王建琳,江之瑤,欒慶東,尹燕博*

(1.青島農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物醫(yī)學(xué)院，青島 266109；2.青島博隆基因工程公司，青島 266041)

禽腺病毒-I群(fowl adenoviruses，F(xiàn)AdVs)感染與多種疾病有關(guān)，如肌胃糜爛、心包積液綜合征(hydropericardium syndrome，HPS)和包涵體肝炎(inclusion body hepatitis，IBH)。根據(jù)病毒的分子結(jié)構(gòu)特征，F(xiàn)AdVs 可分為5個(gè)種，分別為A、B、C、D和E；根據(jù)血清交叉中和反應(yīng)，可分為12個(gè)血清型(FAdVs 1～7、8a、8b、9～11)。其中，肌胃糜爛主要與FAdV-1相關(guān)，盡管也有零星報(bào)道臨床肌胃損傷病例中分離到FAdV-8a和FAdV-8b；HPS主要由FAdV-4引起；IBH與FAdV-2、-8a、-8b和-11相關(guān)。近年來(lái)，F(xiàn)AdVs感染呈現(xiàn)全球增長(zhǎng)趨勢(shì)，給肉雞養(yǎng)殖業(yè)造成嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失。

2007―2017年的調(diào)查表明，我國(guó)主要流行FAdV-4、-8a、-8b和-11，且目前主要流行的血清型FAdVs與IBH和HPS相關(guān)。其中，2007—2014年，F(xiàn)AdV-11為主要流行血清型，引起IBH；從2014年7月以來(lái)，F(xiàn)AdV-4引起的HPS大量發(fā)生；2017年，臨床分離的FAdVs以FAdV-8b為主。目前，我國(guó)FAdVs的致病性研究主要集中到FAdV-4，其他血清型FAdVs的致病性多見(jiàn)于國(guó)外報(bào)道，且報(bào)道結(jié)果并不一致，如Steer等報(bào)道FAdV-8b感染SPF雞引起IBH，其死亡率為7%，但Matos等報(bào)道FAdV-8b感染SPF肉雞和蛋雞的死亡率分別為100%和20%。這表明同一血清型FAdVs不同毒株對(duì)SPF雞的致病性并不完全一致。

垂直傳播被認(rèn)為是FAdVs的重要生物學(xué)特性，但并不是所有血清型FAdVs均可引起雞胚發(fā)生明顯損傷，如FAdV-2和 FAdV-11感染11日齡SPF雞胚不發(fā)生死亡且剖檢無(wú)明顯病變，但也有報(bào)道FAdV-11具有較高的雞胚致死率，F(xiàn)AdV-4和FAdV-8對(duì)雞胚的致死率為100%。這也表明，同一血清型FAdVs不同毒株對(duì)SPF雞胚的致病性并不完全一致。

鑒于同一血清型FAdVs不同毒株對(duì)SPF雞胚和雞的致病性存在差異，且我國(guó)主要流行的血清型FAdV-4、-8a、-8b和-11的致病性未見(jiàn)詳細(xì)研究報(bào)道，故本研究擬對(duì)這4種血清型FAdVs感染雞胚和雞的比較病理學(xué)進(jìn)行研究，以期為FAdVs發(fā)病機(jī)制的研究提供基礎(chǔ)，為FAdVs感染的防控措施的制定提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 毒株

FAdV毒株 KU981149(FAdV-4)、MF573907(FAdV-8a)、MF573909(FAdV-8b)和MF573929(FAdV-11)由本實(shí)驗(yàn)室分離、鑒定和保存。

1.2 主要試劑與實(shí)驗(yàn)動(dòng)物

病毒基因組DNA提取試劑盒、小量膠回收試劑盒、多功能DNA純化回收試劑盒、克隆載體pMD19-T、DL2000 DNA Marker和感受態(tài)細(xì)胞DH5α均購(gòu)自TaKaRa公司、DMEM/F-12 1∶1營(yíng)養(yǎng)液購(gòu)自Hyclone公司、胎牛血清購(gòu)自Gibco公司。

