趙聰娜，韓鵬飛，張寶楠，王居平

1 天津市北辰區(qū)中醫(yī)醫(yī)院腎病科，天津 300400；2 天津市北辰區(qū)中醫(yī)醫(yī)院檢驗(yàn)科；3 天津市北辰區(qū)中醫(yī)醫(yī)院心病科

動(dòng)脈粥樣硬化（AS）以動(dòng)脈壁脂質(zhì)沉積產(chǎn)生病理性斑塊為病理特征，是冠心病、腦梗死等缺血性心腦血管疾病的主要病理基礎(chǔ)。AS的發(fā)生機(jī)制復(fù)雜，涉及氧化應(yīng)激、炎癥反應(yīng)等多種病理過程［1］。研究表明，Toll 樣受體4（TLR4）介導(dǎo)的信號(hào)通路是AS 炎癥反應(yīng)的主要炎癥信號(hào)通路［2-3］。髓樣分化因子88（MyD88）和核轉(zhuǎn)錄因子κB（NF-κB）是TLR4 的關(guān)鍵下游分子，也是炎癥反應(yīng)中重要的炎癥因子，TLR4/MyD88/NF-κB 信號(hào)通路已被證實(shí)是炎癥反應(yīng)中最重要的炎癥信號(hào)通路［4］。因此，以TLR4/MyD88/NF-κB 信號(hào)通路為治療靶點(diǎn)有可能在抑制AS 炎癥反應(yīng)中發(fā)揮關(guān)鍵作用。天降血栓通丸是以補(bǔ)陽還五湯為基本方加減化裁而成，具有活血化瘀、益氣養(yǎng)血的功效［5］。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)表明，天降血栓通丸能夠抑制ApoE-/-小鼠的脂質(zhì)代謝紊亂，減輕炎癥反應(yīng)，從而抑制AS 的發(fā)生發(fā)展；在2 型糖尿病腎病動(dòng)物模型中，天降血栓通丸被證實(shí)具有調(diào)節(jié)血脂、保護(hù)血管內(nèi)皮功能和抑制炎癥反應(yīng)的作用［6］。但目前關(guān)于天降血栓通丸對(duì)AS 的作用機(jī)制研究尚少。2020 年7月—2021 年9 月，我們通過飼喂高脂飲食建立ApoE-/-小鼠AS 模型，觀察天降血栓通丸對(duì)AS 小鼠主動(dòng)脈斑塊形成的抑制作用，并探討其作用機(jī)制與TLR4/MyD88/NF-κB 信號(hào)通路的關(guān)系，為臨床治療AS提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 SPF 級(jí)C57BL/6 雄性小鼠12 只與ApoE-/-雄性小鼠62 只，8 周齡，體質(zhì)量（20±2）g，購自北京維通利華實(shí)驗(yàn)動(dòng)物技術(shù)有限公司。飼養(yǎng)于北京大學(xué)SPF 級(jí)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物房，飼養(yǎng)溫度20～25 ℃，相對(duì)濕度50%～60%，晝夜時(shí)長1∶1，自由飲水采食。用普通飼料適應(yīng)性飼喂1周后用于實(shí)驗(yàn)。

1.1.2 藥物與試劑 高脂飼料（含20%蔗糖、15%豬油、2%膽固醇、0.2%膽酸鈉，購自北京華阜康生科技股份有限公司）；天降血栓通丸（天津市北辰區(qū)中醫(yī)醫(yī)院門診），阿托伐他汀片（輝瑞制藥有限公司）；脂多糖（LPS，TLR4 激動(dòng)劑，北京康瑞納生物科技有限公司）?？偰懝檀迹═C）、甘油三酯（TG）、低密度脂蛋白膽固醇（LDL-C）、高密度脂蛋白膽固醇（HDLC）、單核細(xì)胞趨化因子1（MCP-1）、細(xì)胞間黏附分子1（ICAM-1）、血管細(xì)胞黏附分子1（VCAM-1）檢測(cè)試劑盒（上海酶研生物科技有限公司），白細(xì)胞介素6（IL-6）、白細(xì)胞介素1β（IL-1β）、腫瘤壞死因子α（TNF-α）檢測(cè)試劑盒（南京建成生物研究所），油紅O 染色液（武漢純度生物科技有限公司），BCA 蛋白濃度測(cè)定試劑盒、RIPA蛋白裂解液（北京索萊寶公司），TLR4、MyD88、NF-κB、β-actin抗體（英國Abcam公司）。

