臧旖欣，于婷婷

(佳木斯大學(xué), 黑龍江 佳木斯 154007)

目前，臨床上，義齒性口炎是常見的口腔疾病之一，好發(fā)于口腔衛(wèi)生狀況不佳，常年戴用義齒的中老年人?？谇粌?nèi)細菌感染是非常常見的，口腔中基托的存在會使口腔清潔困難，利于細菌的生長，白色念珠菌[1]是口腔內(nèi)常見菌種之一可引起義齒性口炎，常見的抗真菌藥物可以產(chǎn)生抗菌效果，但由于耐藥菌株的出現(xiàn)及抗菌藥物之間可能存在的相互拮抗作用，所以有必要開發(fā)新的抗菌藥。氯化鑭是一種相對少見的稀土化合物，具備消炎鎮(zhèn)痛、抗菌、抑制癌癥等優(yōu)點[2]。稀土元素在口腔醫(yī)療的使用研究，主要集中在它的防齲作用上，有研究表示鑭可干擾菌斑的產(chǎn)酸過程，對變形鏈球菌也有直接抑菌作用。也有研究證實，氯化鑭作為稀土化合物能有效防止瘢痕組織的形成[3]，但是至今尚未見鑭鹽的添加對義齒基托抗菌作用的相關(guān)報道。筆者希望通過本實驗為氯化鑭增加基托抗菌性提供實驗依據(jù)，為氯化鑭應(yīng)用于義齒性口炎的預(yù)防做一些初步討論。

1 材料和方法

1.1 菌株

國際標準菌株白色念珠菌ATCC10231。

1.2 實驗試劑及儀器

氯化鑭粉末、熱凝固化義齒基托材料和單體、生理鹽水、沙堡液體培養(yǎng)基、恒溫培養(yǎng)箱、全自動菌落回收儀、高壓蒸汽滅菌鍋、4℃冰箱、-80℃冰箱。

1.3 氯化鑭抗菌性檢測

1.3.1 制備菌液濃度：取培養(yǎng)基中液體對白色念珠菌做10-1稀釋，得到1×105CFU/mL濃度的菌液4℃保存?zhèn)溆谩?/p>

1.3.2 制備抗菌劑溶液濃度：將氯化鑭粉末制成40mg/mL、30mg/mL、20mg/mL、10 mg/mL、5mg/mL、2.5mg/mL、1.25mg/mL、0.625mg/mL，并標1～8號備用。

1.3.3 液體稀釋法：1×105CFU/mL的白色念珠菌菌液1mL分別加入上述1～8號試管內(nèi)，此時氯化鑭溶液濃度為：20mg/mL、15mg/mL、10mg/mL、5mg/mL、2.5mg/mL、1.25mg/mL、0.625mg/mL、0.313mg/mL。

1.3.4 實驗分組：陽性對照組：1mL白色念珠菌菌液和1mL生理鹽水；陰性對照組：0.313mg/mL的抗菌劑溶液2mL；實驗組：1～8號試管內(nèi)的液體混勻后37℃培養(yǎng)24h。

1.3.5 細菌培養(yǎng)：從上述各試管內(nèi)取0.2mL液體置于培養(yǎng)基中，37℃需氧培養(yǎng)24h。

1.4 氯化鑭基托抗菌性檢測

1.4.1 實驗樣品制備：按質(zhì)量比制作抗菌濃度為：0.3%、0.5%、0.7%、1.5%、2.0%、2.5%的基托，制成40mm×40mm×2mm的基托試件，以普通基托為空白對照組，每組6個。以1000目水砂紙打磨、拋光，消毒，干燥備用。

1.4.2 實驗：復(fù)蘇、活化菌株、接種、培養(yǎng)24h后菌落計數(shù)。每組實驗重復(fù)3次。

1.5 抗菌率計算

R% =(空白對照樣品平均回收菌落數(shù)-抗菌實驗材料平均回收菌落數(shù))/空白對照組平均回收菌落數(shù)抗菌率 ×100%，R%≥99%的抗菌樹脂可以報告有強抗菌作用，R%≥90%可以報告有抗菌作用。

1.6 統(tǒng)計學(xué)方法

2 結(jié)果

氯化鑭對白色念珠菌的MIC為2.5mg/mL，MBC為5.00mg/mL。當抗菌劑濃度<2.0%時，材料抗菌率低于90%,抗菌劑濃度為2.0%時，抗菌樹脂基托對變異鏈球菌抗菌率為 90%，表示有抗菌作用；濃度為2.5%的抗菌樹脂基托對白色念珠菌的抗菌率達99%，表示當材料濃度為2.5%時，有強抗菌作用。

表1 氯化鑭抗菌基托對白色念珠桿菌的抑菌結(jié)果(菌落數(shù)單位： 抗菌率：R%)

3 討論

在基托中添加一定數(shù)量有抗菌作用的材料，可以抑制口腔中義齒性口炎的產(chǎn)生，葛亞麗等將納米Ag-TiO2加入基托材料中，有效的抑制了口腔中常見菌的生長[4]。曹香林等將納米氧化鋅添加到熱凝基托樹脂中有效的提高了基托的抗菌性[5]。將氯化鑭的鎮(zhèn)痛消炎、抑菌作用附加入基托中，對于義齒基托來說是口腔材料應(yīng)用中比較理想的結(jié)果。氯化鑭作為稀土化合物在臨床上的應(yīng)用越來越廣泛，江川等將氯化鑭加入人工關(guān)節(jié)磨損顆粒中，證實了氯化鑭可以有效抑制磨損顆粒抑制炎癥反應(yīng)[6]。周夢妮等的研究證明，氯化鑭對人卵巢腫瘤細胞有比較明顯的抑制作用[7]。孫嘉方等將鑭鹽作為口腔沖洗液對大鼠牙周組織進行沖洗，證實鑭鹽對炎癥有明顯的抑制作用[8]。本實驗中將氯化鑭作為添加劑添加入義齒基托中，是利用了氯化鑭的有效抗菌作用。添加氯化鑭的樹脂基托能有效抑制其表面的白色念珠菌生長，當添加量達2.0%時，添加氯化鑭的樹脂基托表明有抗白色念珠菌作用，隨氯化鑭添加量的增加，樹脂基托抗菌率(R%)也隨之增高。氯化鑭可有效抑制白色念珠菌菌膜形成，并且結(jié)合Ca2+生成抗酸性較好的磷酸鑭保護層。這與陳暉，研究結(jié)果一致[9]。菌斑生物膜的形成是由多種因素共同作用的結(jié)果，細菌濃度、基托材料、口內(nèi)食物酸甜度、食物存留時間、口腔清潔度、清潔頻率等都有一定影響[10]。白色念珠菌是公認的口腔義齒性口炎致病菌，若基托磨光度差、口腔清潔度不足、清潔頻率低、唾液黏稠度高，白色念珠菌的附著會明顯增加，隨著氯化鑭的添加，白色念珠菌附著相對減小，能夠有效控制口腔中念珠菌數(shù)量的增加。抗菌基托可以抑制病原菌的生成與生長，抑制白色念珠菌菌膜的形成[11]。本研究說明氯化鑭的添加能有效抑制白色念珠菌的生長賦予基托抗菌性，且氯化鑭為白色粉末狀物質(zhì)，因此，其在義齒基托的添加可行性高，并且不會影響義齒基托原有的顏色，美觀性較好，但是本實驗為體外試驗，體內(nèi)抑菌實驗尚未進行，抑菌機制、體內(nèi)抑菌結(jié)果等有待進一步研究。