12日齡SPF雞胚和10日齡SPF雞均購(gòu)自北京梅里亞維通實(shí)驗(yàn)動(dòng)物技術(shù)有限公司。

1.3 4種血清型毒株組織半數(shù)感染量測(cè)定

取4瓶(25 cm)LMH細(xì)胞，待細(xì)胞生長(zhǎng)到約占瓶底面積的90%時(shí)，棄掉培養(yǎng)液，用PBS沖洗3次后，加入0.25%胰酶500 μL室溫消化3 min，消化完成后，加入一定量含10%胎牛血清、1%青鏈霉素雙抗的DMEM/F-12 反復(fù)吹打，使細(xì)胞懸液中細(xì)胞量為(2～3)×10個(gè)·mL。取96孔細(xì)胞培養(yǎng)板，每孔加入細(xì)胞懸液100 μL，置于二氧化碳培養(yǎng)箱中37 ℃培養(yǎng)24 h。培養(yǎng)完成后倒出培養(yǎng)液，每孔加入用含2%胎牛血清、1%青鏈霉素雙抗的DMEM/F-12 10倍比稀釋的細(xì)胞毒100 μL，每個(gè)稀釋度接種8孔，留陰性對(duì)照(加入不含細(xì)胞毒的DMEM/F-12)兩排，置于二氧化碳培養(yǎng)箱中37 ℃，培養(yǎng)7 d。記錄病變孔數(shù)，按Reed-Muench法計(jì)算組織半數(shù)感染量(the 50% tissue culture infective dose，TCID)。

1.4 4種血清型毒株感染SPF雞胚

12日齡SPF雞胚150枚，隨機(jī)分為5組，每組30枚，分別為FAdV-4組、FAdV-8a組、FAdV-8b組、FAdV-11組和對(duì)照組。各感染組雞胚經(jīng)絨毛尿囊膜途徑接種10TCID300 μL病毒液，對(duì)照組接種等量的DMEM/F-12。將雞胚置于孵化器中孵化，每天檢查雞胚發(fā)育情況，棄去接種后24 h內(nèi)死亡雞胚，接種后7 d統(tǒng)計(jì)各組雞胚死亡率，測(cè)定存活雞胚質(zhì)量，觀察胚體變化。

1.5 4種血清型毒株感染SPF雞

150只10日齡SPF雞隨機(jī)分為5組，每組30只，分別經(jīng)腿部肌肉途徑感染300 μL 10TCIDFAdV-4、600 μL 10TCIDFAdV-8a、600 μL 10TCIDFAdV-8b、600 μL 10TCIDFAdV-11 和600 μL DMEM/F-12。每天觀察SPF雞狀態(tài)，于感染后第5天統(tǒng)計(jì)各組死亡率，并每組隨機(jī)處死7只SPF雞進(jìn)行病理剖檢，記錄各組病變并進(jìn)行評(píng)分，無(wú)明顯病變?yōu)?，輕度損傷為1～2，中度損傷為3，嚴(yán)重?fù)p傷為4～5，各組SPF雞各器官評(píng)分進(jìn)行相加。取重要組織和主要免疫器官用10%福爾馬林固定，進(jìn)行HE染色和病理組織學(xué)觀察。