1.1.3 實(shí)驗(yàn)儀器 BS-280全自動(dòng)生化分析儀（南京貝登醫(yī)療股份有限公司）；Applied Biosystems PCR 儀（美國Thermo公司）；WD-9417B酶標(biāo)檢測(cè)儀（上海易匯生物科技有限公司）；CX21光學(xué)顯微鏡（日本奧林巴斯）；GelDoc Go凝膠成像系統(tǒng)（美國Bio-Rad公司）。1.2 模型制備與實(shí)驗(yàn)分組 C57BL/6小鼠飼喂普通飼料作為正常對(duì)照組，ApoE-/-小鼠飼喂高脂飼料制備AS模型。喂養(yǎng)8周后，隨機(jī)選取2只ApoE-/-小鼠觀察主動(dòng)脈病理變化，以出現(xiàn)AS斑塊為建模成功。將剩余60只ApoE-/-小鼠采用隨機(jī)數(shù)字表法分為模型組、阿托伐他汀組、天降血栓通丸低劑量組、天降血栓通丸高劑量組、天降血栓通丸+LPS組，每組12只。

1.3 藥物制備與干預(yù) 天降血栓通丸加工濃縮制成含生藥2.25 g/mL 的藥液；阿托伐他汀片用0.9%氯化鈉溶液制成1.5 mg/mL混懸液。阿托伐他汀組灌胃400 μL 阿托伐他汀混懸液，天降血栓通丸低劑量組和高劑量組分別灌胃含生藥4.5、9.0 g/mL 的天降血栓通丸藥液400 μL。天降血栓通丸+LPS 組先后給予200 μL 天降血栓通丸藥液（18.0 g/mL）和10 g/mL LPS 200 μL 灌胃。正常對(duì)照組與模型組給予生理鹽水400 μL灌胃。每天1次，連續(xù)灌胃8周。1.4 主動(dòng)脈斑塊面積觀測(cè)算 采用油紅O染色法。處死小鼠，分離主動(dòng)脈，取一段加入4%多聚甲醛固定，脫水，透明，石蠟包埋，制作病理切片。加入油紅O 染色液染色，50%乙醇分化，蒸餾水沖洗返藍(lán)，甘油明膠封片。光學(xué)顯微鏡下觀察組織形態(tài)學(xué)變化并拍照，采用Image J 軟件測(cè)定斑塊面積和血管面積，計(jì)算主動(dòng)脈斑塊面積占總血管面積的比值。剩余主動(dòng)脈置于-80 ℃冰箱保存?zhèn)溆谩?/p>

1.5 血脂、血清炎癥因子及細(xì)胞黏附分子水平檢測(cè) 給藥結(jié)束后，小鼠禁食12 h，使用3%戊巴比妥鈉腹腔注射麻醉，打開腹腔，腹主動(dòng)脈取血，置于抗凝管中，4 ℃下3000 r/min離心10 min，收集血清。采用全自動(dòng)生化分析儀檢測(cè)TC、TG、LDL-C、HDL-C 水平，ELISA 法檢測(cè)IL-6、IL-1β、TNF-α 及MCP-1、ICAM-1、VCAM-1水平，嚴(yán)格按照試劑盒說明書進(jìn)行操作。

