門立強(qiáng)，李芳韜，劉 緋，吳好庭，毛婭卿，李慧杰，萬(wàn)建青

(中國(guó)獸醫(yī)藥品監(jiān)察所，北京 100081)

牛結(jié)節(jié)性皮膚病(Lumpy skin disease，LSD)，又稱牛結(jié)節(jié)疹或牛疙瘩皮膚病，是一種發(fā)生于牛的痘病，以全身皮膚出現(xiàn)結(jié)節(jié)性病變?yōu)轱@著特征。其病原為牛結(jié)節(jié)性皮膚病病毒(Lumpy skin disease virus，LSDV)，屬于痘病毒科山羊痘病毒屬。LSD是《中華人民共和國(guó)進(jìn)境動(dòng)物檢疫疫病名錄》中的一類傳染病[1]，同時(shí)也是世界動(dòng)物衛(wèi)生組織(OIE)的法定通報(bào)動(dòng)物疫病[2]。2019年8月，在新疆首次發(fā)現(xiàn)LSD病例，通過(guò)接種疫苗和加強(qiáng)生物安全防控，使國(guó)內(nèi)LSD疫情暫時(shí)得到控制；然而，在2020年6月，福建省報(bào)告了LSD病例；隨后，在2020年7月，廣東、廣西、福建、江西、安徽、浙江和臺(tái)灣等省都報(bào)告發(fā)生LSD疫情[3]。LSD疫情在我國(guó)波及范圍廣、持續(xù)時(shí)間長(zhǎng)、發(fā)病范圍大，對(duì)我國(guó)的奶牛和肉牛養(yǎng)殖業(yè)造成嚴(yán)重經(jīng)濟(jì)損失，是我國(guó)養(yǎng)牛產(chǎn)業(yè)的嚴(yán)峻考驗(yàn)。進(jìn)行安全有效的疫苗接種和生物安全防控，是遏制疫情進(jìn)一步發(fā)展的關(guān)鍵因素，科學(xué)防控對(duì)維護(hù)我國(guó)畜牧養(yǎng)殖業(yè)健康發(fā)展具有重要意義。

1 邊境生物安全風(fēng)險(xiǎn)與防控

1.1 邊境生物安全風(fēng)險(xiǎn) LSD的傳播形式多樣，可通過(guò)接觸傳播、昆蟲(chóng)媒介傳播、精液傳播和哺乳傳播等多種傳播方式，而LSD主要通過(guò)邊境地區(qū)的動(dòng)物或人員移動(dòng)、蟲(chóng)媒跨境活動(dòng)和車輛運(yùn)輸?shù)确绞綌U(kuò)散。國(guó)家之間的動(dòng)物貿(mào)易使LSD可以跨越大洲進(jìn)行傳播，而昆蟲(chóng)媒介又大大增加了LSD疫情在鄰國(guó)之間的擴(kuò)散效率，所以染疫動(dòng)物和昆蟲(chóng)媒介被認(rèn)為是LSD傳入和擴(kuò)散的主要風(fēng)險(xiǎn)因素[4]。

1.1.1 動(dòng)物貿(mào)易流動(dòng) LSD可以通過(guò)動(dòng)物之間的直接接觸傳播，也可以通過(guò)共用食物或器具間接傳播[5]。所以，LSD可以通過(guò)國(guó)家之間的動(dòng)物貿(mào)易跨越國(guó)境甚至是跨越大洲擴(kuò)散。LSD于1929 年在非洲大陸的贊比亞首次出現(xiàn)，迅速傳播到整個(gè)非洲大陸[6]。隨著全球經(jīng)濟(jì)貿(mào)易往來(lái)愈加密切，國(guó)家之間的農(nóng)產(chǎn)品往來(lái)也更加頻繁，動(dòng)物疫病可以伴隨動(dòng)物貿(mào)易擴(kuò)散到未發(fā)生疫情的國(guó)家。1988年，埃及由于從非洲進(jìn)口了染疫牛只，從而首次引入LSD；而由于未合理限制與LSD疫情國(guó)家之間的動(dòng)物貿(mào)易，導(dǎo)致埃及在2006 年再次通過(guò)進(jìn)口動(dòng)物將LSD引入國(guó)內(nèi)[7]。在2017年后，中國(guó)、俄羅斯、印度和越南等多個(gè)亞洲國(guó)家先后爆發(fā)過(guò)LSD疫情，雖然LSD在亞洲各國(guó)之間傳播的具體原因尚不清楚，但各國(guó)之間的動(dòng)物貿(mào)易加大了疫病傳播的風(fēng)險(xiǎn)[8]；同時(shí)，鄰國(guó)之間染疫野生動(dòng)物的跨國(guó)遷徙移動(dòng)，進(jìn)一步增大了LSD防控的難度。