1.6 4種血清型毒株感染SPF雞主要臟器病毒載量測(cè)定

應(yīng)用DNA提取試劑盒根據(jù)操作步驟提取各血清型FAdVs病毒DNA，根據(jù)Meulemans等報(bào)道的FAdVs基因擴(kuò)增引物進(jìn)行PCR擴(kuò)增，擴(kuò)增產(chǎn)物連接pMD19-T載體16 ℃過(guò)夜，后轉(zhuǎn)入DH5α感受態(tài)細(xì)胞中。經(jīng)測(cè)序驗(yàn)證后，正確的樣品大量搖菌培養(yǎng)后提取質(zhì)粒，紫外分光光度計(jì)測(cè)定質(zhì)粒濃度，并按照公式計(jì)算DNA拷貝數(shù)。將質(zhì)粒樣品稀釋?zhuān)胐dHO將質(zhì)粒樣品依次稀釋成1×10～1×10copies·μL，將8個(gè)樣品梯度作為標(biāo)準(zhǔn)品模板進(jìn)行熒光定量PCR，得到相應(yīng)的值。以值作為縱坐標(biāo)，相應(yīng)模板濃度的對(duì)數(shù)作為橫坐標(biāo)，制作標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)。同時(shí)制作熔解曲線(xiàn)，以檢驗(yàn)熒光定量PCR程序的準(zhǔn)確性。同時(shí)制作熔解曲線(xiàn)，以檢驗(yàn)熒光定量PCR程序的準(zhǔn)確性。

130只10日齡SPF雞隨機(jī)分為5組，F(xiàn)AdV-4組50只，其余各組每組20只，分別經(jīng)腿部肌肉途徑感染300 μL 10TCIDFAdV-4、600 μL 10TCIDFAdV-8a、600 μL 10TCIDFAdV-8b、600 μL 10TCIDFAdV-11和600 μL DMEM/F-12。于感染后第3、5、7天每組隨機(jī)處死5只，采集心、肝、腎、胰、脾和法氏囊保存于-70 ℃。提取各組織總核酸進(jìn)行熒光定量PCR測(cè)定，反應(yīng)條件95 ℃ 5 min；35個(gè)循環(huán)，95 ℃ 10 s，55 ℃ 15 s和72 ℃ 20 s；參照試驗(yàn)建立的標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)對(duì)檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行比較分析。

1.7 統(tǒng)計(jì)分析

數(shù)據(jù)采用SPSS 21.0 軟件進(jìn)行分析，多組差異比較采用單因素方差分析，以<0.05 為差異顯著，<0.01為差異極顯著。

2 結(jié) 果

2.1 4種血清型毒株TCID50

LMH細(xì)胞在96孔細(xì)胞培養(yǎng)板中經(jīng)病毒接種后觀察7 d，記錄出現(xiàn)細(xì)胞病變的孔數(shù)。根據(jù)細(xì)胞病變的孔數(shù)，根據(jù)Reed-Muench法計(jì)算，F(xiàn)AdV-4、FAdV-8a、FAdV-8b和FAdV-11的TCID分別為1×10·100 μL、1×10·100 μL、1×10·100 μL和1×10·100 μL。

2.2 4種血清型毒株感染SPF雞胚的研究結(jié)果

4種血清毒株感染雞胚后，F(xiàn)AdV-8a感染組雞胚最早開(kāi)始死亡；感染后7 d FAdV-8a 感染組死亡率達(dá)到16.67%，F(xiàn)AdV-11感染組達(dá)到 86.67%，F(xiàn)AdV-4感染組為40%，F(xiàn)AdV-8b感染組為46.67%，對(duì)照組無(wú)死亡(圖1A)。雞胚感染后7 d，各感染組存活雞胚的質(zhì)量均低于對(duì)照組，其中，F(xiàn)AdV-4 感染組質(zhì)量減少最少，F(xiàn)AdV-8a 感染組質(zhì)量顯著低于對(duì)照組(<0.05)(圖1B)。

A.雞胚存活率；B.雞胚胚體質(zhì)量(*.P<0.05)

除胚體大小外，各感染組雞胚出現(xiàn)相似的變化，均出現(xiàn)胚體出血、蜷縮；胚肝出血、壞死、膽汁淤積，對(duì)照組雞胚無(wú)明顯變化(圖2)。

A1、A2.對(duì)照組；B1、B2.FAdV-4感染組；C1、C2.FAdV-8a感染組；D1、D2.FAdV-8b感染組；E1、E2.FAdV-11感染組

