按1.2.1條件進(jìn)行測(cè)定，做2個(gè)平行樣。其中，含乳飲料和辣椒醬采用2種沉淀劑進(jìn)行前處理，然后測(cè)定。同時(shí)做樣品空白。

表1～表3結(jié)果顯示，5種添加劑的平均回收率為82.6%～104.4%，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為1.3%～4.6%。表2、表3結(jié)果顯示，2種沉淀劑回收率、精密度均達(dá)到理想效果。

3 結(jié)論

本文建立了同時(shí)測(cè)定食品中5種添加劑的高效液相色譜法，該方法簡(jiǎn)單快速，分離效果好，回收率高，精密度好，提高了檢測(cè)效率，降低了檢驗(yàn)成本。選用的2種沉淀劑（亞鐵氰化鉀溶液+乙酸鋅溶液、硫酸鋅+氫氧化鈉）回收效果好，均適用于樣品中蛋白質(zhì)的沉淀處理。

參考文獻(xiàn)

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[3]楊紅梅，劉艷琴，殷曉燕.高效液相色譜法同時(shí)測(cè)定食品中安賽蜜、糖精鈉、苯甲酸、山梨酸和脫氫乙酸[J].食品科技，2007（10）：213-214.

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[5]國(guó)家衛(wèi)生和計(jì)劃生育委員會(huì).食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 食品中脫氫乙酸的測(cè)定：GB 5009.121—2016[S].北京：中國(guó)標(biāo)準(zhǔn)出版社，2016.

[6]中華人民共和國(guó)衛(wèi)生部，中國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)化管理委員會(huì).飲料中乙?；前匪徕浀臏y(cè)定：GB/T 5009.140—2003[S].北京：中國(guó)標(biāo)準(zhǔn)出版社，2003.

作者簡(jiǎn)介：唐奕（1968—），女，湖南邵陽人，本科，工程師。研究方向：食品檢驗(yàn)與質(zhì)量管理。