1.1.2 昆蟲(chóng)媒介 LSD疫情能夠在短時(shí)間內(nèi)擴(kuò)散到多個(gè)國(guó)家[9]，不僅依賴于國(guó)家之間的動(dòng)物貿(mào)易流動(dòng)，蟲(chóng)媒傳播作為L(zhǎng)SD的主要傳播方式發(fā)揮了至關(guān)重要的作用，具有較強(qiáng)飛行能力并攜帶病原的昆蟲(chóng)有利于病毒的遠(yuǎn)距離傳播[10]。通過(guò)分析多個(gè)國(guó)家的疫情發(fā)生規(guī)律，發(fā)現(xiàn)最有可能傳播LSDV的媒介是吸血節(jié)肢動(dòng)物，使LSD能夠短時(shí)間內(nèi)擴(kuò)散到距離最初爆發(fā)地點(diǎn)數(shù)百公里外的區(qū)域[11]。但是，目前尚未確定與LSDV傳播有關(guān)的特異性媒介生物，但蚊、蠅、蠓、虻、蜱等蟲(chóng)媒在該病的傳播中起到了重要的作用[12-13]。

LSD疫情在新疆爆發(fā)，可能是由于中國(guó)和哈薩克斯坦邊境昆蟲(chóng)的跨境飛行。經(jīng)研究發(fā)現(xiàn)，在新疆的伊犁河谷檢測(cè)到了攜帶LSDV的蒼蠅，伊犁河流域位于哈薩克斯坦的正下風(fēng)向，攜帶病毒的蒼蠅可能會(huì)在風(fēng)力的輔助下飛行擴(kuò)散到中國(guó)[9]，與蟲(chóng)媒在以色列邊境借助風(fēng)力、跨境飛行并傳播疫情的方式類似[10]。所以，LSD疫情的爆發(fā)呈現(xiàn)季節(jié)性，主要發(fā)生于氣候溫暖潮濕、蚊蟲(chóng)大量繁殖的夏季[9]。在夏季來(lái)臨之前做好蚊蟲(chóng)消殺工作、控制吸血節(jié)肢動(dòng)物數(shù)量，有利于預(yù)防LSD感染家畜。

1.2 邊境生物安全防控 為了防止在其他國(guó)家流行的LSDV引入我國(guó)，當(dāng)與發(fā)生LSD疫情的國(guó)家進(jìn)行進(jìn)口貿(mào)易時(shí)，應(yīng)當(dāng)采取嚴(yán)格的檢疫措施，防止將染病動(dòng)物或動(dòng)物副產(chǎn)品引入國(guó)內(nèi)養(yǎng)殖場(chǎng)；對(duì)于與無(wú)疫情國(guó)家的進(jìn)口貿(mào)易，在全球多國(guó)爆發(fā)LSD疫情的形勢(shì)下，也應(yīng)當(dāng)對(duì)進(jìn)口動(dòng)物及動(dòng)物副產(chǎn)品加以限制，防止動(dòng)物移動(dòng)過(guò)程中感染疫病或者引入攜帶病毒的蟲(chóng)媒。在長(zhǎng)距離運(yùn)輸動(dòng)物時(shí)，對(duì)輪船和飛機(jī)等運(yùn)輸工具實(shí)施對(duì)昆蟲(chóng)媒介的生物安全控制措施。同時(shí)，做好國(guó)內(nèi)及鄰國(guó)的易感野生動(dòng)物和昆蟲(chóng)媒介的調(diào)查與監(jiān)測(cè)。

在發(fā)生疫情后，應(yīng)采取隔離措施并禁止動(dòng)物移動(dòng)運(yùn)輸；屠宰所有患病或感染動(dòng)物，對(duì)監(jiān)測(cè)發(fā)現(xiàn)病原學(xué)陽(yáng)性牛只進(jìn)行撲殺和無(wú)害化處理，同群牛只隔離觀察；對(duì)牛只排泄物、飼料墊料和污水等進(jìn)行無(wú)害化處理，對(duì)養(yǎng)殖場(chǎng)所進(jìn)行清潔和消毒處理，并對(duì)養(yǎng)殖場(chǎng)范圍內(nèi)的吸血昆蟲(chóng)采取生物安全防控措施，滅殺飼養(yǎng)場(chǎng)所內(nèi)的吸血昆蟲(chóng)及幼蟲(chóng)，清掃滋生蚊蟲(chóng)的環(huán)境[14]。