2.3 4種血清型毒株感染SPF雞的研究結(jié)果

FAdV-4感染組SPF雞在感染后2 d出現(xiàn)被毛蓬亂，F(xiàn)AdV-8b感染組SPF雞在感染后4 d出現(xiàn)精神沉郁現(xiàn)象。感染后5 d，F(xiàn)AdV-4感染組SPF雞死亡率達(dá)53.3%，而其他組均無(wú)死亡。剖檢可見(jiàn)，除FAdV-11感染組外，其他病毒感染SPF雞后均出現(xiàn)了肝脂肪變性、腫脹和出血，且FAdV-4 感染組最明顯；FAdV-4感染組和FAdV-8a 感染組SPF雞明顯出現(xiàn)腎腫大、顏色蒼白；FAdV-8b感染組和FAdV-11感染組出現(xiàn)胰腺壞死。此外，F(xiàn)AdV-4感染組、FAdV-8a感染組和 FAdV-8b感染組分別出現(xiàn)明顯的心包積液、肌胃糜爛和腺胃腫脹現(xiàn)象；對(duì)照組SPF雞各器官均無(wú)明顯病變(圖3)。

A1、A2、A3.對(duì)照組肝、肌胃腺胃和胰；B1、B2、B3.FAdV-4感染組肝、腎和心；C1、C2、C3.FAdV-8a感染組肝、腎和肌胃腺胃；D1、D2、D3.FAdV-8b感染組肝、肌胃腺胃和胰；E1、E2、E3.FAdV-11感染組肝、肌胃腺胃和胰

對(duì)各組SPF雞器官病變進(jìn)行評(píng)分，F(xiàn)AdV-4 感染組SPF雞心、肝和腎損傷較明顯，F(xiàn)AdV-11感染組肝和胰腺出現(xiàn)明顯損傷，F(xiàn)AdV-8b 感染組胰腺、腺胃出現(xiàn)明顯損傷；FAdV-8a感染組和FAdV-8b 感染組肝和腎損傷評(píng)分相似(表1)。

表1 FAdV-4、-8a、-8b和-11感染組SPF雞主要器官損傷評(píng)價(jià)分?jǐn)?shù)和

組織學(xué)觀察發(fā)現(xiàn)各感染組SPF雞肝出現(xiàn)相似變化，肝淤血、肝細(xì)胞變性和壞死，變性的肝細(xì)胞內(nèi)出現(xiàn)核內(nèi)包涵體，壞死區(qū)域出現(xiàn)大量炎性細(xì)胞浸潤(rùn)，浸潤(rùn)的細(xì)胞主要為淋巴細(xì)胞和巨噬細(xì)胞；此外，F(xiàn)AdV-11感染組血管周?chē)霈F(xiàn)炎性細(xì)胞浸潤(rùn)，F(xiàn)AdV-8a感染組部分膽管周?chē)霈F(xiàn)炎性細(xì)胞浸潤(rùn)，對(duì)照組肝組織無(wú)明顯病變(圖4 A1、B1、C1、D1和E1)。

FAdV-4、FAdV-8a和FAdV-8b感染組SPF雞腎損傷相似，主要出現(xiàn)輕度的淤血和腎小管上皮細(xì)胞變性，腎間質(zhì)有大量淋巴細(xì)胞浸潤(rùn)；此外，F(xiàn)AdV-4和FAdV-8a感染組出現(xiàn)腎小球炎，對(duì)照組腎組織無(wú)明顯病變(圖4 A2、B2、E2)。FAdV-8b 感染組SPF雞腺胃管狀腺上皮細(xì)胞壞死，間質(zhì)大量炎性細(xì)胞浸潤(rùn)(圖4 C2)；FAdV-11 感染組腺胃管狀腺間質(zhì)有炎性細(xì)胞浸潤(rùn)(圖4 D2)，對(duì)照組腺胃無(wú)明顯病變(圖4 F2)。

