李志毅

【摘 要】目的：比較不同時段、不同性狀痰標本涂片，檢出抗酸桿菌陽性率，探討痰標本的質(zhì)量、標本采樣時間與抗酸桿菌檢出結果的關系。方法：采用痰抗酸桿菌直接涂片檢查，齊-尼抗酸染色，統(tǒng)計分析不同采樣時間和不同性狀痰標本的涂片檢查的陽性檢出率。結果：750份初診夜間、清晨、即時咳出的干酪痰、血痰、粘液痰、唾液標本的涂片結果差異有統(tǒng)計學意義，晨痰、干酪痰檢出率最高為28%、66.2%；不同性狀，不同時間標本中陽性標本的分布均有統(tǒng)計學意義。結論：痰標本的質(zhì)量、標本留取時間對痰涂片抗酸染色，陽性率有很大影響。

【關鍵詞】染色；結核；肺；痰；抗酸桿菌；涂片

【中圖分類號】R529.3 【文獻標識碼】A 【文章編號】2095-6851（2018）08--01

當前我國結核病控制方式主要是以痰檢抗酸桿菌為主要手段的實驗方法來發(fā)現(xiàn)傳染源，通過痰涂片鏡檢發(fā)現(xiàn)肺結核是實施 DOTS 策略的關鍵，對結核病控制工作起著重要作用。 本文對可疑肺結核就診者的不同采樣時間、不同性狀的痰標本的陽性率進行比較，以進一步提高涂陽肺結核病人發(fā)現(xiàn)率。

1 資料與方法

1.1 資料來源 2017年12月-1018年2月結核門診接診的咳嗽、咳痰超過三周、胸透異常的可疑肺結核癥狀者三份痰標本（夜間痰、晨痰、即時痰）的抗酸桿菌直接涂片檢查結果。

1.2 標本分類

1.2.1 按照痰標本采集時間，標本分為三類 即時痰：化驗時咳出的痰液；晨痰：患者晨起立即用清水漱口后，咳出的痰液；夜間痰：送檢前一天，患者晚間睡前咳出的痰液。

1.2.2 按照痰標本性狀，將其分為四類 干酪痰：標本外觀以黃色（或奶酪色）、膿樣、團塊狀的肺部分泌物為主；血痰：此類標本是因粘液痰或干酪痰標本中混有血液而形成，顏色為褐色或深褐色、鮮紅色或伴有血絲；粘液痰：標本外觀以白色、粘稠度較高的肺部和支氣管分泌物為主；唾液：標本外觀以透明或半透明水樣、粘度較低的口腔分泌物為主，標本中有時伴有氣泡。

1.3 實驗方法 采用直接涂片法，挑取標本量0.05～0.1ml

涂抹10×20mm的卵圓形痰膜。 烘干后進行齊-尼染色（缸染法）：放置在100mL初染劑缸中進行染色，時間為15min，然后取出使用自來水沖洗，再放置在100mL脫色劑缸中，時間為5min，取出使用自來水沖洗，再置在100mL 復染劑缸中。流水沖洗待干鏡檢，雙目光學生物顯微鏡鏡檢（目鏡10×，物鏡100×）。結果分級報告標準見《痰涂片鏡檢標準化操作及質(zhì)量保證手冊》[1]。

1.4 質(zhì)量控制 依照中國結核病防治規(guī)劃《痰涂片鏡檢標準化操作及質(zhì)量保證手冊》 、《結核病診斷細菌學檢驗規(guī)程》[2]進行涂片檢查的室內(nèi)和室間質(zhì)量控制。

1.5 數(shù)據(jù)統(tǒng)計 使用 Ex cel 軟件建立數(shù)據(jù)庫，SPSS11.5軟件進行統(tǒng)計分析。

2 結果

2.1 不同性狀、不同留置時間痰標本構成比 750份標本中粘液痰所占比例最高為44.2%，其次為唾液標本為35.8%。見表1

2.2 不同性狀痰標本的涂片檢查情況 干酪痰、血痰、粘液痰和唾液檢出率分別為66.2%、34.8%、15.0%和0.9%，干酪痰檢出率最高，唾液標本檢出率最低（=930.464，P <0.01）。 結果見表2。

2.3 不同留置時間痰標本的涂片檢查的陽性檢出情況 結果見表2。750份痰標本中抗酸桿菌涂片檢查檢出陽性標本128份，檢出率為17.00%，即時痰、夜間痰和清晨痰的檢出率分別為9.2%、14%和285%，晨痰檢出率最高（=156.069，P <0.01）。

3 討論

3.1 痰涂片抗酸染色顯微鏡鏡檢是一種技術相對簡單，容易標準化和完成操作，所需設備投入少，檢查成本低，迅速報告結果的一種方法；尤其對低收入且結核病疫情嚴重的地區(qū)或基層實驗室，符合成本-效益原則的細菌學實驗技術。 痰標本的留置時間、標本質(zhì)量對痰涂片抗酸桿菌陽性率有很大影響。

3.2 本研究結果顯示，750份痰標本的分布有明顯差異，干酪樣痰的比例中，清晨 >夜間>即時。血痰比例中，清晨>夜間 >即時，粘液痰比例中，清晨>夜間>即時，唾液中，即時>夜間>清晨；初診可疑肺結核就診者痰抗酸染色涂片陽性率17.0%，不同留取時間的痰標本涂片陽性檢出率存在明顯差異。

3.3 在不同性狀的痰標本中，涂片染色陽性率以干酪樣痰最高，其次為血痰、粘液痰、唾液?？顾釛U菌細胞壁中含有大量的脂質(zhì)，是四型變態(tài)反應的物質(zhì)基礎，可結核結節(jié)形成，產(chǎn)生干酪樣壞死。干酪樣或膿性痰來自肺內(nèi)脫落的干酪壞死組織，是抗酸桿菌較為集中的成分，來自患者呼吸道的深處，痰標本質(zhì)量受檢驗因素影響較小，其檢出率最高，血性痰其中一部分是干咳引起的細支氣管破裂出血，不一定是真正的病灶出血，另外血性痰也會影響染色背景，因此檢出率并沒有最高；粘液痰因混有較多的上呼吸道分泌物使其檢出率偏低；唾液可能是肺結核病人大量排菌期間，痰經(jīng)口腔排出殘留在口腔中，陽性率很低。

參考文獻

衛(wèi)生部疾病預防控制局 中國疾病預防控制中心.中國結核病防治規(guī)劃.痰涂片鏡檢標準化操作及質(zhì)量保證手冊[S].北京：中國協(xié)和醫(yī)科大學出版社，2009.

中國防癆協(xié)會基礎委員會.結核病診斷實驗室檢驗規(guī)程[M].北京：中國教育出版社，2006.