張海燕，景一嫻

（重慶市公共衛(wèi)生醫(yī)療救治中心醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)科，重慶 400030）

結(jié)核病的發(fā)生與結(jié)核分枝桿菌感染密切相關(guān)。此病是一種慢性傳染性疾病。盡早對此病患者的病情進(jìn)行準(zhǔn)確的診斷并及時(shí)對其進(jìn)行有針對性的治療對改善其預(yù)后具有十分重要的意義。進(jìn)行結(jié)核分枝桿菌痰標(biāo)本分離培養(yǎng)的耗時(shí)較長，利用固體改良羅氏培養(yǎng)基進(jìn)行分離培養(yǎng)至少需要20 d，最長可需要60 d[1]。目前臨床上通常會(huì)采用痰涂片法進(jìn)行結(jié)核分枝桿菌檢測，該檢測方法具有操作相對簡單、費(fèi)用較低等優(yōu)點(diǎn)[2]。近年來，隨著痰涂片染色技術(shù)的不斷發(fā)展，熒光痰涂片染色技術(shù)在結(jié)核分枝桿菌痰涂片檢測中得到了廣泛的應(yīng)用。有研究指出，金胺-羅丹明染色法（又叫金胺O 熒光染色法）在結(jié)核分枝桿菌痰涂片檢測中的應(yīng)用效果較好。本文對2020 年5 月至2021 年4 月期間在我中心接受結(jié)核分枝桿菌痰涂片檢測的2480 例患者進(jìn)行研究，旨在比較堿性復(fù)紅染色法與金胺- 羅丹明染色法在結(jié)核分枝桿菌痰涂片檢測中的應(yīng)用效果。

1 對象與方法

1.1 研究對象

選擇2020 年5 月至2021 年4 月期間在我中心接受結(jié)核分枝桿菌痰涂片檢測的2480 例結(jié)核病患者作為本次研究的對象。

1.2 方法

1.2.1 試劑和儀器 本研究中使用的檢測儀器和試劑包括堿性復(fù)紅染色試劑盒、金胺- 羅丹明染色試劑盒、熒光顯微鏡、結(jié)核熒光染色閱片機(jī)、生物安全柜等。

1.2.2 檢測方法 為2480 例患者均分別采用堿性復(fù)紅染色法和金胺- 羅丹明染色法進(jìn)行結(jié)核分枝桿菌痰涂片檢測，方法是：采集患者的痰標(biāo)本，將每份痰標(biāo)本分別制成兩張涂片。分別采用堿性復(fù)紅染色法和金胺- 羅丹明染色法對兩張涂片進(jìn)行染色，然后對其進(jìn)行鏡檢。在進(jìn)行堿性復(fù)紅染色時(shí)，需要對涂片進(jìn)行5 min 的加熱。在完成染色后，將涂片置于1000 倍顯微鏡下進(jìn)行觀察。在進(jìn)行金胺- 羅丹明染色時(shí)，需要對涂片進(jìn)行15 ～20 min 的冷染。在完成染色后，將涂片置于400 倍顯微鏡下進(jìn)行觀察。

1.3 觀察指標(biāo)

比較2480 例患者進(jìn)行上述兩種檢測時(shí)的陽性檢出率、檢測結(jié)果的陽性分級情況、讀片時(shí)間及用兩種檢測診斷其病情的靈敏度、特異度。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

對本文中的所有數(shù)據(jù)均采用SPSS 20.0 統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行分析，計(jì)量資料用均數(shù)± 標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示，采用t檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料用百分比（%）表示，采用χ2 檢驗(yàn)。P＜0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 2480 例患者進(jìn)行兩種檢測時(shí)陽性檢出率的比較

這些患者進(jìn)行堿性復(fù)紅染色結(jié)核分枝桿菌痰涂片檢測時(shí)的陽性檢出率為11.01%（273/2480），其進(jìn)行金胺- 羅丹明染色結(jié)核分枝桿菌痰涂片檢測時(shí)的陽性檢出率為18.06%（448/2480）。這些患者進(jìn)行金胺- 羅丹明染色結(jié)核分枝桿菌痰涂片檢測時(shí)的陽性檢出率高于其進(jìn)行堿性復(fù)紅染色結(jié)核分枝桿菌痰涂片檢測時(shí)的陽性檢出率，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。詳見表1。