FAdV-4感染組SPF雞心外膜明顯增厚、肌纖維斷裂，存在水腫和大量炎性細(xì)胞浸潤(rùn)現(xiàn)象，對(duì)照組心無(wú)明顯病變(圖4 A3、F1)。FAdV-8a感染組肌胃出現(xiàn)明顯損傷，角質(zhì)層破壞，固有層內(nèi)混雜有細(xì)胞碎片和異嗜性粒細(xì)胞，對(duì)照組肌胃無(wú)明顯損傷(圖4 B3、E3)。FAdV-8b 和FAdV-11感染組SPF雞胰腺腺泡細(xì)胞壞死，有大量吞噬細(xì)胞和淋巴細(xì)胞浸潤(rùn)，對(duì)照組胰腺無(wú)明顯病變(圖4 C3、D3、F3)。

A1、A2、A3.FAdV-4感染組肝、腎和心；B1、B2、B3.FAdV-8a感染組肝、腎和肌胃；C1、C2、C3.FAdV-8b感染組肝、腺胃和胰；D1、D2、D3.FAdV-11感染組肝、腺胃和胰；E1、E2、E3.對(duì)照組肝、腎和肌胃；F1、F2、F3.對(duì)照組心、腺胃和胰。放大倍數(shù)：A1～2、B1～2、C1～2、D2均為400×;A3、B3、C3、D1、D3、E1～3、F1～3均為200×

免疫器官中感染組SPF雞脾白髓出現(xiàn)彌漫性實(shí)質(zhì)細(xì)胞稀疏現(xiàn)象，F(xiàn)AdV-4感染組SPF雞脾出現(xiàn)淋巴細(xì)胞局灶性增生，F(xiàn)AdV-8a感染組脾紅髓內(nèi)出現(xiàn)嗜伊紅染物質(zhì)，F(xiàn)AdV-8b 感染組和FAdV-11 感染組出現(xiàn)廣泛的實(shí)質(zhì)細(xì)胞壞死(圖5 A1、B1、C1和D1)。各感染組SPF雞胸腺均出現(xiàn)明顯損傷，皮質(zhì)和髓質(zhì)區(qū)域的淋巴細(xì)胞減少(圖5 A2、B2、C2和D2)。FAdV-8b 感染組和FAdV-11感染組胸腺髓質(zhì)胸腺小體增多(圖5 C2、D2)，且FAdV-11感染組出現(xiàn)輕度淤血現(xiàn)象(圖5 D2)。FAdV-4感染組、FAdV-8a感染組和FAdV-11感染組濾泡髓質(zhì)淋巴細(xì)胞明顯缺失(圖5 A3、B3和D3)。FAdV-8b 感染組法氏囊濾泡內(nèi)細(xì)胞壞死，淋巴細(xì)胞局灶性增生(圖5 C3)，F(xiàn)AdV-8b 感染組和FAdV-11感染組法氏囊出現(xiàn)輕度充血(圖5B3和 5D3)。對(duì)照組SPF雞脾、胸腺和法氏囊無(wú)明顯病變(圖5 E1、E2和E3)。

放大倍數(shù)：A1～3、B2～3、C2～3、D2、E1～3均為200×;B1、C1、D1、D3均為400×

除FAdV-8a感染組外，F(xiàn)AdV-4感染組SPF雞心(圖6A)和腎(圖6C)病毒載量最高，F(xiàn)AdV-8b感染組和FAdV-11感染組SPF雞胰腺(圖6D)病毒載量高于FAdV-4感染組。FAdV-4感染組SPF雞心、肝(圖6B)和腎病毒載量在感染后第5天高于第3、7天，這與剖檢時(shí)觀察到的病理?yè)p傷程度相一致。FAdV-8b感染組和 FAdV-11感染組SPF雞脾(圖6E)和法氏囊(圖6F)病毒載量在感染后第3天高于FAdV-4感染組，且法氏囊病毒載量在各個(gè)時(shí)間點(diǎn)均高于FAdV-4感染組。FAdV-8a感染組SPF雞各器官病毒載量均較低(圖6)，這可能與該毒株的生物特性有關(guān)，有待進(jìn)一步研究。