1.6 主動(dòng)脈組織中TLR4/MyD88/NF-κB 信號(hào)通路相關(guān)基因表達(dá)檢測(cè) 采用RT-PCR 法。取凍存的主動(dòng)脈，研磨成粉末，加入TRIzol 提取總RNA，逆轉(zhuǎn)錄合成cDNA。采用Primer Premier 6.0 和Beacon designer 7.8 軟件進(jìn)行熒光定量PCR 引物的設(shè)計(jì)。引物序列：TLR4 上游5＇-CCAGCCTCCTCAGAAACAGA-3＇，下 游 5＇-TCCCTCCAGCAGTAAGAAG-3＇；MyD88上游5＇-TGGCATGCCTCCATCATAGTTAACC-3＇，下游5＇-GTCAGAAACAACCACCACCATGC-3＇；NFκB 上 游5＇-ATAGAAGAGCAGCGTGGGGACT-3＇，下游5＇-GGATGACGTAAAGGGATAGGGC-3＇；β -actin上 游5＇-GCCAACCGTGAAAAAGATG-3＇，下 游5＇-CCAGGATAGAGCCACCAAT-3＇。擴(kuò)增條件：95 ℃預(yù)變性1 min；95 ℃變性15 s，60 ℃退火25 s，共45個(gè)循環(huán)。以β-actin 為內(nèi)參基因，采用2-ΔΔCt法計(jì)算TLR4、MyD88、NF-κB mRNA的相對(duì)表達(dá)量。

1.7 主動(dòng)脈組織中TLR4/MyD88/NF-κB 信號(hào)通路相關(guān)蛋白表達(dá)檢測(cè) 采用Western blotting 法。取凍存的小鼠主動(dòng)脈，研磨成粉末，加入RIPA 蛋白裂解液，提取總蛋白。BCA 法測(cè)定蛋白濃度，得出樣品總濃度后進(jìn)行上樣、電泳、轉(zhuǎn)膜、封閉。加入TLR4、MyD88、NF-κB 一抗（稀釋濃度均為1∶1000）4 ℃孵育過夜；清洗，加入二抗（稀釋濃度1∶3000）孵育。按照ECL 化學(xué)發(fā)光試劑盒說明書進(jìn)行顯色，應(yīng)用凝膠成像系統(tǒng)掃描圖像測(cè)定條帶灰度值，以β-actin 為內(nèi)參蛋白，計(jì)算TLR4、MyD88、NF-κB 蛋白的相對(duì)表達(dá)量。

1.8 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS24.0統(tǒng)計(jì)軟件。符合正態(tài)分布的計(jì)量資料以±s表示，兩組間比較采用t檢驗(yàn)，多組間比較進(jìn)行單因素方差分析，進(jìn)一步兩兩組間比較行SNK-q檢驗(yàn)。P＜0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 各組主動(dòng)脈斑塊面積比較 正常對(duì)照組、模型組、阿托伐汀組、天降血栓通丸低劑量組、天降血栓通丸高劑量組、天降血栓通丸+LPS 組的斑塊面積占主動(dòng)脈總面積的比例為0、33.08% ± 3.03%、15.14 %±1.23%、22.73%±2.34%、16.39%±1.66%、20.33% ± 1.94%。與模型組比較，阿托伐汀組、天降血栓通丸低劑量和高劑量組主動(dòng)脈斑塊面積減少，且天降血栓通丸高劑量組少于低劑量組（P均＜0.05）；天降血栓通丸+LPS 組斑塊面積較天降血栓通丸高劑量組增加（P均＜0.05）。

2.2 各組血脂水平比較 與正常對(duì)照組比較，模型組TC、TG、LDL-C 水平升高（P均＜0.05）；與模型組比較，阿托伐他汀組以及天降血栓通丸低、高劑量組TC、TG、LDL-C 水平降低（P均＜0.05）；天降血栓通丸高劑量組TC、TG、LDL-C 水平低于天降血栓通丸低劑量組（P均＜0.05），但與阿托伐他汀組比較無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P均＞0.05）；與天降血栓通丸高劑量組比較，天降血栓通丸+LPS 組TC、TG、LDL-C 水平升高（P均＜0.05）。各組血清HDL-C 水平比較差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P均＞0.05）。見表1。

表1 各組血清TC、TG、LDL-C、HDL-C水平比較（mmol/L，±s）

表1 各組血清TC、TG、LDL-C、HDL-C水平比較（mmol/L，±s）

注：與正常對(duì)照組比較，aP＜0.05；與模型組比較，bP＜0.05；與天降血栓通丸低劑量組比較，cP＜0.05；與天降血栓通丸高劑量組比較，dP＜0.05。