2 疫苗接種生物安全風(fēng)險(xiǎn)與防控

2.1 疫苗接種生物安全風(fēng)險(xiǎn) LSD在全球的疫情發(fā)展迅速，在過(guò)去十年中逐漸從非洲和中東逐漸擴(kuò)散到歐洲東南部、高加索地區(qū)、俄羅斯和亞洲[15]，造成了嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失。為了遏制疫情的進(jìn)一步擴(kuò)散，疫苗接種被認(rèn)為是控制 LSD疫情的最有效方法之一；而不同國(guó)家根據(jù)本土疫情的傳播情況，制定了不同的疫苗接種計(jì)劃?，F(xiàn)在世界范圍內(nèi)廣泛用來(lái)預(yù)防LSD的疫苗為針對(duì)不同病原的減毒活疫苗，在防控LSD的同時(shí)也造成了生物安全風(fēng)險(xiǎn)。

2.1.1 疫苗接種計(jì)劃 為了有效防控LSD疫情，LSDV同源減毒活疫苗(Neethling疫苗)、異源山羊痘病毒減毒活疫苗(GTPV疫苗)和異源綿羊痘病毒活疫苗(SPPV疫苗)等，在不同國(guó)家被廣泛應(yīng)用[16]。歐洲國(guó)家主要使用Neethling疫苗進(jìn)行免疫接種[15]，在歐洲多個(gè)國(guó)家的平均免疫有效性為79.8%；其中，有效性最低為62.5%(阿爾巴尼亞)，最高達(dá)97%(保加利亞和塞爾維亞)[17]。所以，歐洲東南部通過(guò)使用大規(guī)模疫苗免疫接種計(jì)劃，有效遏制了2016年后歐洲疫情的進(jìn)一步蔓延，在2019年未爆發(fā)新一輪LSD疫情[18-19]。而希臘、土耳其、格魯吉亞和俄羅斯等國(guó)家自LSD疫情爆發(fā)后，則采用SPPV疫苗進(jìn)行免疫[20]。RM65 SPPV疫苗接種1個(gè)月后，疫苗有效性達(dá)到80%[21]，并且接種RM65 SPPV疫苗的不良反應(yīng)比接種Neethling疫苗溫和[22]。除了減毒活疫苗，還有多種防控LSD的疫苗，包括重組載體疫苗[23]、滅活疫苗[24]和二價(jià)苗[25]，但是并未在臨床廣泛應(yīng)用，保護(hù)效果和安全性有待進(jìn)一步驗(yàn)證。

針對(duì)LSD疫情的擴(kuò)散，我國(guó)應(yīng)用的疫苗為GTPV疫苗，我國(guó)農(nóng)業(yè)農(nóng)村部針對(duì)牛群感染LSD的緊急免疫辦法為接種山羊痘疫苗(按照山羊的5倍劑量)[14]。由于山羊痘病毒屬之間具有交叉保護(hù)性，所以針對(duì)山羊痘病毒的減毒活疫苗可以廣泛應(yīng)用到綿羊痘、山羊痘和牛結(jié)節(jié)性皮膚病的免疫計(jì)劃中。GTPV-AV41疫苗被廣泛應(yīng)用于國(guó)內(nèi)山羊痘疫情防控[26]，但該疫苗對(duì)LSDV的保護(hù)效果有待進(jìn)一步評(píng)價(jià)[27]。目前為止，山羊痘疫苗可以有效預(yù)防和控制牛群中發(fā)生的LSD，并且國(guó)內(nèi)已有多家生產(chǎn)山羊痘疫苗的廠家，為我國(guó)迅速控制LSD疫情進(jìn)一步擴(kuò)散提供了有力保障[3]。

2.1.2 疫苗生物安全風(fēng)險(xiǎn) 在考慮疫苗有效性的同時(shí)，還需要考慮疫苗的安全性。雖然用LSDV減毒活疫苗免疫牛群后保護(hù)效果極佳[17]，但是也要進(jìn)一步關(guān)注疫苗接種的副作用以及生物安全風(fēng)險(xiǎn)。接種Neethling疫苗后，可以從動(dòng)物體分離到疫苗病毒株[28]，并且已接種疫苗的奶牛的血液、皮膚組織、牛奶和唾液中均含有LSD疫苗的疫苗株基因[29]，嚴(yán)重影響了公共衛(wèi)生安全和生物安全。