A.心；B.肝；C.腎；D.胰腺；E.脾；F.法氏囊。*.P<0.05; **.P<0.01

3 討 論

目前，F(xiàn)AdVs大部分血清型毒株感染雞都會(huì)造成肝損傷或心包積液等，且臨床感染在多個(gè)國(guó)家呈現(xiàn)增加趨勢(shì)，給家禽養(yǎng)殖業(yè)造成巨大經(jīng)濟(jì)損失。尤其是2014年以來(lái)，我國(guó)出現(xiàn)FAdV-4感染引起HPS，其死亡率高達(dá)20%～70%；雖然研究報(bào)道FAdV-8a、-8b和-11感染SPF雞出現(xiàn)IBH，不會(huì)造成死亡，但臨床IBH嚴(yán)重程度通常由于雞傳染性法氏囊病毒或雞傳染性貧血病毒等免疫抑制性病原混合感染的影響而各異，且近年來(lái)臨床病死雞中FAdVs的分離率明顯增加。鑒于不同血清型FAdVs感染給我國(guó)養(yǎng)雞業(yè)造成嚴(yán)重影響，有必要對(duì)我國(guó)主要流行血清型FAdVs對(duì)雞的致病性進(jìn)行詳細(xì)研究。

FAdVs毒株可通過(guò)雞胚肝細(xì)胞、雞胚腎細(xì)胞、LMH細(xì)胞或雞胚進(jìn)行分離，本研究應(yīng)用LMH細(xì)胞進(jìn)行病毒的增殖和病毒滴度的測(cè)定，LMH細(xì)胞感染后出現(xiàn)明顯的細(xì)胞病變。研究報(bào)道，F(xiàn)AdVs在雞胚中增殖并不一定會(huì)引起明顯病變，本研究不同血清型FAdVs感染雞胚后均出現(xiàn)明顯死亡，且存活雞胚的胚體質(zhì)量明顯降低，其中，F(xiàn)AdV-11感染雞胚死亡率達(dá)86.67%，F(xiàn)AdV-8a感染雞胚死亡率最低為16.67%；FAdV-8a感染對(duì)雞胚胚體質(zhì)量影響最嚴(yán)重，而FAdV-4感染最輕。不同血清型FAdVs感染雞胚后出現(xiàn)相似的損傷現(xiàn)象，與Schachner等的報(bào)道一致，胚體蜷縮和出血，肝出血、壞死、膽汁淤積等現(xiàn)象。垂直傳播被認(rèn)為是FAdVs感染的主要特征，這表明，與其他血清型毒株相比，種雞感染FAdV-11、-8a后會(huì)導(dǎo)致雞胚的孵化率降低或出現(xiàn)弱雛。

自從2014年以來(lái)，大量研究報(bào)道集中于FAdV-4引起HPS。本研究為確保FAdV-4感染后SPF雞出現(xiàn)明顯癥狀，但不會(huì)在感染后1～2 d內(nèi)死亡，進(jìn)行前期試驗(yàn)研究確定病毒感染量，感染后的死亡率達(dá)53.3%，其他血清型FAdVs感染不引起SPF雞死亡。肝和腎為FAdVs感染損傷的主要器官，出現(xiàn)肝炎和腎小球腎炎。4種血清型FAdVs感染SPF雞后，F(xiàn)AdV-4感染雞肝和腎損傷最明顯，F(xiàn)AdV-11感染雞最輕微，且損傷程度與病毒載量多少相一致。盡管FAdV-4對(duì)SPF雞的致病性最強(qiáng)，但也不能忽略FAdV-8a和FAdV-11對(duì)雞胚的致病性。綜合本研究結(jié)果，認(rèn)為不同血清型FAdVs對(duì)雞胚和雞的致病性并不一致，即對(duì)雞胚的致病性強(qiáng)并不代表對(duì)雞的致病性強(qiáng)。