組別正常對(duì)照組模型組阿托伐他汀組天降血栓通丸低劑量組天降血栓通丸高劑量組天降血栓通丸+LPS組n 121212121212 TC 10.81±2.4325.76±3.92a 15.44±2.65abc 19.19±3.52ab 15.37±2.83abc 20.33±2.62abd TG 1.08±0.323.87±0.44a 2.46±0.54abc 3.07±0.55ab 2.43±0.46abc 3.14±0.64abd LDL-C 0.93±0.104.82±0.95a 2.58±0.79abc 3.46±0.65ab 2.64±0.67abc 3.58±0.63abd HDL-C 1.39±0.201.17±0.261.20±0.191.18±0.181.35±0.181.19±0.11

2.3 各組血清IL-6、IL-1β、TNF-α 水平比較 見 表2。

表2 各組血清IL-6、IL-1β、TNF-α水平比較（ng/L，±s）

表2 各組血清IL-6、IL-1β、TNF-α水平比較（ng/L，±s）

注：與正常對(duì)照組比較，aP＜0.05；與模型組比較，bP＜0.05；與天降血栓通丸低劑量組比較，cP＜0.05；與天降血栓通丸高劑量組比較，dP＜0.05。

組別正常對(duì)照組模型組阿托伐他汀組天降血栓通丸低劑量組天降血栓通丸高劑量組天降血栓通丸+LPS組n 121212121212 IL-68.97±1.4417.79±2.76a 12.33±1.81abc 15.03±2.11ab 12.35±1.18abc 15.17±1.26abd IL-1β 4.47±1.0913.92±3.25a 7.79±1.77abc 10.63±2.09ab 7.82±1.23abc 10.98±2.55abd TNF-α 5.38±1.2219.67±3.92a 12.13±2.55abc 15.39±2.32ab 11.91±2.52abc 15.65±2.74abd

2.4 各組血清MCP-1、ICAM-1、VCAM-1 水平比 較 見表3。

表3 各組血清MCP-1、ICAM-1、VCAM-1水平比較（±s）

表3 各組血清MCP-1、ICAM-1、VCAM-1水平比較（±s）

注：與正常對(duì)照組比較，aP＜0.05；與模型組比較，bP＜0.05；與天降血栓通丸低劑量組比較，cP＜0.05；與天降血栓通丸高劑量組比較，dP＜0.05。

組別正常對(duì)照組模型組阿托伐他汀組天降血栓通丸低劑量組天降血栓通丸高劑量組天降血栓通丸+LPS組n 121212121212 MCP-1（pg/mL）11.26±1.3726.42±3.43a 17.39±1.98abc 21.57±2.28ab 17.28±2.57abc 21.26±1.81abd ICAM-1（ng/mL）8.52±1.0419.88±2.52a 11.85±1.24abc 14.82±1.26ab 12.12±1.64abc 15.03±3.25abd VCAM-1（ng/mL）16.74±2.1534.96±6.33a 22.11±2.67abc 28.64±3.23ab 22.79±2.25abc 30.23±3.66abd

2.5 各組主動(dòng)脈組織中TLR4/MyD88/NF-κB 信 號(hào)通路相關(guān)基因表達(dá)量比較 見表4。

表4 各組主動(dòng)脈組織中TLR4、MyD88、NF-κB mRNA表達(dá)量比較（±s）

表4 各組主動(dòng)脈組織中TLR4、MyD88、NF-κB mRNA表達(dá)量比較（±s）

注：與正常對(duì)照組比較，aP＜0.05；與模型組比較，bP＜0.05；與天降血栓通丸低劑量組比較，cP＜0.05；與天降血栓通丸高劑量組比較，dP＜0.05。

組別正常對(duì)照組模型組阿托伐他汀組天降血栓通丸低劑量組天降血栓通丸高劑量組天降血栓通丸+LPS組n 121212121212 TLR4 mRNA 1.00±0.003.52±0.87a 1.86±0.47abc 2.53±0.45ab 1.82±0.53abc 2.56±0.62abd MyD88 mRNA 1.00±0.003.97±0.66a 2.03±0.81abc 3.11±0.73ab 2.07±0.66abc 3.13±0.54abd NF-κB mRNA 1.00±0.004.55±0.56a 2.38±0.46abc 3.02±0.33ab 2.32±0.52abc 3.17±0.64abd