接種活疫苗后不止出現(xiàn)了牛群的排毒現(xiàn)象，還增加了LSDV重組與擴(kuò)散的風(fēng)險(xiǎn)。目前免疫LSD首選的減毒活疫苗仍具備一定的病原繁殖能力，所以在多個(gè)國(guó)家發(fā)現(xiàn)了疫苗株的傳播擴(kuò)散事件[30]。疫苗株與當(dāng)?shù)匾岸局曛亟M產(chǎn)生的疫苗樣毒株，還可能跨越國(guó)境傳播，即使未使用LSDV減毒活疫苗的國(guó)家也有感染疫苗樣毒株的風(fēng)險(xiǎn)。比如，俄羅斯使用SPPV 疫苗免疫LSD，為了疫苗接種的安全性和有效性，禁止使用LSDV同源疫苗，但是仍然出現(xiàn)了重組LSDV疫苗樣毒株的爆發(fā)[9]。經(jīng)流行病學(xué)調(diào)查發(fā)現(xiàn)，可能是由于哈薩克斯坦在2017年實(shí)施LSDV同源活疫苗接種計(jì)劃后，使疫苗樣分離株在俄羅斯邊境廣泛傳播[31]。所以，重組LSDV在俄羅斯出現(xiàn)被認(rèn)為與其鄰國(guó)大量使用LSDV減毒活疫苗有關(guān)。值得注意的是，在中國(guó)西部邊境的蒼蠅中檢測(cè)到LSDV疫苗樣毒株，暗示國(guó)內(nèi)LSD疫情的突然爆發(fā)，可能是由于重組LSDV疫苗樣毒株引發(fā)的疫情從中亞開(kāi)始向東亞迅速蔓延[9]。

2.2 疫苗生物安全防控 迄今為止，尚未發(fā)現(xiàn)我國(guó)應(yīng)用的山羊痘疫苗的疫苗株重組案例，但是發(fā)生過(guò)山羊痘病毒野毒株與疫苗株的重組事件，表明山羊痘病毒作為DNA病毒，其基因組雖然具有一定保守性，但在傳播擴(kuò)散過(guò)程中也會(huì)發(fā)生重組事件[32]。所以應(yīng)制定合理的疫苗免疫接種計(jì)劃，不能為了提高疫苗的保護(hù)效率，而免疫多種針對(duì)不同病原的減毒活疫苗，這種過(guò)度免疫行為可能會(huì)產(chǎn)生新型的重組疫苗樣毒株，進(jìn)而導(dǎo)致疫苗保護(hù)效力下降，陷入疫苗不斷更新?lián)Q代的惡性循環(huán)。

隨著檢測(cè)技術(shù)的發(fā)展進(jìn)步，通過(guò)宏基因組測(cè)序等手段，使追溯病毒重組事件和追蹤疫情爆發(fā)起源變得更加容易，所以有必要確定疫苗株與野毒株在何時(shí)何地發(fā)生了重排，以及新型重組毒株獲得了哪些與傳播能力或致病能力相關(guān)的適應(yīng)性優(yōu)勢(shì)，這些數(shù)據(jù)將為未來(lái)通過(guò)基因工程開(kāi)發(fā)更安全、更有效的疫苗制劑奠定基礎(chǔ)。

3 展 望

在LSD疫情席卷全球多個(gè)國(guó)家與地區(qū)的大背景下，LSDV病原變異不斷加快，邊境和疫苗的生物安全迎來(lái)了巨大挑戰(zhàn)。目前，使用減毒活疫苗在一定程度上可以有效預(yù)防LSD爆發(fā)，但是并不是解決LSD發(fā)生的根本途徑，還可能會(huì)對(duì)生物安全構(gòu)成潛在威脅。通過(guò)研究多個(gè)國(guó)家的LSD疫情防控情況和各國(guó)針對(duì)該病的疫苗免疫計(jì)劃，可以發(fā)現(xiàn)消滅傳染源、切斷傳播途徑并且加強(qiáng)生物安全防控才是有效預(yù)防該病的根本途徑。只有建設(shè)良好的生物安全體系，才能夠有效預(yù)防和控制疫情的進(jìn)一步爆發(fā)。

針對(duì)在國(guó)內(nèi)發(fā)生的LSD疫情，應(yīng)當(dāng)注重邊境生物安全和疫苗生物安全的體系建設(shè)，為防控LSDV在國(guó)內(nèi)的傳播擴(kuò)散提供堅(jiān)實(shí)的保障。在全球一體化的今天，我國(guó)農(nóng)產(chǎn)品進(jìn)出口貿(mào)易規(guī)模不斷擴(kuò)大，有利于優(yōu)良畜牧業(yè)產(chǎn)品在世界各國(guó)之間流動(dòng)，但同時(shí)也加大了動(dòng)物疫病跨國(guó)傳播與擴(kuò)散的生物安全風(fēng)險(xiǎn)。作為已經(jīng)發(fā)生過(guò)LSD疫情的國(guó)家，我們應(yīng)加強(qiáng)口岸疫情防控，既要防止LSD疫情通過(guò)貿(mào)易傳入境內(nèi)，也要防止國(guó)內(nèi)疫情進(jìn)一步向其他國(guó)家蔓延；既要切斷傳播途徑、做好生物安全防控，也要注重制定合理的LSD免疫接種計(jì)劃，才能有效預(yù)防LSD疫情在國(guó)內(nèi)再次爆發(fā)，促進(jìn)畜牧養(yǎng)殖業(yè)的繁榮發(fā)展。