除肝和腎的損傷外，不同血清型毒株具有其損傷的特異靶器官。FAdV-4感染后導(dǎo)致SPF雞出現(xiàn)心包腔積液，心外膜和心肌間間隙增寬，充滿(mǎn)炎性細(xì)胞，這被認(rèn)為是HPS的重要病理特征。肌胃糜爛被認(rèn)為是FAdV-1感染的重要特征，本研究發(fā)現(xiàn) FAdV-8a 感染雞出現(xiàn)明顯雞肌胃糜爛，且異嗜性粒細(xì)胞浸潤(rùn)，這與日本和埃及的兩項(xiàng)研究報(bào)道相一致。腺胃炎是FAdV-8b感染SPF雞的重要特征，這與前期實(shí)驗(yàn)室從臨床腺胃炎病例種分離到 FAdV-8b的結(jié)果相一致。FAdV-8b和FAdV-11感染雞出現(xiàn)胰腺多灶狀壞死，Nakamura等曾報(bào)道FAdV-4感染肉雞胰腺出現(xiàn)白色壞死灶，Okuda等報(bào)道從臨床無(wú)明顯眼觀病變雞的胰腺分離到FAdV-8。胰腺、腺胃和肌胃的損傷必將影響到胰液和消化酶的分泌及消化功能，盡管這種損傷不會(huì)導(dǎo)致雞的死亡，但將會(huì)影響雞的飼料轉(zhuǎn)化、生長(zhǎng)發(fā)育，從而給養(yǎng)雞業(yè)造成嚴(yán)重經(jīng)濟(jì)損失。

以前研究認(rèn)為，引起HBH的幾種血清型FAdVs并不會(huì)作為病原單獨(dú)感染引起疾病，通常是在免疫抑制性病毒感染后繼發(fā)感染而引起IBH。實(shí)際上，大部分FAdVs不僅具有致病性，且具有免疫抑制的可能性。FAdV-4、-8a和-11感染后引起機(jī)體免疫器官，如脾、胸腺和法氏囊出現(xiàn)退行性變化。本研究發(fā)現(xiàn) FAdV-8a、-8b和-11感染雞引起的免疫器官內(nèi)淋巴細(xì)胞缺失和損傷較FAdV-4更為嚴(yán)重，且除FAdV-8a外，脾和法氏囊的病毒載量高低與損傷程度相一致。這表明，F(xiàn)AdV-8a、-8b和-11感染盡管對(duì)雞無(wú)致死性，但可導(dǎo)致雞出現(xiàn)免疫抑制，這將會(huì)導(dǎo)致其他病原的繼發(fā)感染，造成較大的經(jīng)濟(jì)損失。

本研究中與其他血清型FAdVs相比，F(xiàn)AdV-8a感染SPF雞胚的死亡率最低，但對(duì)胚體質(zhì)量影響最大；感染LMH細(xì)胞出現(xiàn)病變最早，免疫熒光染色病毒陽(yáng)性信號(hào)出現(xiàn)最早(數(shù)據(jù)未報(bào)道)，感染SPF雞胚出現(xiàn)死亡最早，但各組織病毒載量最低。FAdV-8a毒株的這一特殊生物學(xué)特性有待于進(jìn)一步研究。

4 結(jié) 論

首次對(duì)我國(guó)主要流行的4種血清型FAdVs對(duì)雞的致病性進(jìn)行比較病理學(xué)研究，結(jié)果表明，F(xiàn)AdVs對(duì)雞胚的致病性強(qiáng)弱并不能代表其對(duì)SPF雞的致病性；且與FAdV-4相比，雖然FAdV-8a、-8b和-11感染不會(huì)造成雞的死亡，但對(duì)雞胚具有較強(qiáng)的致死性和減輕胚體質(zhì)量，造成雞胰腺、腺胃、肌胃和免疫器官?lài)?yán)重?fù)p傷。故FAdV-8a、-8b和-11對(duì)養(yǎng)雞業(yè)的影響也應(yīng)引起足夠重視。