2.6 各組主動(dòng)脈組織中TLR4/MyD88/NF-κB 信號(hào) 通路相關(guān)蛋白表達(dá)量比較 見表5。

表5 各組主動(dòng)脈組織中TLR4、MyD88、NF-κB蛋白表達(dá)量比較（±s）

表5 各組主動(dòng)脈組織中TLR4、MyD88、NF-κB蛋白表達(dá)量比較（±s）

注：與正常對(duì)照組比較，aP＜0.05；與模型組比較，bP＜0.05；與天降血栓通丸低劑量組比較，cP＜0.05；與天降血栓通丸高劑量組比較，dP＜0.05。

組別正常對(duì)照組模型組阿托伐他汀組天降血栓通丸低劑量組天降血栓通丸高劑量組天降血栓通丸+LPS組n 121212121212 TLR40.72±0.071.96±0.53a 1.19±0.12abc 1.52±0.25ab 1.15±0.14abc 1.54±0.14abd MyD880.68±0.081.83±0.49a 1.08±0.07abc 1.37±0.19ab 1.07±0.11abc 1.36±0.12abd NF-κB 0.79±0.071.63±0.36a 1.06±0.12abc 1.34±0.18ab 1.08±0.10bc 1.32±0.21abd

3 討論

AS是心腦血管疾病發(fā)生的主要病理基礎(chǔ)，多發(fā)于血管內(nèi)皮，是由免疫炎癥反應(yīng)介導(dǎo)的一類慢性炎癥反應(yīng)疾病。AS的發(fā)生與機(jī)體多種病理活動(dòng)有關(guān)，研究發(fā)現(xiàn)，在AS 的發(fā)展過程中，機(jī)體出現(xiàn)血脂代謝異常、免疫炎癥反應(yīng)異常以及單核細(xì)胞黏附等病理過程［7-8］。目前由于AS 發(fā)生機(jī)制尚不清晰，其治療與預(yù)后仍存在一些問題，研究發(fā)現(xiàn)他汀類西藥治療AS 迅速有效，但因其作用單一，長期服用也會(huì)造成耐藥性或其他不良反應(yīng)［9］。近年來，中醫(yī)藥在AS 的防治方面取得了一定的效果，中藥復(fù)方在AS中具有顯著優(yōu)勢(shì)，羅朵生等［10］采用田黃方、麻莉等［8］使用景虎通脈方改善AS都取得了較好的效果。

天降血栓通丸由蝮蛇、地龍、黃芪、丹參、赤芍、安息香、降香、山楂、天麻、水蛭、石菖蒲等藥物組成，具有活血化瘀、益氣養(yǎng)血的功效。現(xiàn)代藥理研究表明，丹參的活性成分丹參素可以通過調(diào)節(jié)CD36 和ATP 結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)子A1蛋白的表達(dá)來抑制脂質(zhì)沉積，達(dá)到及時(shí)分解過多膽固醇和降低LDL-C 水平的作用［11］；山楂的活性成分山楂黃酮可以通過下調(diào)肝臟膽固醇生物合成酶羥甲基戊二酰輔酶A 還原酶（HMGCR）的表達(dá)，抑制膽固醇的合成，同時(shí)通過上調(diào)肝臟低密度脂蛋白受體的表達(dá)，促進(jìn)膽固醇的代謝，從而起到調(diào)節(jié)脂質(zhì)代謝紊亂的作用［12］；另外石菖蒲和黃芪等藥物的有效成分也具有降低血脂的作用［13］。本研究對(duì)AS小鼠給予天降血栓通丸治療，觀察其對(duì)斑塊形成的抑制效果。