表1 這些患者進(jìn)行兩種檢測時(shí)陽性檢出率的比較

2.2 用兩種檢測方法診斷這些患者病情靈敏度及特異度的比較

用金胺- 羅丹明染色結(jié)核分枝桿菌痰涂片檢測診斷這些患者病情的特異度、靈敏度均高于用堿性復(fù)紅染色結(jié)核分枝桿菌痰涂片檢測診斷其病情的特異度、靈敏度，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。詳見表2、表3、表4。

表2 這些患者堿性復(fù)紅染色結(jié)核分枝桿菌痰涂片檢測的結(jié)果與結(jié)核分枝桿菌痰培養(yǎng)檢測的結(jié)果（例）

表3 這些患者金胺- 羅丹明染色結(jié)核分枝桿菌痰涂片檢測的結(jié)果與結(jié)核分枝桿菌痰培養(yǎng)檢測的結(jié)果（例）

表4 用兩種檢測方法診斷這些患者病情靈敏度及特異度的比較（%）

2.3 這些患者進(jìn)行兩種檢測時(shí)檢測結(jié)果陽性分級的比較

這些患者進(jìn)行金胺- 羅丹明染色結(jié)核分枝桿菌痰涂片檢測與進(jìn)行堿性復(fù)紅染色結(jié)核分枝桿菌痰涂片檢測時(shí)檢測結(jié)果的陽性分級相比，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。詳見表5。

表5 這些患者進(jìn)行兩種檢測時(shí)檢測結(jié)果陽性分級的比較[ 例（%）]

2.4 這些患者進(jìn)行兩種檢測時(shí)讀片時(shí)間的比較

這些患者進(jìn)行堿性復(fù)紅染色結(jié)核分枝桿菌痰涂片檢測時(shí)的讀片時(shí)間為（4.30±0.52）min，其進(jìn)行金胺- 羅丹明染色結(jié)核分枝桿菌痰涂片檢測時(shí)的讀片時(shí)間為（2.08±0.28）min，二者相比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。

3 討論

對于結(jié)核病患者，目前臨床上主要是采用結(jié)核分枝桿菌痰涂片檢測診斷其病情[3-4]。堿性復(fù)紅染色結(jié)核分枝桿菌痰涂片檢測是目前臨床上常用的結(jié)核分枝桿菌痰涂片檢測方法[5-6]。相關(guān)的研究表明，用金胺- 羅丹明染色結(jié)核分枝桿菌痰涂片檢測診斷結(jié)核病患者病情的特異度、靈敏度和準(zhǔn)確率均較高[7]。徐鳳美[8]的研究表明，與采用堿性復(fù)紅染色結(jié)核分枝桿菌痰涂片檢測相比，用金胺- 羅丹明染色結(jié)核分枝桿菌痰涂片檢測診斷結(jié)核病患者病情的特異度、靈敏度均較高。這與本研究的結(jié)果相符。本研究的結(jié)果顯示，用金胺-羅丹明染色結(jié)核分枝桿菌痰涂片檢測診斷2480 例結(jié)核病患者病情的特異度、靈敏度均高于用堿性復(fù)紅染色結(jié)核分枝桿菌痰涂片檢測診斷其病情的特異度、靈敏度，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。有研究指出，在進(jìn)行結(jié)核分枝桿菌痰涂片檢測的過程中采用堿性復(fù)紅染色法對痰涂片進(jìn)行染色存在操作繁瑣、讀片時(shí)間長等缺點(diǎn)。近年來，隨著痰涂片染色技術(shù)的不斷發(fā)展，熒光痰涂片染色技術(shù)在結(jié)核分枝桿菌痰涂片檢測中得到了廣泛的應(yīng)用。有研究指出，金胺- 羅丹明染色法在結(jié)核分枝桿菌痰涂片檢測中的應(yīng)用效果較好，具有鏡檢視野佳、讀片時(shí)間短等優(yōu)點(diǎn)[9-10]。這與本研究的結(jié)果相符。本研究的結(jié)果顯示，2480 例患者進(jìn)行金胺- 羅丹明染色結(jié)核分枝桿菌痰涂片檢測時(shí)的讀片時(shí)間短于其進(jìn)行堿性復(fù)紅染色結(jié)核分枝桿菌痰涂片檢測時(shí)的讀片時(shí)間，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。

綜上所述，與堿性復(fù)紅染色法相比，金胺-羅丹明染色法在結(jié)核分枝桿菌痰涂片檢測中的應(yīng)用效果較好。此法值得在臨床上推廣應(yīng)用。