AS 主要病理特征為脂質(zhì)沉積或纖維沉積引起的粥樣硬化斑塊的生成，并伴隨血脂異常，研究發(fā)現(xiàn)炎癥反應(yīng)的活化是加快AS 發(fā)展并促進(jìn)周洋硬化斑塊破裂的主要原因［14］。IL-6、IL-1β、TNF-α 等炎癥因子可通過多種通路參與早期炎癥反應(yīng)，IL-6、IL-1β、TNF-α 過度表達(dá)引起炎癥反失調(diào)，導(dǎo)致AS的發(fā)生與發(fā)展［15-16］。MCP-1 是一種促炎細(xì)胞因子，參與細(xì)胞趨化與遷移過程，能夠誘導(dǎo)炎癥反應(yīng)過表達(dá)［17］；ICAM-1 在機(jī)體炎癥以及AS 過程中發(fā)揮關(guān)鍵作用［18］；VCAM-1 作為一種免疫球蛋白，參與機(jī)體免疫應(yīng)答、促進(jìn)炎癥反應(yīng)［19］。本研究通過飼喂高脂飲食建立ApoE-/-小鼠AS模型，發(fā)現(xiàn)模型組小鼠動(dòng)脈組織中出現(xiàn)AS 斑塊，提示模型建立成功。AS 小鼠血清中血脂代謝指標(biāo)TC、TG、LDL-C 和炎癥因子IL-6、IL-1β、TNF-α 以及MCP-1、ICAM-1、VCAM-1 水平顯著升高，提示AS小鼠脂代謝異常伴隨炎癥反應(yīng)的激活。給予天降血栓通丸干預(yù)后，小鼠主動(dòng)脈中的AS斑塊明顯減少，血清中TC、TG、LDL-C 水平以及IL-6、IL-1β、TNF-α 含量顯著降低，MCP-1、ICAM-1、VCAM-1 水平明顯下降，提示天降血栓通丸具有調(diào)節(jié)血脂水平、減輕炎癥反應(yīng)的作用，從而改善AS。

TLR4 是公認(rèn)的經(jīng)典炎癥反應(yīng)信號(hào)通路轉(zhuǎn)導(dǎo)受體，參與機(jī)體炎癥反應(yīng)、免疫反應(yīng)以及脂質(zhì)代謝過程，在AS 病變過程中起到關(guān)鍵作用［20］。NF-κB 是TLR4 下游重要的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)因子，有研究證明，TLR4/MyD88/NF-κB 信號(hào)通路與AS 的發(fā)生發(fā)展有著密切的聯(lián)系［21-22］。血管內(nèi)皮細(xì)胞受損介導(dǎo)免疫反應(yīng)發(fā)生，激活TLR4信號(hào)通路，從而激活NF-κB，調(diào)節(jié)下游更多炎癥因子的表達(dá)與釋放，從而引起炎癥反應(yīng)，進(jìn)一步加重組織損傷，導(dǎo)致AS 發(fā)生［23-24］。研究發(fā)現(xiàn)，TLR4 介導(dǎo)的下游信號(hào)MyD88 缺失時(shí)能夠減輕機(jī)體炎癥反應(yīng)，使AS斑塊面積明顯減少［25］。以上研究表明，TLR4/MyD88/NF-κB 信號(hào)通路是血管炎癥反應(yīng)和AS發(fā)生的主要原因，抑制該通路的激活與傳導(dǎo)可能有效減輕AS 的病理發(fā)展過程。本研究結(jié)果顯示，AS 小鼠主動(dòng)脈組織中TLR4/MyD88/NF-κB信號(hào)通路相關(guān)基因的相對(duì)表達(dá)明顯升高，而天降血栓通丸高劑量組和低劑量組主動(dòng)脈組織中該通路相關(guān)基因的相對(duì)表達(dá)量明顯降低，且TLR4/MyD88/NF-κB信號(hào)通路相關(guān)蛋白表達(dá)量的變化趨勢(shì)與基因表達(dá)一致，提示天降血栓通丸能夠有效抑制TLR4/MyD88/NF-κB 信號(hào)通路激活。此外，TLR 激動(dòng)劑LPS 可部分逆轉(zhuǎn)天降血栓通丸對(duì)AS 的改善作用，表明天降血栓通丸可通過抑制TLR4/MyD88/NF-κB信號(hào)通路激活，從而減輕AS 導(dǎo)致的免疫炎癥反應(yīng)，抑制血脂異常代謝和單核細(xì)胞黏附以及減少AS 斑塊形成。

綜上所述，天降血栓通丸可以通過抑制TLR4/MyD88/NF-κB 信號(hào)通路激活，達(dá)到抑制AS 小鼠主動(dòng)脈斑塊形成的作用，且高劑量天降血栓通丸能夠發(fā)揮更顯著的效果。本研究為天降血栓通丸應(yīng)用于治療AS引起的腦血管疾病提供了重要指導(dǎo)意義。